Les anarobies

Aspect microscopique
Bacilles Gram + prsentant une spore lEF : mobiles le plus souvent par ciliature pritriche

Spore trs rsistante, non dtruite 100C pendant 3 5 heures.

Classification
Elle se fait selon leur habitat, leurs caractres morphologiques et culturaux et leur pouvoir pathogne. On distingue:

la flore tellurique: bactries saprophytes du sol et commensales des cavits naturelles de l'homme et des animaux. Exemple : le genre Clostridium. Rgle applique pour les conserves industrielles : 10 min 120C. la flore de Veillon: bactries commensales des voies respiratoires, digestives et gnitales de l'homme et des animaux et qui ne peuvent survivre dans le sol, non sporules. Exemples : nombreux genres comme Bacteroides, Peptococcus,

Mobiluncus, Fusobacterium.

Pouvoir pathogne
Clostridium tetani

Forme vgtative : bacilles bouts carrs en chanettes plus ou moins longues Gram +

Forme de rsistance : spore dans un environnement favorable permet le dveloppement dun nouveau Clostridium tetani. Prsent dans le sol et les poussires ttanos

Le ttanos est secondaire l'introduction dans l'organisme de spores de Clostridium tetani conscutive un traumatisme. Si l'anarobiose est suffisante (plaies profondes, multiplication de bactries arobies associes), les formes vgtatives apparaissent par germination des spores.

Cependant, la multiplication bactrienne reste localise la porte d'entre, la maladie est uniquement due la toxine.
La toxine, libre au cours de la multiplication entre par endocytose par les terminaisons nerveuses du site infect. Elle empche la libration d'inhibiteurs du motoneurone (glycine, GABA) et provoque une paralysie spastique. (muscle restant en contraction)

Clostridium botulinum
Observation microscopique
Grand bacille (5 m de long, 1 m de large), Gram +, Formant une spore ovalaire terminale dformante.

Caractres biochimiques: ANS, glucose +, mobile.

Clostridium botulinum est l'agent d'une intoxication alimentaire, le botulisme. La maladie nest pas due la bactrie mais lingestion de sa toxine prsent dans un aliment mal strilis. Cest une toxine thermolabile (sensible la chaleur), il y a risque de contamination uniquement lors de lingestion daliments non chauffs. L'intoxication se traduira par une paralysie des muscles lisses essentiellement.

Clostridium perfringens
Observation au MEB
Grand bacille (5 m de long, 1 m de large), Gram +, Formant une spore ovalaire terminale dformante.

Responsable de gangrnes gazeuses post-traumatiques, de toxi-infections alimentaires et d'entrites ncrosantes. C'est l'anarobie le plus rpandu dans l'environnement (sol, eau, air, poussires). C'est aussi un commensal des flores de l'intestin, du vagin ou des voies ariennes suprieures de l'Homme et des animaux. Sa prsence dans les eaux est un critre de contamination fcale.

Angine fuso-spirochtienne de Vincent

Angine ulcro-ncrotique accompagne d'une fivre leve et d'une raction ganglionnaire de voisinage. Le diagnostic est bactrioscopique avec la prsence d'une bactrie de type Fusobacterium et d'une bactrie de type spirochte.

Le traitement de cette angine est simple base de pnicilline G.

Les milieux de culture des Clostridium

Milieu de SCHAEDLER
Bouillon trypticase soja Polytone Sg glucose Extrait de levure Tris-hydroxymthylaminomthane Hmine L-cystine ED 10 g 5g 5g 3g 0,01 g 0,40 g qsp 1 L
Source N et de C, de vitamines
Tampon (maintien du pH constant) Facteur de croissance (synthse des cytochromes) Acide amin, rducteur

pH = 7,6

Utilisation:

Ce milieu peut-tre : enrichi par addition de vitamine K3. slectif par addition d'inhibiteurs . solide par addition d'agar : glose Schaedler.

Bouillon ou glose Schaedler simple: bactries non exigeantes du genre Clostridium . Bouillon ou glose enrichi(e): bactries exigeantes de la flore de Veillon. Milieu de culture utilis pour les bactries anarobies exigeantes : glose Schaedler + vitamine K3 + sang frais une concentration de 5%.

Milieu de Rosenow cystine

Composition
Peptone trypsique Extrait de viande de buf Chlorure de sodium Chlorhydrate de Cystine Glucose Indicateur dAndrade (fushine acide dans de lED) ED 10 g 3g 2g 0,3 g 2g 10 mL qsp 1 L Ajouter dans le tube: Un morceau de marbre Un morceau de cervelle de boeuf
Source N et de C Sources minrales Acide amin, rducteur Source nergtique carbone Indicateur doxydo rduction

pH = 7,2

Ensemencement
Rgnrer le milieu 20 min au BM 100C pour assurer lanarobie La prsence dun rducteur renforce lanarobie Ensemencer en profondeur le tube en vitant les bulles dair Recouvrir de paraffine fondue Incuber 24 heures 37C.

Milieu MRS
Composition
Peptone trypsique de casine Macration de viande Extrait de levure Actate de sodium Citrate dammonium Phosphate bipotassique Tween 80 Sulfate de magnsium Sulfate de manganse Glucose Agar ED 15 g 500 mL 5g 5g 2g 2,4 g 1 mL 0,2 g 0,05 g 20 g 12 g qsp 1 L
Source N et de C, vitamines et minraux, dacides amins Inhjbiteurs (concentrations ) Source minrale Apport dacides gras Sources minrales Source nergtique de C

pH = 6,5 inhibiteur
Cest un milieu disolement slectif et enrichi des Lactobacillus utilis pour lisolement et le dnombrement de ces bactries dans les produits laitiers.

Ensemencement
Isolement par la technique des quadrants et incubation sous atmosphre CO 2 .

Milieu de Rosenow Cystine

Lecture des milieux

Coloration rose rouge carmin au niveau de la cervelle fermentation du glucose

Pas de coloration rose glucose Dcoloration du milieu voir virage au vert les bactries sont rductrices

Apparition de bulles, dcollement de la paraffine production de gaz par les bactries

Type respiratoire

Glose de Schaedler en anarobiose

Culture sur la hauteur du tube, lexception de la surface en contact avec lO2 de lair bactries ANS. Colonies blanches contours rguliers, bombes,type S culture sur milieu riche en anarobiose

n impair: Bacilles Gram - culture sur milieu riche , bactries exigeantes faisant partie de la flore de veillon

Colonies blanches contours rguliers, bombes, type S culture sur milieu riche en anarobiose

n pair: Bacilles Gram + sporogne bactries faisant partie de la flore tellurique.

Glose MRS
Petites colonies blanches caractristiques des Lactobacillus

Culture sur les botes mises en anarobiose et sous atmosphre CO2 bactries cultivant en absence dO2 ncessaire la fermentation du lactose du lait production dacides responsables de lapparition du caill.

Frottis du yaourt

Bacilles Gram + caractristiques des

Coques en chanette Gram + caractristiques des Lactococcus

Lactobacillus La fermentation du yaourt est due deux types de bactrie provoquant le caill du lait par production dacides lors de lutilisation du lactose.