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Pr M.

Chraibi Unité 2 : Le génie génétique

Chapitre 1 : Nature de l’information génétique et mécanisme de son expression

Introduction

Au sein de chaque espèce d'être vivant, les individus


possèdent en commun des caractères héréditaires
spécifiques qui permettent de les différencier des autres
espèces, et des caractères héréditaires individuels qui
permettent de distinguer un individu des autres individus de
la même espèce. L'ensemble de ces caractères héréditaires
constitue le phénotype. Cette diversité des caractères
héréditaires résulte de l'expression d'un programme ou d'une
information génétique.

La reproduction humaine se fait suite à la fécondation d’un ovule (le gamète


féminin) par un seul spermatozoïde (le gamète masculin), les deux noyaux
s’unissent pour former la cellule-œuf, première cellule, qui par division
cellulaire (Mitose) forme le futur bébé. Chez les plantes, les gamètes sont
formés par la division (Méiose) d’une cellule mère diploïde à 2n chromosomes
en quatre cellules (tétrades) haploïdes à n chromosome.

Questionnement ?

Quelle est la localisation de l’information génétique au niveau cellulaire ?


Quelle est la nature chimique de cette information ?
Comment se fait la transmission – et la conservation- de l’information,
d’une cellule à l’autre ?

Activité 1 : Localisation de l’information génétique au niveau cellulaire.


1. Mise en évidence de la localisation de l’information génétique
a. Chez un être vivant unicellulaire
L'acétabulaire est une algue unicellulaire (composée d'une seule cellule). Elle est composée
d’une tige, un pied qui renferme un noyau et possède un chapeau dont la forme varie selon les
espèces. On cite :

Chapeau lisse a Chapeau à bord


bord lisse finement
régulier dentelé

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Expérience 1 : Section et génération


On sectionne une algue acétabulaire en trois parties nucléé et anucléé, les parties sont placées dans un
milieu favorable

1-Décrivez l’expérience
de section.

2-Emettre des hypothèses


pour expliquer le résultat
obtenu.

1-On observe que seulement le rhizoïde contenant le noyau qui reste vivant et régénère une nouvelle algue. Tandis que
les autres parties (chapeau et pédicule) qui ne contiennent pas de noyau meurent après quelques jours.
2-On déduit que le rhizoïde possède un élément (noyau ou autre chose) nécessaire à la survie et la croissance de l’algue
Conclusion : Le noyau est indispensable à la vie, à la croissance, et à la division cellulaire.

Expérience 2 : la greffe croisée de noyaux dans les rhizoïdes entre deux espèces d’acétabulaires
1. On sectionne les deux espèces (Ac1) et (Ac2) ont 2 parties.
2. En extrait, le noyau de chacune de ces 2 espèces.
3. Le noyau de (Ac1) est greffé dans le rhizoïde de (Ac2) énuclée lui est vice versa.
4. Le résultat obtenu sont présentés par la figure.

1-Expliquez comment
les résultats de cette
expérience permettent
de vérifier l'hypothèse
proposée à partir des
résultats de
l'expérience 1 ?

1-On observe que la forme du chapeau est liée au type du noyau présent dans le rhizoïde et non du type de l’algue dont
le rhizoïde est issu. (Le chapeau nouvellement reconstitué présente les caractéristiques de l’algue dont le noyau est
extrait).
Conclusion : On déduit que le noyau contient l’information génétique permettant la reconstitution du chapeau
de l’espèce

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Expérience 2 : Section chez l'Amibe Mérotomie

L'amibe est un animal unicellulaire


eucaryote. Très petit, entre 50 à 400
micromètres. Les amibes sont caractérisées
par un corps cellulaire déformable émettant
des prolongements de formes changeantes,
Les pseudopodes qui leur permettent de
ramper sur un support ou de capturer les
proies microscopiques par phagocytose.
On a mis en évidence le rôle du noyau en réalisant l'expérience de mérotomie qui consiste à
couper une amibe en 2 parties.
1-que peut-on
conclure ?

