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UNIVERSITE KASDI MERBAH – OUARGLA -

FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE

Département des Sciences Agronomiques

UNIVERSITE KASDI
MERBAH-OUARGLA

MEMOIRE DE FIN D’ETUDE

En vue de L’obtention Du Diplôme d’Ingénieur d’Etat en Sciences Agronomiques


Spécialité : Technologie alimentaire
THEME

Optimisation des conditions d’extraction des


polysaccharides issus d’Astragalus gombo bunge
(Fabaceae) récolté au Sahara septentrional Est
algérien.

Présenté et soutenu publiquement par :

Melle Tinamri Mabrouka


Melle Lagmi Ikram

Le17 / 06/2014

Devant le jury- :
 BOUAL Z. (MAA) Président (Univ Ouargla).
 CHOUANA T. (MAA) Encadreur ( Univ Ouargla).
 LOUNICI S. (MAA) Examinateur (Univ Ouargla).
 CHAICHE K.. (MAA) Examinateur (Univ Ouargla)

Année Universitaire : 2013/2014


Remerciements

Avant tout, nous remercions, Dieu tout puissant de nous avoir donné le courage, la force, la
volonté et la patience pour réaliser ce travail.

Au terme de ce modeste travail, nous tenons à remercier infiniment et avec gratitude

Mr. CHOUANA T. Qui a accepté de nous encadrer, de diriger ce travail, et pour son aide
très précieuse, et ses corrections sérieuses, qu’il nous a apportées et sa patience.

Nos vifs et sincères remerciements vont à Mr. BOUAL Z. pour son aide et pour avoir accepté
de présider ce jury.

Nous remercions Mr. CHAICH K. et Meme . LOUNICI S., d’avoir accepté, d'examiner ce
modeste travail.

Nous tenons à exprimer nos remerciements :

A tous les étudiants de la promotion 2009 - 2014.

A tous les enseignants de la faculté sciences de la nature et de la vie. Notamment Mr.


BELAROUSSI M.

Nos remerciements vont également à tout Les techniciens des laboratoires pédagogiques
représentés Principalement par Mr. EL AIECHE et toute l’équipe : Amina, Houda
,Imen ,Amal …. Et les techniciens des laboratoires de recherche ECOSYS et le laboratoire
BIO RESOURCE : Mme Kaci.

À toutes personnes qui a contribué de près ou de loin à la réalisation de ce modeste travail.

LAGMI IKRAM
ET
TINAMRI MABROUKA
Figure N° Titres Page
01 la structure d’A D- galacturonan 07

02 Représentation de la molécule de cellulose 11

03 Structure de 4-O-méthyl-D-glucorono-D-xylan 13
04 Répartition du genre Astragalus dans le monde 23

05 Astragalus gombo 26

06 Situation géographique de la région d’Ouargla 29

07 Diagramme d’extraction des polysaccharides par 32


l’eau chaude

08 Taux de rendement en polysaccharides en fonction 35


du temps d’extraction.

09 Effet de la température sur le rendement en 36


polysaccharides .
10 Effet de temps sur le rendement en polysaccharide . 38
Tableaux N° Titres Page
01 origine des principaux polysaccharides 07

02 Fonctions et applications des principaux polysaccharides 14


utilisés dans l’industrie alimentaire
03 les activités biologiques des polysaccharides signalées par les 17
scientifiques et quels types de polysaccharides dotés de ces
activités
04 Systématique d’Astragalus et al gombo 27

05 Variation des facteurs d’extraction des polysaccharides 33


brute
06 Effet de température sur le rendement des polysaccharides 37

07 Effet de temps sur le rendement des polysaccharides 38


Abréviation Signification
GAG Glycosaminoglycan
Glc Glucose
AC Acide
LM Low methoxy (bas méthoxy)

HM High methoxy ( haut méthoxy)

ºC Degrés sur susse


m /s Mètre sur seconde
mm Millimètre
rpm rotations per minute

T Toure
ddL Dégrée de liberté
p Probabilité

Fcl F calculé ( teste F)

SCE Comme carré des écarts

PE Poids échantillons
P0 Poids capsule vide
P1 Poids de capsule + poids d’échantillons
H Humidité
MH Moyenne d’humidité
Ms g Matière sèche en gramme
R Rendement
PEB Poids de l’extraie brut de polysaccharide
PMs Poids de matière sèche en gramme
Titre page

Introduction générale 01

Partie 1 : recherche bibliographique

Chapitre I : généralité sur les polysaccharides 02


I .1 - Généralités sur les glucides 02
I.1.1- Les Oses 02
I .1.1.1- Oses neutres 02
I.1.1.2- Osamines 02
I.1.1.3- Acides uroniques 03
I.1.1.4- Acides sialiques 03
I.1 .2- Les osides 03
I.1 .2.1- Holosides 03
I.1.2.1.1- Diholosides 03
I.1.2.1.2- Triholosides 04
I.1 .2.2- Les polysaccharides 04
I.1.2.2.1- Nomenclateur des polysaccharides 05
I.1.2.2.2- Classification des polysaccharides Selon leurs sources 07
I.1 .2.2.2.1- Polysaccharides d’origine animale 08
I.1.2.2.2.1.1- Le glycogène 08
I.1.2.2.2.1.2- La chitine 08
I.1.2 .2.2.1.3- L’héparine 09
I.1.2.2 .2.2- Polysaccharides des algues 09
I.1.2.2.2.3- Polysaccharides bactériens et fongiques 09
I.1.2 .2.2.3.1- Polysaccharides fongiques 09
I.1.2.2.2.3.2- Polysaccharides des bactéries 10
I.1.2.2.2.4- Polysaccharides des végétaux 10
I.1.2.2.2.4.1- Polysaccharides de réserve 10
I.1.2.2.2.4.1.1- L’amidon 10
I.1 .2.2 .2.4.2- Polysaccharides de la structure 11
I.1.2.2.2.4.2.1- La cellulose 11
I.1.2.2.2.4.2.2- Pectine 12
I.1.2.2.2.4.2.3- Hémicelluloses 12
I.1.2.2.2.4.2.4- Les xylanes 13
I.1.2.2.2.4.3- Exsudats et mucilages 13
I.1.2.2.2.4.3.1- Gommes 13
I.1.2.2.2.4.3.2- Mucilages 14
I.1.2.2 .3- Les applications des polysaccharides en médicine. 15
I.1.2.2.4- Les propretés physiques des polysaccharides 17
I.1.2 .2.5- Paramètres influençant l’extraction 18
I.1.2.2.5.1- Influence du solide 18
I.1.2.2.5.2- Influence du soluté 19
I.1 .2.2.5.3- Influence de la température d’extraction 19
I.1.2.2.5.4- Temps d’extraction ou Temps de contact liquide –solide 20
I.1 .2.2.5.5- Influence de l’agitation 20
I.1.2.3 - Hétérosides 20
Chapitre II- Botanique d’Astragalus gombo 22
II.1 - Présentation d’Astragalus gombo (Fabaceae) 22
II.1.1- La famille des Fabaceae 22
II.1.1.1- Caractéristiques botaniques des Fabaceae 22
II.1.1.2- Position systématique 23
II.1.2-Genre d’Astragalus 23
II.1.2.1- Repartions géographique 23
II.1.2.2- Description botanique 24
II.1.2.3- Les composés chimiques d’Astragalus 24
II.1.2 .4- L’utilisation des Astragales 24
II.1.3- L’espèce Astragalus gombo 24
II.1.3.1- Intérêts médicinal de la plante 27
Partie 2 : partes expérimentale
Chapitre III- Matériel et méthode 30
III.1- Présentation de la région d’étude 30
III.2- Principe d’étude 30
III.3 - Matériel végétal 30
III.4 - Teneur en humidité 30
III.4 .1- teneur en eau 30
III.4.1.1- principe 30
III.4.1.2- Calcul 31
III.4.2- Teneur en matière sèche 31
III.5- procédure d’extraction des polysaccharides bruts par l’eau chaude 31
III.5.1- Optimisation de l’extraction des polysaccharides 31
III. 6- Calcule des rendements 32
III.7-Analyse statistique 34
III .7.1-Analyse de variance 34
Chapitre V- Résultats et discussions 35
V.1- Les analyses de base 35
V.1.1- Humidité 35
V.2 – Extraction des polysaccharides dans la température ambiante 35
V.3 – Effet de la température sur le rendement en polysaccharides 36
V.4- – Effet de temps sur le rendement en polysaccharides 37
Conclusion
Références bibliographiques
Annexes
Résumé
Introduction
Introduction

Introduction
Les polysaccharides sont les macromolécules les plus abondants sur terre et dans les
océans. Ils sont fortement utilisés dans l'industrie agroalimentaire et pharmaceutique
(EFSTATHIOU T. et al 2012)
Ces macromolécules sont les éléments structuraux majeurs de la paroi des végétaux (ex :
cellulose, Carraghénanes, alginates). Ils présentent une variabilité structurale et une richesse
de propriétés physico-chimiques, que l'on ne rencontre chez aucune autre classe
d'organismes (WARRAND, 2004).
Le genre d’Astragale (famille de Fabaceae) contient de nombreux éléments actifs, tels
que des flavonoïdes, des glycosides triterpénes, des acides aminés et des traces de minéraux
et des polysaccharides (SAOUDO M., 2007). Les méthodes d’extraction de ce dernier est un
processus important pour leur application dans les différents industries (agroalimentaires,
pharmaceutiques …etc).
De nombreuses études ont montré l'effet des conditions d'extraction sur le rendement des
polysaccharides extraits (RENJIE, 2008).
Ce travail s'oriente sur l’optimisation des conditions d’extraction des polysaccharides
issus de l'Astragalus gombo (Fabaceae) récolté de Sahara septentrional Est algérien.
L’objectif recherché est d’établir un protocole d’extraction spécifique pour cette plante. Et de
déterminer les conditions le plus convenable pour l’obtention le meilleur rendement en
polysaccharides hydrosoluble de l’Astragalus gombo.
La présente étude s’articule autour de trois parties. La première partie comporte deux
chapitres, l’un rappelant la botanique de la plante étudié et l'autre sur les polysaccharides et
les différents paramètres influençant leur extraction.
La deuxième partie décrit les techniques d’extraction (matériel et méthodes) des
polysaccharides hydrosolubles dans par l’eau. Une troisième partie dans laquelle on a présenté
les principaux résultats obtenus.

