Conduite à Tenir Devant un LBA

- Le LBA est un prélèvement qui permet la recherche de parasites et de champignons à porte d’entrée pulmonaire
(comme Pneumocystis jirovecii) ou qui se retrouvent au niveau pulmonaire après dissémination (Toxoplasma
gondii).
- C’est un prélèvement préconisé chez les immunodéprimés à la recherche d’agents opportunistes, en cas de :
o Pneumopathie fébrile inexpliquée.
o Détresse respiratoire.
o Imagerie d’une pneumopathie interstitielle bilatérale évoquant une infection à Pneumocystis jiovecii.
o Immunodépression (baisse des taux de LT CD4+ chez les sujets VIH (+)).
- Chez les immunocompétents, on peut retrouver les crochets et scolex hydatiques après une vomique ou les œufs
de Paragonimus westermani (douve pulmonaire).

Parasites et Champignons Retrouvés Chez les Immunodéprimés

- VIH : pneumocystose, cryptococcose, toxoplasmose disséminée ou mycoses à champignons dimorphiques en cas
de séjour en zone d’endémie (histoplasmose, pénicillose à Talaromyces marneffei…).
- Neutropénie post-chimiothérapie : candidose, aspergillose et mucormycoses.
- Corticothérapie : aspergillose, cryptococcose, pneumocystose ou anguillulose maligne.

Étapes de l’Analyse
- Avant la centrifugation : examen direct.
- Après la centrifugation :
o Sur le culot :
 État frais (à l’encre de Chine pour Cryptococcus).
 Frottis coloré : MGG, Ziehl Neelsen modifiée, Weeber modifiée, Musto ou O-toluidine.
 Frottis non colorés, fixés à l’acétone : tests d’immunofluorescence.
o Sur le surnageant :
 Recherche des antigènes mycosiques.
 Culture mycologique.
 Culture cellulaire.
 Inoculation à l’animal.
 Sérologie.
 PCR.

Pneumocystis jirovecii
- État frais : amas (kystes et trophozoïtes) en forme de nuages, leur dénombrement permet de déterminer la
charge parasitaire.
- Frottis coloré :
o MGG : trophozoïtes colorés en bleu, à noyaux rouges. Au niveau des kystes, seuls les corps intra-
kystiques sont colorés, leur paroi apparait en négatif sous forme d’halo clair.
o Coloration spéciale de la paroi des kystes (aspect de ballons dégonflés) :
 Musto (imprégnation argentique) : paroi en noir sur un fond vert.
 O-toluidine : paroi en bleu violet sur fond violet clair.
- Frottis non colorés, fixés à l’acétone : test d’IFI de la paroi des oocystes.

Cryptococcus neoformans
- État frais à l’encre de Chine : mise en évidence de la capsule de la levure (halo clair).
- Culture mycologique.
- Recherche des antigènes mycosiques : Cryptococcus (GXM).

Toxoplasma gondii
- Frottis coloré au MGG : recherche des tachyzoïtes intracellulaires à cytoplasme bleu et noyau rouge
(exceptionnel).
- Frottis non colorés, fixés à l’acétone : tests d’IFD.
- Autres : culture cellulaire, inoculation à l’animal ou PCR.
Cryptosporidium sp.
- Frottis coloré par la méthode de Ziehl Neelsen modifiée : oocystes rouges sur fond vert avec vacuole centrale
claire et sporozoïtes périphériques noirs en « C ».
- Frottis non colorés, fixés à l’acétone : tests d’IFD.

Microsporidies
- Frottis coloré par la technique de Weeber modifiée : paroi des spores en rose foncé, renforcée au centre, avec
aspect asymétrique dû à la vacuole polaire.
- Uvitex : fluorescence bleue
- Frottis non colorés, fixés à l’acétone : tests d’IFD.
- PCR sur les selles.

Autres
- Leishmania sp. : recherche des formes amastigotes sur frottis coloré au MG ou au MGG, elles ont un
cytoplasme bleu et un noyau et kinétoplaste rouges.
- Champignons dimorphiques : recherche de la forme levure d’Histoplasma capsulatum après coloration au
MGG à l’intérieur des macrophages.
- Anguillules : recherche des larves dans les selles.
- Levures filamenteuses : comme Candida sp.
- Champignons filamenteux : comme Aspergillus sp.