Génétique du développement animal

Les gènes de Segmentation et la Métamérisation

Les gènes « gap », « pair rule » et de polarité segmentaire

 TYPE DE GENES PRINCIPAUX GENES EFFETS

Formation de gradients
Gènes a effet maternel bicoid, huncback, nanos, caudal Morphogènes responsables de la
mise en place des axes de polarité
Gènes de Segmentation
hunchback, Kruppel, Knirps, giant
Division de l'embryon en grandes
tailless, huckebein, buttonhead, empty
"Gap" régions selon l'axe antéro-postérieur
spiracles, orthodenticide

hairy, even-skipped, runt, fushi tarazu,

"pair rule" primaires Division des grandes régions de
odd-paired, odd-skipped, sloppy-paired,
et secondaires l'embryon en para-segments
paired

wingless, hedgehog, engrailed, cubitus Stabilisation du découpage

Polarité segmentaire interruptus D, fused, armadillo, segmentaire et polarité
patched, goosberry, pangolin intrasegmentaire

labial, proboscipedia, Deformed, Sex

combs reduced, Antennapedia, Spécification phénotypique des
Gènes homéotiques
Ultrabithorax, Abdominal-A, segments
Abdominal-B.
Les produits de gène « gap » découpent l’embryon en grandes régions

La distribution du signal bicoid est responsable de

l’expression en région antérieure du gene hunchback

Expression huncback:
Construction: Promoteur huncback/gène LacZ
Insertion dans le génome drosophile.
Région promotrice normale, partiellement délétée,
et totalement délétée (absence de fixation Bicoid)
 Les gènes gap: Premiers gènes zygotiques
Leur expression est initiée par les protéines Bicoid

Expression spatiale, selon l’axe antéro-postérieur, contrôlée par les

protéines Hunchback et Bicoid (synergie): pattern non périodique
 Le gradient du répresseur Hunchback établit les limites d’expression
des gènes Gap : division de l’embryon en grands segments

Acron Partie antérieure Partie postérieure Telson Mécanismes

Morphogènes et
hunchback protéines
régulatrices

Torpedo hunchback + Bicoid Caudal Torpedo

Gènes "gap"
tailless kruppel knirps giant kruppel knirps giant tailless exprimés ou
réprimés
huckebein huckebein

Protéines "gap"
Tailless ? Krϋppel Knirps Giant Tailless régulation croisée
Huckerbein Huckebein
 L’expression de Hunchback dirige l’expression séquentielle des
gènes « Gap » et établit leurs limites
Le gradient antéropostérieur de Hunchback établit les limites
de la protéine Kruppel, Knirps et Giant

Des quantités élevées de Hunchback sont Des quantités faibles de Hunchback

nécessaires pour la répression du gène krϋppel suffisent pour réprimer le gène giant

La région 5’ régulatrice des gènes krϋppel et giant contient différents sites

de fixation du répresseur Hunchback : kruppel (3)et giant (7)
 Expression du gène Kruppel

Activée par une combinaison Réprimée par des concentrations

Bicoid+faibles quantités de Hunchback élevées de Hunchback
 Les produits de gène « pair-rule » subdivisent l’embryon en
sous unités : mise en place des parasegments

A partir de la 13e division:

transcription de gènes « pair-rule »

• « Pair-rule » primaires:
hairy, even-skipped et runt

• « Pair-rule » dits secondaires:

fushi tarazu, odd-paired, odd-skipped,
sloppy-paired et paired

Premiers signes visibles de Segmentation.

Sillons verticaux de division:

14 para-segments qui forment l’unité
fondamentale de la segmentation de l’embryon
de la drosophile

Le Parasegment: une unité indépendante

sous le contrôle d’une série de gènes Relation entre Parasegments et
segments à différents Stades
 Les gènes «pair-rule» présentent des patrons
d’expression apériodiques et délimitent les para-segments

Embryon doublement marqué : Patron avant cellularisation

gène even-skipped et de fushi tarazu, fushi tarazu (parasegment pair) : brun
Présentation de rayures bicolores formant 14 even-skipped (parasegment impair): bleue
bandes transversales qui s’alternent

zone claire:
Deux para-segments : Succession du patron d’expression. Expression d’autre gène (odd-
Sur les régions marquées, on décrit le profil de ftz et eve
paired, sloppy-paired, ou runt).
• Du gène fushi tarazu (bande pair)
•Du gène d’even-skipped (bande impair)
 Organisation de chaque bande pair-rule

Patron avant cellularisation

• Chaque bande pair-rule: rangée de 4 cellules.
• Chaque gene « pair rule » est exprimé dans les 7 bandes.
• Périodicité correspondant à une alternance des para-segments.
• Pattern est présent avant les divisions cellulaires: Embryon syncitium.
 Cas du gène even-skipped (eve)

• La protéine Eve: relativement petite, 2kb.

• Régions flanquantes : 4kb en 5’ et 8kb en 3’.

Gène even-skipped ou eve: 7 bandes sur 14.