1- Les résultats de l'expérience de la mérotomie, montrent que la partie anucléée meurt, tandis que la partie
nucléée survit, et elle est capable de croître et de se multiplier par mitose.

Conclusion : On déduit que le noyau contient l’information génétique permettant la reconstitution du chapeau
de l’espèce

b. Chez un être vivant pluricellulaire


Travaux de GURDON 1960

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1- Le noyau de la cellule intestinale du têtard albinos donne des crapauds albinos Le noyau est le responsable du transfert
des caractères héréditaires, le cytoplasme n’intervient pas. Malgré la différenciation du noyau de la cellule intestinale
dans les fonctions de digestion et d’absorption, l’information génétique de l’espèce dans le noyau n’est pas perdue, elle
y reste conservée

Conclusion : La conclusion est que c'est le noyau qui gouverne la couleur et les caractères du xénope, puisque les
xénopes sont albinos et non vers. L'ovule sans le noyau et uniquement avec sa membrane et son cytoplasme ne
joue aucun rôle. Les caractéristiques d’un individu dépendent des informations contenues dans le noyau. Donc le
noyau contient bien le programme génétique

Souris

2. Ultrastructure du noyau
L’information génétique : Constituant cellulaire nucléaire qui détermine les caractères
héréditaires, il est localisé dans le noyau des organismes unicellulaire et pluricellulaires sa nature
est l’ADN.
Le noyau est un corpuscule que l'on retrouve dans toutes les cellules sauf dans les hématies
humaines. Certaines cellules en contiennent plusieurs comme les fibres musculaires striées.

Chez les eucaryotes (cellule à noyau vrai) ; le


noyau est bien différencié et entouré d'une
membrane nucléaire discontinu. Ces
discontinuités sont dues à des pores permettant
la communication entre le cytoplasme et le
nucléoplasme (gelée à l'intérieur du noyau).

Le nucléoplasme renferme une ou plusieurs


vésicules appelées nucléoles (sauf chez les
spermatozoïdes ou il n'y ‘en a pas) et un
enchevêtrement de filament appelé
chromatine.

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Cette chromatine est constituée de 96% de


nucléoprotéine, formées par l'association de
protéines et d'acides nucléiques (acide
désoxyribonucléique : ADN et acide ribonucléique
ARN).

Observés au MET, les noyaux apparaissent délimités par une enveloppe percée de pores et
constitués d’un matériel plus ou moins granuleux (chromatine et nucléole) baignant dans un
nucléoplasme.
En dehors des périodes de division cellulaire (pendant l’interphase) la chromatine se présente
sous forme de filaments très fins appelés nucléofilaments (=filaments du noyau) uniquement
visibles en microscopie électronique à très fort grossissement.
Lors des divisions cellulaires, le noyau présente des structures filamenteuses appelées
chromosomes. Le chromosome est de la chromatine soigneusement enroulée.
Chaque chromosome visible est constitué de deux chromatides unies entre-elles au niveau du
centromère
Activité 2: Transfert de l’information génétique d’une cellule à une autre
1- Etapes de la mitose (division cellulaire) :
Le programme génétique à l’origine des caractères d’un individu est localisé dans le noyau des
cellules sous forme de chromosomes observables lorsque les cellules se multiplient. La

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multiplication cellulaire se fait par mitose, un processus continu, mais qu’on peut diviser en quatre
phases.
a -mise en évidence la mitose chez la cellule végétale
Pour l’étude de la mitose chez les cellules végétales, les
extrémités des jeunes racines des bulbes d’oignon ou d’ail
constituent un matériel de choix par ce qu’elles possèdent des
méristèmes caractérisés par des cellules à multiplication
rapide.
Montage expérimental :
1. Prélever avec une lame de rasoir des extrémités de racines, bulbe l’ognon germé de 1 cm de
longueur et les plonger dans durant une minute dans du carmin acétique bouillant.
2. Transférer 2 ou 3 extrémités dans une goutte de carmin acétique froid déposée sur une lame
en verre
3. Recouvrir d’une lamelle et écraser délicatement avec un doigt.
4. Observer la préparation au faible moyen et fort grossissement di microscope

b -Résultats d’observations microscopiques


Méristème

1. Décrire
l’aspect du
noyau des
cellules
observées
dans la
figure c ?
Coiffe

2. Dégager les
caractéristiq
ues de la
mitose chez
la cellule
Figure C végétale ?

 Le méristème est la zone responsable de la croissance de la racine


 La coiffe est responsable de la protection du méristème et la pénétration dans le sol