1
Partie I

Recherche bibliographique
Partie I Recherche bibliographique

Chapitre I : Généralité sur les polysaccharides

I .1 - Généralités sur les glucides

Les glucides forment un groupe de composés très importants. Certains représente une source
d’énergie pour les organismes vivants , soit immédiatement utilisable (glucose ) , soit sous
forme de réserves (amidon , glycogène ) ; d’autres ont un rôle structurale (cellulose , chitine ,
acide hyaluronique ) ; d’autres , enfin , possèdent un rôle biologique importants comme celui
de signaux de reconnaissance (glycanes des glycoprotéines et des glycolipides) . Les termes
sucres et hydrates de carbone se rencontrent encore dans certains ouvrages ; cette dernière
dénomination est due au fait qu’un grand nombre de composés répondent à la formule
Cn(H2O) n, mais n’est pas valable pour tous les glucides, on distinguera ainsi les oses ou
sucres simples et les osides dont l’hydrolyse livre plusieurs oses (JACQUES H. W. et al. ,
2005).

I.1.1- Les Oses

Les oses sont des polyalcools qui possèdent une fonction aldéhyde appelé aldose ou une
fonction cétone donnant les cétoses. Les oses qui sont les molécules élémentaires constitutives
des glucides peuvent avoir de 3 à8 atomes de carbone. Les plus répandus sont en C3 (trioses),
C4 (tétroses), C5 (pentoses) et C6 (hexoses). Le plus connu est le glucose comme type
d’aldose et le fructose dans le cas des cétones (CLANDE COSTES., 1980).

Les oses sont divisés en quatre catégories : oses neutres, Osamines, acides uroniques, acides
sialiques (JACQUES H. W. et al. , 2005).

I.1 .1.1- Oses neutres

On classe parmi les oses neutres les glucides qui ne possèdent, outre la fonction aldéhydique
ou cétonique, que des fonctions alcooliques tel que le D-glucose, le D – galactose le D-
mannose et le D- xylose (JACQUES H. W. et al. , 2005).

I.1 .1.2- Osamines

Ils dérivent des oses par remplacement d’un hydroxyle (généralement celui porté par le C2 par
une fonction amine.

2
Partie I Recherche bibliographique

Ce sont essentiellement des hexosamines correspondant à la substitution de l’OH en C 2 par


un groupement NH2 (2- amino-2-désoxyhexoses en nomenclature internationale). En général,
la fonction amine est sous forme N-acétylée (SABOURAULTD. et al. ,1985).

I.1.1.3- Acides uroniques

Les acides uroniques sont les produits d'oxydation des hexoses par des déshydrogénases
spécifiques. La fonction alcool primaire est oxydée en acide carboxylique. Les acides D-
glucuroniques et D-galacturoniques sont des constituants habituels des polysaccharides pariétaux
en particulier de la pectine, des mucilages acides et de la plupart des sécrétions
polysaccharidiques comme la gomme de Sterculia(BRUNETON, 1999).

L’acide D-glycuronique (encore appelé glucuronique) est l’un des acides uroniques les plus
répandus et on le trouve dans divers polyosides ; en outre, il participe aux processus de
détoxification (JACQUES H. W. et al. , 2005).

I.1.1.4- Acides sialiques

L’acide sialique est un sucre à 9 atomes de carbone, dérivant de la condensation d’une acétyl-
hexoamine avec de l’acide pyruvique.

L’acide sialique ou acide N-acétyl-neuraminique doit être considéré comme le résultat de


condensation aldolique d’une molécule de N-acétyl-mannosamine avec une molécule d’acide
pyruvique (BRUNETON, 1999).

I .1 .2- Les osides

Les osides résultent de la combinaison, par l'intermédiaire de liaisons dit es osidiques, de


plusieurs molécules d'oses (holosides), ou d'oses avec les composés non glucidiques
(hétérosides)(BRUNETON, 1999).

I .2.1- Holosides

Les holosides résultent de l’association de n molécules d’oses. La liaison qui unit les molécules
d’oses est une liaison O-osidique ou liaison glycosidique. Cette liaison est formée par
condensation de l’hydroxyle du C anomérique d’un ose avec l’un des hydroxyles de l’autre ose
(KESSOUS C., 2005).

3
Partie I Recherche bibliographique

I.1.2.1.1- Diholosides

Deux oses sont unis entre eux par une liaison osidique (ou glycosidique) pour donner un
diholoside. Selon le mode de liaison des 2 oses le diholoside est non réducteur ou réducteur
(PATRICE F., 2011).

Diholoside non réducteur : liaison osido-oside il y a condensation de la fonction


hémiacétalique de chaque ose par une liaison osido- oside

Diholoside réducteur : liaison osido-ose il y a condensation d’une fonction hémiacétalique


d’un ose avec une fonction alcoolique d’un second ose par une liaison osido-ose. Il reste donc
dans le diholoside un –OH hémiacétalique libre responsable du pouvoir réducteur de la molécule
(PATRICE F. ,2011).

I.1.2.1.2- Triholosides :
Le plus répandu est le raffinose ou α D galactopyranosyl ( 1- 6) α D- glucopyranosyl (1-2) β D
fructofuranoside , il s’agit d’un sucre non réducteur présent dans plusieurs plantes et surtout la
betterave(BEN SALAH A.et al .,2007).
I.1 .2.2- Les polysaccharides :
Les polysaccharides sont des glucides résultant de la polymérisation d’un nombre d’ose
dépassant quelques dizaines (la limite est très arbitraire). On distingue les homopolysaccharides
et les hétéros polysaccharides, selon qu’il y a un seul type d’unité constitutive (oses), ou deux ou
davantage. Il ne faut pas confondre cette distinction avec celle caractérisant les holosides et
hétérosides. Dans une nomenclature moderne. Le terme de polysaccharides devrait avoir été
remplacé par glycanes, surtout usité en anglais (glycans), mais dont l’usage ne s’est pas imposé
en français (WIDMER F.et al. 2000).

Les polysaccharides sont de longes chaines polymères d’unités de monosaccharides. Selon le


polysaccharide, les chaines peuvent être linéaires ou ramifiées. Chez les animaux, l’excès de
glucose est stocké sous forme d’un long polysaccharide ramifié appelé glycogène alors que chez
la majorité des végétaux, la forme principale de stockage du glucose est l’amidon, un autre long
polysaccharide. Les bactéries et les levures stockent le glucose polymérisé sous forme d’un autre
type de polysaccharide : le dextrane (HAMES B.D et al., 2006).

Il s’agit de réserves nutritives qui peuvent être dégradées en cas de besoin, les monosaccharides
résultants étant ensuite métabolisés pour fournir l’énergie nécessaire. Au contraire, la cellulose
est un polysaccharide de structure des parois cellulaires végétales (HAMES B.D et al., 2006).

4
Partie I Recherche bibliographique

Homopolysaccharides

Les homopolysaccharides peuvent être classés en fonction de la nature de leur unité


monosaccharide. Par exemple, les glucanes sont des polymères de glucose et les galactanes sont
des polymères de galactose (VOET D.et al. 2005).

Hétéropolysaccharides

Les hétéropolysaccharides comportent comme leur nom l’indique, plusieurs types d’oses et
jouent un rôle important dans le tissu de soutien et la matrice extracellulaire de l’organisme. Ils
constituent de longues chaines d’oses indépendantes ou liées à un noyau protéique. Dans ce
dernier cas, le volume de la chaine osidiques est bien plus important que celui de la partie
protéique (WIDMER F.et al. 2000).

Les hétéropolysaccharides sont des molécules de haut poids moléculaire contenant au moins
deux per de monosaccharides formant un motif de base polymérisé (FABRE M. F, 1989)

I.1.2.2.1- Nomenclateur des polysaccharides (IUB-IUPAC., 1980) :

La nomenclature de polysaccharide suit les principes généraux des produits organiques


stables et la nomenclature de carbohydrase.