Chaque bande du gène eve : 4 rangées de cellules
 Les régions régulatrices contiennent 5 enhancer
(pour les 7 bandes)

La région régulatrice 5’ est les régions flanquantes 3’régulent les

responsable des bandes 2,3 et 7 bandes 1, 4,5 et 6
 Régulation de l’enhancer 2 du gène eve

Enhancer-2: 500 pb
Il contient différents sites de fixation des 4 protéines 12 sites de fixation pour Bicoid,
régulatrices : bicoid, hunchback, Giant, and Kruppel. Hunchback, Kruppel et Giant

La distribution des régulateurs est résumé dans le diagramme.

Il ya des quantités élevées des gradients Bicoid et Hunchback dans
les cellules exprimant eve-2
 Régulation différentielle des eve-3 et eve-4 par des gradients
opposés des répresseurs hunchback et activateurs Knirps

Les deux bandes sont positionnées à des

régions différentes de l’embryon

L’enhancer eve-3 est réprimé par quantités Inversement l’enhancer eve-4 est réprimé par
élevées du gradient Hunchback, mais activé des quantités faibles de Hunchback, mais activé
par des quantités faibles de gradient Knirps par des quantités élevées de Knirps.
 Les gènes de polarité segmentaire conduisent à la définition des segments
•A partir de la 13-14 e division > Blastoderme cellulaire.
• Renforcement de la périodicité parasegmentaire (initié par les « pair-rule)
• Jeu d’interaction entre cellules voisines: établir la destinée de ces dernières dans chaque
parasegment.
• La synthèse de Wingless et Engrailed conduisent
à la délimitation des segments. •Les protéines Wingless et Engrailed
• Protéines produites chacune que par une seule présentent une périodicité de synthèse au
bande de cellules par para-segment niveau de l’Abdomen
Gènes pair-rule : fushi tarazu, even-skipped et engrailed au
niveau des para-segments.

engrailed est exprimé au niveau de la marge antérieure et

permet la délimitation des parasegments

engrailed
Code un facteur de transcription
exprimé par les cellules de la marge
antérieure du para-segment

Cellules antérieures

• Expriment la protéine Hedgehog.

• Hedgehog active et maintient l’expression
du gène de segmentation wingless
 Du Parasegment au Segment ?
La diffusion de Hedgehog et de Wingless est à l’origine de gradient de
protéines responsables de la spécification des cellules des parasegments.

L’arrangement spatial des destinées cellulaires résultant des

interactions déplace l’unité d’organisation du parasegment au segment
Intéraction entre les genes hedghog, wingless et engrailed

• Le maintien de l’expression du gène wingless

et engrailed est assuré par des relations
intercellulaires
• Les cellules exprimant le gène engrailed (marge
antérieure parasegments) produisent aussi la
protéine Hedgehog

• Hedgehog se lie à des récepteurs spécifiques

portés sur les cellules voisines et provoquent
l’activation de wingless et le maintien de la
protéine Wingless

Feedback des protéines Wingless sur les cellules

productrices de Engrailed pour maintenir
l’expression de engrailed et hedgehog

L’effet est inverse chez les mutants wingless

(ni engrailed et hedgehog).
 Les gènes wingless et hedgehog codent des protéines responsables
de deux voies distinctes de signalisation.

la voie de signalisation Hedgehog Absence de Hedgehog .

• la PM Patched, récepteur de Hedgehog inhibe la PM Smoothened.
• le facteur de transcription Ci est maintenu dans le cytoplasme en
deux complexes protéiques
• l’une associée à Smoothned.
• l’autre associée à Sufu (Suppressor of Fused)
• Ci du complexe est phosphorylé/ Protéines kinases GSK-3 (glucogen
Synthetase kinase), PKA (Protein Kinase A) et CK1 (Casein Kinase
1).
• Engendre un clivage protéolytique des Ci et formation de protéine
tronquée CiRep.
• CiRep entre dans le noyau et agit comme répresseur des gènes cibles
de Hedgehog.

Présence de Hedgehog: une levée de l’inhibition

• Levée de l’inhibition de Smoothened et blocage de la production
de CiRep.
• Relâchement de Ci et entrée dans le noyau.
• Activation de gènes cibles de Hedgehog : wingless (wg),
decapentaplegic (dpp), engrailed (en).
la voie de signalisation Wingless

Wingless/Récepteur Frizzled

• Signal est traduit/Membrane/Protéine de

signalisation intracellulaire Dishevelled.

• Dishevelled activé: Intéraction avec Daxin

(Axin)

• Prévenir un complexe protéique contenant la

protéine kinase Zeste-White(GSK-3) et APC
pour prévenir Armadillo (β Catenin) d’une
dégradation/Ubiquitin dépendante.

• Par contre les β Catenin stables entrent dans le

noyau ou elles forment un complex avec le
facteur de transcription Pangolin (TCF ; Pan) et
régule la transcription de gènes cibles.
 Génétique du développement animal

Les gènes homéotiques

• Chaque segment a une identité unique.

