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UNIVERSITE KASDI
MERBAH-OUARGLA
Le17 / 06/2014
Devant le jury- :
BOUAL Z. (MAA) Président (Univ Ouargla).
CHOUANA T. (MAA) Encadreur ( Univ Ouargla).
LOUNICI S. (MAA) Examinateur (Univ Ouargla).
CHAICHE K.. (MAA) Examinateur (Univ Ouargla)
Avant tout, nous remercions, Dieu tout puissant de nous avoir donné le courage, la force, la
volonté et la patience pour réaliser ce travail.
Mr. CHOUANA T. Qui a accepté de nous encadrer, de diriger ce travail, et pour son aide
très précieuse, et ses corrections sérieuses, qu’il nous a apportées et sa patience.
Nos vifs et sincères remerciements vont à Mr. BOUAL Z. pour son aide et pour avoir accepté
de présider ce jury.
Nous remercions Mr. CHAICH K. et Meme . LOUNICI S., d’avoir accepté, d'examiner ce
modeste travail.
Nos remerciements vont également à tout Les techniciens des laboratoires pédagogiques
représentés Principalement par Mr. EL AIECHE et toute l’équipe : Amina, Houda
,Imen ,Amal …. Et les techniciens des laboratoires de recherche ECOSYS et le laboratoire
BIO RESOURCE : Mme Kaci.
LAGMI IKRAM
ET
TINAMRI MABROUKA
Figure N° Titres Page
01 la structure d’A D- galacturonan 07
03 Structure de 4-O-méthyl-D-glucorono-D-xylan 13
04 Répartition du genre Astragalus dans le monde 23
05 Astragalus gombo 26
T Toure
ddL Dégrée de liberté
p Probabilité
PE Poids échantillons
P0 Poids capsule vide
P1 Poids de capsule + poids d’échantillons
H Humidité
MH Moyenne d’humidité
Ms g Matière sèche en gramme
R Rendement
PEB Poids de l’extraie brut de polysaccharide
PMs Poids de matière sèche en gramme
Titre page
Introduction générale 01
Introduction
Les polysaccharides sont les macromolécules les plus abondants sur terre et dans les
océans. Ils sont fortement utilisés dans l'industrie agroalimentaire et pharmaceutique
(EFSTATHIOU T. et al 2012)
Ces macromolécules sont les éléments structuraux majeurs de la paroi des végétaux (ex :
cellulose, Carraghénanes, alginates). Ils présentent une variabilité structurale et une richesse
de propriétés physico-chimiques, que l'on ne rencontre chez aucune autre classe
d'organismes (WARRAND, 2004).
Le genre d’Astragale (famille de Fabaceae) contient de nombreux éléments actifs, tels
que des flavonoïdes, des glycosides triterpénes, des acides aminés et des traces de minéraux
et des polysaccharides (SAOUDO M., 2007). Les méthodes d’extraction de ce dernier est un
processus important pour leur application dans les différents industries (agroalimentaires,
pharmaceutiques …etc).
De nombreuses études ont montré l'effet des conditions d'extraction sur le rendement des
polysaccharides extraits (RENJIE, 2008).
Ce travail s'oriente sur l’optimisation des conditions d’extraction des polysaccharides
issus de l'Astragalus gombo (Fabaceae) récolté de Sahara septentrional Est algérien.
L’objectif recherché est d’établir un protocole d’extraction spécifique pour cette plante. Et de
déterminer les conditions le plus convenable pour l’obtention le meilleur rendement en
polysaccharides hydrosoluble de l’Astragalus gombo.
La présente étude s’articule autour de trois parties. La première partie comporte deux
chapitres, l’un rappelant la botanique de la plante étudié et l'autre sur les polysaccharides et
les différents paramètres influençant leur extraction.
La deuxième partie décrit les techniques d’extraction (matériel et méthodes) des
polysaccharides hydrosolubles dans par l’eau. Une troisième partie dans laquelle on a présenté
les principaux résultats obtenus.
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Partie I
Recherche bibliographique
Partie I Recherche bibliographique
Les glucides forment un groupe de composés très importants. Certains représente une source
d’énergie pour les organismes vivants , soit immédiatement utilisable (glucose ) , soit sous
forme de réserves (amidon , glycogène ) ; d’autres ont un rôle structurale (cellulose , chitine ,
acide hyaluronique ) ; d’autres , enfin , possèdent un rôle biologique importants comme celui
de signaux de reconnaissance (glycanes des glycoprotéines et des glycolipides) . Les termes
sucres et hydrates de carbone se rencontrent encore dans certains ouvrages ; cette dernière
dénomination est due au fait qu’un grand nombre de composés répondent à la formule
Cn(H2O) n, mais n’est pas valable pour tous les glucides, on distinguera ainsi les oses ou
sucres simples et les osides dont l’hydrolyse livre plusieurs oses (JACQUES H. W. et al. ,
2005).
Les oses sont des polyalcools qui possèdent une fonction aldéhyde appelé aldose ou une
fonction cétone donnant les cétoses. Les oses qui sont les molécules élémentaires constitutives
des glucides peuvent avoir de 3 à8 atomes de carbone. Les plus répandus sont en C3 (trioses),
C4 (tétroses), C5 (pentoses) et C6 (hexoses). Le plus connu est le glucose comme type
d’aldose et le fructose dans le cas des cétones (CLANDE COSTES., 1980).
Les oses sont divisés en quatre catégories : oses neutres, Osamines, acides uroniques, acides
sialiques (JACQUES H. W. et al. , 2005).
On classe parmi les oses neutres les glucides qui ne possèdent, outre la fonction aldéhydique
ou cétonique, que des fonctions alcooliques tel que le D-glucose, le D – galactose le D-
mannose et le D- xylose (JACQUES H. W. et al. , 2005).
Ils dérivent des oses par remplacement d’un hydroxyle (généralement celui porté par le C2 par
une fonction amine.
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Partie I Recherche bibliographique
Les acides uroniques sont les produits d'oxydation des hexoses par des déshydrogénases
spécifiques. La fonction alcool primaire est oxydée en acide carboxylique. Les acides D-
glucuroniques et D-galacturoniques sont des constituants habituels des polysaccharides pariétaux
en particulier de la pectine, des mucilages acides et de la plupart des sécrétions
polysaccharidiques comme la gomme de Sterculia(BRUNETON, 1999).
