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Package Insert - API 20 STREP
Package Insert - API 20 STREP
®
20 Strep IVD
bioMérieux SA Français - 1
api® 20 Strep 07625K - fr - 2009/12
xOuvrir les ampoules délicatement comme suit : NOTE 2 : Pour obtenir une pousse suffisante, il est
- Placer l'ampoule dans le protège-ampoule. préférable de préparer 2 géloses quand la souche est
- Tenir l'ensemble verticalement dans une susceptible d'être un Pneumocoque.
main (bouchon blanc vers le haut).
Préparation de la galerie
- Bien enfoncer le bouchon.
- Exercer une pression horizontale avec le xRéunir fond et couvercle d'une boîte d'incubation et
pouce sur la partie striée du bouchon de répartir environ 5 ml d'eau distillée ou déminéralisée [ou
façon à casser l'extrémité de l'ampoule. toute eau sans additif ou dérivés susceptibles de libérer
- Retirer l'ampoule du protège-ampoule et des gaz (Ex : Cl2, CO2 ...)] dans les alvéoles pour créer
conserver le protège-ampoule pour une une atmosphère humide.
utilisation ultérieure. xInscrire la référence de la souche sur la languette
- Enlever délicatement le bouchon. latérale de la boîte. (Ne pas inscrire la référence sur le
xLes performances présentées sont obtenues avec la couvercle, celui-ci pouvant être déplacé lors de la
méthodologie indiquée dans cette notice. Toute dé- manipulation).
viation de méthodologie peut altérer les résultats. xSortir la galerie de son emballage individuel.
xL'interprétation des résultats du test doit être faite en xPlacer la galerie dans la boîte d'incubation.
tenant compte du contexte clinique ou autre, de l'origine Préparation de l'inoculum
du prélèvement, des aspects macro et microscopiques
de la souche et éventuellement des résultats d'autres xOuvrir une ampoule d’API Suspension Medium (2 ml)
tests, en particulier de l'antibiogramme. comme indiqué au paragraphe "Précautions
d’utilisation" ou utiliser un tube contenant 2 ml d'eau
distillée sans additif.
CONDITIONS DE STOCKAGE
xA l'aide d'un écouvillon, prélever toute la culture
Les galeries et milieux se conservent à 2-8°C jusqu'à la préalablement préparée.
date limite d'utilisation indiquée sur l'emballage. xRéaliser une suspension très dense : opacité
supérieure à 4 de McFarland. Cette suspension doit
ECHANTILLONS (PRELEVEMENT ET PREPARATION) être utilisée extemporanément.
API 20 Strep ne doit pas être utilisé directement à partir Inoculation de la galerie
des prélèvements d'origine clinique ou autre.
Les microorganismes à identifier doivent dans un premier xDans la première moitié de la galerie (tests VP à ADH)
temps être isolés sur un milieu de culture adapté selon les répartir la suspension précédente en évitant la formation
techniques usuelles de bactériologie. de bulles (pour cela, incliner la boîte d'incubation vers
l'avant et placer la pointe de la pipette ou de la PSIpette
sur le côté de la cupule) :
MODE OPERATOIRE
- pour les tests VP à LAP : environ 100 µl dans chaque
Sélection des colonies cupule.
Après isolement et vérification de l'appartenance de la - pour le test ADH : remplir uniquement le tube.
souche à identifier à la famille des Streptococcaceae xDans la deuxième moitié de la galerie (tests RIB à
(réaction de Gram, catalase) : GLYG) :
xNoter le type d'hémolyse sur la fiche de résultats - ouvrir une ampoule d'API GP Medium comme indiqué
(21° test). au paragraphe "Précautions d’utilisation" et y
xPrélever une colonie bien isolée (Note 1) et la mettre en transférer le reste de la suspension, soit 0,5 ml au
suspension dans 0,3 ml d'eau stérile. Bien homo- minimum. Bien homogénéiser.
généiser. - répartir cette nouvelle suspension dans les tubes
xInonder une boîte de gélose Columbia au sang de uniquement.
mouton (Note 2) avec cette suspension (ou xRemplir les cupules des tests soulignés ADH à GLYG
écouvillonner stérilement toute la surface de la gélose). avec de l'huile de paraffine en formant un ménisque
xIncuber la boîte 24 heures (± 2 heures) à 36°C ± 2°C en convexe.
anaérobiose. xRefermer la boîte d'incubation.
NOTE 1 : Les Streptocoques ß-hémolytiques et les xIncuber à 36°C ± 2°C en aérobiose pendant
Entérocoques donnent des colonies de taille suffisante 4H00 - 4H30 pour une première lecture et 24 heures
après 24 heures d'incubation. Pour les autres (± 2 heures) si nécessaire pour une deuxième lecture.
Streptocoques, il est préférable de prélever des colonies LECTURE ET INTERPRETATION
de 48 heures. Pour les souches de culture difficile (très
Lecture de la galerie
petites colonies à 48 heures) il est recommandé d'opérer
de la manière suivante : Après 4 heures d'incubation :
- Cultiver la colonie dans 1 ml de bouillon de Schaedler à xAjouter les réactifs :
36°C ± 2°C pendant 5 heures. - test VP : 1 goutte de VP 1 et VP 2.
- Inonder une boîte de gélose Columbia au sang de - test HIP : 2 gouttes de NIN.
mouton avec la totalité de cette culture. Eliminer - tests PYRA, DGAL, ßGUR, ßGAL, PAL, LAP :
l'excédent. 1 goutte de ZYM A et ZYM B (*).
- Incuber la boîte 18 à 24 heures à 36°C ± 2°C en (*) Il est recommandé de contrôler chaque ampoule
ère
anaérobiose. de réactif ZYM B avant la 1 utilisation.
Pour cela, il est recommandé d’utiliser la souche
ATCC® 700400 mentionnée au paragraphe Contrôle
Qualité afin d’exclure tout réactif défectueux.
xAttendre 10 minutes, puis lire toutes les réactions en se
référant au Tableau de Lecture. Si nécessaire, exposer
la galerie à une lampe forte (1000 W) 10 secondes pour
décolorer le réactif en excès dans les tubes PYRA à LAP.
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CONTROLE DE QUALITE
Les galeries, milieux et réactifs font l'objet de contrôles de qualité systématiques à différentes étapes de leur fabrication.
Le Contrôle de Qualité Minimum peut être utilisé pour vérifier que les conditions de stockage et de transport n’ont pas
d’impact sur les performances de la galerie API 20 Strep. Ce contrôle peut être réalisé en suivant les instructions et
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critères attendus ci-dessus en lien avec le référenciel CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
Identification Systems.
®
Le Contrôle peut être fait en utilisant la souche Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 pour évaluer
les performances du test ARA. Des études réalisées par bioMérieux ont montré que sur la galerie API 20 Strep, le test
ARA est le test le plus sensible. Lors du contrôle, l’intégrité de la galerie peut être vérifiée en utilisant la souche
Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400.
Dans le cas où un contrôle de Qualité Complet exigé pour cette galerie, les deux souches suivantes devront être
testées pour vérifier les réactions positives et négatives de la plupart des tests de la galerie API 20 Strep.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Ce résultat peut varier en fonction du milieu de culture utilisé.
xInoculum ajusté entre 4,5 et 5,5 McF avec DENSIMAT.
xProfils obtenus après : - 4 heures d'incubation pour les tests VP à LAP
- 24 heures d'incubation pour les tests ADH à GLYG.
xSouches cultivées sur gélose Columbia au sang de mouton.
Il est de la responsabilité de l'utilisateur de s'assurer que le contrôle de qualité est mis en oeuvre conformément à la
législation locale en vigueur.
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TABLEAU DE LECTURE
QTE RESULTATS
TESTS COMPOSANTS ACTIFS REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.) NEGATIF POSITIF
VP 1 + VP 2 / jusqu'à 10 min (3)
production d'acétoïne
VP sodium pyruvate 1,9 Incolore Rose-Rouge
(Voges Proskauer)
NIN / jusqu'à 10 min
HIP acide hippurique hydrolyse (acide HIPpurique) Incolore/Bleu pâle
0,4 Bleu foncé/Violet
Gris-bleuté
4h 24 h 4h 24 h
Incolore
esculine 1,16 hydrolyse ß-glucosidase Incolore Noir
ESC Jaune pâle Noir
citrate de fer 0,152 (ESCuline) Jaune pâle Gris
Gris clair
ZYM A + ZYM B / 10 min (PYRA à LAP) (1)
au besoin décoloré par éclairement intense
acide pyroglutamique- Incolore ou
PYRA 0,0256 PYRrolidonyl Arylamidase Orange
ß-naphtylamide Orange très pâle
6-bromo-2-naphtyl-DD-
DGAL 0,0376 D-GALactosidase Incolore Violet
galactopyranoside
acide naphtol-ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-GlUcuRonidase Incolore Bleu
glucuronique
2-naphtyl-ßD- Incolore ou
ßGAL 0,0306 ß-GALactosidase Violet
galactopyranoside Violet très pâle
Incolore ou
PAL 2-naphtyl phosphate 0,0244 Phosphatase ALcaline Violet
Violet très pâle
LAP L-leucine-ß-naphtylamide 0,0256 Leucine AminoPeptidase Incolore Orange
4h 24 h 4h 24 h
Orange/ Orange/
RIB D-ribose 1,4 acidification (RIBose) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
ARA L-arabinose 1,4 acidification (ARAbinose) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
MAN D-mannitol 1,36 acidification (MANnitol) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
SOR D-sorbitol 1,36 acidification (SORbitol) Rouge Jaune
Rouge Jaune
D-lactose Orange/ Orange/
LAC 1,4 acidification (LACtose) Rouge Jaune
(origine bovine) Rouge Jaune
Orange/ Orange/
TRE D-tréhalose 1,32 acidification (TREhalose) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
INU inuline 5,12 acidification (INUline) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
RAF D-raffinose 3,12 acidification (RAFfinose) Rouge Jaune
Rouge Jaune
Orange/ Orange/
AMD amidon (2) 2,56 acidification (AMiDon) Rouge Jaune
Rouge Jaune
GLYG glycogène 1,28 acidification (GLYcoGène) Rouge ou Orange Jaune franc
(1) Lors d'une deuxième lecture après 24 heures d'incubation, on peut remarquer un dépôt dans les tubes où ont été ajoutés les
réactifs ZYM A et ZYM B. Ce phénomène est normal et ne doit pas être pris en considération.
(2) L'acidification de l'amidon est fréquemment moins forte que celle des autres sucres.
(3) Une coloration rose pâle obtenue après 10 minutes doit être considérée négative.
xLes quantités indiquées peuvent être ajustées en fonction des titres des matières premières.
xCertaines cupules contiennent des composants d’origine animale, notamment des peptones.
METHODOLOGIE p. I BIBLIOGRAPHIE p. III
TABLEAU D'IDENTIFICATION p. II TABLE DES SYMBOLES p. IV
BIOMERIEUX, le logo bleu, API et apiweb sont des marques utilisées, déposées et/ou enregistrées appartenant à bioMérieux SA ou à l’une de ses filiales.
CLSI est une marque appartenant à Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
ATCC est une marque appartenant à American Type Culture Collection.
Les autres marques et noms de produits mentionnés dans ce document sont des marques commerciales de leurs détenteurs respectifs.
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QUALITY CONTROL
The media, strips and reagents are systematically quality controlled at various stages of their manufacture.
Streamlined quality control may be used to confirm acceptable performance of the API 20 Strep system after shipping-
storage. This methodology may be performed by following the instructions above for testing and meeting the criteria
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stated in CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial Identification Systems.
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Testing may be conducted using Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 to evaluate the performance
of the ARA test. Testing performed by bioMérieux has shown that the ARA test is the most labile on the API 20 Strep
strip. When testing the strip, Stretococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 can be used to detect degradation.
For those users who are required to perform comprehensive quality control testing with the strip, the following two
strains should be tested to demonstrate positive and negative reactivity for most of the API 20 Strep tests.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* This result may vary depending on the culture medium used.
xInoculum adjusted to between 4.5 and 5.5 McF using DENSIMAT.
xProfiles obtained after : - 4 hours of incubation for tests VP to LAP
- 24 hours of incubation for tests ADH to GLYG.
xStrains cultured on Columbia sheep blood agar.
It is the responsibility of the user to perform Quality Control in accordance with any local applicable regulations.
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READING TABLE
QTY RESULTS
TESTS ACTIVE INGREDIENTS REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.) NEGATIVE POSITIVE
VP 1 + VP 2 / wait 10 min (3)
acetoin production
VP sodium pyruvate 1.9 Colorless Pink-Red
(Voges Proskauer)
NIN / wait 10 min
HIP hippuric acid 0.4 hydrolysis (HIPpuric acid) Colorless/Pale blue
Dark blue/Violet
Bluish-grey
4 hrs. 24 hrs. 4 hrs. 24 hrs.
Colorless
esculin 1.16 ß-glucosidase hydrolysis Colorless Black
ESC Pale yellow Black
ferric citrate 0.152 (ESCulin) Pale yellow Grey
Light grey
ZYM A + ZYM B / 10 min (PYRA to LAP) (1)
if necessary, decolorize with intense light
pyroglutamic acid- Colorless or
PYRA 0.0256 PYRrolidonyl Arylamidase Orange
ß-naphthylamide very pale orange
6-bromo-2-naphthyl-
DGAL 0.0376 D-GALactosidase Colorless Violet
DD-galactopyranoside
naphthol ASBI-
ßGUR 0.0537 ß-GlUcuRonidase Colorless Blue
glucuronic acid
2-naphthyl- Colorless or
ßGAL 0.0306 ß-GALactosidase Violet
ßD-galactopyranoside Very pale violet
Colorless or
PAL 2-naphthyl phosphate 0.0244 ALkaline Phosphatase Violet
Very pale violet
LAP L-leucine-ß-naphthylamide 0.0256 Leucine AminoPeptidase Colorless Orange
ADH L-arginine 1.9 Arginine DiHydrolase Yellow Red
4 hrs. 24 hrs. 4 hrs. 24 hrs.
Orange/ Orange/
RIB D-ribose 1.4 acidification (RIBose) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
ARA L-arabinose 1.4 acidification (ARAbinose) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
MAN D-mannitol 1.36 acidification (MANnitol) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
SOR D-sorbitol 1.36 acidification (SORbitol) Red Yellow
Red Yellow
D-lactose Orange/ Orange/
LAC 1.4 acidification (LACtose) Red Yellow
(bovine origin) Red Yellow
Orange/ Orange/
TRE D-trehalose 1.32 acidification (TREhalose) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
INU inulin 5.12 acidification (INUlin) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
RAF D-raffinose 3.12 acidification (RAFfinose) Red Yellow
Red Yellow
Orange/ Orange/
AMD starch (2) 2.56 acidification (AmiDon) Red Yellow
Red Yellow
GLYG glycogen 1.28 acidification (GLYcoGen) Red or Orange Bright yellow
(1) During a second reading after 24 hours of incubation, a deposit may be noticed in the tubes where the ZYM A and ZYM B reagents
have been added. This phenomenon is normal and should not be taken into consideration.