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1- Les cellules du méristème diffèrent par : - Le volume : grand volume chez les cellules A, B, C, D et E ; petit
volume chez les cellules F .
- l’aspect nu noyau : en une seule masse appelée chromatine avec nucléole chez la cellule A ; sous forme de
filaments appelés chromosomes ( B ) qui se rassemblent au milieu de la cellule C , se divisent en 2 lots qui se
séparent vers les pôles de la cellule D et E , revient à l’état d’une seule masse mais dans deux cellules de petite
taille .
Conclusion : la cellule de grand volume avec noyau contenant de la chromatine est dite cellules au repos ou en
interphase. La transformation de la chromatine en chromosomes signifie l’entrée de la cellule en phase de
multiplication qui produira à partir d’une cellule mère deux cellules filles, cette activité est appelée mitose. Dans la
vie d’une cellule eucaryote alternent 2 phases selon un cycle, appelé cycle cellulaire

Cycle cellulaire =Interphase + Mitose


c-Ultrastructure du noyau pendant le cycle cellulaire
La figure 1 présente Les étapes d’un cycle cellulaire en désordre
1. Classer
chronologiquement
ces électrographies
puis décrire l’aspect
du noyau des
cellules présentées
par ces photos ?

2.

d- Les étapes mitose :


La prophase
Il y’a disparition de l’enveloppe nucléaire et du
nucléole. La chromatine se condense en
chromosomes avec un nombre bien déterminé

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appelé garniture chromosomique. Appariation du


fuseau de division fuseau achromatique

La métaphase
Les chromosomes se rassemblent à l'équateur du
fuseau de division formant la plaque équatoriale. Les
chromosomes apparaissent fissurés en 2 chromatides
liés à un centromère porteur de fibres chromosomiques
qui permettent aux chromosomes de s'accrocher aux
fibres polaires du fuseau de division.

L’anaphase
Le centromère de chaque chromosome se fissure
‘clivage‘, les deux chromatides indépendants l’un de
l’autre, deviennent chromosomes et chacun migre vers
l’un deux pôles de la cellule par interaction entre les
fibres chromosomiques et les fibres polaires, on parle
d’ascension polaire. Il se forme dans les pôles de la
cellule deux lots de même nombre de chromosomes.

La télophase
Lors de laquelle les chromosomes se décondensent et
une enveloppe nucléaire se forme autour de chacun des
deux lots chromosomiques. Le cytoplasme se divise
(cytodiérèse) par formation d’une nouvelle membrane
plasmique et une paroi cellulosique.

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d- la mitose chez une cellule animale

Au cours de sa mitose la cellule animale passe par les mêmes étapes que la cellule végétale,
avec quelques différences dues à la structure de la cellule animale : la cellule animale au repos
possède un organite cytoplasmique appelé centrosome
Au cours de la prophase le centrosome se multiplie en deux, chaque centrosome fils acquière
des microtubules et se transforme en aster, les deux asters s’éloignent et les fibres polaires du
fuseau achromatique s’installent entre les deux asters

Schéma cellule animale au repos

En absence d’une membrane squelettique rigide, la télophase chez la cellule animale se fait par
étranglement équatoriale de la membrane cytoplasmique, les côtés de la membrane se
rapprochent et fusionnent pour donner deux cellules filles indépendantes de petite taille.
e-Observation microscopique de la mitose chez une cellule animale

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f-Comparaison entre la mitose végétale et animale

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j-Aspect du chromosome au cours du cycle cellulaire

Décrire l’évolution de la quantité d’ADN pendant le cycle cellulaire ?