L’acide D-glycuronique (encore appelé glucuronique) est l’un des acides uroniques les plus
répandus et on le trouve dans divers polyosides ; en outre, il participe aux processus de
détoxification (JACQUES H. W. et al. , 2005).
L’acide sialique est un sucre à 9 atomes de carbone, dérivant de la condensation d’une acétyl-
hexoamine avec de l’acide pyruvique.
I .2.1- Holosides
Les holosides résultent de l’association de n molécules d’oses. La liaison qui unit les molécules
d’oses est une liaison O-osidique ou liaison glycosidique. Cette liaison est formée par
condensation de l’hydroxyle du C anomérique d’un ose avec l’un des hydroxyles de l’autre ose
(KESSOUS C., 2005).
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Partie I Recherche bibliographique
I.1.2.1.1- Diholosides
Deux oses sont unis entre eux par une liaison osidique (ou glycosidique) pour donner un
diholoside. Selon le mode de liaison des 2 oses le diholoside est non réducteur ou réducteur
(PATRICE F., 2011).
I.1.2.1.2- Triholosides :
Le plus répandu est le raffinose ou α D galactopyranosyl ( 1- 6) α D- glucopyranosyl (1-2) β D
fructofuranoside , il s’agit d’un sucre non réducteur présent dans plusieurs plantes et surtout la
betterave(BEN SALAH A.et al .,2007).
I.1 .2.2- Les polysaccharides :
Les polysaccharides sont des glucides résultant de la polymérisation d’un nombre d’ose
dépassant quelques dizaines (la limite est très arbitraire). On distingue les homopolysaccharides
et les hétéros polysaccharides, selon qu’il y a un seul type d’unité constitutive (oses), ou deux ou
davantage. Il ne faut pas confondre cette distinction avec celle caractérisant les holosides et
hétérosides. Dans une nomenclature moderne. Le terme de polysaccharides devrait avoir été
remplacé par glycanes, surtout usité en anglais (glycans), mais dont l’usage ne s’est pas imposé
en français (WIDMER F.et al. 2000).
Il s’agit de réserves nutritives qui peuvent être dégradées en cas de besoin, les monosaccharides
résultants étant ensuite métabolisés pour fournir l’énergie nécessaire. Au contraire, la cellulose
est un polysaccharide de structure des parois cellulaires végétales (HAMES B.D et al., 2006).
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Partie I Recherche bibliographique
Homopolysaccharides
Hétéropolysaccharides
Les hétéropolysaccharides comportent comme leur nom l’indique, plusieurs types d’oses et
jouent un rôle important dans le tissu de soutien et la matrice extracellulaire de l’organisme. Ils
constituent de longues chaines d’oses indépendantes ou liées à un noyau protéique. Dans ce
dernier cas, le volume de la chaine osidiques est bien plus important que celui de la partie
protéique (WIDMER F.et al. 2000).
Les hétéropolysaccharides sont des molécules de haut poids moléculaire contenant au moins
deux per de monosaccharides formant un motif de base polymérisé (FABRE M. F, 1989)
Le polysaccharide (glycan) est le nom donné à une macromolécule composée d'un grand
nombre de monosaccharide, les résidus (de glycose) se sont liés entre eux par les liaisons
glycosidiques.
Le terme poly (g1ycose) n'est pas tout à fait un synonyme pour le polysaccharide (glycan) parce
qu'il inclut des macromolécules composées de résidus de glycose liés par des liaisons non
glycosidiques.
Bien que la plupart des polysaccharides comportent un résidu réducteur de monosaccharide à une
de ces extrémités, par contre d’autres polysaccharides non aucun résidu réducteur aux deux
extrémités.
Pour des polysaccharides contenant une proportion substantielle de résidus de sucre aminés, la
dénomination polysaccharide peut être utilisée, bien que le terme glycosaminoglycan puisse être
employé.
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Partie I Recherche bibliographique
Le terme oligosaccharide est généralement employé pour des hydrates de carbone consistés de
deux à dix résidus de monosaccharide.
Le nom n’un polysaccharide (glycan) constitué par un monosaccharide simple sera composé
par le nom du sucre composant et on ajoutant le suffixe ‘’an’’.
Par exemple : xylane pour des polymères de xylose, mannane pour des polymères de mannose, et
galactane pour des polymères de galactose. Le Cellulose et l'amidon sont les deux des glucanes,
car ils sont composés de résidus de glucose.
Quand la configuration des résidus de monomère est connue,"D" ou "L" elle peut être incluse
au nom du polysaccharide.
Les noms assignés aux polysaccharides nouvellement découverts devraient finir par " an." (IUB-
IUPAC., 1980).
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Partie I Recherche bibliographique
Les polymères contenant les résidus en covalence liés de monosaccharide et d'acide aminé se
nomment des glycoprotéines, des protéoglycans, et des peptidoglycans.
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Partie I Recherche bibliographique
Ces polymères sont constitués de résidus neutres (glycosamine) et acides (acide glucuronique
et/ou acide iduronique) plus ou moins sulfatés, unis par des liaisons glycosidiques de type α-
(1→4), β-(1→4) ou β-(1→3). L’héparine est un polymère fortement lié aux protéines formant
ainsi un protéoglycanes à l’état natif. Il s’agit d’une molécule à activité anticoagulante
immédiate. Il est utilisé dans le traitement curatif et préventif des maladies thromboemboliques
(BOUAL Z ,2009 in MURRAY et al. 1999).
I.1.2.2.2.1.1- Le glycogène
Le glycogène est un polyglucose que les animaux mettent en réserve dans le cytosol des
hépatocytes (glycémie : distribution à l’organisme) et dans la contraction musculaire (CHIKHI
A. et al. 2006).
- La longueur moyenne des chaines ramifiées est plus courte Cette structure est donc plus
compacte que celle de l’amylopectine (CHIKHI A.et al. 2006).