(2) The acidification of starch is frequently weaker than that of other sugars.
(3) A pale pink color obtained after 10 minutes should be considered negative.
xThe quantities indicated may be adjusted depending on the titer of the raw materials used.
xCertain cupules contain products of animal origin, notably peptones.
BIOMERIEUX, the blue logo, API and apiweb are used, pending and/or registered trademarks belonging to bioMérieux SA or one of its subsidiaries.
CLSI is a trademark belonging to Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
ATCC is a trademark belonging to American Type Culture Collection.
Any other name or trademark is the property of its respective owner.
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xÖffnen Sie die Ampullen wie folgt vorsichtig: ANMERKUNG 2: Bei Verdacht auf Pneumokokken emp-
- Stecken Sie die Ampulle in die Schutzhülle fiehlt es sich, 2 Platten vorzubereiten, um ausreichendes
der Ampulle. Wachstum zu erhalten.
- Halten Sie die Ampulle in der Schutzhülle senk-
Vorbereitung des Streifens
recht (weiße Verschlusskappe nach oben).
- Pressen Sie die Verschlusskappe so weit xStellen Sie eine Inkubationswanne mit Deckel bereit und
wie möglich nach unten. geben Sie zur Herstellung einer feuchten Kammer ca.
- Drücken Sie mit dem Daumen gegen den 5 ml destilliertes oder demineralisiertes Wasser [oder
gestrichelten Bereich der Verschluss- anderes Wasser ohne Zusätze bzw. Derivate, die Gase
kappe, bis die Ampullenspitze abbricht. freisetzen können (z.B. Cl2, CO2 ...)] in die Wanne.
- Nehmen Sie die Ampulle aus der Schutz- xNotieren Sie die Referenznummer des Stammes auf
hülle und bewahren Sie die Schutzhülle für dem dafür vorgesehenen seitlichen Abschnitt der Inku-
einen späteren Gebrauch auf. bationswanne. (Die Referenznummer nicht auf dem De-
- Entfernen Sie vorsichtig die Verschluss- ckel notieren, da dieser während des Arbeitsablaufes
kappe. verwechselt werden oder abhanden kommen kann).
xDie angegebene Performance wurde gemäß dem xNehmen Sie den Streifen aus der Verpackung.
Verfahren der vorliegenden Arbeitsanleitung ermittelt. xLegen Sie den Streifen in die Wanne.
Jede Abweichung von diesem Verfahren kann die Er- Vorbereitung des Inokulums
gebnisse beeinflussen.
xBei der Interpretation der Ergebnisse müssen der klini- xÖffnen Sie eine Ampulle API Suspensionsmedium
sche Hintergrund oder andere Zusammenhänge, die (2 ml), wie im Abschnitt "Vorsichtsmaßnahmen" dieser
Probenherkunft, Kolonie- und mikroskopische Morpho- Arbeitsanleitung beschrieben, oder verwenden Sie ein
logie des Stammes sowie gegebenenfalls die Ergeb- anderes Röhrchen mit 2 ml Aqua dest. ohne Zusätze.
nisse anderer Tests, insbesondere das Antibiogramm, xNehmen Sie die zuvor hergestellte Kultur mit einem
berücksichtigt werden. Wattetupfer ganz ab.
xStellen Sie eine dichte Suspension her: Die Trübung
muss höher als die des McFarland-Standards 4 sein.
LAGERUNGSBEDINGUNGEN
Diese Suspension muss sofort verwendet werden.
Die Streifen und Medien müssen bei 2-8°C gelagert wer-
den und sind bis zu dem auf der Verpackung angegebe- Inokulation des Streifens
nen Verfallsdatum haltbar. xErste Hälfte des Streifens: Die Tests VP bis ADH folgen-
dermaßen mit dieser Suspension beimpfen (um Blasen-
PROBEN (ENTNAHME UND VORBEREITUNG) bildung zu vermeiden, halten Sie die Inkubationswanne
API 20 Strep darf nicht zur direkten Testung von klini- leicht schräg und legen Sie die Pipette oder PSIpette
schen oder anderen Untersuchungsmaterialien verwendet am Rand des Bechers auf):
werden. - Für die Tests VP bis LAP ca. 100 µl in jeden Becher
Die zu identifizierenden Mikroorganismen müssen gemäß pipettieren.
den üblichen mikrobiologischen Verfahren auf einem - Für den ADH-Test nur das Röhrchen füllen.
geeigneten Kulturmedium isoliert werden. xZweite Hälfte des Streifens (Tests RIB bis GLYG):
- Öffnen Sie eine Ampulle API GP Medium, wie im Ab-
schnitt „Vorsichtsmaßnahmen“ beschrieben, und
TESTDURCHFÜHRUNG
überführen Sie den Rest der Suspension (ca. 0,5 ml)
Auswahl der Kolonien in diese Ampulle. Gut homogenisieren.
Nach der Isolierung des zu identifizierenden Stamms und - Mit dieser neuen Suspension nur die Röhrchen füllen.
Überprüfung, ob dieser zur Familie der Streptococcaceae xÜberschichten Sie die Becher der unterstrichenen Reak-
gehört (Gramfärbung, Katalase-Reaktion) gehen Sie wie tionen (ADH bis GLYG) hoch mit Paraffinöl.
folgt vor: xSchließen Sie die Inkubationswanne mit dem Deckel.
xNotieren Sie die Art der Hämolyse auf dem Ergebnis- xDie erste Ablesung erfolgt nach Inkubation für 4 - 4 ½ h
blatt (21. Test). bei 36°C ± 2°C unter aeroben Bedingungen, die zweite
xNehmen Sie eine Einzelkolonie ab (Anmerkung 1) und Ablesung erfolgt, falls erforderlich, nach 24 h (± 2 h).
suspendieren Sie diese in 0,3 ml sterilem Aqua dest.
ABLESUNG UND INTERPRETATION
Die Suspension gut homogenisieren.
xÜberfluten Sie eine Columbia-Agarplatte mit Schafblut Ablesung des Streifens
(Anmerkung 2) mit dieser Suspension (oder beimpfen Nach 4-stündiger Inkubation:
Sie die ganze Oberfläche des Agars aseptisch mit xDie Reagenzien zugeben:
einem Wattetupfer). - VP: je 1 Tropfen VP 1 und VP 2.
xInkubieren Sie die Platte für 24 h (± 2 h) bei - HIP: 2 Tropfen NIN.
36°C ± 2°C unter anaeroben Bedingungen. - PYRA, DGAL, ßGUR, ßGAL, PAL und LAP:
ANMERKUNG 1: ß-hämolysierende Streptokokken und je 1 Tropfen ZYM A und ZYM B (*).
Enterokokken bilden nach 24-stündiger Inkubation ausrei- (*) Es ist empfehlenswert, jede Ampulle mit ZYM B
chend große Kolonien. Bei anderen Streptokokken ist es Reagenz vor dem ersten Gebrauch zu kontrollieren.
empfehlenswert, 48 h zu inkubieren. Bei anspruchsvollen Es wird empfohlen, hierfür den im Abschnitt
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Keimen (sehr kleine Kolonien nach 48 h) empfiehlt es Qualitätskontrolle angegebenen ATCC Stamm
sich, folgendermaßen vorzugehen: 700400 zu verwenden, um jegliche unbrauchbaren
- Inkubieren Sie eine Kolonie in 1 ml Schaedler-Bouillon Reagenzien auszuschließen.
für 5 h bei 36°C ± 2°C. xWarten Sie 10 min und lesen Sie dann alle Reaktionen
- Überfluten Sie eine Columbia-Agarplatte mit Schafblut mit Hilfe der Ablesetabelle ab. Falls erforderlich, legen
mit der ganzen Kultur. Den Überstand verwerfen. Sie den Streifen 10 s lang unter eine starke Lampe
- Inkubieren Sie die Platte für 18-24 h bei 36°C ± 2°C (1000 W), um das überschüssige Reagenz in den
unter anaeroben Bedingungen. Röhrchen PYRA bis LAP zu entfärben.
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QUALITÄTSKONTROLLE
Die Medien, Streifen und Reagenzien unterliegen in den verschiedenen Stadien der Produktion systematisch durchge-
führten Qualitätskontrollen.
Es kann eine rationalisierte Qualitätskontrolle durchgeführt werden, um sicherzustellen, dass die Leistungsdaten des
API 20 Strep Systems durch die Lagerung und den Transport nicht beeinflusst wurden. Diese Kontrolle kann
®
durchgeführt werden, indem die oben genannten Testanweisungen befolgt und die in der Norm CLSI M50-A Quality
Control for Commercial Microbial Identification Systems genannten Kriterien eingehalten werden.
Um die Leistung der ARA Reaktion zu überprüfen, kann die Testung mit dem Streptococcus equi spp zooepidemicus
®
ATCC 700400 Stamm durchgeführt werden. Die von bioMérieux durchgeführten Tests haben gezeigt, dass der ARA
Test der empfindlichste Test auf dem API 20 Strep Streifens ist. Durch die Testung von Streptococcus equi spp
zooepidemicus ATCC 700400 kann eine Qualitätsminderung des Streifens nachgewiesen werden.
Für eine umfassende Qualitätskontrolle des Teststreifens müssen die folgenden zwei Stämme getestet werden, um
die positiven und negativen Reaktionen für die Mehrzahl der Tests des API 20 Strep Streifens zu kontrollieren.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC: American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Dieses Ergebnis kann je nach dem verwendeten Kulturmedium variieren.
xDas Inokulum wurde mit DENSIMAT auf Werte zwischen 4,5 und 5,5 McF eingestellt.
xProfile nach: - 4-stündiger Inkubation für die Tests VP bis LAP,
- 24-stündiger Inkubation für die Tests ADH bis GLYG.
xAnzucht der Stämme auf Columbia-Agar mit Schafblut.
Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die Qualitätskontrolle in Übereinstimmung mit den jeweils gültigen Vor-
schriften durchzuführen.
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ABLESETABELLE
MENGE ERGEBNISSE
TESTS AKTIVE BESTANDTEILE REAKTIONEN/ENZYME
(mg/Vert.) NEGATIV POSITIV
VP 1 + VP 2 / bis 10 min (3)
Acetoinbildung
VP Natriumpyruvat 1,9 farblos rosa-rot
(Voges Proskauer)
NIN / bis 10 min
HIP Hippursäure 0,4 Hydrolyse (HIPpursäure) farblos/blassblau dunkelblau/violett
bläulich-grau
4h 24 h 4h 24 h
farblos farblos schwarz schwarz
Aesculin 1,16 ß-Glucosidase-Hydrolyse
ESC blassgelb blassgelb grau
Eisencitrat 0,152 (AESCulin)
hellgrau
ZYM A + ZYM B / 10 min (PYRA bis LAP) (1)
bei Bedarf mit einer starken Lichtquelle entfärben
Pyroglutaminsäure- farblos oder
PYRA 0,0256 PYRrolidonylarylamidase orange
ß-naphthylamid sehr hell-orange
6-Bromo-2-naphthyl-
DGAL 0,0376 D-GALactosidase farblos violett
DD-galactopyranosid
Naphthol-ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-GlUcuRonidase farblos blau
glucuronsäure
2-Naphthyl- farblos oder
ßGAL 0,0306 ß-GALactosidase violett
ßD-galactopyranosid sehr hell-violett
farblos oder
PAL 2-Naphthylphosphat 0,0244 ALkalische Phosphatase violett
sehr hell-violett
LAP L-Leucin-ß-naphthylamid 0,0256 LeucinAminoPeptidase farblos orange
ADH L-Arginin 1,9 ArgininDiHydrolase gelb rot
4h 24 h 4h 24 h
orange/ orange/
RIB D-Ribose 1,4 Säurebildung (RIBose) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
ARA L-Arabinose 1,4 Säurebildung (ARAbinose) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
MAN D-Mannitol 1,36 Säurebildung (MANnitol) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
SOR D-Sorbitol 1,36 Säurebildung (SORbitol) rot gelb
rot gelb
D-Lactose orange/ orange/
LAC 1,4 Säurebildung (LACtose) rot gelb
(bovin) rot gelb
orange/ orange/
TRE D-Trehalose 1,32 Säurebildung (TREhalose) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
INU Inulin 5,12 Säurebildung (INUlin) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
RAF D-Raffinose 3,12 Säurebildung (RAFfinose) rot gelb
rot gelb
orange/ orange/
AMD Stärke (2) 2,56 Säurebildung (AMiDon) rot gelb
rot gelb
GLYG Glycogen 1,28 Säurebildung (GLYcoGen) rot oder orange leuchtend gelb
(1) Bei einer zweiten Ablesung nach 24 h Inkubation kann sich in den Röhrchen, denen die Reagenzien ZYM A und ZYM B zugegeben
wurden, ein Niederschlag bilden. Dies ist normal und für die Identifizierung ohne Bedeutung.
(2) Die Säurebildung aus Stärke ist häufig weniger stark als bei den anderen Kohlenhydraten.
(3) Eine hellrosa Färbung nach 10 min ist negativ zu bewerten.
xDie angegebenen Mengen können je nach Konzentration der verwendeten Ausgangsmaterialien angeglichen werden.
xEinige Näpfchen enthalten Bestandteile tierischen Ursprungs, vor allem Peptone.
METHODIK S. I LITERATUR S. III
PROZENTTABELLE S. II SYMBOLE S. IV
BIOMERIEUX, das blaue Logo, API und apiweb sind verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marken von bioMérieux SA oder einer ihrer Niederlassungen.
CLSI ist eine Marke von Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
ATCC ist eine Marke von American Type Culture Collection.
Alle anderen Namen oder Marken sind das Eigentum ihrer jeweiligen Besitzer.
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xAbrir las ampollas con cuidado del modo siguiente: Preparación de la galería
- Introducir la ampolla en el protege-ampolla. xReunir fondo y tapa de una cámara de incubación y
- Sujetar verticalmente el conjunto en una repartir aproximadamente 5 ml de agua destilada o
mano (tapón blanco hacia arriba). desmineralizada [o cualquier agua sin aditivos ni
- Presionar a fondo el tapón. derivados susceptibles a liberar gases (Ej. Cl2, CO2 ...)]