• L’identité est spécifiée par les gènes sélecteur homéotique,
dont la mutation entrainant une homeosis ( transformation
d’un segment en un autre segment qui lui est proche)
• Un gène sélecteur :
• contrôle l’activité d’autres gènes
• maintient un pattern d’expression de gènes.
• Les homologues des gènes sont identifiés chez tous les vertébrés : gènes Hox,
contrôle de l’identité de l’axe antéro-postérieur.
 TYPE DE GENES PRINCIPAUX GENES EFFETS

Formation de gradients
Gènes a effet maternel bicoid, huncback, nanos, caudal Morphogènes responsables de la
mise en place des axes de polarité
Gènes de Segmentation
hunchback, Kruppel, Knirps, giant
Division de l'embryon en grandes
tailless, huckebein, buttonhead, empty
"Gap" régions selon l'axe antéro-postérieur
spiracles, orthodenticide

hairy, even-skipped, runt, fushi tarazu,

"pair rule" primaires Division des grandes régions de
odd-paired, odd-skipped, sloppy-paired,
et secondaires l'embryon en para-segments
paired

wingless, hedgehog, engrailed, cubitus Stabilisation du découpage

Polarité segmentaire interruptus D, fused, armadillo, segmentaire et polarité
patched, goosberry, pangolin intrasegmentaire

labial, proboscipedia, Deformed, Sex

combs reduced, Antennapedia, Spécification phénotypique des
Gènes homéotiques
Ultrabithorax, Abdominal-A, segments
Abdominal-B.
 L’identité des segments est sous contrôle des gènes des
complexes Antennapedia et bithorax

Complexe Antennapedia: contrôle l’identité des

parasegments antérieurs
- Labial (lab): spécifiant les segments céphaliques
-Proboscipedia (pb): ne s’exprime que chez l’adulte. Si ce gène est
muté, ce sont les palpes labiaux qui sont transformés en pattes.
-Deformed (Dfd): spécifiant également les segments céphaliques.
- Sex combs reduced (Scr) et Antennapedia (Antp),: specifiant
respectivement le premier et le deuxième segment thoracique.

Complexe, Bithorax: contrôle l’identité des

parasegments 5-14

-Ultrabithorax (ubx): spécifiant le troisième segment thoracique .

-Abdominal-A: (abd-A).
-Abdominal-B: (abd-B): spécifiant les segments abdominaux.
 Cpx Antennapedia contrôle la
Mutation Antennapedia spécification des régions antérieures

Mutants de Antp, AntpD/+ : Antennapedia (Antp)

Spécifiant le deuxième segment thoracique

Chez les drosophiles à mutation Antennapedia

dominant, les antennes sont transformées en patte

•5 gènes homéobox.
•Contrôle les parasegments antérieurs, jusqu’au 5e parasegment.
•Mutations du gène deformed affectent les structures dérivées de l’ectoderme
des parasegments 0 et 1.
• Les mutations du gène Sex Combs reduced scr affectent les parasegments 2 et 3.
•Les mutations du gène Antennapedia affectent les parasegment 4 et 5.
 Les mutations homéotiques Transformation homéotique des ailes et haltères
par les mutations dans le complexe bithorax
Mutation bithorax
• La mutation bithorax transforme le compartiment
antérieur de l’haltère en partie antérieure de l’aile.
• La mutation postbithorax agit de la même façon dans le
compartiment postérieur.

Si les deux mutations sont présentes , on a un effet additif et

l’haltère se transforme complètement en aile.
Mutations de ubx : Ultrabithorax (ubx): spécifiant
le troisième segment thoracique
Transformation du métathorax en mésothorax
(donc une duplication du mésothorax: deux ailes)
 Mutation Contrabithorax

Mutations Cbx : Contrabithorax

Mauvaise expression du gène Ubx dans le mésothorax entraine une
perte des ailes et leur remplacement par des haltères.
 Les gènes sélecteurs du Cpx Bithorax
sont responsables de la diversification
des segments postérieurs

L’expression des gènes Ultrabithorax, abdominal-A,

Abdominal-B determinent l’identité de chaque
parasegment. (wild type).

Les mutations du complexe engendrent des

transformations homéotiques

•Absence du Complexe bithorax: Conversion des

parasegment 5-13 en neufs parasegments de type 4
= segment T2 chez la larve.

•Transformation causée par l’absence de

combinaison:
• Gene Ultabithorax absent seul:
Parasegments 5 et 6 transformés en
parasegments 4.
 L’ordre d’expression des gènes hox correspond à l’ordre des gènes
La notion de colinéarité spatiale

Relation entre la position d’un gène Chaque gène homéotique, là ou il s’exprime, définit
homéotique sur le chromosome et son l’identité d’un segment
niveau d’expression dans l’organisme

Organisation et expression des gènes Hox chez la

drosophile et la souris
Les gènes sont conservés chez les vertébrés