I.1.2.2.2.1.2- La chitine
Elle diffère de la cellulose que par le C2 du glucose : son hydroxyle est remplacé par le
groupement acétylamine
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Partie I Recherche bibliographique
L’héparine est sécrétée par les mastocytes du tissu conjonctif. Elle est abondante dans le foie, les
muscles et le poumon. Elle possède une action anticoagulante et permet la libération de la
lipoprotéine lipase ou facteur clarifiant. L’ Héparane-sulfate ou héparitine-sulfate est présente
dans le derme et dans l’aorte (CHIKHI A et al ., 2006).
Les trois grandes classes d’algues auxquelles appartiennent les espèces actuellement utilisées ont
chacune leurs polysaccharides caractéristiques : acide alginique et fucanes des phaeophyceae
,galactanes sulfatés-Carraghénanes et agar agar-des Rhodophyceae, polysaccharides complexes,
souvent sulfatés, des Chlorophyceae(BRUNETON J., 1999).
L’utilisation des algues dans l’alimentation humaine est une pratique courante et ancienne en
Extrême-Orient : lenori (en feuilles ou en paillettes, préparé à partir de porphyra), le komdu (des
Laminariaséchés) ou le wakame (Undaria salés ou séchés). Le marché (plusieurs dizaines de
milliers de tonnes) est approvisionné par l’algoculture (BRUNETON J., 1999).
Ces biopolymères assurent un rôle de soutien ou forment une gaine protectrice autour du
mycélium. Le principal représentant de ces polymères fongiques est la chitine
(DELTTRE ,2005).
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Partie I Recherche bibliographique
Les bactéries synthétisent plusieurs types de polysaccharides qui peuvent être classés en trois
grands groupes selon leur localisation dans la cellule :le premier groupe rassemble les
polysaccharides du cytosol ,ils servent de source de carbone et d’énergie à la cellule ;le second
groupe concerne les constituants de la paroi tels que les acides téichoïque et les peptidoglycanes ;
le troisième groupe qui ,réunit les polysaccharides élaborés par la cellule et secrétés dans le
milieu (DELTTRE,2005).
I.1.2.2.2.4.1.1- L’amidon
Il est la principale substance glucidique de réserve des plantes supérieures. L’amidon représente
une fraction pondérale importante des matières premières agricoles, stocké dans les organes de
réserve des végétaux tels que les céréales (30-70% de la matière sèche), les tubercules (60-90 %)
et les légumineuses (25 à 50 %).
L’amidon constitue la principale source d’énergie pour la vie animale et la moitié de l’amidon
produit industriellement est destinée à l’alimentation humaine. C’est un composé nutritionnel
abondant, renouvelable, peu coûteux, qui trouve dans les aliments de multiples fonctions comme
épaississant, gélifiant, liant sous sa forme d’empois d’amidon granulaire et comme matières
sucrantes, liantes, support lorsqu’il est utilisé sous forme hydrolysé( LUC-WERTZ J., et
al. ,2011 ).
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Partie I Recherche bibliographique
La teneur en chacun des constituants est différente suivant l’origine de l’amidon (LUC-WERTZ
J., 2011).
L’amylose est formée de chaines de 250 à 300 résidus d’α- D-glucopyranose associés par des
liaisons osidiques 1→4, elle est donc équivalente à enchainement d’unités maltose. Par suite de
la structure spatiale de ces sucres, la chaine d’amylose n’est pas plane mais possède une
structure hélicoïdale assez lâche (AUDIGIE Cl., et al, 1983).
I.1.2.2.2.4.2.1- La cellulose
La cellulose est une molécule stable, insoluble représentant 15 à 30% de la masse sèche de la
paroi primaire. Elle est synthétisée par des organismes aussi différents que les bactéries, les
champignons et les plantes. La cellulose est un homopolymère linéaire composé de 2 000 à 25
000 résidus de β-(1-4)-D-glucopyranose, dont le cellobiose (dimère de Glc) est le motif répétitif
(BRETT T.C., 2000).
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Partie I Recherche bibliographique
Les chaînes de cellulose ont une forte tendance à s’agréger entre elles en raison de leur
constitution chimique et de leur conformation spatiale. La disposition des hydroxyles libres des
résidus Glc permet l’établissement de liaisons hydrogènes intramoléculaires, stabilisant la
cellulose dans son orientation linéaire, ce qui lui confère une certaine rigidité. L’existence de
liaisons hydrogène inter-chaînes conduit à la formation de fibres, ce qui favorise l’établissement
d’un état solide ordonné, pseudocristallin et permet la formation de microfibrilles. La structure
fibrillaire très condensée de la cellulose explique sa résistance mécanique à la traction, ainsi que
son caractère non soluble dans l’eau (DOBLIN M.S., et al. 2002).
I.1.2.2.2.4.2.2- Pectine
Les pectines sont des molécules ramifiées avec une chaine principale composée d’acide
galacturonique lie en α – (1, 4). Certaines fonctions carbonyles (C-6) peuvent être estérifiées par
le méthanol ou amides. Les pectines possèdent des chaines latérales constituées de galactose,
d’arabinose et de xylose celles – ci sont partiellement dégradées par le procédé d’extraction
industriel. Elles sont présentes dans la plupart des fruits, mais sont surtout industriellement
extraites des citrons orange et pommes (RAPHAIL B., et al. ,2010).
s’associer par l’intermédiaire des ions calcium (Ca2+) (MKEDDER I., 2012 in VINCKEN J.,
2003).
Les pectines jouent un rôle capital dans l’architecture de la paroi ou elles assurent sa rigidité,
I.1.2.2.2.4.2.3- Hémicelluloses
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Partie I Recherche bibliographique
Les hémicelluloses sont plus ou moins solubles dans l’eau selon la nature des monomères
(MARLENE F., et al. ,2001).
Les hémicelluloses sont des polymères amorphes, constitués de pentoses ou d'hexoses mixtes de
sucres neutres (xylose, arabinose, mannose, galactose, glucose) et d’acides uroniques (l’acide
glucuronique et l’acide 4-O-méthyl glucuronique), essentiellement. Elles représentent 15 à 40%
de la matière végétale, et peuvent avoir un rôle structural et de réserve (COSGROVE D.J., et al.
,2005).