- Ejercer una presión horizontal con el pulgar en los alveólos para crear una atmósfera húmeda.
en la parte estriada del tapón para romper xInscribir la referencia de las cepas en la lengüeta lateral
la extremidad de la ampolla. de la cámara. (No inscribir la referencia sobre la tapa, ya
- Retirar la ampolla del protege-ampolla y que ésta puede extraviarse durante la manipulación).
conservarlo para un próximo uso. xSacar una galería de su envase individual.
- Retirar el tapón con cuidado. xColocar la galería en la cámara de incubación.
xLas prestaciones indicadas han sido obtenidas
mediante la metodología expresada en la presente ficha Preparación del inóculo
técnica. Toda desviación de dicha metodología puede xAbrir una ampolla de API Suspension Medium (2 ml)
alterar los resultados. como se indica en el párrafo "Precauciones de
xLa interpretación de los resultados del ensayo debe ser utilización" o bien utilizar un tubo que contenga 2 ml de
realizada teniendo en cuenta un contexto clínico o de agua destilada sin aditivo.
otro tipo, el origen de las muestras, los aspectos macro xCon la ayuda de un escobillón, retirar todo el cultivo
y microscópicos de la cepa y, eventualmente, los previamente preparado.
resultados de otros ensayos, particularmente del xRealizar una suspensión muy densa: turbidez superior
antibiograma. a 4 de McFarland. Esta suspensión debe ser utilizada
de inmediato después de su preparación.
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
Inoculación de la galería
Las galerías y los medios se conservan a 2-8ºC hasta la
fecha límite de utilización indicada en el envase. xEn la primera mitad de la galería (desde el ensayo VP al
ADH), repartir la suspensión anterior, evitando la
MUESTRAS (RECOGIDA Y PREPARACIÓN) formación de burbujas (para ello inclinar la cámara de
La galería API 20 Strep no debe ser utilizada incubación hacia adelante y colocar la punta de la
directamente a partir de muestras de origen clínico o de pipeta o PSIpette sobre el lateral de la cúpula):
otro tipo. - para los ensayos desde VP al LAP: agregar
En una primera fase, los microorganismos a identificar aproximadamente 100 µl en cada cúpula.
deben aislarse sobre un medio de cultivo adaptado según - para el ensayo ADH: llenar únicamente el tubo.
las técnicas usuales en bacteriología. xEn la segunda mitad de la galería (desde el ensayo RIB
al GLYG):
MODO DE EMPLEO - abrir una ampolla de API GP Medium como se indica
en el párrafo "Precauciones de utilización" y transferir
Selección de las colonias
allí el resto de la suspensión, es decir,
Después de aislar y verificar la pertenencia de la cepa a aproximadamente 0,5 ml como mínimo.
identificar al género Streptococcaceae (reacción de Homogeneizar bien.
Gram, catalasa): - repartir esta nueva suspensión sólo en los tubos.
xAnotar el tipo de hemólisis en la hoja de resultados xLlenar las cúpulas de las pruebas subrayadas desde la
(ensayo nº 21). ADH a la GLYG con aceite de parafina, provocando un
xTomar una colonia bien aislada (Nota 1) y disolverla en menisco convexo.
suspensión en 0,3 ml de agua estéril. Homogeneizar xVolver a cerrar la cámara de incubación.
bien. xIncubar a 36ºC r 2ºC en aerobiosis durante 4 - 4,5
xInundar una placa de agar Columbia con sangre de horas para una primera lectura y 24 horas (r 2 horas) si
cordero (Nota 2) con esta suspensión (o distribuirlo fuera necesario para una segunda lectura.
mediante un escobillón estéril sobre toda la superficie
del agar). LECTURA E INTERPRETACIÓN
xIncubar la placa 24 horas (r 2 horas) a 36°C r 2ºC en Lectura de la galería
anaerobiosis.
Después de 4 horas de incubación:
NOTA 1: Los Estreptococos ß-hemolíticos y los xAñadir los reactivos:
Enterococos generan colonias de tamaño suficiente - ensayo VP: 1 gota de VP 1 y VP 2
después de 24 horas de incubación. Para los otros - ensayo HIP: 2 gotas de NIN
Estreptococos, es preferible utilzar colonias a las 48 - ensayos PYRA, DGAL, ßGUR, ßGAL, PAL, LAP:
horas de incubación. Para las cepas de cultivo difícil una gota de ZYM A ZYM B (*).
(colonias extremadamente pequeñas a las 48 horas), se (*) Se recomienda controlar cada ampolla de reactivo
recomienda operar como sigue: era
ZYM B antes de la 1 utilización.
- Cultivar la colonia en 1 ml de caldo de Schaedler a Para ello, se recomienda utilizar la cepa ATCC®
36°C r 2ºC durante 5 horas. 700400 mencionada en el párrafo Control de Calidad
- Inundar una placa de agar Columbia con sangre de con el fin de excluir todo reactivo defectuoso.
cordero con la totalidad de este cultivo inicial en caldo.
xEsperar 10 minutos para leer todas las reacciones,
Eliminar el excedente.
remitiéndose la Tabla de Identificación. Si es necesario,
- Incubar la placa durante 18-24 horas a 36°C r 2ºC en
exponer la galería a una lámpara de luz intensa
anaerobiosis.
(1000 W) 10 segundos para eliminar el exceso de
NOTA 2: Para obtener una cantidad suficiente, es reactivo de los tubos desde el PYRA al LAP.
preferible preparar 2 placas cuando la cepa sea
susceptible de ser un Pneumococo.
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CONTROL DE CALIDAD
Los medios, galerías y reactivos son objeto de controles de calidad sistemáticos durante las diferentes etapas de su
fabricación.
Se puede realizar un control de calidad para confirmar las prestaciones de API 20 Strep tras la recepción y
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almacenaje. Para ello se pueden seguir las instrucciones y criterios descritos en CLSI M50-A Quality Control for
Commercial Microbial Identification Systems.
®
La prueba se puede realizar usando Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 para evaluar las
prestaciones de la prueba ARA. Pruebas realizadas por bioMérieux mostraron que la prueba ARA es la más lábil en API
20 Strep. Al probar la tarjeta se puede usar, Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 para detectar la
degradación.
Los usuarios que han de realizar un control de calidad con la galería pueden usar las dos cepas siguientes para
demostrar la reactividad positiva o negativa de la mayoría de las pruebas de API 20 Strep.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Este resultado puede variar en función del medio de cultivo utilizado.
xInóculo ajustado entre 4,5 y 5,5 McF con DENSIMAT.
xPerfiles obtenidos tras: - 4 horas de incubación para los ensayos desde el VP al LAP
- 24 horas de incubación para los ensayos desde el ADH al GLYG.
xCepas cultivadas sobre agar Columbia con sangre de cordero.
El usuario es responsable de cerciorarse de que el control de calidad haya sido realizado conforme a la legislación local
vigente.
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TABLA DE IDENTIFICACIÓN
COMPONENTES CANT RESULTADOS
TESTS REACCIONES/ENZIMAS
ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
VP 1 + VP 2 / hasta 10 min. (3)
producción de acetona
VP piruvato sódico 1,9 Incoloro Rosa-Rojizo
(Voges Proskauer)
NIN / hasta 10 min.
HIP ácido hipúrico hidrólisis (ácido HIPúrico) Incolor/Azul pálido
0,4 Azul oscuro /Violeta
Gris azulado
4h 24 h 4h 24 h
Incoloro Incoloro Negro Negro
esculina 1,16 hidrólisis ß-glucosidasa Amarillo Amarillo Gris
ESC
citrato de hierro 0,152 (ESCulina) pálido pálido
Gris claro
ZYM A + ZYM B / 10 min. (del PYRA al LAP) (1)
decolorar en caso necesario mediante luz intensa
ácido piroglutámico- Incoloro o
PYRA 0,0256 PIRolidonil Arilamidasa Naranja
ß-naftilamida Naranja muy pálido
6-bromo-2-naftil-DD-
DGAL 0,0376 D-GALactosidasa Incoloro Violeta
galactopiranosida
ácido naftol-ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-GlUcuRonidasa Incoloro Azul
glucurónico
2-naftil-ßD- Incoloro o
ßGAL 0,0306 ß-GALactosidasa Violeta
galactopiranosida Violeta muy pálido
Incoloro o
PAL 2-naftil fosfato 0,0244 Fosfatasa ALcalina Violeta
Violeta muy pálido
LAP L-leucina-ß-naftilamida 0,0256 Leucina AminoPeptidasa Incoloro Naranja
ADH L-arginina 1,9 Arginina DiHidrolasa Amarillo Rojo
4h 24 h 4h 24 h
Naranja/ Naranja/
RIB D-ribosa 1,4 acidificación (RIBosa) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
ARA L-arabinosa 1,4 acidificación (ARAbinosa) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
MAN D-manitol 1,36 acidificación (MANitol) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
SOR D-sorbitol 1,36 acidificación (SORbitol) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
D-lactosa Naranja/ Naranja/
LAC 1,4 acidificación (LACtosa) Rojo Amarillo
(origen bovino) Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
TRE D-trehalosa 1,32 acidificación (TREhalosa) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
INU inulina 5,12 acidificación (INUlina) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
RAF D-rafinosa 3,12 acidificación (RAFinosa) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
Naranja/ Naranja/
AMD almidón (2) 2,56 acidificación (AlMiDón) Rojo Amarillo
Rojo Amarillo
GLYG glicógeno 1,28 acidificación (GLIcógeno) Rojo o Naranja Amarillo franco
(1) Durante una segunda lectura después de 24 horas de incubación, se puede observar un depósito en los tubos a los cuales se han
añadido reactivos ZYM A y ZYM B. Este fenómeno es normal y no debe ser tomado en consideración.
(2) La acidificación del almidón es con frecuencia menos intensa que la de otros azúcares.
(3) Una coloración rosa pálido obtenida después de 10 minutos debe ser considerada negativa.
xLas cantidades indicadas pueden ser ajustadas en función de los títulos de las materias primas.
xCiertas cúpulas contienen componentes de origen animal, especialmente peptona bovina/porcina.
TECNICA p. I BIBLIOGRAFÍA p. III
TABLA DE IDENTIFICACIÓN p. II TABLA DE SÍMBOLOS p. IV
BIOMERIEUX, el logo azul, API y apiweb son marcas utilizadas, depositadas y/o registradas pertenecientes a bioMérieux SA o a cada una de sus filiales.
CLSI es una marca registrada perteneciente a Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
ATCC es una marca perteneciente a American Type Culture Collection.
Las otras marcas y nombre de productos mencionados en este documento son marcas comerciales de sus respectivos poseedores.
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CONTROLLO DI QUALITÀ
Le gallerie, i terreni, ed i reattivi sono sottoposti a controlli di qualità sistematici nelle diverse fasi del ciclo produttivo.
Il Controllo di Qualità Minimo può essere utilizzato per verificare che le condizioni di conservazione e di trasporto non
hanno impatto sulle performance della galleria API 20 Strep. Questo controllo può essere eseguito seguendo le istruzioni
ed i criteri riportati sopra, vincolati al referenziale CLSI® M50-A Quality Control for Commercial Microbial Identification
Systems.
Per valutare le performance del test ARA, il Controllo può essere fatto utilizzando il ceppo Streptococcus equi spp
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zooepidemicus ATCC 700400. Studi eseguiti da bioMérieux hanno mostrato che sulla galleria API 20 Strep il test ARA
è il test più sensibile. Quando viene eseguito il controllo, l’integrità della galleria può essere verificata utilizzando il ceppo
Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400.
Nel caso in cui per questa galleria si debba eseguire un Controllo di Qualità Completo, per verificare le reazioni
positive e negative della maggior parte dei test della galleria API 20 Strep dovranno essere testati i due ceppi seguenti.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Questo risultato può variare in funzione del terreno di coltura utilizzato.
xInoculo aggiustato fra 4,5 e 5,5 McF con il DENSIMAT.
xProfili ottenuti dopo: - 4 ore di incubazione per i test da VP a LAP
- 24 ore di incubazione per i test da ADH a GLYG.
xCeppi coltivati sull’agar Columbia al sangue di montone.
E’ responsabilità dell’utilizzatore assicurarsi che il controllo di qualità corrisponda a quanto previsto dalla legislazione
vigente.
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TABELLA DI LETTURA
Q.TA’ RESULTATI
TEST SUBSTRATI REAZIONI/ENZIMI
(mg/cup.) NEGATIVO POSITIVO
VP 1 + VP 2 / Attendere 10 min (3)
produzione d'acetoina
VP piruvato di sodio 1,9 Incolore Rosa-Rosso
(Voges Proskauer)
NIN / attendere 10 min
HIP acido ippurico idrolisi (acido ippurico) Incolore/Blu chiaro
0,4 Blu scuro/Viola
Grigio bluastro
4 ore 24 ore 4 ore 24 ore
Incolore Incolore Nero Nero
esculina 1,16 idrolisi ß-glucosidasi
ESC Giallo pallido Giallo pallido Grigio
citrato di ferro 0,152 (ESCulina)
Grigio chiaro
ZYM A + ZYM B / 10 min (da PYRA a LAP) (1)
se necessario decolorare per esposizione intensa alla luce
ac. piroglutammico- Incolore o
PYRA 0,0256 PiRrolidonil Arilamidasi Arancione
ß-naftilamide Arancione molto chiaro
6-bromo-2-naftil-DD-
DGAL 0,0376 D-GALattosidasi Incolore Viola
galattopiranoside
acido naftol-ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-GLUcuRonidasi Incolore Blu
glucuronico
2-naftyl-ßD- Incolore o
ßGAL 0,0306 ß-GALattosidasi Viola
galattopiranoside Viola molto chiaro
Incolore o
PAL 2-naftil fosfato 0,0244 Fosfatasi ALcalina Viola
Viola molto pallido
L-leucina-ß-
LAP 0,0256 Leucina AminoPeptidasi Incolore Arancione
naftilamide
ADH L-arginina 1,9 Arginina Diidrolasi Giallo Rosso
4 ore 24 ore 4 ore 24 ore
Arancione/ Arancione/
RIB D-ribosio 1,4 acidificazione (RIBosio) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
ARA L-arabinosio 1,4 acidificazione (ARAbinosio) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
MAN D-mannitolo 1,36 acidificazione (MANnitolo) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
SOR D-sorbitolo 1,36 acidificazione (SORbitolo) Rosso Giallo
Rosso Giallo
D-lattosio Arancione/ Arancione/
LAC 1,4 acidificazione (LAttosio) Rosso Giallo
(origine bovina) Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
TRE D-trealosio 1,32 acidificazione (TREalosio) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
INU inulina 5,12 acidificazione (INUlina) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
RAF D-raffinosio 3,12 acidificazione (RAFfinosio) Rosso Giallo
Rosso Giallo
Arancione/ Arancione/
AMD amido (2) 2,56 acidificazione (AMiDo) Rosso Giallo
Rosso Giallo
GLYG glicogeno 1,28 acidificazione (GLicoGeno) Rosso o Arancione Giallo acceso
(1) Nella seconda lettura dopo 24 ore di incubazione, si può notare la presenza di un deposito nelle provette in cui sono stati aggiunti
ZYM A e ZYM B. questo fenomeno è del tutto normale e non deve essere preso in considerazione.