Le polysaccharide (glycan) est le nom donné à une macromolécule composée d'un grand
nombre de monosaccharide, les résidus (de glycose) se sont liés entre eux par les liaisons
glycosidiques.

Le terme poly (g1ycose) n'est pas tout à fait un synonyme pour le polysaccharide (glycan) parce
qu'il inclut des macromolécules composées de résidus de glycose liés par des liaisons non
glycosidiques.

Les polysaccharides peuvent être linéaires, embranché, ou répétition.

Bien que la plupart des polysaccharides comportent un résidu réducteur de monosaccharide à une
de ces extrémités, par contre d’autres polysaccharides non aucun résidu réducteur aux deux
extrémités.

Pour des polysaccharides contenant une proportion substantielle de résidus de sucre aminés, la
dénomination polysaccharide peut être utilisée, bien que le terme glycosaminoglycan puisse être
employé.

5
Partie I Recherche bibliographique

Les polysaccharides composés d’un monosaccharide seulement sont décrits comme


homopolysaccharides (homoglycans).

De même, si le polysaccharide est composé de deux ou plusieurs différentes unités de


monomères, le nom hétéropolysaccharides (heteroglycan) peut être employé.

Le terme oligosaccharide est généralement employé pour des hydrates de carbone consistés de
deux à dix résidus de monosaccharide.

Le nom n’un polysaccharide (glycan) constitué par un monosaccharide simple sera composé
par le nom du sucre composant et on ajoutant le suffixe ‘’an’’.

Par exemple : xylane pour des polymères de xylose, mannane pour des polymères de mannose, et
galactane pour des polymères de galactose. Le Cellulose et l'amidon sont les deux des glucanes,
car ils sont composés de résidus de glucose.

Quand la configuration des résidus de monomère est connue,"D" ou "L" elle peut être incluse
au nom du polysaccharide.

Les noms assignés aux polysaccharides nouvellement découverts devraient finir par " an." (IUB-
IUPAC., 1980).

Un polysaccharide (glycan) composé entièrement de résidus acides glycuronique est appelé en


remplaçant l’acide d'IC" par "an."

Le nom générique pour ce groupe est "glycuronan" (DIXON H.P.F. , 1980).

6
Partie I Recherche bibliographique

Figure 1 : la structure de A D- galacturonan

Un polysaccharide composé entièrement de résidus de sucre aminés est appelé par la


nomenclature systématique concernant le sucre aminé.

Un hétéropolysaccharide (heteroglycan) est un polymère contenant deux genres ou plus de sucre


(glycose) ou sucre modifié (par exemple, aminodeoxyglycose ou acide glycuronique)

Les polymères contenant les résidus en covalence liés de monosaccharide et d'acide aminé se
nomment des glycoprotéines, des protéoglycans, et des peptidoglycans.

I. 1.2.2.2- Classification des polysaccharides Selon leurs sources

Tableau 1 : origine des principaux polysaccharides

Origine des polysaccharides polysaccharides


Végétal Amidon
Cellulose
pectines
Gomme
Algale Alginates
Agars
Carraghénanes
fucanes
Animal Héparine
Chondroitine
Microbien Dextranes
Xanthanes
Source : (SANDRINE G., 2004).

7
Partie I Recherche bibliographique

I.1.2.2.2.1- Polysaccharides d’origine animale :

Hormis le glycogène (α-D-glucane de réserve) et la chitine (polysaccharide de structure


rencontré chez les insectes, crustacés et champignons), les polysaccharides animaux
appartiennent à la famille des glycosaminoglycan (GAG) et sont issus des protéoglycanes. Ces
polymères sont soit impliqués dans la structure des tissus conjonctifs (hyaluronanes, dermatanes
sulfates et chondroïtines), soit dans des mécanismes de communications cellulaires via leurs
propriétés fonctionnelles (héparines et héparanes sulfate)(BOUAL Z .2009 in MURRAY et al
,1999).

Ces polymères sont constitués de résidus neutres (glycosamine) et acides (acide glucuronique
et/ou acide iduronique) plus ou moins sulfatés, unis par des liaisons glycosidiques de type α-
(1→4), β-(1→4) ou β-(1→3). L’héparine est un polymère fortement lié aux protéines formant
ainsi un protéoglycanes à l’état natif. Il s’agit d’une molécule à activité anticoagulante
immédiate. Il est utilisé dans le traitement curatif et préventif des maladies thromboemboliques
(BOUAL Z ,2009 in MURRAY et al. 1999).

I.1.2.2.2.1.1- Le glycogène

Le glycogène est un polyglucose que les animaux mettent en réserve dans le cytosol des
hépatocytes (glycémie : distribution à l’organisme) et dans la contraction musculaire (CHIKHI
A. et al. 2006).

Sa structure est celle de l’amylopectine avec les différences suivantes :

- Les branchements ont lieu tous les 8 à 12 résidus et même de 3 à 5 au centre de la


molécule

- La longueur moyenne des chaines ramifiées est plus courte Cette structure est donc plus
compacte que celle de l’amylopectine (CHIKHI A.et al. 2006).

I.1.2.2.2.1.2- La chitine

Elle diffère de la cellulose que par le C2 du glucose : son hydroxyle est remplacé par le
groupement acétylamine

Ce polymère GlcNac (β1 → 4) a la même structure que la cellulose. on le trouve dans le


squelette extérieure des invertébrés (CHIKHIA et al. , 2006 ).

8
Partie I Recherche bibliographique

La chitine est un homopolysaccharide linéaire. Les unités de N –acétylglucosamine sont unies


par des liaisons (β1→ 4). (La chitine a donc la même structure que la cellulose, à l’exception du
C-2 substitué non par un groupement hydroxyle, mais par un groupement aminé acétylé) le
renforcement des interactions entre rubans étirés rigidifie fibrilles et fibres (MOUSSARD C.,
2007).

I.1.2 .2.2.1.3- L’héparine

L’héparine est sécrétée par les mastocytes du tissu conjonctif. Elle est abondante dans le foie, les
muscles et le poumon. Elle possède une action anticoagulante et permet la libération de la
lipoprotéine lipase ou facteur clarifiant. L’ Héparane-sulfate ou héparitine-sulfate est présente
dans le derme et dans l’aorte (CHIKHI A et al ., 2006).

I.1.2.2 .2.2- Polysaccharides des algues

Les trois grandes classes d’algues auxquelles appartiennent les espèces actuellement utilisées ont
chacune leurs polysaccharides caractéristiques : acide alginique et fucanes des phaeophyceae
,galactanes sulfatés-Carraghénanes et agar agar-des Rhodophyceae, polysaccharides complexes,
souvent sulfatés, des Chlorophyceae(BRUNETON J., 1999).

L’utilisation des algues dans l’alimentation humaine est une pratique courante et ancienne en
Extrême-Orient : lenori (en feuilles ou en paillettes, préparé à partir de porphyra), le komdu (des
Laminariaséchés) ou le wakame (Undaria salés ou séchés). Le marché (plusieurs dizaines de
milliers de tonnes) est approvisionné par l’algoculture (BRUNETON J., 1999).

I.1.2.2.2.3- Polysaccharides bactériens et fongiques

- I.1.2 .2.2.3.1- Polysaccharides fongiques

Les champignons représentent un ensemble extrêmement hétérogène d’organismes dont les


individus sont distribués dans toutes sortes d’habitats .Cette caractéristique a pour conséquence
une grande diversité métabolique et biochimique .Les polysaccharides représentent un
pourcentage majeur de la biomasse fongique (jusqu’ à environ 75%).

Ces biopolymères assurent un rôle de soutien ou forment une gaine protectrice autour du
mycélium. Le principal représentant de ces polymères fongiques est la chitine
(DELTTRE ,2005).

9
Partie I Recherche bibliographique

I.1.2.2.2.3.2- Polysaccharides des bactéries

Les bactéries synthétisent plusieurs types de polysaccharides qui peuvent être classés en trois
grands groupes selon leur localisation dans la cellule :le premier groupe rassemble les
polysaccharides du cytosol ,ils servent de source de carbone et d’énergie à la cellule ;le second
groupe concerne les constituants de la paroi tels que les acides téichoïque et les peptidoglycanes ;
le troisième groupe qui ,réunit les polysaccharides élaborés par la cellule et secrétés dans le
milieu (DELTTRE,2005).

I.1.2.2.2.4- Polysaccharides des végétaux

Les sources de polysaccharides végétaux sont multiples. Il se distingue les


polysaccharides de réserve (amidon, caroube), les polysaccharides de structures (cellulose,
hémicellulose, pectines), les polysaccharides exsudats (gomme arabique) et enfin les mucilages
(WARRAND J. , 2004).

I.1.2.2.2.4.1- Polysaccharides de réserve

I.1.2.2.2.4.1.1- L’amidon

L’amidon est un polysaccharide d’origine végétale composé d’unités glucose C6H12O6.

Il est la principale substance glucidique de réserve des plantes supérieures. L’amidon représente
une fraction pondérale importante des matières premières agricoles, stocké dans les organes de
réserve des végétaux tels que les céréales (30-70% de la matière sèche), les tubercules (60-90 %)
et les légumineuses (25 à 50 %).