Les xylanes sont les hémicelluloses principales des parois secondaires, et regroupent ; les
glucuronoxylanes où des résidus soit d’acide glucuronique soit de l'acide 4-O-méthyl-
glucuronique sont greffés sur la xylose de la chaine principale.
Les arabinoxylanes où les résidus xylose sont substitués par des résidus arabinose, les
I.1.2.2.2.4.3.1- Gommes
Les propriétés physico-chimiques des gommes d’origine végétale peuvent changèrent fonction
du site d’origine, de l’espèce et des propriétés du sol.
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Partie I Recherche bibliographique
La viscosité de la gomme varie en fonction de la période de récolte: elle est faible en période de
pluies et élevée en période sèche. Le calibrage de la gomme. Tient compte de plusieurs variables
physico-chimiques dont la viscosité (SAMB A .et al. 2012).
I.1.2.2.2.4.3.2- Mucilages
Ce sont des constituants normaux des plantes. Ils ont un rôle protecteur (préviennent la
déshydratation des graines et leur conservent leurs facultés germinatives). Ils sont localisés dans
les graines le plus souvent. Il en existe de 2 sortes : acides (AC. uroniques) et neutres
(VERCAITERE J. ,2011).
Les mucilages sont des complexes de polysaccharide formés du sucre et les mucilages acides
uroniques d'unités forment les masses gluantes dans l'eau, sont en général hétérogènes en
composition (DIVEKAR V. B. ,et al. ,2010).
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Partie I Recherche bibliographique
Les polysaccharides sont les principales substances nutritives de la plupart des organismes Ils
fournissent l'énergie et les carbones nécessaires pour la biosynthèse de protéines, d'acides
nucléiques, de lipides et d'autres glucides (MARIBEL PACHECO in GRIFFIN, 1994).
Les herbes officinales, contenant des polysaccharides sont largement utilisées pour le traitement
des maladies dans la médecine traditionnelle et moderne.
Les polysaccharides issus des plantes médicinales africaines ont des activités immunostimulantes
et peuvent permettre de stimuler le système immunitaire dans le cas d’une fragilité de ce système
par certaines maladies (IPHAMETRA et al. 2010).
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Partie I Recherche bibliographique
Les polysaccharides ont reçu, en raison de leurs propriétés immunomodulatrices, une attention
particulière de la part des chercheurs œuvrant dans le domaine biomédical. Plusieurs
polysaccharides fongiques ont en effet la particularité de stimuler les défenses de l'hôte en
favorisant la maturation, la différentiation et la prolifération des cellules immunitaires, ce qui
leur confère plusieurs propriétés thérapeutiques notamment des propriétés anticancérigènes,
antibactériennes et antivirales (JONG et al. 1993).
Les pectines sont des fibres solubles constituées, Elles ont été associées à diverses activités
biologiques telles que des activités immunostimulante, anti-métastasique, anti-ulcère et anti-
néphrotique (YU et al. , 2001).
La présence de pectine affecterait aussi la digestion des protéines. Selon la nature des pectines et
leur quantité, la digestion de caséines a été affectée différemment et les nutriments azotés issus
de cette digestion variaient (LAURE R, in KOSSORI et al. , 2000).
Au niveau du côlon, les pectines comme toutes les fibres ont un rôle de pré biotique
(LAURE RINALDI in DONGOWSKI et al. , 2002) Ont montré que la présence de pectines LM
et HM (6.5 % dans une diète) augmentait la production d‘acides gras à courtes chaînes par les
bactéries du côlon, en particulier avec les pectines LM. Ces résultats suggèrent donc un impact
des pectines sur la croissance et le développement du microbiote colique (LAURE R in
DONGOWSKI et al, 2002).connu pour moduler des réponses hormonales postprandiales
régulant le métabolisme du glucose et l‘insulinémie (CANI et al. 2009).
Les α-glucanes sont les polysaccharides les plus abondants. Ils servent de composés structuraux
et de matériel de cimentation. Ils peuvent également être accumulés comme matériel
mucilagineux (excrétion cellulaire) protégeant les cellules fongiques contre la sécheresse (RUIZ-
HERRERA, 1992).
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Partie I Recherche bibliographique
Tableau 3 : les activités biologiques des polysaccharides signalées par les scientifiques et
quels types de polysaccharides dotés de ces activités
Les propretés seront mises en exergue en fonction de leur utilisation dans le domaine alimentaire.
La nature des polysaccharides influence fortement leurs propriétés physique .dans le domaine
alimentaire ce sont les propriétés en solution qui revêtent le plus importance en milieux aqueux les
molécules linéaires forment généralement des solutions plus visqueuses que les molécules branchées
car elles ont un volume hydrodynamique plus important
Les molécules linéaires ont aussi une plus grande tendance à précipiter en milieux concentré car
leur conformation favorise les interactions intermoléculaires. Il peut en résulter un état plus ou moins
cristallin ; comme pour l’amidon lors de la rétrogradation certains homoglycanes comme la cellulose
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Partie I Recherche bibliographique
sont insolubles car les ponts hydrogène intra et intermoléculaires sont très stable et forment un réseau
cristallin hautement organisé empêchant la pénétration de l’eau.
Les composés ramifies sont souvent plus solubles que les composés linéaires et forment plus
facilement des gels car les interactions intermoléculaires sont moins fortes. Par contre, les solutions
sont souvent plus collantes à cause de l’enchevêtrement des chaines latérales.
La charge des polymères exerce aussi une influence sur leur comportement en fonction du PH ou
de la présence de sels. par exemple , la pectine et l’alginate précipitent à bas PH lorsque les
groupement carboxyles est neutralisée , par contre, lorsque ces groupement sont déprotonés la
répulsion entre les charge fait que les molécules prennent une conformation étendue, donnant des
solution visqueuses .la présence de sels peut aussi induire des association de chaines car des cation
divalents peuvent stabiliser des groupements chargé , et forme des structures de type Egg-box ou boite
a œufs .
La viscosité d’une solution est fonction de la taille de la structure des molécules. la structure des
molécules influence leur flexibilité ou leur rigidité, par exemple la rotation autour des liaisons
glycosidiques, et ainsi la forme que la molécule adoptera en solution (BADOUD R., et al. ,2010).