(2) L'acidificazione dell'amido è spesso meno intensa rispetto a quella degli altri zuccheri.
(3) Una colorazione rosa pallido ottenuta dopo 10 minuti deve essere considerata negativa.
xLe quantità indicate possono variare in funzione dei titoli delle materie prime.
xCerte cupole contengono dei componenti di origine animale, in particolare dei peptoni.
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xAbrir cuidadosamente as ampolas, como abaixo NOTA 2 : Para obter um crescimento suficiente, é
indicado: preferível preparar 2 geloses se se suspeitar que a
- Colocar a ampola no protector de ampola. estirpe/cepa é um pneumococo.
- Segurar o conjunto verticalmente numa mão
Preparação da galeria
(tampa branca para cima).
- Fechar bem a tampa. xJuntar fundo e tampa de uma caixa de incubação e
- Pressionar horizontalmente com o polegar a distribuir cerca de 5 ml de água destilada ou
parte estriada da tampa de forma a partir a desmineralizada [ou qualquer água sem aditivos ou
extremidade da ampola. derivados susceptíveis de libertarem gases (Ex : Cl2,
- Retirar a ampola do protector de ampola e CO2 ...)] nos alvéolos para criar uma atmosfera húmida.
conservá-lo para uma posterior utilização. xInscrever a referência da estirpe/cepa na lingueta lateral
- Retirar delicadamente a tampa. da caixa. (Não inscrever a referência na tampa, esta
xO comportamento funcional apresentado é obtido com o pode ser movida durante a manipulação).
procedimento indicado neste folheto informativo. xRetirar a galeria da embalagem.
Qualquer desvio à metodologia pode alterar os xColocar a galeria na caixa de incubação.
resultados. Preparação do inóculo
xA interpretação dos resultados do teste deve ser
efectuada tendo em conta o contexto clínico ou outro, a xAbrir uma ampola de API Suspension Medium (2 ml)
origem da amostra, os aspectos macro e microscópicos como indicado no parágrafo "Precauções de utilização"
da estirpe/cepa e, eventualmente, os resultados de ou utilizar um tubo contendo 2 ml de água destilada
outros testes, em especial, do antibiograma. sem aditivo.
xUtilizando uma zaragatoa/swab, colher/coletar toda a
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO cultura previamente preparada.
xPreparar uma suspensão bastante densa : opacidade
As galerias e meios conservam-se a 2° - 8° C até à data
superior a 4 de McFarland. Esta suspensão deve ser
de validade indicada na embalagem.
utilizada imediatamente após a sua preparação.
AMOSTRAS (COLHEITA/COLETA E PREPARAÇÃO) Inoculação da galeria
O API 20 Strep não deve ser utilizado directamente em xNa primeira metade da galeria (testes VP a ADH)
amostras de origem clínica ou outras. distribuir a suspensão anterior evitando a formação de
Os microrganismos a identificar devem primeiro ser bolhas (inclinar ligeiramente a caixa de incubação para
isolados num meio de cultura adaptado segundo as a frente e colocar a ponta da pipeta ou da PSIpeta de
técnicas habituais de bacteriologia. lado na cúpula) :
- Para os testes VP a LAP : distribuir cerca de 100 µl
PROCEDIMENTO em cada cúpula.
Selecção das colónias - Para o teste ADH : encher unicamente o tubo.
Após o isolamento e verificação de que a estirpe/cepa a xNa segunda metade da galeria (testes RIB a GLYG) :
identificar pertence ao género Streptococcaceae (reacção - abrir uma ampola de API GP Medium como indicado
de Gram, catalase) : no parágrafo "Precauções de utilização" e transferir o
xAnotar o tipo de hemólise na ficha de resultados resto da suspensão, ou seja 0,5 ml no mínimo.
(21° teste). Homogeneizar correctamente.
xColher/coletar uma colónia bem isolada (Nota 1) e - distribuir esta nova suspensão unicamente nos tubos.
colocá-la em suspensão com 0,3 ml de água estéril. xEncher as cúpulas dos testes sublinhados ADH a GLYG
Homogeneizar correctamente. com óleo de parafina formando um menisco convexo.
xInundar uma placa de gelose Columbia com sangue de xFechar a caixa de incubação.
carneiro (Nota 2) com esta suspensão (ou fazer uma xIncubar a 36°C ± 2°C em aerobiose durante 4H00 –
sementeira estéril em toda a superfície da gelose). 4H30 para uma primeira leitura e 24 horas (± 2 horas)
xIncubar a placa 24 horas (± 2 horas) a 36° C ± 2° C em se necessário, para uma segunda leitura.
anaerobiose.
NOTA 1 : Os Estreptococos ß-hemolíticos e os LEITURA E INTERPRETAÇÃO
Enterococos apresentam colónias de tamanho suficiente Leitura da galeria
após 24 horas de incubação. Para os outros Após 4 horas de incubação :
Estreptococos, é preferível colher/coletar as colónias de xAdicionar os reagentes :
48 horas. Para as estirpes/cepas de cultura difícil - teste VP : 1 gota de VP 1 e VP 2.
(colónias muito pequenas às 48 horas) é aconselhável - teste HIP : 2 gotas de NIN.
proceder da seguinte maneira : - testes PYRA, DGAL, ßGUR, ßGAL, PAL, LAP :
- Cultivar a colónia em 1 ml de caldo de Schaedler a 1 gota de ZYM A e ZYM B (*).
36°C ± 2°C durante 5 horas. (*) É aconselhado controlar cada ampola de reagente
- Inundar uma placa de gelose Columbia com sangue de ZYM B antes da 1ª utilização.
carneiro com a totalidade desta cultura. Eliminar o Para tal, é aconselhado utilizar a estirpe/cepa ATCC®
excesso. 700400 indicada no parágrafo Controlo de Qualidade
- Incubar a placa 18 a 24 horas a 36°C ± 2°C em para excluir qualquer reagente defeituoso.
anaerobiose.
xEsperar 10 minutos, depois ler todas as reacções
consultando o Quadro de Leitura. Se necessário,
colocar a galeria por baixo de uma lâmpada potente
(1000 W) 10 segundos para descolorar o reagente em
excesso nos tubos PYRA a LAP.
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CONTROLO DE QUALIDADE
Os galerias, meios e reagentes são sujeitos a controlos de qualidade sistemáticos nas diferentes etapas do seu fabrico.
O Controlo de Qualidade Mínimo pode ser utilizado para verificar se as condições de armazenamento e de transporte
não tiveram impacto no comportamento funcional da galeria API 20 Strep. Este controlo pode ser efectuado seguindo as
®
instruções e critérios acima esperados em relação ao referencial CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
Identification Systems.
®
O Controlo pode ser efectuado utilizando a estirpe/cepa Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 para
avaliar o comportamento funcional do teste ARA. Foram efectuados estudos pela bioMérieux que demonstraram que na
galeria API 20 Strep, o teste ARA é o teste mais sensível. No controlo, a integridade da galeria pode ser verificada
utilizando a estirpe/cepa Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400.
No caso de ser exigido um controlo de Qualidade Completo para esta galeria, as duas estirpes/cepas seguintes
deverão ser testadas para verificar as reacções positivas e negativas da maioria dos testes da galeria API 20 Strep.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Este resultado pode variar em função do meio de cultura utilizado.
xInóculo ajustado entre 4,5 e 5,5 McF com DENSIMAT.
xPerfis obtidos após : - 4 horas de incubação para os testes VP a LAP
- 24 horas de incubação para os testes ADH a GLYG.
xEstirpes/cepas cultivadas em gelose Columbia com sangue de carneiro.
É da responsabilidade do utilizador assegurar que o controlo de qualidade é efectuado em conformidade com a
legislação local em vigor.
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QUADRO DE LEITURA
4h 24 h 4h 24 h
Laranja/ Laranja/
RIB D-ribose 1,4 Acidificação (RIBose) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
ARA L-arabinose 1,4 Acidification (ARAbinose) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
MAN D-manitol 1,36 Acidificação (MANitol) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
SOR D-sorbitol 1,36 Acidificação (SORbitol) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
D-lactose Laranja/ Laranja/
LAC 1,4 Acidificação (LACtose) Vermelho Amarelo
(origem bovina) Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
TRE D-trealose 1,32 Acidificação (TREalose) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
INU inulina 5,12 Acidificação (INUlina) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
RAF D-rafinose 3,12 Acidificação (RAFinose) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
Laranja/ Laranja/
AMD amido (2) 2,56 acidificação (AmiDo) Vermelho Amarelo
Vermelho Amarelo
GLYG glicogénio 1,28 acidificação (GLIcoGénio) Vermelho ou Laranja Amarelo
(1) Numa segunda leitura após 24 horas de incubação, pode-se notar um depósito nos tubos onde foram adicionados os reagentes
ZYM A e ZYM B. Este fenómeno é normal e não deve ser levado em consideração.
(2) A acidificação do amido é frequentemente menor que a dos outros açúcares.
(3) Uma coloração rosa pálido obtida após 10 minutos deve ser considerada negativa.
xAs quantidades indicadas podem ser ajustadas em função dos títulos das matérias-primas.
xAlgumas cúpulas contêm componentes de origem animal, nomeadamente peptonas.
PROCEDIMENTO p. I BIBLIOGRAFIA p. III
QUADRO DE IDENTIFICAÇÃO p. II QUADRO DE SÍMBOLOS p. IV
A BIOMERIEUX, o logotipo azul, API e apiweb são marcas utilizadas, depositadas e/ou registadas, propriedade exclusiva da
bioMérieux, SA ou de uma das suas filiais.
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20 Strep IVD
bioMérieux SA ǼȜȜȘȞȚțȐ - 1
api® 20 Strep 07625K - el - 2009/12
xǹȞȠȓȟIJİ IJȚȢ ijȪıȚȖȖİȢ ʌȡȠıİțIJȚțȐ ȦȢ İȟȒȢ : - ȀĮȜȜȚİȡȖİȓıIJİ IJȘȞ ĮʌȠȚțȓĮ ıİ 1 ml ȗȦµȠȪ Schaedler
- ȉȠʌȠșİIJȒıIJİ IJȘȞ ijȪıȚȖȖĮ ıIJȘȞ ʌȡȠıIJĮIJİȣIJȚțȒ ıIJȠȣȢ 36°C ± 2°C ȖȚĮ 5 ȫȡİȢ.
ıȣıțİȣȒ. - īݵȓıIJİ ʌȜȒȡȦȢ ȑȞĮ IJȡȣȕȜȓȠ ȐȖĮȡ Columbia µİ ĮȓµĮ
- ȀȡĮIJȒıIJİ IJȘȞ ʌȡȠıIJĮIJİȣµȑȞȘ ijȪıȚȖȖĮ µİ IJȠ ʌȡȠȕȐIJȠȣ µİ ȠȜȩțȜȘȡȘ IJȘȞ țĮȜȜȚȑȡȖİȚĮ. ǹʌȠµĮțȡȪȞİIJİ
ȑȞĮ ȤȑȡȚ ıİ țȐșİIJȘ șȑıȘ (IJȠ Ȝİȣțȩ ʌȜĮıIJȚțȩ IJȣȤȩȞ ʌİȡȓııİȚĮ ȣȖȡȠȪ.
țȐȜȣµµĮ ʌȡȠȢ IJĮ ʌȐȞȦ). - ǼʌȦȐıIJİ IJȠ IJȡȣȕȜȓȠ ȖȚĮ 18-24 ȫȡİȢ ıIJȠȣȢ 36°C ± 2°C
- ȆȚȑıIJİ IJȠ țȐȜȣµµĮ ʌȡȠȢ IJĮ țȐIJȦ ȖȚĮ ȩıȠ ıİ ĮȞĮİȡȩȕȚİȢ ıȣȞșȒțİȢ.
µİȖĮȜȪIJİȡȘ ĮʌȩıIJĮıȘ ȖȓȞİIJĮȚ. ȈǾȂǼǿȍȈǾ 2 : Ȉİ ʌİȡȓʌIJȦıȘ ȣʌȠȥȓĮȢ ʌȞİȣµȠȞȚȩțȠțțȦȞ,
- ȉȠʌȠșİIJȒıIJİ IJȠ ȡȪȖȤȠȢ ıIJȠ ȡĮȕįȦIJȩ IJµȒµĮ İȞįİȓțȞȣIJĮȚ ȞĮ ʌȡȠİIJȠȚµȐıİIJİ 2 IJȡȣȕȜȓĮ ȐȖĮȡ ȑIJıȚ ȫıIJİ
IJȠȣ țĮȜȪµµĮIJȠȢ țĮȚ ʌȚȑıIJİ ʌȡȠȢ IJĮ ݵʌȡȩȢ ȞĮ ʌȡȠțȪȥİȚ İʌĮȡțȒȢ ĮȞȐʌIJȣȟȘ.
ȖȚĮ ȞĮ ĮijĮȚȡȑıİIJİ ıʌȐȗȠȞIJĮȢ IJȘȞ țȠȡȣijȒ
IJȘȢ ijȪıȚȖȖĮȢ. ȆȡȠİIJȠȚµĮıȓĮ IJȘȢ IJĮȚȞȓĮȢ
- ǺȖȐȜIJİ IJȘȞ ijȪıȚȖȖĮ Įʌȩ IJȘȞ ʌȡȠıIJĮIJİȣIJȚțȒ xȆȡȠİIJȠȚµȐıIJİ ȑȞĮ țȣIJȓȠ İʌȫĮıȘȢ (įȓıțȠȢ țĮȚ țȐȜȣµµĮ)
ıȣıțİȣȒ țĮȚ ijȣȜȐȟIJİ IJȘȞ ʌȡȠıIJĮIJİȣIJȚțȒ țĮȚ įȚĮȞİȓµİIJİ ʌİȡȓʌȠȣ 5 ml ĮʌİıIJĮȖµȑȞȠȣ Ȓ
ıȣıțİȣȒ ȖȚĮ İʌȩµİȞȘ ȤȡȒıȘ. ĮʌȚȠȞȚıµȑȞȠȣ ȪįĮIJȠȢ [Ȓ ȠʌȠȚȠȣįȒʌȠIJİ ȪįĮIJȠȢ ȤȦȡȓȢ
- ȆȡȠıİțIJȚțȐ ĮijĮȚȡȑıIJİ IJȠ țȐȜȣµµĮ. ʌȡȩıșİIJĮ Ȓ ȤȘµȚțȐ ʌȠȣ µʌȠȡİȓ ȞĮ ĮʌİȜİȣșİȡȫıȠȣȞ
xȉĮ įİįȠµȑȞĮ ĮʌȩįȠıȘȢ IJȘȢ µİșȩįȠȣ ʌȠȣ ĮȑȡȚĮ (ʌ.Ȥ. Cl2, CO2, țIJȜ.)] ıIJȚȢ țȣȥȑȜİȢ IJȠȣ įȓıțȠȣ ȖȚĮ
ʌĮȡȠȣıȚȐȗȠȞIJĮȚ İȜȒijșȘıĮȞ ĮțȠȜȠȣșȫȞIJĮȢ IJȘ ȞĮ įȘµȚȠȣȡȖȘșİȓ µȚĮ ȣȖȡȒ ĮIJµȩıijĮȚȡĮ.