Durant la phase G1, la quantité d’ADN est constante (quantité Q).
 Durant la phase S, la quantité d’ADN est doublé (quantité 2Q). Il y a réplication de l’ADN
(phase  Durant La phase G2, la quantité d’ADN reste constante à 2Q
 La mitose permet de rétablir la quantité initiale de l’ADN

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Bilan : La mitose est une division cellulaire correspondant à une reproduction conforme
car elle conserve toutes les caractéristiques de la cellule mère : Les cellules filles produites sont
identiques entre elles et à la cellule mère.

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Activité 3: la nature chimique de l’information génétique


1- Mise en évidence de la nature chimique de l’information génétique
a. Expérience de Griffith

Pour révéler la nature du principe transformant supposé par Griffith, Avery disposait en 1944
d’enzymes capables d’éliminer un à un les principaux constituants de la cellule bactérienne, à
savoir : Les protéines et deux types d’acide présent dans le noyau : l’acide ribonucléique (ARN)
et l’acide désoxyribonucléique (ADN).

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Il réalisa alors les expériences du document suivant.

1-Exploitez les données des expériences d’Avery, pour révéler la nature chimique de
l’information génétique.
Réponse :

Les expériences d’Avery démontrent que l’apparition de bactéries S vivantes persiste même
après l’élimination des protéines ou de l’ARN, on déduit que ces deux éléments n’interviennent
pas lors de la transformation bactérienne. Tandis que lorsqu’on détruit l’ADN, la transformation
bactérienne ne s’effectue pas. L’ADN est donc nécessaire pour offrir l’information génétique
concernant la synthèse de la capsule aux bactéries R. On déduit que la molécule d’ADN est le
support de l’information génétique.

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b- Mécanisme de transformation bactérienne

La transformation du pneumocoque R en pneumocoque S, se manifeste par


l’acquisition de la capsule en présence de l’ADN de S tué. Donc l’ADN est
capable de donner aux bactéries R la capacité de synthétiser la capsule, qui
constitue chez cette espèce un caractère héréditaire.

L’ADN est donc le support de l’information génétique

c-Confirmation du rôle de l’ADN : expérience de


Hershey et Chase (1952)
Les expériences de Chase et Hershey ont été réalisées
avec le bactériophage T2 en 1952. Ce bactériophage
infecte et se multiplie dans la bactérie E. coli. Le
bactériophage T2 un ADN protégé par une capside
protéique

Que peut-on déduire ?

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1. Décrire les étapes de la multiplication du bactériophage


2. Que peut-on déduire de l’analyse du cycle de vie du bactériophage ?

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2- L’extraction de l’ADN à partir de cellules de bulbe d’ognon

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Les résultats de la technique de Feulgen montrent que la molécule ADN est le constituant
fondamental des chromosomes, qui sont le support de l’information héréditaire.
Activité 4 : Les constituants chimiques de l’information génétique et sa structure
1-Constituants chimiques

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3- Structure de l’ADN :
A- Régle de chargraff

Correc on

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1-Constituants chimiques

Activité 5 : Relation entre chromatine, chromosomes et ADN


L’observation au microscope électronique du noyau inter phasique permet de voir l’ultra
structure de la chromatine
à 40000X la chromatine apparait sous forme de
filaments fins enchevêtrés ; chaque filament est
formé d’ADN .

Nucléoplasme
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A 220000 X le filament
chromatinien ou nucléo
filament apparait comme un
collier où alterne l’ADN et des
globules appelées nucléosomes,
chaque nucléosome est formé
d’histone une protéine
nucléique sur laquelle s’enroule
l’ADN .

Pendant la prophase et la
métaphase les nucléofilaments
se condensent en chromosomes
qui apparaissent formés de deux
chromatides

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Activité : Mécanisme de duplication de l’ADN


1- Mise en évidence de la duplication de l’ADN

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2- Mécanisme de réplication de l’ADN


a. Expérience de Meselson et stahl (1958)

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b. Expérience de taylor

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