La taille et la structure de l’échantillon jouent un rôle important dans l’extraction. Plus la matière est
divisée finement et plus la surface d’échange est grande rendant le contact solide /liquide meilleur
.c’est pourquoi l’extraction des matières végétales est toujours précédée du broyage cependant, un
broyage poussé peut dégrader les principes actifs sous l’effet de la chaleur dégagée par les frottements.
Les particules trop petites peuvent aussi engendrer des problèmes d’imperméabilité du lit de filtration
(DJABOUN S. in LALOU A., 1995).
Lorsque la teneur en soluté est importante dans le solide, la structure poreuse peut être détruite par
broyage. La dissolution ultérieure du soluté devient plus facile. Dans les matières végétales, le soluté
est généralement occlus dans des cellules d’où il est extrait par un mécanisme de dialyse ou de
diffusion capillaire à travers des parois cellulaires (BOUSBIA N. ,2011).
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Partie I Recherche bibliographique
La nature et l’état physique du soluté ont une importance primordiale et déterminent le mécanisme
de transfert de matière. Le soluté contenu dans ces corps est soit un solide, soit un liquide, stable ou
non à la chaleur ou à l’atmosphère. Il est réparti uniformément en des teneurs variables dans le solide.
Si le soluté est dispersé uniformément dans le solide, les parties superficielles sont dissoutes en
laissant derrière elles un solide poreux. Le solvant doit ensuite pénétrer cette couche extérieure avant
d’atteindre le soluté situé en profondeur. Le chemin du solvant est rendu de plus en plus difficile,
traduisant ainsi une diminution de la vitesse superficielle (BOUSBIA, 2011).
Le soluté à extraire contenu dans le corps solide influence considérablement la vitesse d’extraction de
part sa taille, sa localisation, sa répartition et ses liaisons dans la matière végétale avec d’autres
composés.
La vitesse de diffusion est inversement proportionnelle à la taille des particules du soluté, elle
diminue quand la taille de ces dernières augmente par exemple, les vitesses d’extraction des
composants hydrosolubles sont dans l’ordre croissant suivant : acides acétiques >sucre >pectines.
Les substances à extraire, localisées à l’intérieur des cellules, se présentent sous forme libre alors
que celles qui participent à la structure sont liées à d’autres composés. Leurs concentration varient
selon les conditions climatiques de croissance, les conditions de récoltes, l’état de maturité et le
conditionnement, c’est pourquoi elles varient beaucoup d’un lot à l’autre et au sein d’un même lot
(DJABOUN S. in LALOU A., 1995).
La température d’extraction a aussi une très grande importance dans le processus d’extraction .Une
augmentation de la température favorise la solubilité et la diffusivité du soluté et réduit sa viscosité et
celle du solvant .Mais elle peut entrainer une diminution de la sélectivité suite à la perméabilité des
parois cellulaires par dénaturation. Elle peut également dénaturer le produit à extraire comme elle
augmente le risque de perte en solvant (DJABOUN S. in LALOU A., 1995).
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Partie I Recherche bibliographique
Le temps est un autre paramètre qui doit être pris en considération dans l’extraction de la matière
végétale. Généralement l’augmentation du temps de contact augmente le rendement du produit extrait
.Il faut noter cependant qu’un temps prolongé peut causer la dégradation des extraits (DJABOUN S. in
LALOU A., 1995).
I.1.2.3 - Hétérosides
Les N-hétérosides sont dérivés du ribose ou du désoxyribose lié à des bases pour former les
nucléotides présents dans toutes les cellules (ARN et ADN).
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Partie I Recherche bibliographique
Les O- hétérosides sont les plus importants. Comme les S-hétérosides, ils sont essentiellement
végétaux. Ils forment des substances de réserve localisées dans les vacuoles cellulaires ; mais on
peut les considérer comme des déchets, possédant un rôle comparable aux glucuronides des
animaux supérieur. de nombreuses substances de ce groupe ont des propriétés pharmaceutiques
(CHARLES. A et al., 2008).
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Partie I Recherche bibliographique
Le nom de la Famille des Fabaceae, découle du nom de genre Faba. Or, il se trouve que ce nom
de genre n'est plus utilisé, ayant laissé place au genre Vicia. Un représentant de l'ancien genre
Faba (du latin faba, fève) est la fève, anciennement Faba vulgaris, maintenant Vicia faba. La
famille est aussi appelée couramment Légumineuses (Leguminosae) ou Papilionacées
(Papilionaceae), mais ces ne sont pas de vrais synonymes. Chaque nom s'applique à une
condition particulière. Selon les classifications, la composition de cette famille varie (SAOUDO
M, 2007).
Les feuilles: généralement alternes , composées pennées (ou bipennées ) à composées palmées ,
trifoliolées , ou unifoliolées; entières à parfois dentées-serrées , à nervation pennée , folioles
parfois transformées en vrilles; les stipules minuscules à foliacées, parfois transformées en
épines inflorescences presque toujours indéterminées , parfois réduites à une fleur solitaire ,
terminales ou axillaires(JUDD C.et al, 2002).
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Partie I Recherche bibliographique
II.1.1.2-Genre d’Astragalus
L'Astragalus L. (Fabacée), est un genre largement distribué dans toutes les régions tempérées du
monde, localisées principalement en Europe, l'Asie et Amérique du Nord. Environ 2000 des
espèces ont été décrites, 372 d'entre elles en Amérique du Nord et 133 en Europe (RIOS J. L.,
1997).
Le genre Astragalus de la famille des Fabacées comprend plus de 1500 espèces dont la plupart
se répartissent en Orient. Une cinquantaine d’espèces sont retrouvées en Afrique du Nord et
quinze environ au Sahara (HASSENT et al, 2012).
Calice tubuleux en cloche, à 5 dents subégales ou très inégales. Pétales généralement longuement
onguiculés. Etendard dressé. Carène égalant environ les ailes. Etamines diadelphes, à gaine
fendue au sommet. Ovaire pluri ovulé à ovules sur 2 rangs. Gousse de forme variée, rarement
uniloculaire, généralement à 2 loges plus ou moins complètes par intro flexion de l'une des
sutures, déhiscente ou indéhiscente. Feuilles imparipennées en général, stipulées (QUEZELP.,
1962).