įȚĮįȚțĮıȓĮ Ș ȠʌȠȓĮ ʌİȡȚȖȡȐijİIJĮȚ ıİ ĮȣIJȩ IJȠ İıȫțȜİȚıIJȠ xȀĮIJĮȖȡȐȥIJİ IJȠȞ țȦįȚțȩ IJȠȣ ıIJİȜȑȤȠȣȢ ıIJȠ İʌȓµȘțİȢ
ȠįȘȖȚȫȞ. ȅʌȠȚĮįȒʌȠIJİ ĮȜȜĮȖȒ Ȓ IJȡȠʌȠʌȠȓȘıȘ IJȘȢ ʌIJİȡȪȖȚȠ IJȠȣ įȓıțȠȣ. (ȂȘȞ țĮIJĮȖȡȐijİIJİ IJȠȞ țȦįȚțȩ ıIJȠ
įȚĮįȚțĮıȓĮȢ µʌȠȡİȓ ȞĮ İʌȘȡİȐıİȚ IJĮ ĮʌȠIJİȜȑıµĮIJĮ. țȐȜȣµµĮ, įȚȩIJȚ µʌȠȡİȓ ȞĮ IJȠʌȠșİIJȘșİȓ ȜĮȞșĮıµȑȞĮ țĮIJȐ
xǾ İȡµȘȞİȓĮ IJȦȞ ĮʌȠIJİȜİıµȐIJȦȞ IJȘȢ İȟȑIJĮıȘȢ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ IJȘ įȚȐȡțİȚĮ IJȘȢ įȚĮįȚțĮıȓĮȢ).
ȖȓȞİIJĮȚ ȜĮµȕȐȞȠȞIJĮȢ ȣʌȩȥȘ IJȠ ȚıIJȠȡȚțȩ IJȠȣ ĮıșİȞȒ, IJȘȞ xǹijĮȚȡȑıIJİ IJȘȞ IJĮȚȞȓĮ Įʌȩ IJȘȞ ĮIJȠµȚțȒ IJȘȢ ıȣıțİȣĮıȓĮ.
ʌȡȠȑȜİȣıȘ IJȠȣ įİȓȖµĮIJȠȢ, IJȘ µȠȡijȠȜȠȖȓĮ IJȦȞ ĮʌȠȚțȚȫȞ xȉȠʌȠșİIJȒıIJİ IJȘȞ IJĮȚȞȓĮ ıIJȠ țȣIJȓȠ İʌȫĮıȘȢ.
țĮȚ IJȘ µȚțȡȠıțȠʌȚțȒ İȚțȩȞĮ IJȠȣ ıIJİȜȑȤȠȣȢ țĮȚ, ĮȞ ȆȡȠİIJȠȚµĮıȓĮ IJȠȣ İȞĮȚȦȡȒµĮIJȠȢ
ȤȡİȚȐȗİIJĮȚ, IJĮ ĮʌȠIJİȜȑıµĮIJĮ Įʌȩ ȩʌȠȚİȢ ȐȜȜİȢ
İȟİIJȐıİȚȢ ȑȤȠȣȞ ʌȡĮȖµĮIJȠʌȠȚȘșİȓ, ȚįȚĮȓIJİȡĮ IJȚȢ İȟİIJȐıİȚȢ xǹȞȠȓȟIJİ µȚĮ ijȪıȚȖȖĮ API Suspension Medium (2 ml)
İȣĮȚıșȘıȓĮȢ ıIJĮ ĮȞIJȚµȚțȡȠȕȚĮțȐ. ȩʌȦȢ ȣʌȠįİȚțȞȪİIJĮȚ ıIJȘȞ ʌĮȡȐȖȡĮijȠ "ȆȡȠİȚįȠʌȠȚȒıİȚȢ
țĮȚ ȆȡȠijȣȜȐȟİȚȢ" Ȓ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȒıIJİ ȠʌȠȚȠįȒʌȠIJİ
ıȦȜȘȞȐȡȚȠ ʌȠȣ ʌİȡȚȑȤİȚ 2 ml ĮʌİıIJĮȖµȑȞȠȣ ȪįĮIJȠȢ
ȈȊȃĬǾȀǼȈ ĭȊȁǹȄǾȈ
ȤȦȡȓȢ ʌȡȩıșİIJĮ.
ȅȚ IJĮȚȞȓİȢ țĮȚ IJĮ ȣȜȚțȐ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ijȣȜȐııȠȞIJĮȚ ıIJȠȣȢ xȋȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞIJĮȢ ȑȞĮ ıIJȣȜİȩ, ıȣȜȜȑȟIJİ ȩȜȘ IJȘȞ
2-8°C µȑȤȡȚ IJȘȞ ȘµİȡȠµȘȞȓĮ ȜȒȟȘȢ ʌȠȣ ĮȞĮȖȡȐijİIJĮȚ ıIJȘ țĮȜȜȚȑȡȖİȚĮ Įʌȩ IJȠ IJȡȣȕȜȓȠ ĮȞĮțĮȜȜȚȑȡȖİȚĮȢ ʌȠȣ İȓȤİ
ıȣıțİȣĮıȓĮ. ʌȡȠİIJȠȚµĮıIJİȓ ʌȡȠȘȖȠȣµȑȞȦȢ.
xĭIJȚȐȟIJİ ȑȞĮ ʌȣțȞȩ İȞĮȚȫȡȘµĮ µİ șȠȜİȡȩIJȘIJĮ
ǻǼǿīȂǹȉǹ (ȈȊȁȁȅīǾ Ȁǹǿ ȆȇȅǼȉȅǿȂǹȈǿǹ) µİȖĮȜȪIJİȡȘ Įʌȩ 4 McFarland. ȉȠ İȞĮȚȫȡȘµĮ ĮȣIJȩ
ȉȠ API 20 Strep įİȞ ʌȡȠȠȡȓȗİIJĮȚ ȖȚĮ ĮʌİȣșİȓĮȢ ȤȡȒıȘ µİ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșİȓ ĮµȑıȦȢ µİIJȐ IJȘȞ
țȜȚȞȚțȐ Ȓ ȐȜȜĮ įİȓȖµĮIJĮ. ʌȡȠİIJȠȚµĮıȓĮ.
ȅȚ µȚțȡȠȠȡȖĮȞȚıµȠȓ ʌȡȠȢ IJĮȣIJȠʌȠȓȘıȘ ʌȡȑʌİȚ ʌȡȫIJĮ ȞĮ ǼȞȠijșĮȜµȚıµȩȢ IJȘȢ IJĮȚȞȓĮȢ
ĮʌȠµȠȞȦșȠȪȞ ıİ țĮIJȐȜȜȘȜȠ ȣȜȚțȩ țĮȜȜȚȑȡȖİȚĮȢ ıȪµijȦȞĮ
µİ ʌȡȩIJȣʌİȢ µȚțȡȠȕȚȠȜȠȖȚțȑȢ IJİȤȞȚțȑȢ. xȈIJȠ ʌȡȫIJȠ µȚıȩ IJȘȢ IJĮȚȞȓĮȢ (İȟİIJȐıİȚȢ VP ȑȦȢ ADH),
įȚĮȞİȓµİIJİ ĮȣIJȩ IJȠ İȞĮȚȫȡȘµĮ, ĮʌȠijİȪȖȠȞIJĮȢ IJȠȞ
ıȤȘµĮIJȚıµȩ ijȣıĮȜȓįȦȞ (ȖİȓȡİIJİ IJȘȞ IJĮȚȞȓĮ İȜĮijȡȫȢ
ȅǻǾīǿǼȈ ȋȇǾȈǾȈ ʌȡȠȢ IJĮ ݵʌȡȩȢ țĮȚ IJȠʌȠșİIJȒıIJİ IJȠ ȡȪȖȤȠȢ IJȘȢ
ǼʌȚȜȠȖȒ ĮʌȠȚțȚȫȞ ʌȚʌȑIJIJĮȢ Ȓ IJȘȢ PSIpette ıIJȘȞ ʌȜĮȧȞȒ İʌȚijȐȞİȚĮ IJȠȣ
ȂȩȜȚȢ Ƞ µȚțȡȠȠȡȖĮȞȚıµȩȢ ʌȠȣ ʌȡȩțİȚIJĮȚ ȞĮ IJĮȣIJȠʌȠȚȘșİȓ țȣʌȑȜȚȠȣ) :
ȑȤİȚ ĮʌȠµȠȞȦșİȓ țĮȚ ʌȚıIJȠʌȠȚȘșİȓ ȦȢ µȑȜȠȢ IJȘȢ - īȚĮ IJȚȢ İȟİIJȐıİȚȢ VP ȑȦȢ LAP : įȚĮȞİȓµİIJİ ʌİȡȓʌȠȣ
ȠȚțȠȖȑȞİȚĮȢ Streptococcaceae (Gram, İȟȑIJĮıȘ 100 µl ıİ țȐșİ țȣʌȑȜȚȠ.
țĮIJĮȜȐıȘȢ) : - īȚĮ IJȘȞ İȟȑIJĮıȘ ADH : ȖݵȓıIJİ µȩȞȠ IJȠ ıȦȜȘȞȐȡȚȠ.
xȈȘµİȚȫıIJİ IJȠ İȓįȠȢ IJȘȢ ĮȚµȩȜȣıȘȢ ıIJȠ ijȪȜȜȠ xȈIJȠ įİȪIJİȡȠ µȚıȩ IJȘȢ IJĮȚȞȓĮȢ (İȟİIJȐıİȚȢ RIB ȑȦȢ GLYG):
ĮʌȠIJİȜİıµȐIJȦȞ (21Ș İȟȑIJĮıȘ). - ǹȞȠȓȟIJİ µȚĮ ijȪıȚȖȖĮ API GP Medium ȩʌȦȢ
ȣʌȠįİȚțȞȪİIJĮȚ ıIJȘȞ ʌĮȡȐȖȡĮijȠ "ȆȡȠİȚįȠʌȠȚȒıİȚȢ țĮȚ
xȁȐȕİIJİ µȚĮ țĮȜȐ ĮʌȠµȠȞȦµȑȞȘ ĮʌȠȚțȓĮ (ȈȘµİȓȦıȘ 1)
ȆȡȠijȣȜȐȟİȚȢ" țĮȚ µİIJĮijȑȡİIJİ IJȠ ȣʌȩȜȠȚʌȠ IJȠȣ
țĮȚ İȞĮȚȦȡȒıIJİ IJȘȞ ıİ 0.3 ml ıIJİȓȡȠȣ ȪįĮIJȠȢ.
İȞĮȚȦȡȒµĮIJȠȢ µȑıĮ ıİ ĮȣIJȒȞ (ʌİȡȓʌȠȣ 0.5 ml).
ȅµȠȖİȞȠʌȠȚȒıIJİ țĮȜȐ. ǹȞĮįİȪıIJİ țĮȜȐ.
xīݵȓıIJİ ʌȜȒȡȦȢ ȑȞĮ IJȡȣȕȜȓȠ ȐȖĮȡ Columbia µİ ĮȓµĮ - ǻȚĮȞİȓµİIJİ ĮȣIJȩ IJȠ ȞȑȠ İȞĮȚȫȡȘµĮ µȩȞȠȞ µȑıĮ ıIJĮ
ʌȡȠȕȐIJȠȣ (ȈȘµİȓȦıȘ 2) µİ ĮȣIJȩ IJȠ İȞĮȚȫȡȘµĮ (Ȓ ıȦȜȘȞȐȡȚĮ.
ĮıȘʌIJȚțȐ İʌȚıIJȡȫıIJİ ȠȜȩțȜȘȡȘ IJȘȞ İʌȚijȐȞİȚĮ IJȠȣ xīݵȓıIJİ IJȠ țȣʌȑȜȚȠ IJȦȞ ȣʌȠȖȡĮµµȚıµȑȞȦȞ İȟİIJȐıİȦȞ
ȐȖĮȡ). (ADH ȑȦȢ GLYG) µİ ʌĮȡĮijȚȞȑȜĮȚȠ ȖȚĮ ȞĮ ıȤȘµĮIJȓıİIJİ
xǼʌȦȐıIJİ IJȠ IJȡȣȕȜȓȠ ȖȚĮ 24 ȫȡİȢ (± 2 ȫȡİȢ) ıIJȠȣȢ ȑȞĮ țȣȡIJȩ µȘȞȓıțȠ.
36°C ± 2°C ıİ ĮȞĮİȡȩȕȚİȢ ıȣȞșȒțİȢ. xȉȠʌȠșİIJȒıIJİ IJȠ țȐȜȣµµĮ İʌȐȞȦ ıIJȠȞ įȓıțȠ.
ȈǾȂǼǿȍȈǾ 1 : ȅȚ ß-ĮȚµȠȜȣIJȚțȠȓ ıIJȡİʌIJȩțȠțțȠȚ țĮȚ xǼʌȦȐıIJİ ıIJȠȣȢ 36°C ± 2°C ıİ ĮİȡȩȕȚİȢ ıȣȞșȒțİȢ ȖȚĮ
İȞIJİȡȩțȠțțȠȚ ĮȞĮʌIJȪııȠȣȞ İʌĮȡțȫȢ µİȖȐȜİȢ ĮʌȠȚțȓİȢ 4 - 4 ½ ȫȡİȢ ȖȚĮ ȞĮ ʌȡȠțȪȥİȚ µȚĮ ʌȡȫIJȘ ĮȞȐȖȞȦıȘ țĮȚ
µİIJȐ Įʌȩ 24 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ. īȚĮ ȐȜȜȠȣȢ ıIJȡİʌIJȩțȠțțȠȣȢ, ȖȚĮ 24 ȫȡİȢ (± 2 ȫȡİȢ) ȖȚĮ ȞĮ ʌȡȠțȪȥİȚ µȚĮ įİȪIJİȡȘ
İȓȞĮȚ ʌȡȠIJȚµȩIJİȡȠ ȞĮ İʌȚȜȑȖİIJİ µȚĮ ĮʌȠȚțȓĮ µİIJȐ Įʌȩ ĮȞȐȖȞȦıȘ, ĮȞ ȤȡİȚȐȗİIJĮȚ.