L’amidon constitue la principale source d’énergie pour la vie animale et la moitié de l’amidon
produit industriellement est destinée à l’alimentation humaine. C’est un composé nutritionnel
abondant, renouvelable, peu coûteux, qui trouve dans les aliments de multiples fonctions comme
épaississant, gélifiant, liant sous sa forme d’empois d’amidon granulaire et comme matières
sucrantes, liantes, support lorsqu’il est utilisé sous forme hydrolysé( LUC-WERTZ J., et
al. ,2011 ).

L’amidon consiste en deux glucanes structurellement différents : l’amylose, polymère linéaire


(c.-à-d. non branché) et l’amylopectine, polymère fortement branché. L’amylopectine est le
constituant principal de la plupart des amidons.

10
Partie I Recherche bibliographique

La teneur en chacun des constituants est différente suivant l’origine de l’amidon (LUC-WERTZ
J., 2011).

L’amylopectine c’est une macromolécule ramifiée formée d’un squelette de résidus D


glucopyranose reliée enter eux par liaison α (1→4) sur le quel se greffent des chaines
polyosidiques par des liaisons α (1→6) à raison de 5% des liaisons de la molécule. la degré de
polymérisation est très variable en fonction de l’espèce (MARLENE F. ,et al ., 2001).

L’amylose est formée de chaines de 250 à 300 résidus d’α- D-glucopyranose associés par des
liaisons osidiques 1→4, elle est donc équivalente à enchainement d’unités maltose. Par suite de
la structure spatiale de ces sucres, la chaine d’amylose n’est pas plane mais possède une
structure hélicoïdale assez lâche (AUDIGIE Cl., et al, 1983).

I.1.2.2 .2.4.2- Polysaccharides de la structure

I.1.2.2.2.4.2.1- La cellulose

La cellulose est une molécule stable, insoluble représentant 15 à 30% de la masse sèche de la
paroi primaire. Elle est synthétisée par des organismes aussi différents que les bactéries, les
champignons et les plantes. La cellulose est un homopolymère linéaire composé de 2 000 à 25
000 résidus de β-(1-4)-D-glucopyranose, dont le cellobiose (dimère de Glc) est le motif répétitif
(BRETT T.C., 2000).

Formule simplifiée de la structure de cellulose (DAVID S. ,1997).

Figure2 : Représentation de la molécule de cellulose (HIJAZI M. ,2011).

11
Partie I Recherche bibliographique

Les chaînes de cellulose ont une forte tendance à s’agréger entre elles en raison de leur
constitution chimique et de leur conformation spatiale. La disposition des hydroxyles libres des
résidus Glc permet l’établissement de liaisons hydrogènes intramoléculaires, stabilisant la
cellulose dans son orientation linéaire, ce qui lui confère une certaine rigidité. L’existence de
liaisons hydrogène inter-chaînes conduit à la formation de fibres, ce qui favorise l’établissement
d’un état solide ordonné, pseudocristallin et permet la formation de microfibrilles. La structure
fibrillaire très condensée de la cellulose explique sa résistance mécanique à la traction, ainsi que
son caractère non soluble dans l’eau (DOBLIN M.S., et al. 2002).

I.1.2.2.2.4.2.2- Pectine

Les pectines sont des molécules ramifiées avec une chaine principale composée d’acide
galacturonique lie en α – (1, 4). Certaines fonctions carbonyles (C-6) peuvent être estérifiées par
le méthanol ou amides. Les pectines possèdent des chaines latérales constituées de galactose,
d’arabinose et de xylose celles – ci sont partiellement dégradées par le procédé d’extraction
industriel. Elles sont présentes dans la plupart des fruits, mais sont surtout industriellement
extraites des citrons orange et pommes (RAPHAIL B., et al. ,2010).

La structure chimique consiste en un enchainement linéaire de résidus de l’acide galacturonique


liés en α (1-4) qui peuvent être intercalés par des molécules de rhamnoses. Des ramifications,
principalement constituées par de courtes chaînes latérales de sucres neutres (galactanes,
arabanes, xylanes...), sont rattachées à la chaîne principale. En raison de leur capacité de

s’associer par l’intermédiaire des ions calcium (Ca2+) (MKEDDER I., 2012 in VINCKEN J.,

2003).

Les pectines jouent un rôle capital dans l’architecture de la paroi ou elles assurent sa rigidité,

permettent l’adhésion cellulaire et participent au métabolisme cellulaire (MKEDDER I., 2012 in

VINCKEN J., 2003).

I.1.2.2.2.4.2.3- Hémicelluloses

Sont des hétéropolymères a courtes ramifications, le degré de polymérisation est faible,


inférieur à 200. Les liaisons entre monomères sont de type β (1-4), sauf si le D-galactose domine
dans ce cas, les liaison sont β (1-3) (MARLENE F. ,et al. ,2001).

La forme la plus commune d’hémicellulose (céréales) est polyxylane substitué par du L-


arabinose et de l’acide glucuronique (MARLENE F., et al. ,2001).

12
Partie I Recherche bibliographique

Les hémicelluloses sont plus ou moins solubles dans l’eau selon la nature des monomères
(MARLENE F., et al. ,2001).

Les hémicelluloses sont des polymères amorphes, constitués de pentoses ou d'hexoses mixtes de
sucres neutres (xylose, arabinose, mannose, galactose, glucose) et d’acides uroniques (l’acide
glucuronique et l’acide 4-O-méthyl glucuronique), essentiellement. Elles représentent 15 à 40%
de la matière végétale, et peuvent avoir un rôle structural et de réserve (COSGROVE D.J., et al.
,2005).

I.1.2.2.2.4.2.4- Les xylanes

Les xylanes sont les hémicelluloses principales des parois secondaires, et regroupent ; les
glucuronoxylanes où des résidus soit d’acide glucuronique soit de l'acide 4-O-méthyl-
glucuronique sont greffés sur la xylose de la chaine principale.

Les arabinoxylanes où les résidus xylose sont substitués par des résidus arabinose, les

Glucuronoarabinoxylanes qui ont un squelette de résidus xylose sur lequel se greffent

Des résidus arabinose et acide glucuronique (WHISTLER R.L et al. ,1991).

Figure3 : Structure de 4-O-méthyl-D-glucorono-D-xylan (NICOLAS


BORDENAVE, 2009)

I.1.2.2.2.4.3- Exsudats et mucilages

I.1.2.2.2.4.3.1- Gommes

Elles sont d’origine pathologique (gommasses), exsudation centrifuge spontanée ou forcée.


Surtout de Fabacées (VERCAITERE J. ,2011).

Les propriétés physico-chimiques des gommes d’origine végétale peuvent changèrent fonction
du site d’origine, de l’espèce et des propriétés du sol.

13
Partie I Recherche bibliographique

La viscosité de la gomme varie en fonction de la période de récolte: elle est faible en période de
pluies et élevée en période sèche. Le calibrage de la gomme. Tient compte de plusieurs variables
physico-chimiques dont la viscosité (SAMB A .et al. 2012).

I.1.2.2.2.4.3.2- Mucilages

Ce sont des constituants normaux des plantes. Ils ont un rôle protecteur (préviennent la
déshydratation des graines et leur conservent leurs facultés germinatives). Ils sont localisés dans
les graines le plus souvent. Il en existe de 2 sortes : acides (AC. uroniques) et neutres
(VERCAITERE J. ,2011).

Les mucilages sont des complexes de polysaccharide formés du sucre et les mucilages acides
uroniques d'unités forment les masses gluantes dans l'eau, sont en général hétérogènes en
composition (DIVEKAR V. B. ,et al. ,2010).

Tableaux2 : Fonctions et applications des principaux polysaccharides utilisés dans


l’industrie alimentaire :

Polymères Sources Fonctions Applications


principales

Amidon (Amylose et Graines et tiges Agent stabilisant,


Amylopectine) de céréales. texturant et gélifiant.

Carboxymethylcellulose Cellulose de plant Agent stabilisant, Crème glacée, pates à frire,


de coton. texturant rétention de sirops, mélanges à gâteaux,
l’eau. produits carnés.

Carraghénanes Algues rouges Agent stabilisant, Crème glacée, desserts, produits


(Gigartina, texturant et gélifiant carnés, assaisonnements,
Gracliaria, pudding instantanés.
Eucheuma ssp).

Alginates Algues brunes Agent stabilisant, Crème glacée, pudding


(Mavrocgstis,Asc texturant. instantanées, boissons.
ophyllum,
Lamincria,
Eckdonia ssp).

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Partie I Recherche bibliographique

Agar Algues rouges Agent gélifiant Produits laitiers, produits carnés.


(Geliduim ssp).

Gomme arabique Extrait de sève Agent stabilisant, Confiseries, boulangeries,


d’acacia Senegal. texturant et pâtisseries, boissons, sauces.
émulsifiant,
encapsulation.

Galactomannanes Gomme de guar Agent stabilisant, Produits laitiers, crème glacés,


et de locusie, rétention de l’eau. desserts, boulangeries,
gomme de graines pâtisseries.
de caroube.