Le genre astragale semble fortement uniforme d'un point de vue chimique, avec deux genres de
principes pharmacologiquement actifs et trois genres différents décomposés toxiques. Dans
l'ancien groupe les polysaccharides et les saponines se tiennent dehors, et dans la seconde, les
23
Partie I Recherche bibliographique
L'utilisation la plus commune de l'astragale est comme fourrage pour bétail et animaux
sauvages, bien que 32 ait été identifiés pour l’utilisation en nourritures, médecines, produits de
beauté, comme substitue pour le thé ou le café, ou comme sources des gommes végétales.
cependant, un certain nombre d'espèces sont toxiques pour le bétail et dans beaucoup de cas les
toxines ont pu être transférées aux humains par la viande ou le lait (RIOSJ .L et al ,1997).
Plantes à tige bien développée, élevée ; fleures en grappes axillaires, sessiles ou presque ;
feuilles de grande taille, à pétioles robustes à très nombreuses folioles (OZENDA P ,1977).
Fleur grande, de 25 mm ; gousse à parois épaisses ligneuse très dure, ornée de grosses nervures
et terminée en bec robuste et long Assez commun dans tout le Sahara Endémique (OZENDA
P ,1977).
24
Partie I Recherche bibliographique
Gousse Fleure
25
Partie I Recherche bibliographique
Position systématique
Embranchement Spermatophytes
Classe Dicotylédones
Famille Fabaceae
Espèce Gombo
Nom scientifique Astragalus gombo
L'Astragale contient de nombreux éléments actifs, tels que des flavonoïdes, des
polysaccharides, des glycosides tri terpènes, des acides aminés et des traces de minéraux. Les
différentes recherches sur l'Astragale démontrent que :
- les propriétés immunitaires de cette plante semblent ramener à un niveau normal le nombre de
cellules T (un globule blanc de la famille des lymphocytes) dans les cas de certains cancers.
26
Partie I Recherche bibliographique
- les recherches en laboratoire sur certains extraits de la racine ont démontré un effet protecteur
au niveau des cellules hépatiques soumises à certains toxiques. Un effet anti-inflammatoire a
également été constaté (SAOUDO M ,2007).
Comme agent thérapeutique, l’astragale est recommandé dans les cas de faiblesse,
engourdissements, asthme, nervosité, tendance aux infections, transpirations nocturnes, rhumes
et grippes, douleurs arthritiques, déficience du système immunitaire et insuffisance de production
d’urine (SAOUDO M, 2007).
Les feuilles d’Astragalus sont utilisées en médecine traditionnelle pour le traitement des
hémorroïdes (HASSEN T et al, 2012)
27
28
Partie II Etude expérimentale
Ouargla est l’une des principales oasis du Sahara algérien. Elle couvre une superficie de 163323
Km2environ, elle se situe approximativement à 750 km au sud d’Alger ces coordonnées
géographiques. La latitude est de 32° 45, Nord et 31° 45, Sud ; la longitude est de 5° 20, Est et 5°
40, Ouest (RouvillIos-B, 1975).
29
Partie II Etude expérimentale
Le climat de la région d’Ouargla est un climat désertique chaud de type saharien, caractérisé par
des précipitations très peu abondantes et irrégulières, par des températures élevées accusant des
amplitudes journalières et annuelles importantes et par une faible humidité relative de l’air. La
température moyenne annuelle est de 23,74C°. Le mois Juillet est le plus chaud, avec une
température moyenne de 36,22C° et le mois de Janvier est le plus froid avec une température
moyenne de 12 ,07C°.
La durée d’insolation maximum est de 327 heures au mois de Juillet, et un minimum de 213 ,18
heures au mois de Novembre.les vents fréquents durant toute l’année, avec une moyenne qui
varie entre 2, 62 et 4,81m /s . L’humidité relative de l’aire elle diminue au mois de Janvier
59,64% jusqu’au mois de Juillet 26 ,55%, puis elle augmente pour atteindre une moyenne de
59 ,41% au mois de Décembre. L’évaporation maximum est 459,49 mm au mois de Juillet par
conter la quantité minimal avec104,56 mm au mois de Décembre, le cumule annuel est de
3239 ,80 mm(O.N.M ; 2012).
La plante Astragalus gombo a été récoltée le mois de juin 2013 dans la région d’Ouargla, sécher
à l’air libre durant les 2 mois suivants (Juillet et Aout), les deux parties racinaire et aérienne sont
découpées afin d’être analyser séparément et broyées pour avoir des particules fines de l’ordre de
2mm.
III.4.1.1- Principe : La teneur en humidité des aliments est déterminée par la perte de poids
subie après séchage à une température de 103°C pendant 4h.Tout fois ce protocole doit être
adapté suivant la nature de l’échantillon.( AFNOR )
30
Partie II Etude expérimentale
III.4.1.2.-Calcul
PE −(P1−P0)
Humidité(%) = × 100
PE
Le broyat sec de l’Astragalus gombo subit une macération (Liu et al., 2011) par l’eau
chaude à des températures différentes et des temps différents (tableau 7), centrifugé à 4000rpm,
pendant 15 minutes. L’extrait est concentré sous pression à une température de 65 C0 par un
rotavapeur (RV06-ML IKA℗ WERKE) à un 1/3 de volume initial (Liu et al., 2011) selon le
Les protéines sont éliminées par le réactif de SEVAG (éliminé par décantation), deux volumes
d’éthanol (96%) sont ajoutés à l’extrait et garder a 4 C0 durant toute la nuit (Zhao et al. 2010).
les polysaccharides bruts sont obtenus après centrifugation à 4000 rpm pendant 10 min, et un
lavage par l’acétone et conservés par lyophilisation (SHENG-Q.et al , 2010).
31
Partie II Etude expérimentale
Premier filtration
Culot
Surnageant
Décantation
Culot
Surnageant
Culot Surnageant
Polysaccharide
Séchage à 30°C
brut
33
Partie II Etude expérimentale
La normalité des données (le rendement en polysaccharide= la variable) a été test par un logiciel
de traitement de données nommé SPSS14.