48 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ. īȚĮ ĮʌĮȚIJȘIJȚțȐ ıIJİȜȑȤȘ (ʌȠȣ
ĮȞĮʌIJȪııȠȣȞ µȚțȡȠıțȠʌȚțȑȢ ĮʌȠȚțȓİȢ µİIJȐ Įʌȩ 48 ȫȡİȢ),
ıȣȞȚıIJȐIJĮȚ Ș ʌĮȡĮțȐIJȦ įȚĮįȚțĮıȓĮ :
bioMérieuxSA ǼȜȜȘȞȚțȐ - 2
api® 20 Strep 07625K - el - 2009/12
ȆȅǿȅȉǿȀȅȈ ǼȁǼīȋȅȈ
ȉĮ ȣȜȚțȐ țĮȚ ȠȚ IJĮȚȞȓİȢ ȣʌȠȕȐȜȜȠȞIJĮȚ ıȣıIJȘµĮIJȚțȐ ıİ ʌȠȚȠIJȚțȩ ȑȜİȖȤȠ ıİ įȚȐijȠȡĮ ıIJȐįȚĮ IJȘȢ ʌĮȡĮȖȦȖȒȢ IJȠȣȢ.
ǼțȜȠȖȚțİȣµȑȞȠȢ ʌȠȚȠIJȚțȩȢ ȑȜİȖȤȠȢ µʌȠȡİȓ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșİȓ ȖȚĮ ȞĮ İʌȚȕİȕĮȚȦșİȓ Ș ĮʌȠįİțIJȒ ĮʌȩįȠıȘ IJȠȣ
ıȣıIJȒµĮIJȠȢ API 20 Strep µİIJȐ IJȘ µİIJĮijȠȡȐ/ijȪȜĮȟȘ. Ǿ µİșȠįȠȜȠȖȓĮ ĮȣIJȒ µʌȠȡİȓ ȞĮ İijĮȡµȠıIJİȓ ĮțȠȜȠȣșȫȞIJĮȢ IJȚȢ
®
ʌĮȡĮʌȐȞȦ ȠįȘȖȓİȢ ȖȚĮ IJȘȞ İȟȑIJĮıȘ țĮȚ ıȣµijȦȞȫȞIJĮȢ µİ IJĮ țȡȚIJȒȡȚĮ ʌȠȣ įȘȜȫȞȠȞIJĮȚ ıIJȠ CLSI M50-A Quality Control
for Commercial Microbial Identification Systems. (ȆȠȚȠIJȚțȩȢ DzȜİȖȤȠȢ ȖȚĮ ǼµʌȠȡȚțȐ ȈȣıIJȒµĮIJĮ ȂȚțȡȠȕȚĮțȒȢ ȉĮȣIJȠʌȠȓȘıȘȢ).
®
ȅ ȑȜİȖȤȠȢ µʌȠȡİȓ ȞĮ įȚİȟĮȤșİȓ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞIJĮȢ Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 ȖȚĮ ȞĮ
ĮȟȚȠȜȠȖȘșİȓ Ș ĮʌȩįȠıȘ IJȘȢ İȟȑIJĮıȘȢ ARA. ȅ ȑȜİȖȤȠȢ ʌȠȣ ʌȡĮȖµĮIJȠʌȠȚȒșȘțİ Įʌȩ IJȘȞ bioMérieux ȑįİȚȟİ ȩIJȚ Ș İȟȑIJĮıȘ
ARA İȓȞĮȚ Ș ʌȚȠ İȣĮȓıșȘIJȘ ıIJȘ IJĮȚȞȓĮ API 20 Strep. ȀĮIJȐ IJȠȞ ȑȜİȖȤȠ, Ș ĮțİȡĮȚȩIJȘIJĮ IJȘȢ IJĮȚȞȓĮȢ µʌȠȡİȓ ȞĮ İʌĮȜȘșİȣIJİȓ
ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞIJĮȢ IJȠ ıIJȑȜİȤȠȢ Stretococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400.
īȚĮ İțİȓȞȠȣȢ IJȠȣȢ ȤȡȒıIJİȢ ʌȠȣ IJȠȣȢ ȗȘIJİȓIJĮȚ ȞĮ įȚİȟȐȖȠȣȞ ĮȞĮȜȣIJȚțȒ İȟȑIJĮıȘ ʌȠȚȠIJȚțȠȪ İȜȑȖȤȠȣ µİ IJȘȞ IJĮȚȞȓĮ, șĮ
ʌȡȑʌİȚ ȞĮ İȟİIJȐȗȠȞIJĮȚ IJĮ įȪȠ ʌĮȡĮțȐIJȦ ıIJİȜȑȤȘ ȖȚĮ ȞĮ İțįȘȜȫȞİIJĮȚ șİIJȚțȒ țĮȚ ĮȡȞȘIJȚțȒ ĮȞIJȚįȡĮıIJȚțȩIJȘIJĮ ȖȚĮ IJȚȢ
ʌİȡȚııȩIJİȡİȢ Įʌȩ IJȚȢ İȟİIJȐıİȚȢ API 20 Strep.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* ȉȠ ĮʌȠIJȑȜİıµĮ ĮȣIJȩ µʌȠȡİȓ ȞĮ įȚĮijȑȡİȚ ĮȞȐȜȠȖĮ µİ IJȠ ȣȜȚțȩ țĮȜȜȚȑȡȖİȚĮȢ ʌȠȣ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȒșȘțİ.
xǼȞĮȚȫȡȘµĮ ʌȠȣ ȡȣșµȓıIJȘțİ µİIJĮȟȪ 4,5 țĮȚ 5,5 McF ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞIJĮȢ DENSIMAT.
xȆȡȠijȓȜ ʌȠȣ ʌȡȠȑțȣȥĮȞ µİIJȐ Įʌȩ : - 4 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ ȖȚĮ İȟİIJȐıİȚȢ VP ȑȦȢ LAP
- 24 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ ȖȚĮ İȟİIJȐıİȚȢ ADH ȑȦȢ GLYG.
xȈIJİȜȑȤȘ ʌȠȣ țĮȜȜȚİȡȖȒșȘțĮȞ ıİ ȐȖĮȡ Columbia µİ ĮȓµĮ ʌȡȠȕȐIJȠȣ.
ǹʌȠIJİȜİȓ İȣșȪȞȘ IJȠȣ ȤȡȒıIJȘ ȞĮ įȚİȟȐȖİȚ IJȠȞ ȆȠȚȠIJȚțȩ DzȜİȖȤȠ ıȪµijȦȞĮ µİ IJȠȣȢ İțȐıIJȠIJİ IJȠʌȚțȠȪȢ ȚıȤȪȠȞIJİȢ
țĮȞȠȞȚıµȠȪȢ.
bioMérieux SA ǼȜȜȘȞȚțȐ - 3
api® 20 Strep 07625K - el - 2009/12
bioMérieuxSA ǼȜȜȘȞȚțȐ - 4
api® 20 Strep 07625K - el - 2009/12
ȆǿȃǹȀǹȈ ǹȃǹīȃȍȈǾȈ
ǼȄǼȉǹ- ȆȅȈ. ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉǹ
ǻȇǹȈȉǿȀǹ ȈȊȈȉǹȉǿȀǹ ǹȃȉǿǻȇǹȈǼǿȈ/ǼȃǽȊȂǹ
ȈǼǿȈ (mg/ȜȤʍ.) ǹȇȃǾȉǿȀȅ ĬǼȉǿȀȅ
VP 1 + VP 2 / ʌİȡȚµȑȞİIJİ 10 ȜİʌIJȐ (3)
ʌĮȡĮȖȦȖȒ ĮțİIJȠȧȞȘȢ
VP ʌȣȡȠıIJĮijȣȜȚțȩ ȞȐIJȡȚȠ 1,9 DZȤȡȦµȠ ȇȩįȚȞȠ-Ǽȡȣșȡȩ
(Voges Proskauer)
NIN / ʌİȡȚµȑȞİIJİ 10 ȜİʌIJȐ
HIP ȚʌʌȠȣȡȚțȩ ȠȟȪ 0,4 ȣįȡȩȜȣıȘ (ǿʌʌȠȣȡȚțȩ ȠȟȪ) DZȤȡȦµȠ/ǹʌĮȜȩ țȣĮȞȩ ȈțȠȪȡȠ țȣĮȞȩ/ǺȚȠȜİIJȓ
ȀȣĮȞȩ-ȖțȡȓȗȠ
4 ȫȡİȢ 24 ȫȡİȢ 4 ȫȡİȢ 24 ȫȡİȢ
DZȤȡȦµȠ DZȤȡȦµȠ ȂĮȪȡȠ ȂĮȪȡȠ
İıțȠȣȜȓȞȘ 1,16 ȣįȡȩȜȣıȘ ß-ȖȜȣțȠȗȚįȐıȘȢ
ESC ǹʌĮȜȩ ǹʌĮȜȩ țȓIJȡȚȞȠ īțȡȓȗȠ
țȚIJȡȚțȩ IJȡȚȞȐIJȡȚȠ 0,152 (EıțȠȣȜȓȞȘ)
țȓIJȡȚȞȠ ǹȞȠȚȤIJȩ ȖțȡȓȗȠ
ZYM A + ZYM B / 10 ȜİʌIJȐ (PYRA ȑȦȢ LAP) (1)
ĮȞ İȓȞĮȚ ĮʌĮȡĮȓIJȘIJȠ, ĮʌȠȤȡȦµĮIJȓıIJİ µİ ȑȞIJȠȞȠ ijȦȢ
ʌȣȡȠȖȜȠȣIJĮµȚȞȚțȩ ȠȟȪ- DZȤȡȦµȠ Ȓ
PYRA 0,0256 ȆȣȡȠȜȚįȠȞȣȜ ǹȡȣȜĮµȚįȐıȘ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ
ß-ȞĮijșȣȜĮµȓįȚȠ ʌȠȜȪ ĮʌĮȜȩ ʌȠȡIJȠțĮȜȓ
6-ȕȡȦµȠ-2-ȞĮijșȣȜ-
DGAL 0,0376 D-īĮȜĮțIJȠȗȚįȐıȘ DZȤȡȦµȠ ǺȚȠȜİIJȓ
DD-ȖĮȜĮțIJȠʌȣȡĮȞȠȗȓįȘ
ȞĮijșȩȜȘ ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-īȜȣțȠȣȡȠȞȚįȐıȘ DZȤȡȦµȠ ȀȣĮȞȩ
ȖȜȣțȠȣȡȠȞȚțȩ ȠȟȪ
2-ȞĮijșȣȜ- DZȤȡȦµȠ Ȓ
ßGAL 0,0306 ß-īĮȜĮțIJȠȗȚįȐıȘ ǺȚȠȜİIJȓ
ßD-ȖĮȜĮțIJȠʌȣȡĮȞȠȗȓįȘ ȆȠȜȪ ĮʌĮȜȩ ȕȚȠȜİIJȓ
‘ǹȤȡȦµȠ Ȓ
PAL 2-naphthyl phosphate 0,0244 ǹȜțĮȜȚțȒ ĭȦıijĮIJȐıȘ ǺȚȠȜİIJȓ
ȆȠȜȪ ĮʌĮȜȩ ȕȚȠȜİIJȓ
LAP L-ȜİȣțȓȞȘ-ß-ȞĮijșȣȜĮµȓįȚȠ 0,0256 ȁİȣțȓȞȘ ǹµȚȞȠʌİʌIJȚįȐıȘ DZȤȡȦµȠ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ
ADH L-ĮȡȖȚȞȓȞȘ 1,9 ǻȚȨįȡȠȜȐıȘ IJȘȢ ǹȡȖȚȞȓȞȘȢ ȀȓIJȡȚȞȠ Ǽȡȣșȡȩ
4 ȫȡİȢ 24 ȫȡİȢ 4 ȫȡİȢ 24 ȫȡİȢ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ /
RIB D-ȡȚȕȩȗȘ 1,4 ȠȟȓȞȚıȘ (ȇȚȕȩȗȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
ARA L-ĮȡĮȕȚȞȩȗȘ 1,4 ȠȟȓȞȚıȘ (ǹȡĮȕȚȞȩȗȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
MAN D-µĮȞȞȚIJȩȜȘ 1,36 ȠȟȓȞȚıȘ (ȂĮȞȞȚIJȩȜȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
SOR D-ıȠȡȕȚIJȩȜȘ 1,36 ȠȟȓȞȚıȘ (ȈȠȡȕȚIJȩȜȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
D-ȜĮțIJȩȗȘ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
LAC 1,4 ȠȟȓȞȚıȘ (ȁĮțIJȩȗȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
(ȕȩİȚȠȢ ʌȡȠȑȜİȣıȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
TRE D-IJȡİĮȜȩȗȘ 1,32 ȠȟȓȞȚıȘ (ȉȡİĮȜȩȗȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
INU ȚȞȠȣȜȓȞȘ 5,12 ȠȟȓȞȚıȘ (ǿȞȠȣȜȓȞȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
RAF D-ȡĮijijȚȞȩȗȘ 3,12 ȠȟȓȞȚıȘ (ȇĮijijȚȞȩȗȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ/
AMD ȐµȣȜȠ (2) 2,56 ȠȟȓȞȚıȘ (AµȚįȩȞȘ) Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
Ǽȡȣșȡȩ ȀȓIJȡȚȞȠ
GLYG ȖȜȣțȠȖȩȞȠ 1,28 ȠȟȓȞȚıȘ (īȜȣțȠȖȩȞȠ) Ǽȡȣșȡȩ Ȓ ȆȠȡIJȠțĮȜȓ DzȞIJȠȞȠ țȓIJȡȚȞȠ
(1) ȀĮIJȐ IJȘ įȚȐȡțİȚĮ µȚĮȢ įİȪIJİȡȘȢ ĮȞȐȖȞȦıȘȢ µİIJȐ Įʌȩ 24 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ, ȑȞĮ ȓȗȘµĮ µʌȠȡİȓ ȞĮ ʌĮȡĮIJȘȡȘșİȓ ıIJĮ ıȦȜȘȞȐȡȚĮ ȩʌȠȣ IJĮ
ĮȞIJȚįȡĮıIJȒȡȚĮ ZYM A țĮȚ ZYM B ȑȤȠȣȞ ʌȡȠıIJİșİȓ. ȉȠ ijĮȚȞȩµİȞȠ ĮȣIJȩ İȓȞĮȚ ijȣıȚȠȜȠȖȚțȩ țĮȚ įİȞ șĮ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ȜĮµȕȐȞİIJĮȚ ȣʌȩȥȘ.