Pectines Pommes, citron et Agent gélifiant, Confitures, agents de


autres fruits. texturant et stabilisant. conservation, boissons,
boulangeries, pâtisseries,
confiseries, produits laitiers.

Gomme de Astragalus ssp. Agent stabilisant, Produits laitiers,


tragacanthe texturant et gélifiant assaisonnements, sauces,
confiseries.

Gomme de Xanthane Xanthomonascam Agent stabilisant et Assaisonnements, boissons,


pestris. gélifiant. produits laitiers.

Source :(STEPHEN ET CHURMS ,1995).

I.1.2.2 .3- Les applications des polysaccharides en médicine.

Les polysaccharides sont les principales substances nutritives de la plupart des organismes Ils
fournissent l'énergie et les carbones nécessaires pour la biosynthèse de protéines, d'acides
nucléiques, de lipides et d'autres glucides (MARIBEL PACHECO in GRIFFIN, 1994).

Les herbes officinales, contenant des polysaccharides sont largement utilisées pour le traitement
des maladies dans la médecine traditionnelle et moderne.

Les polysaccharides issus des plantes médicinales africaines ont des activités immunostimulantes
et peuvent permettre de stimuler le système immunitaire dans le cas d’une fragilité de ce système
par certaines maladies (IPHAMETRA et al. 2010).

15
Partie I Recherche bibliographique

Les polysaccharides ont reçu, en raison de leurs propriétés immunomodulatrices, une attention
particulière de la part des chercheurs œuvrant dans le domaine biomédical. Plusieurs
polysaccharides fongiques ont en effet la particularité de stimuler les défenses de l'hôte en
favorisant la maturation, la différentiation et la prolifération des cellules immunitaires, ce qui
leur confère plusieurs propriétés thérapeutiques notamment des propriétés anticancérigènes,
antibactériennes et antivirales (JONG et al. 1993).

Les poly- et oligosaccharides représentent de véritables auxiliaires indispensables au bon


fonctionnement de la vie quotidienne. Un intérêt grandissant concerne leurs applications comme
activateurs biologiques. Les oligosaccharides sont de véritables modulateurs biologiques qui
participent à de nombreux phénomènes de signalisation dans l’organisme. Ainsi, les
oligosaccharides provenant de la dégradation des polysaccharides des plantes (xyloglucane et
pectine) ou de champignons (β-glucane et chitine) sont largement décrits comme des régulateurs
biologiques actifs, sur des mécanismes tels que la croissance, le développement cellulaire, la
symbiose et les réactions de défense (BOUAL Z .et al. ,2011).

Les pectines sont des fibres solubles constituées, Elles ont été associées à diverses activités
biologiques telles que des activités immunostimulante, anti-métastasique, anti-ulcère et anti-
néphrotique (YU et al. , 2001).

La présence de pectine affecterait aussi la digestion des protéines. Selon la nature des pectines et
leur quantité, la digestion de caséines a été affectée différemment et les nutriments azotés issus
de cette digestion variaient (LAURE R, in KOSSORI et al. , 2000).

Au niveau du côlon, les pectines comme toutes les fibres ont un rôle de pré biotique

(LAURE RINALDI in DONGOWSKI et al. , 2002) Ont montré que la présence de pectines LM
et HM (6.5 % dans une diète) augmentait la production d‘acides gras à courtes chaînes par les
bactéries du côlon, en particulier avec les pectines LM. Ces résultats suggèrent donc un impact
des pectines sur la croissance et le développement du microbiote colique (LAURE R in
DONGOWSKI et al, 2002).connu pour moduler des réponses hormonales postprandiales
régulant le métabolisme du glucose et l‘insulinémie (CANI et al. 2009).

Les α-glucanes sont les polysaccharides les plus abondants. Ils servent de composés structuraux
et de matériel de cimentation. Ils peuvent également être accumulés comme matériel
mucilagineux (excrétion cellulaire) protégeant les cellules fongiques contre la sécheresse (RUIZ-
HERRERA, 1992).

16
Partie I Recherche bibliographique

Tableau 3 : les activités biologiques des polysaccharides signalées par les scientifiques et
quels types de polysaccharides dotés de ces activités

Activités biologiques Actifs

Antibiotiques Composés aromatiques, aliphatiques,


phénoliques, terpènes
polysaccharides, oligosaccharides.

Anti-coagulant /anti-Thrombotique. Oligosaccharides sulfatés (fucanes).

Anti-Tumorale Polysaccharides, oligosaccharides.

Anti-Ulcère Polysaccharides, oligosaccharides


(Alginate, Carraghénanes).

Anti-Viral (Herpès ,HV) Polysaccharides (fucanes,


Carraghénanes, Galactomannanes,
Agaranes).

Hypocholestérémiante Iode, polysaccharides.

Traitement contre le goitre ; Iode.

Vermifuge Acide Kainique.

I.1.2.2.4- Les propretés physiques des polysaccharides

Les propretés seront mises en exergue en fonction de leur utilisation dans le domaine alimentaire.
La nature des polysaccharides influence fortement leurs propriétés physique .dans le domaine
alimentaire ce sont les propriétés en solution qui revêtent le plus importance en milieux aqueux les
molécules linéaires forment généralement des solutions plus visqueuses que les molécules branchées
car elles ont un volume hydrodynamique plus important

Les molécules linéaires ont aussi une plus grande tendance à précipiter en milieux concentré car
leur conformation favorise les interactions intermoléculaires. Il peut en résulter un état plus ou moins
cristallin ; comme pour l’amidon lors de la rétrogradation certains homoglycanes comme la cellulose

17
Partie I Recherche bibliographique

sont insolubles car les ponts hydrogène intra et intermoléculaires sont très stable et forment un réseau
cristallin hautement organisé empêchant la pénétration de l’eau.

Les composés ramifies sont souvent plus solubles que les composés linéaires et forment plus
facilement des gels car les interactions intermoléculaires sont moins fortes. Par contre, les solutions
sont souvent plus collantes à cause de l’enchevêtrement des chaines latérales.

La charge des polymères exerce aussi une influence sur leur comportement en fonction du PH ou
de la présence de sels. par exemple , la pectine et l’alginate précipitent à bas PH lorsque les
groupement carboxyles est neutralisée , par contre, lorsque ces groupement sont déprotonés la
répulsion entre les charge fait que les molécules prennent une conformation étendue, donnant des
solution visqueuses .la présence de sels peut aussi induire des association de chaines car des cation
divalents peuvent stabiliser des groupements chargé , et forme des structures de type Egg-box ou boite
a œufs .

La viscosité d’une solution est fonction de la taille de la structure des molécules. la structure des
molécules influence leur flexibilité ou leur rigidité, par exemple la rotation autour des liaisons
glycosidiques, et ainsi la forme que la molécule adoptera en solution (BADOUD R., et al. ,2010).

I.1.2 .2.5- Paramètres influençant l’extraction

I.1.2.2.5.1- Influence du solide

La taille et la structure de l’échantillon jouent un rôle important dans l’extraction. Plus la matière est
divisée finement et plus la surface d’échange est grande rendant le contact solide /liquide meilleur
.c’est pourquoi l’extraction des matières végétales est toujours précédée du broyage cependant, un
broyage poussé peut dégrader les principes actifs sous l’effet de la chaleur dégagée par les frottements.
Les particules trop petites peuvent aussi engendrer des problèmes d’imperméabilité du lit de filtration
(DJABOUN S. in LALOU A., 1995).

Lorsque la teneur en soluté est importante dans le solide, la structure poreuse peut être détruite par
broyage. La dissolution ultérieure du soluté devient plus facile. Dans les matières végétales, le soluté
est généralement occlus dans des cellules d’où il est extrait par un mécanisme de dialyse ou de
diffusion capillaire à travers des parois cellulaires (BOUSBIA N. ,2011).

18
Partie I Recherche bibliographique

I.1.2.2.5.2- Influence du soluté

La nature et l’état physique du soluté ont une importance primordiale et déterminent le mécanisme
de transfert de matière. Le soluté contenu dans ces corps est soit un solide, soit un liquide, stable ou
non à la chaleur ou à l’atmosphère. Il est réparti uniformément en des teneurs variables dans le solide.

Si le soluté est dispersé uniformément dans le solide, les parties superficielles sont dissoutes en
laissant derrière elles un solide poreux. Le solvant doit ensuite pénétrer cette couche extérieure avant
d’atteindre le soluté situé en profondeur. Le chemin du solvant est rendu de plus en plus difficile,
traduisant ainsi une diminution de la vitesse superficielle (BOUSBIA, 2011).

Le soluté à extraire contenu dans le corps solide influence considérablement la vitesse d’extraction de
part sa taille, sa localisation, sa répartition et ses liaisons dans la matière végétale avec d’autres
composés.

La vitesse de diffusion est inversement proportionnelle à la taille des particules du soluté, elle
diminue quand la taille de ces dernières augmente par exemple, les vitesses d’extraction des
composants hydrosolubles sont dans l’ordre croissant suivant : acides acétiques >sucre >pectines.