34
Partie II Etude expérimentale
IV.1.1- Humidité :
L’humidité a été la première analyse effectuée, et pour assurer une communication correcte, et
de fournir une base de comparaison pour tous les autres analyses, tous les résultats ont été
comparés sur la base des matières sèches.
Concernant la teneur en humidité de notre échantillon, nous avons enregistré une teneur en eau
moyenne de 4,64%±0,011.
1,8
1,6
1,4
1,2
rendemet
1
0,8
rendement
0,6
0,4
0,2
0 min
0 50 100 150 200 250 300
Temps (min)
35
Partie II Etude expérimentale
Sheng-Q. H.et al., (2010) rapporte que le rendement en polysaccharide augmente en fonction
du temps. Cette décroissance est peut être due à la dégradation des polysaccharides par la
présence des microorganismes, non éliminer par un traitement physicochimique avant
d’entamer l’extraction.
(C°)
l’explication qu’on peut donner est liée à la solubilité et la diffusivité (et réduit sa viscosité) de la
matière primaire favoriser par les températures plus au moins élevées, une température très
36
Partie II Etude expérimentale
élevée peut avoir un effet contraire comme le montre la figure 09. Ces résultats son en accord
avec celle rapportés par (MEZIANE .S et al, 2008).
(min)
Nous avons enregistré un taux de rendent de 1.01 %± 0.33 après un temps d’extraction de 60 min
,le rendement augmente progressivement avec l'augmentation du temps d'extraction(après 100
37
Partie II Etude expérimentale
Par contre l’analyse de la variance (Tableau8) a montré un effet non significatif du temps
d’extraction sur le rendement en polysaccharide (p=0.84>p=0.05)
L’étude menue par Zhaojing Wang et al. (2007) sur l’extraction des polysaccharides de la Gynos
temma pentaphyllum Makinoa montré que la température et le temps d’extraction ont un effet
significatif sur le rendement contrairement à nos résultats ou juste la température a montré un
effet significatif sur le rendement en polysaccharides.
38
Conclusion générale
Cette étude nous a permis de déterminer les conditions optimales d’extraction des
polysaccharides par l’eau chaude, une température de 70C° pendant un temps d’extraction de
100 min à donner le meilleur rendement soit 1.16% ±0.35.
par contre l’analyse de la variance à montré que le temps d’extraction ayant un effet négligeable
sur le rendement.
l’extraction des polysaccharides est peut être gérer par d’autre paramètres qu’on a pas pris en
considération dans ce travail tel que : la granulométrie des particules, la nature du milieu
d’extraction (neutre, acide , ou alcalin), nombre de répétition de l’extraction, et le rapport solide
/ solvant
Dans les travaux futurs on suggère que les effets des paramètres cités ci-dessus seront pris en
considération pour bien maitriser l’extraction des polysaccharides
39
Références bibliographique
Référence bibliographique
40
Référence bibliographique
- DAVID S. (1997) The molecular and supramole cular chemistry of carbohydrates ,BCH-CH, Oxfored
,pp1-2.
- DELTTRE CEDRIC (2005) Stratégie d’obtention d’oligosaccharides anioniques par dégradation
enzymatique de gluconate, pp4-11.
- DIVEKAR VARSHA B ,KALASKAR MOHAN G ,CHOUGULE POONAM D ,REDASANI VIVEK K
and BAHETI D(2010) Isolation and characterization of mucilage from Lepiduim Sativum Linn Seeds
,Intrernational journal of pharma Reseach et Development .Online (IJPRD),09974.9446.
- DJABOUN SADIA(1995) influence de l’hexane acidifié sur l’extraction de l’huile de grignon d’olive
assistée par micro-ondes, de uagister , université Mouloud Mammeri Tizi –Ouzou , chimie, pp30-32.
-
FABRE, MADELEINE-France(1989) nouvel heteropolysaccharide, procède permettant son obtention et son
application dans divers types d'industries, Bundesdruckerei –Berlin, 2p.
- HASSEN TEYET , OLFA HOUTA ,WAHIBA DOUKI , MEHAMED NEFFATI(2012) Composition
chimique et activité antioxydant de l’huile essentielle d’Astragalus gombo collecte a partir de deux site de
la Tunis, Journal de la société chimique de Tunisie, vol 14, 63p.
- HIJAZI M. (2011) Caractérisation structurale et fonctionnelle d'AGP31, une glycoprotéine atypique de la paroi chez
Arabidopsis thaliana, These de doctorat, Biosciences végétales , université de Toulouse , 14p.
- IUB-IUPAC, Joint commission on Biochemical Nomenclature (1980), Journal of biological chemistry, Vol
257, pp 3352-3354.
- JACQUES-HENRY WEIL ,JUES BOULANGER ,NASSIM SALI, JOHAN AUWERX
,JOUCEF ,DIDIER DEYS ,CATHERINE FLORENTY ,CLOUD KEDINGE , SEAN
MONTREUIL ,MARC LE MAIRE ,GERARD REBEL,MAURICE OFFNER ,PIEVE OUTET ,JEAN-
MICHEL ROSSIGNOL(2005) Biochimie général cours et exercice corrigé ,10 éd, DUNOD, Paris ,pp191-
202.
- JODD CAMPBELL et KELLOGG STEVENS(2002) Botanique systématique une perspective
phylogénétique, Boeck Université, 283p.
- JONG S C. BRIMINGHAN J M.(1993) Medicinal and therapeutic value of the shiitake mushrooms ,Adv
.Appl. Microbial- 39-153-184.
- KESSOUS C. (2005) Biochimie structurale ,9éd, Publications Universitaires, Place centrale de Ben
AKNON (Alger), 60p.
- KOSSORI RLE, SANCHEZ C., BOUSTANI E-SE, MAUCOURT MN, SOUVAIRE Y., MEJEAN L. and
VILLAUME C. (2000) Comparison of effects of prickely pear (Opuntia fiais indica Sp) fruit Arabic gum
carrageenan alginic acid, locust bean gum and citrus pectin on viscosity and in vitro digestibility of casein
.Journal of the science of food and Agriculture vol 80(3), pp 359-364.