(2) Ǿ ȠȟȓȞȚıȘ IJȠȣ ĮµȪȜȠȣ İȓȞĮȚ ıȣȤȞȐ ʌȚȠ ĮįȪȞĮµȘ Įʌȩ IJȘȞ ȠȟȓȞȚıȘ ȐȜȜȦȞ ıĮțȤȐȡȦȞ.
(3) Ǿ ݵijȐȞȚıȘ ĮʌĮȜȠȪ ȡȩįȚȞȠȣ ȤȡȫµĮIJȠȢ ʌȠȣ ʌȡȠȑțȣȥİ µİIJȐ Įʌȩ 10 ȜİʌIJȐ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ șİȦȡİȓIJĮȚ ĮȡȞȘIJȚțȒ.
xȅȚ ĮȞĮȖȡĮijȩµİȞİȢ ʌȠıȩIJȘIJİȢ µʌȠȡȠȪȞ ȞĮ ȡȣșµȓȗȠȞIJĮȚ ĮȞȐȜȠȖĮ µİ IJȠȞ IJȓIJȜȠ IJȦȞ ʌȡȫIJȦȞ ȣȜȫȞ ʌȠȣ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȠȪȞIJĮȚ.
xȅȡȚıµȑȞĮ țȣʌȑȜȚĮ ʌİȡȚȑȤȠȣȞ ʌȡȠȧȩȞIJĮ ȗȦȚțȒȢ ʌȡȠȑȜİȣıȘȢ, İȚįȚțȐ ʌİʌIJȩȞİȢ.
Ǿ ȠȞȠµĮıȓĮ BIOMERIEUX, Ƞ țȣĮȞȩȢ ȜȠȖȩIJȣʌȠȢ, ȠȚ ȠȞȠµĮıȓİȢ API țĮȚ apiweb ĮʌȠIJİȜȠȪȞ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘµȑȞĮ, țĮIJĮIJİșİȚµȑȞĮ Ȓ/țĮȚ țĮIJĮȤȦȡȘµȑȞĮ ݵʌȠȡȚțȐ ıȒµĮIJĮ
ʌȠȣ ĮȞȒțȠȣȞ ıIJȘ bioMérieux SA Ȓ µȚĮ İț IJȦȞ șȣȖĮIJȡȚțȫȞ IJȘȢ.
Ǿ ȠȞȠµĮıȓĮ CLSI İȓȞĮȚ ݵʌȠȡȚțȩ ıȒµĮ ʌȠȣ ĮȞȒțİȚ ıIJȘȞ Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
Ǿ ȠȞȠµĮıȓĮ ATCC ĮʌȠIJİȜİȓ ݵʌȠȡȚțȩ ıȒµĮ ʌȠȣ ĮȞȒțİȚ ıIJȘȞ American Type Culture Collection.
ȅʌȠȚĮįȒʌȠIJİ ȐȜȜȘ ȠȞȠµĮıȓĮ Ȓ ݵʌȠȡȚțȩ ıȒµĮ İȓȞĮȚ ȚįȚȠțIJȘıȓĮ IJȠȣ ĮȞIJȓıIJȠȚȤȠȣ ȚįȚȠțIJȒIJȘ.
®
20 Strep IVD
bioMérieux SA Svenska - 1
api® 20 Strep 07625K - sv - 2009/12
x Öppna ampullerna försiktigt enligt följande: OBS 2: Vid misstanke om pneumokocker bör
- Placera ampullen i ampullskyddet. 2 agarplattor prepareras för att erhålla tillräcklig tillväxt.
- Håll den skyddade ampullen i vertikal
Preparering av stripset
position med en hand (det vita plastlocket
uppåt). xGör i ordning en inkubationsbox (platta och lock) och
- Tryck ner locket så långt som möjligt. fördela ca 5 ml destillerat vatten eller avmineraliserat
- Placera tumspetsen på den räfflade delen av vatten [eller annat vatten utan tillsatser och kemikalier
locket och pressa framåt för att bryta av som kan utveckla gaser (t.ex. Cl2, CO2, etc.)] till
ampulltoppen. håligheterna på plattan för att skapa en fuktig atmosfär.
- Ta ut ampullen från ampullskyddet och lägg xAnteckna stambeteckningen på den förlängda fliken på
skyddet åt sidan för senare användning. plattan. (Anteckna inte beteckningen på locket eftersom
- Ta försiktigt av locket. det kan komma att förläggas under arbetet).
xData angående prestanda som presenterats har erhållits xTa ut stripset ur dess förpackning.
med hjälp av den metod som anges i denna xPlacera stripset i inkubationsboxen.
bipacksedel. Varje ändring i utförandet kan påverka Preparering av inokulatet
resultaten.
xTolkningen av testresultaten skall göras med hänsyn till xÖppna ampullen med API Suspension Medium (2 ml)
patientens anamnes, provkällan, kolonial och som anvisat i avsnittet “Försiktighetsåtgärder” eller
mikroskopisk morfologi hos stammen och, om använd ett annat rör innehållande 2 ml destillerat vatten
nödvändigt, resultaten av andra utförda tester, speciellt utan tillsatser.
antibiotikakänslighet. xAnvänd en bomullstopp och skörda hela kulturen från
den tidigare preparerade subkulturplattan.
xBered en koncentrerad lösning med turbiditet högre än
FÖRVARING
4 McFarland. Suspensionen måste användas direkt
Strips och medier bör förvaras vid 2-8°C fram till sista efter beredning.
förbrukningsdatum som anges på förpackningen.
Inokulering av stripset
PROVER (INSAMLING OCH PREPARERING) xFördela suspensionen på första halvan av stripset (VP
API 20 Strep är inte avsett för direkt användning med till ADH testerna), undvik att det bildas bubblor (luta
kliniska eller andra prover. stripset lite framåt och placera spetsen på pipetten eller
Mikroorganismerna som ska identifieras måste först PSIpetten mot sidan av kupolen):
isoleras på ett lämpligt medium i enlighet med - För testerna VP till LAP: fördela ca 100 µl till varje
standardiserade mikrobiologiska tekniker. kupol.
- För ADH testet: fyll endast brunnen.
xFör andra halvan av stripset (testerna RIB till GLYG):
BRUKSANVISNING
- Öppna en ampull API GP Medium som anvisat i
Val av kolonier stycket “Försiktighetsåtgärder” och överför resten av
När mikroorganismen som ska identifieras har isolerats lösningen till ampullen (ca 0,5 ml). Blanda väl.
och verifierats som medlem i familjen Streptococcaceae - Den nya suspensionen fördelas endast till brunnarna.
(Gram-, katalastest): xFyll kupolerna till de understrukna testerna (ADH till
xAnteckna typ av hemolys på rapportbladet (21:a testet). GLYG) med mineralolja tills det att det bildas en konvex
xPlocka en välisolerad koloni (OBS 1) och suspendera yta.
den i 0,3 ml sterilt vatten. Homogenisera väl. xPlacera locket på plattan.
xFlöda en Columbia fårblodsagarplatta (OBS 2) med xInkubera vid 36°C ± 2°C under aeroba förhållanden i 4 -
denna lösning (eller gör ett sterilt utstryk på hela 4 ½ timmar för att erhålla en första avläsning och i
agarytan). 24 timmar (± 2 timmar) för att göra en andra avläsning,
xInkubera plattan i 24 timmar (± 2 timmar) vid 36°C ± 2°C om det är nödvändigt.
under anaeroba förhållanden.
OBS 1: ß-hemolytiska streptokocker och enterokocker AVLÄSNING OCH TOLKNING
bildar tillräckligt stora kolonier efter 24 timmars inkubation. Avläsning av stripset
För andra streptokocker är det fördelaktigt att välja ut en
Efter 4 timmars inkubation:
koloni efter 48 timmars inkubation. För krävande stammar
xTillsätt reagenserna:
(bildar minimala kolonier efter 48 timmars inkubation)
rekommenderas följande procedur: - VP test: 1 droppe av både VP 1 och VP 2.
- Odla kolonin i 1 ml Schaedler buljong vid 36°C ± 2°C i - HIP test: 2 droppar NIN.
5 timmar. - PYRA-, DGAL-, ßGUR-, ßGAL-, PAL- och LAP-tester:
- Flöda en Columbia fårblodsagarplatta med hela 1 droppe av både ZYM A och ZYM B (*).
kulturen. Avlägsna överflödig vätska. (*) Det rekommenderas att varje ampull med ZYM B
- Inkubera plattan i 18-24 timmar vid 36°C ± 2°C under kontrolleras innan den används för första gången.
anaeroba förhållanden. För att, i avsikt att eliminera eventuellt defekt reagens,
göra denna kontroll är stammen ATCC® 700400 att
föredra enligt avsnittet Kvalitetskontroll.
xVänta 10 minuter och avläs sedan reaktionerna enligt
Avläsningstabellen. Om det är nödvändigt, utsätt stripset
för starkt ljus (10 sekunder med 1000 W lampa) för att
avfärga eventuellt reagensöverskott i brunnarna PYRA
till LAP.
bioMérieux SA Svenska - 2
api® 20 Strep 07625K - sv - 2009/12
KVALITETSKONTROLL
Medier, strips och reagenser är systematiskt kvalitetskontrollerade vid olika steg i tillverkningen.
Rationaliserad kvalitetskontroll (Streamlined quality control) kan tillämpas för att bekräfta att API 20 Strep-systemet
har en acceptabel prestanda efter leverans/lagerhållning. Denna metod kan utföras genom att följa instruktionerna ovan
®
för att testa och uppfylla kriterierna i CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial Identification Systems.
Testning kan utföras med hjälp av Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC® 700400 för att utvärdera
prestandan hos ARA-testet. Tester utförda av bioMérieux har visat att ARA-testet är den mest labila på API 20 Strep-
stripset. När stripset skall testas kan Stretococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 användas för att detektera
degradering.
För de användare som behöver utföra omfattande tester för kvalitetskontroll av stripset bör följande två stammar
testas för att påvisa positiv och negativ reaktivitet hos de flesta av API 20 Strep-testerna.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Detta resultat kan variera beroende på odlingsmediet som används.
xInokulatet är anpassat till mellan 4,5 och 5,5 McF med hjälp av DENSIMAT.
xProfiler som erhölls efter : - 4 timmars inkubation för testerna VP till LAP
- 24 timmars inkubation för testerna ADH till GLYG.
xStammar odlade på Columbia fårblodsagar.
Det är användarens ansvar att utföra kvalitetskontroll i enlighet med de lokalt tillämpade bestämmelserna.
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bioMérieux SA Svenska - 4
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AVLÄSNINGSTABELL
MGD RESULTAT
TEST AKTIVA INGREDIENSER REAKTIONER/ENZYMER
(mg/kup.) NEGATIVT POSITIVT
VP 1 + VP 2 / vänta 10 min (3)
acetoinbildning
VP Natriumpyruvat 1,9 Färglös Rosa-Röd
(Voges Proskauer)
NIN / vänta 10 min
HIP 0,4 Färglös/Svagt blå Mörkblå/Violett
hippursyra hydrolys (HIPpursyra)
Blåaktig-grå
4 timmar 24 timmar 4 timmar 24 timmar
Färglös Färglös Svart Svart
esculin 1,16 ß-glucosidashydrolys Svagt gul Svagt gul Grå
ESC
järncitrat 0,152 (ESCulin)
Ljusgrå
ZYM A + ZYM B / 10 min (PYRA till LAP) (1)
om nödvändigt, avfärga med starkt ljus
pyroglutaminsyra- Färglös eller
PYRA 0,0256 PYRrolidonylArylamidas Orange
ß-naftylamid Mycket svagt orange
6-bromo-2-naftyl-
DGAL 0,0376 D-GALaktosidas Färglös Violett
DD-galaktopyranosid
naftol ASBI-
ßGUR 0,0537 ß-GlUkuRonidas Färglös Blå
glukuronsyra
2-naftyl- Färglös eller
ßGAL 0,0306 ß-GALaktosidas Violett
ßD-galaktopyranosid Mycket svagt violett
Färglös eller
PAL 2-naftylfosfat 0,0244 ALKalisk fosfatas Violett
Mycket svagt violett
LAP L-leucin-ß-naftylamid 0,0256 Leucine AminoPeptidas Färglös Orange
ADH L-arginin 1,9 Arginin DiHydrolas Gul Röd
4 timmar 24 timmar 4 timmar 24 timmar
Orange/ Orange/
RIB D-ribos 1,4 surgörning (RIBos) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange/
ARA L-arabinos 1,4 surgörning (ARAbinos) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange/
MAN D-mannitol 1,36 surgörning (MANnitol) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange/
SOR D-sorbitol 1,36 surgörning (SORbitol) Röd Gul
Röd Gul
D-laktos Orange/ Orange/
LAC 1,4 surgörning (LAktos) Röd Gul
(av nöt) Röd Gul
Orange/ Orange/
TRE D-trehalos 1,32 surgörning (TREhalos) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange/
INU inulin 5,12 surgörning (INUlin) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange/
RAF D-raffinos 3,12 surgörning (RAFfinos) Röd Gul
Röd Gul
Orange/ Orange
AMD stärkelse (2) 2,56 surgörning (RAFinos) Röd Gul
Röd /Gul
GLYG glykogen 1,28 surgörning (GLYkoGen) Röd eller Orange Klargul
(1) Under en andra avläsning efter 24 timmars inkubation kan en avlagring upptäckas i brunnarna där ZYM A och ZYM B reagenserna
blivit tillsatta. Det är normalt och skall inte tas i beaktande.
(2) Surgörningen av stärkelse är ofta svagare än hos andra kolhydrater.
(3) En svagt rosa färg som erhålls efter 10 minuter skall anses som negativ.
xDen angivna mängden kan justeras beroende på titern hos de använda råmaterialen.
xVissa kupoler innehåller produkter av animaliskt ursprung, i synnerhet peptoner.
BIOMERIEUX, den blå logotypen, API and apiweb är patentsökta och/eller registrerade varumärken som tillhör och används av bioMérieux SA eller något av
dess dotterbolag.
CLSI är ett varumärke som tillhör Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
ATCC är ett varumärke som tillhör is American Type Culture Collection.
Alla övriga namn eller varumärken tillhör dess respektive ägare.
®
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xÅbn forsigtigt ampullerne som følger: Note 2 : I tilfælde af mistanke om pneumokokker tilrådes
- Anbring ampullen i ampulbeskytteren. det at præparere 2 agarplader for at opnå tilstrækkelig
- Hold den beskyttede ampul i den ene hånd i vækst.
lodret stilling (med den hvide plasthætte
Præparering af strip'en
øverst).