Les substances à extraire, localisées à l’intérieur des cellules, se présentent sous forme libre alors
que celles qui participent à la structure sont liées à d’autres composés. Leurs concentration varient
selon les conditions climatiques de croissance, les conditions de récoltes, l’état de maturité et le
conditionnement, c’est pourquoi elles varient beaucoup d’un lot à l’autre et au sein d’un même lot
(DJABOUN S. in LALOU A., 1995).

I.1 .2.2.5.3- Influence de la température d’extraction

La température d’extraction a aussi une très grande importance dans le processus d’extraction .Une
augmentation de la température favorise la solubilité et la diffusivité du soluté et réduit sa viscosité et
celle du solvant .Mais elle peut entrainer une diminution de la sélectivité suite à la perméabilité des
parois cellulaires par dénaturation. Elle peut également dénaturer le produit à extraire comme elle
augmente le risque de perte en solvant (DJABOUN S. in LALOU A., 1995).

L’élévation de la température permet l’accroissement de la solubilité et de la diffusivité du soluté et


la diminution de la viscosité. Elle doit être limitée pour éviter les risques d’extraction des composés
nuisibles et la dégradation thermique du soluté (BOUSBIA, 2011).

19
Partie I Recherche bibliographique

I.1.2.2.5.4- Temps d’extraction ou Temps de contact liquide –solide

Le temps est un autre paramètre qui doit être pris en considération dans l’extraction de la matière
végétale. Généralement l’augmentation du temps de contact augmente le rendement du produit extrait
.Il faut noter cependant qu’un temps prolongé peut causer la dégradation des extraits (DJABOUN S. in
LALOU A., 1995).

I.1 .2.2.5.5- Influence de l’agitation : (DJABOUN S. in LALOU A., 1995).

L’agitation mécanique permet le maintien en suspension des particules dans le solvant et


l’homogénéisation du milieu, elle a donc une grande influence sur le transfert de matière à l’interface
solide –liquide .la variation de la vitesse d’agitation ne semble pas avoir une grande influence sur le
rendement d’extraction (DJABOUN S. in LALOU A., 1995).

Le rendement de polysaccharides d'abord accrus et alors diminués avec l'augmentation de la


température, et le rendement le plus élevé ont été obtenus à la température du ºC 60 quand la
concentration en NaOH était constante. Le rendement a augmenté avec l'augmentation du
moment d'extraction où il avait lieu en-dessous de 80 minutes (Sheng-Q. H.et al. , 2010).

I.1.2.3 - Hétérosides

Les hétérosides résultent de la combinaison, avec élimination d’eau, de l’hydroxyle réducteur


d’un ose avec une substance non glucidique, l’aglycone ou gémine .La diversité des hétérosides
vient de leur gémine, appartenant à tous les groupes de métabolites secondaires, du mode de
liaison entre la gémine et le (ou les) ose (s), et de la partie glucidique, également variée. La
liaison hétérosidique se produit :

- Entre la fonction réductrice de l’ose et un groupement hydroxyle (alcoolique ou


phénolique) de l’aglycone ; ce sont les O-hétérosides ;
- Entre la fonction réductrice de l’ose et un thiol : S-hétérosides ;
- Entre la fonction réductrice de l’ose et un groupement aminé : N-hétérosides.
Par ailleurs, la liaison entre la gémine et l’ose se fait parfois carbone à carbone. Ces C-
hétérosides ne sont pas hydrolysables ni pas les acides, ni par voie enzymatique, seule une
oxydation permet la séparation gémine- ose.

Les N-hétérosides sont dérivés du ribose ou du désoxyribose lié à des bases pour former les
nucléotides présents dans toutes les cellules (ARN et ADN).

20
Partie I Recherche bibliographique

Les O- hétérosides sont les plus importants. Comme les S-hétérosides, ils sont essentiellement
végétaux. Ils forment des substances de réserve localisées dans les vacuoles cellulaires ; mais on
peut les considérer comme des déchets, possédant un rôle comparable aux glucuronides des
animaux supérieur. de nombreuses substances de ce groupe ont des propriétés pharmaceutiques
(CHARLES. A et al., 2008).

21
Partie I Recherche bibliographique

Chapitre II : Botanique d’Astragalus

II .1 - Présentation d’Astragalus gombo (Fabaceae)

II.1.1- La famille des Fabaceae

Le nom de la Famille des Fabaceae, découle du nom de genre Faba. Or, il se trouve que ce nom
de genre n'est plus utilisé, ayant laissé place au genre Vicia. Un représentant de l'ancien genre
Faba (du latin faba, fève) est la fève, anciennement Faba vulgaris, maintenant Vicia faba. La
famille est aussi appelée couramment Légumineuses (Leguminosae) ou Papilionacées
(Papilionaceae), mais ces ne sont pas de vrais synonymes. Chaque nom s'applique à une
condition particulière. Selon les classifications, la composition de cette famille varie (SAOUDO
M, 2007).

II.1.1.1- Caractéristiques botaniques des Fabaceae :

Plantes herbacées, arbustes, arbres ou plantes grimpantes à liant volubiles ou à vrilles ; à


métabolisme azoté élevé et acide aminés inhabituels, souvent nodules racinaires contenant des
bactéries fixatrices d’azote (Rhizobium) ; parfois des composés cyanogénétiques ; les plastes
sont des tubes criblés à cristaux protéiques et aussi à grains d’amidon. Poil variables (JUDD C.
et al, 2002).

Les feuilles: généralement alternes , composées pennées (ou bipennées ) à composées palmées ,
trifoliolées , ou unifoliolées; entières à parfois dentées-serrées , à nervation pennée , folioles
parfois transformées en vrilles; les stipules minuscules à foliacées, parfois transformées en
épines inflorescences presque toujours indéterminées , parfois réduites à une fleur solitaire ,
terminales ou axillaires(JUDD C.et al, 2002).

Les Fleurs : généralement hermaphrodites, actinomorphes à zygomorphes, à hypanthium court,


généralement cupuliforme. Sépales généralement 5, libres ou plus souvent soudés. valvaires ou
imbriqués, tous semblables, ou le pétale postérieur différant par la forme, la taille et la couleur
(c’est-à-dire formant un étendard), disposé intérieurement ou extérieurement dans le bouton, les
deux pétales inférieurs souvent soudés ou adhérents et formant une carène. Le nombre des
étamines est généralement 10, abritées dans le périanthe (JUDD C. et al. 2002).

22
Partie I Recherche bibliographique

II.1.1.2-Genre d’Astragalus

II.1.1.2.1 - Repartions géographique

L'Astragalus L. (Fabacée), est un genre largement distribué dans toutes les régions tempérées du
monde, localisées principalement en Europe, l'Asie et Amérique du Nord. Environ 2000 des
espèces ont été décrites, 372 d'entre elles en Amérique du Nord et 133 en Europe (RIOS J. L.,
1997).

Le genre Astragalus de la famille des Fabacées comprend plus de 1500 espèces dont la plupart
se répartissent en Orient. Une cinquantaine d’espèces sont retrouvées en Afrique du Nord et
quinze environ au Sahara (HASSENT et al, 2012).

Figure 4 : Répartition du genre Astragalus dans le monde (KASSOUI H ,2007).

II.1.2.2- Description botanique

Calice tubuleux en cloche, à 5 dents subégales ou très inégales. Pétales généralement longuement
onguiculés. Etendard dressé. Carène égalant environ les ailes. Etamines diadelphes, à gaine
fendue au sommet. Ovaire pluri ovulé à ovules sur 2 rangs. Gousse de forme variée, rarement
uniloculaire, généralement à 2 loges plus ou moins complètes par intro flexion de l'une des
sutures, déhiscente ou indéhiscente. Feuilles imparipennées en général, stipulées (QUEZELP.,
1962).

II.1.2.3- Les composés chimiques d’Astragalus

Le genre astragale semble fortement uniforme d'un point de vue chimique, avec deux genres de
principes pharmacologiquement actifs et trois genres différents décomposés toxiques. Dans
l'ancien groupe les polysaccharides et les saponines se tiennent dehors, et dans la seconde, les

23
Partie I Recherche bibliographique

alcaloïdes d'indolizidine (swainsonine et son dérivé d'N-oxyde, et le ntiginosine) les


endecaphyllinsnitro de composés (dérivés nitropropionque d'acide-glucose) et 3-
nitropropylglucosides, et les dérivés sélénifères (selenocysteine, - cystathionine, - cystine, et-
méthionine) là sont d'autres composés intéressants, tels que des flavonoïdes (flavonols, flavones,
isoflavones, et flavylions) sous les formes libres et glycosidiques ; lespterocarpans libèrent et
comme glucosides et dérivés acides organiques (acides homopilosinique et phaseique)
(RIOS J. L., 1997).

II.1.2 .4- L’utilisation des Astragales

L'utilisation la plus commune de l'astragale est comme fourrage pour bétail et animaux
sauvages, bien que 32 ait été identifiés pour l’utilisation en nourritures, médecines, produits de
beauté, comme substitue pour le thé ou le café, ou comme sources des gommes végétales.
cependant, un certain nombre d'espèces sont toxiques pour le bétail et dans beaucoup de cas les
toxines ont pu être transférées aux humains par la viande ou le lait (RIOSJ .L et al ,1997).