- LAURE RINALDI (2013) Impact de l’ajout de polysaccharides dans des matrices laitières gélifiées acides
sur la digestion gastro- intestinale des protéines et des réponses métabolique associées, Thèse de doctorat
en sciences et technologie des aliments , Université la val, pp2-4 .
41
Référence bibliographique
- LUC-WERTZ JEAN (2010) L’amidon et le PLA deux biopolymères sur le marche, ValBiom , Wallonne,
pp 4-6.
- MARLENE FRENOT , ELISABETH VICRLING (2001) Biochimie des aliment distique du sujet bien
portant, Biosciences et techniques sciences des aliments ,2éd, Welters Kluwer, Franc.68p.
- MKEDDER ILHAM (2012) Modification et dégradation enzymatique de polysaccharides : investigation
par imagerie et diffusion de rayonnement , thèses de doctorat université de Grenoble, chimie des
polymères, 21p.
- MOBLIN M S. KUREK I. , JACOB- WILK D. DELMER D P. (2002) cellulose biosynthesis in plants
from genes to rosettes , plant cell physiol 43 pp1407-1420.
- MOUSSARD CHRISTIAN (2007) Biochimie structural et métabolique ,3éd, Bruxelles,77p.
- MURRAY K., GRANNER D. , MAYES P et RODWELL V . (1999) Biochimie, éd. MCGRAW- HILL,
Italia. 641p.
- NICOLAS BORDENAVE (2009) Hemicelluloses , Nbordena@ Purdus edu.
- O.N.M. (2013) :Données climatiques de Ouargla. O.N.M .,Ouargla. 3P.
- OZENDA P(1987), Flore de Sahara ,2Ed centre nationale de la recherche scientifique, paris, 3000p.
- PATRICE FAURE (2011) Structure des glucides ,Biochimie métabolique, ITCE de la faculté de médecine
et de la pharmacie , Grenoble,43p.
- QUEZEL P. et SANTA S. (1962) Nouvelle flore de l’Algérie et des Régions désertiques méridionales,
Centre Nationale de la recherche scientifique, paris, 7, 545p.
- RAPHAIL BADOUD, JURG LOLGER(2010) Science et technologies des aliment principales de dinie des
constituent et de technologie des procédes, Alain Etournand PPUR, Presses, ISBN 2880747546,
9782880747541, pp 237-241.
- Rios J L.et WATERMAN P G. (1997) A review of the pharmacology and toxicology of Astragalus
phototherapy research, Vol 11, PP411-418.
- ROUVILLOIS-BRIGOL , M . (1975) le pays de Ouargla ( Sahara Algérien ) , variation et organisation
d’un espace rural en milieu désertique , Pub . Univ-Sorbonne, Paris, 361p.
- RUIZ-HERRERA J. (1992), structure, synthesis and Assembly fungal cell wall, Florida V.S.ACRC, Press
Inc 248p.
- SABOUR AULT(1985) Biochimie Glucides Lipides métabolisme, Intermédiaire Breal, Paris, 25p.
- SANDRINE GARON – CARDIERE (2004) Etude structural des polysaccharides pariétaux de l’algue
rouge Asparagopis armata (Bonnemaisoniales), Thèse de doctorat en Biochimie, Université de Bretagne
occidentale, pp 6 -7.
- SAOUDI MOUNA(2007) Les Bactérie ondulant les légumineuses ; Caractérisation des bactéries associées
aux nodules de la légumineuse Astragalus Armatus , Thèse de magister ,Université Mentouri de
Constantine ,27p.
- SHENG-QUAN HUANG, JIN-WEI LI , ZHOU WANG, HUA-XIN PAN , JIANG-XU CHEN and
ZHENG-XIANG NING (2010) Optimization of Alkaline Extraction of Polysaccharides from Ganoderma
42
Référence bibliographique
lucidum and Their Effect on Immune Function in Mice, molecules journal , vol 15, ISSN 1420-3049, pp
3696-3697 .
- VERCAITERE J. (2012) Formules et illustration du cours de pharmacognosie ,ed UMN , pp40-41.
-
VOET D. VOET J G. (2005) Biochimie, 2éd, Bruxelles, pp 362-363.
- WARRAND J(2004) Etude structure et propriétés en solution des polysaccharides constitutifs de mucilage
de lin (Linum Usitassimum) ,Thèse de doctorat de l’université de Picardie Jules verne ,238p.
- WHISTHER R L. CHEN C C. (1991) Fibre science and technology, vol 11, pp 287-319.
- WIDMER FRANCOIS, ROLAND BEFFA (2000) Aide mémoire de biochimie et biologie moléculaire 2éd
Edition médicales inter nationales, condres, Paris –new York .200p.
- YU KW. ,KIYOHRA H. , MATSUMOTO T. ,YARG H C. and YANADA H. (2001) Structural
caractérisation of intestinal immune system modulating new arabino-3,6-galactan from rhizones of
Atractylodes of Atractylodes lancea D C ,Carbohydrate polymers ,pp147-156.
- ZHAOJING W. DIANHUI L.CIA E.(2007) Optimization of polysaccharides extraction from Gyuostemma
pentaphyllum Makino using Uniform Design, Carbohydrate polymers ,vol 69, pp311-317.
43
Annexes
Annexes
A B C D
Poids échantillons(PE) 10g 10g 15g 15g
Poids capsule vide (P0) 2.57g 2.55g 2.55g 2.55g
Poids(C+E)(P1) 12.02g 12.01g 16.71g 16.70g
(P1-P0) 9.63g 9.46g 14.16g 14.15g
Abstract
The aim of this study is to optimize the extraction of polysaccharides by varying the extraction
conditions; time and temperature of the spontaneous plant of Astragalus gombo known as
FAILA name, the study showed that a temperature of 70 ° C and an extraction during 100min are
the best conditions to obtain a maximum yield of crudes polysaccharides.
ملخص
هدا العمل يهدف إلى تحسين ضروف إستخالص متعدد السكريات بتغير الوقت و درجة الح اررة في وسط
دقيقة هي الشروط المناسبة100 درجة مئوية و70 نستنتج أن, معتدل من النبتة العفوية المسماة الفيمة
بالمئة1.16 لنتحصل عمى أحسن مردود