- Tryk hætten så langt ned som muligt. xPræparer en inkubationsæske (skål og låg) og fordel
- Anbring spidsen af tommelfingeren på cirka 5 ml destilleret eller demineraliseret vand [eller
hættens rillede del og tryk udefter for at eventuelt vand uden tilsætningsstoffer eller kemikalier,
der kan frigive gasser (f.eks. Cl2, CO2, etc.)] i bakkens
knække toppen af ampullen.
fordybninger for at skabe en fugtig atmosfære.
- Tag ampullen ud af ampulbeskytteren og
xNotér stammereferencen på bakkens forlængede klap.
læg beskytteren til side til senere brug. (Notér ikke referencen på låget, da det kan blive flyttet
- Tag forsigtigt hætten af. under proceduren).
xDe fremlagte præstationsdata blev fundet ved xFjern strip'en fra dens individuelle pakning.
anvendelse af den procedure, der er angivet på denne xAnbring strip'en i inkubationsæsken.
indlægsseddel. Enhver ændring eller modifikation af
denne procedure kan påvirke resultaterne. Præparering af inokulum
xVed fortolkning af testresultaterne skal der tages højde xÅbn en ampul med API Suspensionsmedium (2 ml) som
for patientens sygehistorie, prøvens kilde, koloniens og angivet i afsnittet "Advarsler og forholdsregler" eller brug
mikroskopiens morfologi for stammen samt om et andet rør med 2 ml destilleret vand uden tilsætninger.
nødvendigt resultaterne af eventuelle andre udførte xBenyt en vatpind til at høste hele kulturen fra den
prøver, specielt de antibakterielle følsomhedsmønstre. forpræparerede subkulturplade.
xPræparer en tæt opløsning med en turbiditet på mere
OPBEVARINGSFORHOLD end 4 McFarland. Denne suspension skal anvendes
Strips og medier skal opbevares ved 2-8°C indtil den umiddelbart efter præpareringen.
udløbsdato, der er angivet på emballagen. Inokulation af strip'en
xFordel denne suspension i den første halvdel af strip'en
PRØVER (OPSAMLING OG PRÆPARERING)
(test VP til ADH), og undgå, at der dannes bobler (vip
API 20 Strep må ikke bruges direkte sammen med strip'en let fremad og anbring spidsen af pipetten eller
kliniske eller andre prøver. PSIpetten mod siden af brønden) :
De mikroorganismer, der skal identificeres, skal først - For tests VP til LAP : fordel cirka 100 µl i hver brønd.
isoleres på et egnet dyrkningsmedium i - For ADH testen : fyld kun røret.
overensstemmelse med mikrobiologiske standard xI den anden halvdel af strip'en (tests RIB til GLYG):
teknikker. - Åbn en ampul med API GP Medium som angivet i
afsnittet "Advarsler og forholdsregler" og overfør
BRUGSANVISNING resten af suspensionen til den (ca. 0,5 ml). Bland
Udvælgelse af kolonier omhyggeligt.
- Fordel denne nye suspension udelukkende i rørene.
Når den mikroorganisme, der skal identificeres, er blevet xFyld brønden i de understregne tests (ADH til GLYG)
isoleret og verificeret som et medlem af familien med mineralsk olie for at danne en konveks menisk.
Streptococcaceae (Gram, katalasetest) så : xSæt låget på skålen.
xNotér hæmolysetypen på resultatarket (21. test). xInkubér ved 36°C ± 2°C under aerobe betingelser i
xUdtag en velisoleret koloni (note 1) og suspendér den i 4 - 4 ½ time for at opnå en første aflæsning og i 24 timer
0,3 ml sterilt vand. Homogenisér den omhyggeligt. (± 2 timer) for at opnå en ekstra aflæsning om
xOverhæld en Columbia-fåreblodsagarplade (note 2) nødvendigt.
med denne suspension (eller opsaml aseptisk hele
agarens overflade).
AFLÆSNING OG FORTOLKNING
xInkubér pladen i 24 timer (± 2 timer) ved 36°C ± 2°C
under anaerobe betingelser. Aflæsning af strip
Note 1 : ß-hæmolytiske streptokokker og enterokokker Efter 4 timers inkubation:
producerer tilstrækkeligt store kolonier efter 24 timers xtilsæt reagenserne:
inkubation. For andre streptokokker er det tilrådeligt at - VP-test : 1 dråbe af hvert af reagenserne VP 1 og VP 2.
selektere en koloni efter 48 timers inkubation. For kræsne - HIP-test : 2 dråber NIN.
stammer (der producerer meget små kolonier efter - PYRA, DGAL, ßGUR, ßGAL, PAL og LAP tests :
48 timer) anbefales følgende fremgangsmåde: 1 dråbe af hvert af reagenserne ZYM A og ZYM B (*)
- Dyrk kolonien i 1 ml Schaedler kødafkog ved (*) Det anbefales at kontrollere hver ampul ZYM B,
36°C ± 2°C i 5 timer. inden den åbnes første gang.
- Overhæld en Columbia fåreblodsagarplade med hele Til udførelse af en sådan kontrol anbefales det at
kulturen. Fjern eventuel overskydende væske. bruge stammen ATCC® 700400 nævnt i afsnittet om
- Inkubér pladen i 18-24 timer ved 36°C ± 2°C under kvalitetskontrol for at eliminere defekte reagenser.
anerobe betingelser. xVent 10 minutter og aflæs derefter reaktionerne ved at
referere til Aflæsningstabellen. Udsæt om nødvendigt
strip'en for kraftigt lys (10 sekunder med en 1000 W
lampe) for at affarve eventuelle overskydende
reagenser i rørene PYRA til LAP.
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KVALITETSKONTROL
Medier, strips og reagenser kontrolleres systematisk på forskellige trin under fremstillingen.
En effektiv kvalitetskontrol kan anvendes til bekræftelse af acceptabel præstation af API 20 Strep systemet efter
levering/opbevaring. Denne metodologi kan udføres ved at følge ovenstående instruktioner for testning og imødegåelse
®
af kriterier angivet i CLSI M50-A Quality Control for Commercial Identification Systems.
®
Testning kan foretages med anvendelse af Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 til vurdering af
præstationen af ARA testen. Tests udført af bioMérieux har vist, at ARA testen er den mest ustabile i API 20 Strep
strip’en. Når strip’en testes, kan Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 anvendes til detektion af
nedbrydning.
For de brugere, som skal udføre omfattende kvalitetskontroltestning af strip’en, er det bedst at anvende følgende to
stammer til demonstration af positiv og negativ reaktivitet for de fleste API 20 Strep tests:
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Dette resultat kan variere afhængigt af det anvendte dyrkningsmedium.
xInokulum justeret til mellem 4,5 og 5,5 McF med DENSIMAT.
xProfiler opnået efter: - 4 timers inkubation for tests VP til LAP
- 24 timers inkubation for tests ADH til GLYG.
xStammer dyrket på Columbia fåreblodsagar.
Det er brugerens ansvar at foretage kvalitetskontrol i overensstemmelse med lokalt gældende bestemmelser.
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api® 20 Strep 07625K - da - 2009/12
bioMérieux SA Dansk - 4
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AFLÆSNINGSTABEL
BIOMÉRIEUX, det blå logo, API og apiweb er anvendte, under registrering og/eller registrerede varemærker tilhørende bioMérieux SA eller et af dettes datterselskaber.
CLSI er et varemærke tilhørende Clinical and Laboratory Standards Institute, Inc.
ATCC er et tilhørende American Type Culture Collection.
Alle andre handelsnavne eller varemærker er den respektive ejers ejendom.
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20 Strep IVD
bioMérieux SA Polski - 1
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bioMérieux SA Polski - 2
api® 20 Strep 07625K - pl - 2009/12
KONTROLA JAKOĝCI
PodáoĪa, paski i odczynniki są systematycznie poddawane kontroli jakoĞci na róĪnym poziomie procesu produkcji.
Do oceny systemu API 20 Strep po transporcie/magazynowaniu moĪe byü uĪywana CzĊĞciowa Kontrola JakoĞci. Ta
metodyka moĪe byü wykonywana wedáug zaáączonych instrukcji badania w celu speánienia kryteriów Kontroli JakoĞci dla
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komercyjnych systemów identyfikacji mikrobiologicznej CLSI M50-A.
®
Do oceny testu ARA uĪyü moĪna szczepu wzorcowego Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400.
Badania prowadzone przez bioMérieux wykazaáy, Īe test ARA jest najmniej trwaáy w zestawie API 20 Strep. Szczepu
Stretococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 moĪna uĪywaü do wykrycia rozkáadu.
Dla uĪytkowników, którzy zobowiązani są prowadziü Peáną KontrolĊ JakoĞci pasków zaleca siĊ dwa nastĊpujące
szczepy dla sprawdzenia dodatniej i ujemnej reaktywnoĞci wiĊkszoĞci testów zestawu API 20 Strep.
1. Streptococcus equi spp zooepidemicus ATCC 700400 2. Streptococcus uberis ATCC 700407
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
VP HIP ESC PYRA DGAL ßGUR ßGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG
1. – – – – – + – + + + + – – + + – – – + +
2. + + + V V + – –* + + + – + + + + + + – –
* Wynik ten moĪe siĊ róĪniü w zaleĪnoĞci od uĪytego podáoĪa.
xOdpowiednia gĊstoĞü inokulum wyznaczona przy uĪyciu DENSIMATU zawiera siĊ miĊdzy 4.5 a 5.5 McF.
xProfile otrzymane po: - 4 godzinach inkubacji dla testów od VP do LAP
- 24 godzinach inkubacji dla testów od ADH do GLYG.
xSzczepy hodowane na agarze Columbia z krwią baranią.
UĪytkownik jest zobowiązany do prowadzenia kontroli jakoĞci zgodnie z lokalnymi przepisami.
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TABELA ODCZYTÓW
AKTYWNE STĉĩENIE WYNIKI
TEST REAKCJE/ENZYMY
SKàADNIKI (mg/probówka) NEGATYWNY POZYTYWNY
VP 1 + VP 2 / odczekaü 10 min (3)
wytwarzanie acetoiny
VP pirosiarczan sodu 1,9 Bezbarwny RóĪowo-Czerwony
(Voges Proskauer)
NIN / odczekaü 10 min
HIP kwas hipurowy 0,4 hydroliza (kwas hipurowy) Bezbarwny /Blado niebieski Ciemno niebieski/Fioletowy
Niebieskawo-szary
4 godz. 24 godz. 4 godz. 24 godz.
Bezbarwny Bezbarwny Czarny Czarny
eskulina 1,16 ß-glukozydaza hydroliza
ESC Blado Īóáty Blado Īóáty Szary
cytrynian sodu 0,152 (eskulina)
Jasno szary
ZYM A + ZYM B / 10 min (od PYRA do LAP) (1)
JeĞli konieczne, odbarwiü w silnym Ğwietle
ß-naftyloamid kwasu Bezbarwny lub
PYRA 0,0256 arylamidaza pirolidonylu PomaraĔczowy
piroglutaminowego Bardzo blado pomaraĔczowy
6-bromo-2-naftylo-
DGAL 0,0376 D-galaktozydaza Bezbarwny Fioletowy
DD-galaktopiranozyd
naftol ASBI
ßGUR 0,0537 ß-glukuronidaza Bezbarwny Niebieski
kwasu glukuronowego
2-naftylo- Bezbarwny lub
ßGAL 0,0306 ß-galaktozydaza Fioletowy
ßD-galaktopiranozyd Bardzo blado fioletowy
Bezbarwny lub
PAL 2-naftylo fosforan 0,0244 fosfataza alkaliczna Fioletowy
Bardzo blado fioletowy
L-leucyno-
LAP 0,0256 leucyno aminopeptydaza Bezbarwny PomaraĔczowy
ß-naftyloamid
ADH L-arginina 1,9 dihydrolaza argininy ĩóáty Czerwony
4 godz. 24 godz. 4 godz. 24 godz.
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
RIB D-ryboza 1,4 zakwaszenie (ryboza) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
ARA L-arabinoza 1,4 zakwaszenie (arabinoza) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
MAN D-mannitol 1,36 zakwaszenie (mannitol) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
SOR D-sorbitol 1,36 zakwaszenie (sorbitol) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
D-laktoza PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
LAC 1,4 zakwaszenie (laktoza) Czerwony ĩóáty
(woáowa) Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
TRE D-trehaloza 1,32 zakwaszenie (trehaloza) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
INU inulina 5,12 zakwaszenie (inulina) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
RAF D-rafinoza 3,12 zakwaszenie (rafinoza) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
PomaraĔczowy/ PomaraĔczowy/
AMD skrobia (2) 2,56 zakwaszenie (skrobia) Czerwony ĩóáty
Czerwony ĩóáty
GLYG glikogen 1,28 zakwaszenie (glikogen) Czerwony lub PomaraĔczowy Jasno Īóáty
(1) W trakcie drugiego odczytu po 24 godzinach inkubacji, moĪe pojawiaü siĊ w probówkach osad po dodaniu odczynników ZYM A
i ZYM B. Jest to normalne zjawisko, które nie powinno byü brane pod uwagĊ.
(2) Zakwaszenie skrobi jest czĊsto sáabsze niĪ innych cukrów.
(3) Blado róĪowy kolor pojawiający siĊ po 10 minutach naleĪy uwaĪaü za wynik negatywny.
xWskazane stĊĪenia mogą byü regulowane w zaleĪnoĞci od miana uĪytego surowego materiaáu.
xNiektóre mikroprobówki zawierają produkty pochodzenia zwierzĊcego,zwáaszcza peptony.
METODYKA str. I PIĝMIENNICTWO str. III
TABELA IDENTYFIKACYJNA str. II TABELA SYMBOLI str. IV
BIOMERIEUX, i jego niebieskie logo, API i apiweb są znakami towarowymi uĪywanymi, w trakcie rejestracji i/lub zastrzeĪonymi, naleĪącym do bioMérieux SA
lub jednego z przedstawicielstw.
CLSI ijest znakiem towarowym naleĪącym do Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
ATCC jest znakiem towarowym naleĪącym do American Type Culture Collection.
Wszystkie pozostaáe nazwy i znaki towarowe są wáasnoĞcią ich posiadaczy.
> 4 McF
~ 500 µl VP ADH
ADH
API GP Medium
RIB GLYG
RIB GLYG
24:00 36°C VP : VP 1 + VP 2
± 2:00 ± 2°C HIP : NIN
API 20 Strep PYRA LAP : ZYM A + ZYM B
+ - + - + -
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bioMérieux SA II
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bioMérieux SA III
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