II.1.3- L’espèce Astragalus gombo : Plante vigoureuse au port dressé de 10 à 50 cm de haut.


Tiges bien développées .Feuilles de grande taille de couleur vert clair, avec de très nombreuses
petites folioles .Les pétioles robustes perdant leurs folioles deviennent coriaces et piquant à
l’extrémité. Fleurs jaunes, en grappe axillaires denses. Gousse couverte d’un duvet soyeux. Elle
est très résistante à la sécheresse (CHEHMA A, 2006).

Plantes à tige bien développée, élevée ; fleures en grappes axillaires, sessiles ou presque ;
feuilles de grande taille, à pétioles robustes à très nombreuses folioles (OZENDA P ,1977).

Fleur grande, de 25 mm ; gousse à parois épaisses ligneuse très dure, ornée de grosses nervures
et terminée en bec robuste et long Assez commun dans tout le Sahara Endémique (OZENDA
P ,1977).

Le photo en bas représente l’Astragalus gomb

24
Partie I Recherche bibliographique

Gousse Fleure

Photo 01: Astragalus gombo (BUNGE) (KHERRAZE MEHAMED El HAFED et al 2010).

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Partie I Recherche bibliographique

Habitat : En pieds isolés ou en petites colonies, dans les terrains sablonneux.

Répartition : Assez commun dans tout le Sahara .Endémique.

Période de végétation : Floraison en mars – avril (CHEHMA A ,2006).

Position systématique

Tableau 5 : Systématique d’Astragalus et al gombo

Règne Plantes (Végétal)

Embranchement Spermatophytes

Sous Embranchement Angiospermes

Classe Dicotylédones

Sous classe Dialypétales


Ordre Fables

Famille Fabaceae

Sous famille Papilionaceae


Genre Astragalus

Espèce Gombo
Nom scientifique Astragalus gombo

Nom vernaculaire Faila(‫)الفيلة‬

Source :( QUEZEL et SANTA., 1962 ; BOUMLIK ., 1995 ; CHEHMA ., 2006).

II.1.3.1- Intérêts médicinal de la plante

L'Astragale contient de nombreux éléments actifs, tels que des flavonoïdes, des
polysaccharides, des glycosides tri terpènes, des acides aminés et des traces de minéraux. Les
différentes recherches sur l'Astragale démontrent que :

- les propriétés immunitaires de cette plante semblent ramener à un niveau normal le nombre de
cellules T (un globule blanc de la famille des lymphocytes) dans les cas de certains cancers.

26
Partie I Recherche bibliographique

- les recherches en laboratoire sur certains extraits de la racine ont démontré un effet protecteur
au niveau des cellules hépatiques soumises à certains toxiques. Un effet anti-inflammatoire a
également été constaté (SAOUDO M ,2007).

- l'Astragale contient également un flavonoïde nommé astragalée, qui est un puissant


antioxydant.

Comme agent thérapeutique, l’astragale est recommandé dans les cas de faiblesse,
engourdissements, asthme, nervosité, tendance aux infections, transpirations nocturnes, rhumes
et grippes, douleurs arthritiques, déficience du système immunitaire et insuffisance de production
d’urine (SAOUDO M, 2007).

Les feuilles d’Astragalus sont utilisées en médecine traditionnelle pour le traitement des
hémorroïdes (HASSEN T et al, 2012)

27
28
Partie II Etude expérimentale

III.1- Matériels et méthodes

III.1- Présentation de la région d’étude

Ouargla est l’une des principales oasis du Sahara algérien. Elle couvre une superficie de 163323
Km2environ, elle se situe approximativement à 750 km au sud d’Alger ces coordonnées
géographiques. La latitude est de 32° 45, Nord et 31° 45, Sud ; la longitude est de 5° 20, Est et 5°
40, Ouest (RouvillIos-B, 1975).

Elle est limitée :

 Au Nord la wilaya de Djelfa et la wilaya d’El-Oued.


 A l’Est par Tunisie sur 500Km.
 Au sud par la wilaya de Tamanrasset et la wilaya d’Illizi.
 A l’Ouest par la wilaya de Ghardaïa.

Figure 06 : Situation géographique de la région d’Ouargla

29
Partie II Etude expérimentale

Le climat de la région d’Ouargla est un climat désertique chaud de type saharien, caractérisé par
des précipitations très peu abondantes et irrégulières, par des températures élevées accusant des
amplitudes journalières et annuelles importantes et par une faible humidité relative de l’air. La
température moyenne annuelle est de 23,74C°. Le mois Juillet est le plus chaud, avec une
température moyenne de 36,22C° et le mois de Janvier est le plus froid avec une température
moyenne de 12 ,07C°.

La durée d’insolation maximum est de 327 heures au mois de Juillet, et un minimum de 213 ,18
heures au mois de Novembre.les vents fréquents durant toute l’année, avec une moyenne qui
varie entre 2, 62 et 4,81m /s . L’humidité relative de l’aire elle diminue au mois de Janvier
59,64% jusqu’au mois de Juillet 26 ,55%, puis elle augmente pour atteindre une moyenne de
59 ,41% au mois de Décembre. L’évaporation maximum est 459,49 mm au mois de Juillet par
conter la quantité minimal avec104,56 mm au mois de Décembre, le cumule annuel est de
3239 ,80 mm(O.N.M ; 2012).

III.2- Principe d’étude

Le présente travaille à comme objectif l’optimisation de l’extraction des polysaccharides d’une


plante spontané connue sous le nom Faila et sous le nom scientifique Astragalus gombo.

III.3- Matériel végétal

Préparation du matériel végétale :

La plante Astragalus gombo a été récoltée le mois de juin 2013 dans la région d’Ouargla, sécher
à l’air libre durant les 2 mois suivants (Juillet et Aout), les deux parties racinaire et aérienne sont
découpées afin d’être analyser séparément et broyées pour avoir des particules fines de l’ordre de
2mm.

III.4 - Teneur en humidité

III.4.1-teneur en eau : On entend par la teneur en eau la perte de masse, exprimée en


pourcentage, subie par le produit dans les conditions de la présente norme.

III.4.1.1- Principe : La teneur en humidité des aliments est déterminée par la perte de poids
subie après séchage à une température de 103°C pendant 4h.Tout fois ce protocole doit être
adapté suivant la nature de l’échantillon.( AFNOR )

30
Partie II Etude expérimentale

III.4.1.2.-Calcul

Les résultats sont exprimés en pourcentage en masse du produit brut.

PE −(P1−P0)
Humidité(%) = × 100
PE

PE : poids d’échantillons, p1 : poids de capsule + poids d’échantillon, p0 : poids de capsule vide

Quatre répétition (A, B, C, D) on été pris pour déterminer la teneur en humidité

Moyenne d’humidité %= (HA%+HB%+HC%+HD%)/4

III.4.2- Teneur en matière sèche :

Matière sèche %=(100-Humidité)%

III.5- Procédure d’extraction des polysaccharides bruts par l’eau chaude:

III.5 .1-Optimisation de l’extraction des polysaccharides :

Le broyat sec de l’Astragalus gombo subit une macération (Liu et al., 2011) par l’eau
chaude à des températures différentes et des temps différents (tableau 7), centrifugé à 4000rpm,
pendant 15 minutes. L’extrait est concentré sous pression à une température de 65 C0 par un

rotavapeur (RV06-ML IKA℗ WERKE) à un 1/3 de volume initial (Liu et al., 2011) selon le

diagramme d’extraction présenté ci-dessous.

Les protéines sont éliminées par le réactif de SEVAG (éliminé par décantation), deux volumes
d’éthanol (96%) sont ajoutés à l’extrait et garder a 4 C0 durant toute la nuit (Zhao et al. 2010).
les polysaccharides bruts sont obtenus après centrifugation à 4000 rpm pendant 10 min, et un
lavage par l’acétone et conservés par lyophilisation (SHENG-Q.et al , 2010).

31
Partie II Etude expérimentale

Broyat (diamètre des particules 2mm)

Macération par l’eau distillée V/V

Centrifugation (4000 T pendant 15 min)

Premier filtration

Culot

Surnageant

Concentre jusqu’a 1/3 le


volume
Ajouter Chloroforme +
Butanol (SEVAGE)

Centrifuger (4000 T pendant


10min)

Décantation

Culot

Surnageant

Précipitation par 2 volumes d’éthanol


(durant toute la nuit a 4°C)

Centrifuger (4000 T pendant 10min)

Culot Surnageant

Lavage par l’acétone

Polysaccharide
Séchage à 30°C
brut

Diagramme d’extraction des polysaccharides par l’eau chaude 32


Partie II Etude expérimentale

Tableau 06 : variation des facteurs d’extraction des polysaccharides bruts :

Expérience Température (°C) Temps (min)



1 34 60
2 34 90
3 34 120
4 34 150
5 34 180
6 34 210
7 34 240
8 50 60
9 50 80
10 50 100
11 50 120
12 60 60
13 60 80
14 60 100
15 60 120
16 70 60
17 70 80
18 70 100
19 70 120
20 80 60
21 80 80
22 80 100
23 80 120
24 90 60
25 90 80
26 90 100
27 90 120
28 95 60
29 95 80
30 95 100
31 95 120

III.6- Calcul des rendements :

R(%) = [ PEB (g) / PMS(g)] ×100%

R : rendement en polysaccharides bruts


PEB : poids de l’extrait brut de polysaccharides en gramme .
PMS : poids de la matière sèche en gramme.

33
Partie II Etude expérimentale

III.7- Analyses statistique :

III. 7.1- L’analyse de la variance :

La normalité des données (le rendement en polysaccharide= la variable) a été test par un logiciel
de traitement de données nommé SPSS14.

L’analyse de la variance montrant l’effet des facteurs d’extraction à savoir la température et le


temps (= observations) sur le rendement (variable) on été traiter par un logiciel STATISTIC 04.

34
Partie II Etude expérimentale

Chapitre IV : résultat et discutions

IV.1- Les analyses de base :

IV.1.1- Humidité :

L’humidité a été la première analyse effectuée, et pour assurer une communication correcte, et
de fournir une base de comparaison pour tous les autres analyses, tous les résultats ont été
comparés sur la base des matières sèches.

Concernant la teneur en humidité de notre échantillon, nous avons enregistré une teneur en eau
moyenne de 4,64%±0,011.

IV.2-Extraction des polysaccharides dans la température ambiante :

La température de laboratoire le jour de l’extraction a était mesuré à 34 C°.

Le but de cette analyse est d’évaluer le rendement en polysaccharides sans effectuer un


traitement thermique a fin d’éviter toute sorte de dégradation des polysaccharides par la
température élevé.

Les résultats de cet analyse sont représentés dans la figure 08.

1,8
1,6
1,4
1,2
rendemet

1
0,8
rendement
0,6
0,4
0,2
0 min
0 50 100 150 200 250 300

Temps (min)

Figure 08 : Taux de rendement en polysaccharides en fonction du temps d’extraction.

35
Partie II Etude expérimentale

Contrairement a ce que rapport la bibliographie ; nous avons constaté une évolution


décroissante du rendement en polysaccharides avec le temps.

Sheng-Q. H.et al., (2010) rapporte que le rendement en polysaccharide augmente en fonction
du temps. Cette décroissance est peut être due à la dégradation des polysaccharides par la
présence des microorganismes, non éliminer par un traitement physicochimique avant
d’entamer l’extraction.

IV.3-Effets de la température sur le rendement en polysaccharide :


(%)

(C°)

Figure09 : Effet de la température sur le rendement en polysaccharides

le rendement augmente progressivement avec l'augmentation de la température d'extraction, pour


atteindre un rendement de 1,16 ± 0.35 % à la température 70 C°(figure 9 ) , puis diminuer pour
avoir un rendement de 0.77 % ± 0.22 .

l’explication qu’on peut donner est liée à la solubilité et la diffusivité (et réduit sa viscosité) de la
matière primaire favoriser par les températures plus au moins élevées, une température très

36
Partie II Etude expérimentale

élevée peut avoir un effet contraire comme le montre la figure 09. Ces résultats son en accord
avec celle rapportés par (MEZIANE .S et al, 2008).

L’analyse de la variance (Tableau07) montre un effet hautement significatif de la température


d’extraction sur le rendement en polysaccharide (p=0.000004<0.05).

Tableau 07: Effet de la température sur le rendement en polysaccharide :

Origine de la SCE ddL Variance Fcal p


variation
température 766,3 5 153,3 16,28 0,000004
Erreur 169,5 18 9,4

IV.4-Effet de temps sur le rendement en polysaccharide :


(%)

(min)

Figure 10 :Effet de temps sur le rendement en polysaccharide .

Nous avons enregistré un taux de rendent de 1.01 %± 0.33 après un temps d’extraction de 60 min
,le rendement augmente progressivement avec l'augmentation du temps d'extraction(après 100

37
Partie II Etude expérimentale

min d’extraction)pour atteindre un rendement de1,16% ± 0.27 ;par la suite le rendement


enregistré prend une valeur basse de 0.77% ± 0.09 .

Par contre l’analyse de la variance (Tableau8) a montré un effet non significatif du temps
d’extraction sur le rendement en polysaccharide (p=0.84>p=0.05)

Tableau08 : Effet de temps sur le rendement en polysaccharide :

Origin de la SCE ddL Variance Fcal p


variation
temps 36,2 3 12,1 0,268 0,847672
Erreur 899,7 20 45,0

L’étude menue par Zhaojing Wang et al. (2007) sur l’extraction des polysaccharides de la Gynos
temma pentaphyllum Makinoa montré que la température et le temps d’extraction ont un effet
significatif sur le rendement contrairement à nos résultats ou juste la température a montré un
effet significatif sur le rendement en polysaccharides.

38
Conclusion générale

Cette étude nous a permis de déterminer les conditions optimales d’extraction des
polysaccharides par l’eau chaude, une température de 70C° pendant un temps d’extraction de
100 min à donner le meilleur rendement soit 1.16% ±0.35.

L’analyse de la variance a montré un effet hautement significatif de la température sur le


rendement d’extraction.

par contre l’analyse de la variance à montré que le temps d’extraction ayant un effet négligeable
sur le rendement.

l’extraction des polysaccharides est peut être gérer par d’autre paramètres qu’on a pas pris en
considération dans ce travail tel que : la granulométrie des particules, la nature du milieu
d’extraction (neutre, acide , ou alcalin), nombre de répétition de l’extraction, et le rapport solide
/ solvant

Dans les travaux futurs on suggère que les effets des paramètres cités ci-dessus seront pris en
considération pour bien maitriser l’extraction des polysaccharides

39
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43
Annexes
Annexes

A B C D
Poids échantillons(PE) 10g 10g 15g 15g
Poids capsule vide (P0) 2.57g 2.55g 2.55g 2.55g
Poids(C+E)(P1) 12.02g 12.01g 16.71g 16.70g
(P1-P0) 9.63g 9.46g 14.16g 14.15g

Tableaux 10 :Calculé teneure l’humidité.

Intervalle de confiance à 95%


Ecart- Erreur pour la moyenne minimum maxi
N Moyenne standard Borne Borne mum
type
inférieure supérieure
50,00 4 0,5150 0,18046 0,09023 0,2278 0,8022 0,35 0,75
60,00 4 0,955 0,21331 0,10665 0,6156 1,2944 0,64 1,1
70,00 4 0,7975 0,35151 0,17575 0,2382 1,3568 0,39 1,16
80,00 4 0,7075 0,12285 0,6142 0,5120 0,9030 0,59 0,88
90,00 4 0,5650 0,22956 0,11478 0,1997 0,9303 0,62 0,77
95,00 4 0,800 0,28367 0,14183 0,3486 1,2514 0,50 1,13
Total 24 0,7233 0,26249 0,05358 0,6125 0,8342 0,26 1,16

Tableaux 11 : descriptives des rendement au fonction de température

Intervalle de confiance à 95%


Ecart- Erreur pour la moyenne minimum maxi
N Moyenne standard Borne Borne mum
type
inférieure supérieure
60,00 6 0,6367 0,33750 0,13778 0,2825 0,9909 0,26 1,01
80,00 6 0,8183 0,29532 0,12057 0,5084 1,1283 0,40 1,13
100,00 6 0,7783 0,27946 0,11409 0,4851 1,0716 0,52 1,16
120,00 6 0,6600 0,09716 0,03967 0,5580 0,7620 0,50 0,77
Total 24 0,7233 0,26249 0,05358 0,6125 0,8342 0,26 1,16

Tableaux 12 : descriptives des rendement au fonction de temps


Résume
Se travaille à comme objectif l’optimisation de l’extraction des polysaccharides par
variation des conditions d’extraction ; le temps et la température de l’plante spontané de
l’Astragalus gombo connue sous le nom FAILA, l’étude a montré que une température
de 70°c et durant 100min d’extraction sont les meilleures conditions pour avoir un
rendement maximum en polysaccharides bruts.

Les monts clef : Optimisation, Condition, Polysaccharide. Astragalus gombo

Abstract
The aim of this study is to optimize the extraction of polysaccharides by varying the extraction
conditions; time and temperature of the spontaneous plant of Astragalus gombo known as
FAILA name, the study showed that a temperature of 70 ° C and an extraction during 100min are
the best conditions to obtain a maximum yield of crudes polysaccharides.

The mounts key: Optimization, Condition, Polysaccharide. Astragalus gombo

‫ملخص‬

‫هدا العمل يهدف إلى تحسين ضروف إستخالص متعدد السكريات بتغير الوقت و درجة الح اررة في وسط‬
‫دقيقة هي الشروط المناسبة‬100 ‫درجة مئوية و‬70 ‫نستنتج أن‬, ‫معتدل من النبتة العفوية المسماة الفيمة‬
‫بالمئة‬1.16 ‫لنتحصل عمى أحسن مردود‬

‫الفيمة‬.‫متعدد السكريات’ الشروط‬, ‫ تحسين‬:‫الكممات المفتاحية‬

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