Vous êtes sur la page 1sur 28

2023-09-11

Physico-chimie des
molécules bioactives
CHM-106
Danny Létourneau
TRIMESTRE AUTOMNE 2023
Cours#2

Plan de la matière
• Semaine 1 (28 août au 1 sept) : Mardi 29 août : Plan de cours et présentation
Jeudi 31 août : Activités étudiantes (levée des cours de 8 h 30 à 22 h 00)
• Semaine 2 (4 au 8 septembre) : Cours #1 : Introduction et État physique de la matière.
• Semaine 3 (11 au 15 septembre) : Cours #2 : Équilibre acido-basique : tampon et pH
• Semaine 4 (18 au 22 septembre) : Cours #3 : Type de réactions et stœchiométrie
• Semaine 5 (25 au 29 septembre): Cours #4 : Cinétique chimique et équilibre
• Semaine 6 (2 au 6 octobre) : Cours #5 : Solubilité, électrolytes, force ionique et chélation
• Semaine 7 (9 au 13 octobre) : Cours #6 : Oxydo-réduction et électrochimie et révision
• Semaine 8 (16 au 20 octobre) : Semaine examen Intra
• Semaine 9 (23 au 27 octobre) : Relâche des activités pédagogiques

• Semaine 10 (30 oct. au 3 novembre) : Cours #7 : 1ere loi de la thermodynamique : l’énergie est conservée
• Semaine 11 (6 au 10 novembre) : Cours #8 2eme loi de la thermodynamique : L’entropie…
• Semaine 12 (13 au 17 novembre) : Cours #9 Énergie libre de Gibbs et équilibres
• Semaine 13 (20 au 24 novembre) : Cours #10 Thermodynamique des ions et transport d’électron
• Semaine 14 (27 nov. au 1 décembre) : Cours #11 La cinétique des processus biologiques
• Semaine 15 (4 au 8 décembre) : Cours #12 Coefficient de partition et spectroscopie et révision
• Semaine 16 (11 au 15 décembre) : Semaine examen Final

Automne 2023 CHM106 2

1
2023-09-11

La respiration et l’hémoglobine
• Tétramère (4) de 65 kDa
• 2 chaines alpha (141 a.a)
• 2 chaines beta (146 a.a)
• Contient un groupement héme
pouvant lié l’oxygène
• Transport de l’oxygène dans
le sang jusqu’à la myoglobine
• Déterminer la forme et la
structure (diffraction des
rayons X, diffusion de la https://biochimiedesproteines.espaceweb.usherbrooke.ca/index.php
lumière, etc.)

Automne 2022 CHM106 3

La respiration et l’hémoglobine
• Liaison de l’oxygène et CO2 à
l’hème
• Coordination des ions
métalliques comme le fer
• Orbitales moléculaires et
propriétés spectrales
• La nature coopérative de la
liaison et modèle allostérique
• La capture d'oxygène par une
première sous-unité entraîne
une augmentation d'affinité
pour les suivantes.

Automne 2022 CHM106 4

2
2023-09-11

La respiration et l’hémoglobine
• La dépendance au pH de la
liaison à O2 et CO2.
• La protéine existe sous deux
formes
• la forme T (pour tendue) à faible
affinité pour l'oxygène et la forme
R (pour relaxée) de haute affinité.
• Dépend du pH ambiant et de la
présence d'oxygène.
• À pH élevé et en présence
d'oxygène, la forme R est
privilégiée (lie O2);à pH bas
(acide) la forme T est privilégiée
et l'hémoglobine relâche
l'oxygène.

Automne 2022 CHM106 5

Acides et bases
• Les acides et les bases forment une classe très importante
d’électrolytes.
• La balance et l’équilibre des concentrations, ainsi que le pH dans
notre corps est primordial pour le bon fonctionnement des enzymes,
maintien de la pression osmotique et autres.
• Une déviation de 1/10 d’unité de pH peut conduire à des maladies ou la mort.
• L’effet tampon (Carbonate et Phosphate) est essentiel à
l’homéostasie et le pH dans le corps humain peut varier de 6.8 à 7.4
dans le plasma, alors que celui des fluides gastriques peut atteindre
un pH égal à 1.
Automne 2022 CHM106 6

3
2023-09-11

Automne 2022 CHM106 7

La nature des acides et des bases


• Les acides goutent surettes et les bases amères et sont visqueuses.
• La première personne à reconnaître la nature essentielle des acides
et des bases fut Svante Arrhénius*.
• Sur la base de ses expériences avec des électrolytes, Arrhenius a postulé
que les acides produisent des ions hydrogène (H+) en solution aqueuse,
tandis que les bases produisent des ions hydroxyde (OH-).
NaOH → Na+ + OH-
B + H2O → BH+ + OH- Svante August Arrhenius (February
19, 1859 – October 2, 1927) was a
Nobel-Prize winning scientist from
Sweden.

*Arrhénius est un des pères fondateurs de la chimie-physique…

Automne 2022 CHM106 8

4
2023-09-11

Définition de Brønsted–Lowry
• Un acide est un donneur de proton (H+) et une base est un accepteur de proton.
• Un acide est un composé susceptible de libérer un proton.
• Une base est un composé susceptible de fixer un proton.
HA → H+ + A-
B + H+ → BH+
• Considérant ces réactions réversibles:
A- + H+ →HA;
• A- est susceptible de fixer un proton et on le considère comme une base
appelé base conjuguée du couple HA/A-
• De la même manière, BH+ est l’acide conjugué du couple BH+/B

Automne 2022 CHM106 9

L’eau: un solvant amphotère


• Pour révéler le caractère acide ou basique d’une substance,
celle-ci doit de trouver en présence d’un composé (solvant)
capable d’accepter ou donner des protons.
• On voit ici le rôle fondamental du solvant dans l’étude des
acides/bases.
• On classe les solvant selon leur capacité à fixer des protons
(protophile) ou à céder des protons (protogène).
• L’eau constitue un solvant à la fois protophile et protogène, i.e.
qu’il possède à la fois un caractère basique et acide: amphotère
ou amphiprotique
Automne 2022 CHM106 10

10

5
2023-09-11

L’eau: un solvant amphotère


• Lorsque l’on met un composé acide dans l’eau, celui-ci se
comportera ainsi: Ha/b acide faible/base faible
Ha + H2O ⇌ H3O + a
+ - HA/B acide fort/base forte

• où a- est la base conjuguée de Ha et H3O+ l’acide conjugué de H2O


• Transfert de proton entre les deux couples: Ha/a- et H3O+/H2O
• Réciproquement, pour une base;
b + H2O ⇌ bH+ + OH-
• où bH+ est l’acide conjugué de b et OH- la base conjugués de H2O
• Transfert de proton entre les deux couples: b/ bH+ et H2O/OH-

Automne 2022 CHM106 11

11

L’eau: un solvant amphotère


• Ainsi, l’eau appartient à deux couples acide-base:
2H2O ⇌ H3O+ + OH-
• H2O appartient aux deux couples H3O+/H2O et H2O/OH-
• La constante de dissociation ionique de l’eau se calcule:
[H3O+]•[OH−]
𝐾𝑒𝑎𝑢 =
[H2O]2
• Comme l’équilibre est surtout vers la gauche (H2O) et que l’eau est approximativement à
l’état standard; [H2O]/[H2O]º =1M, ainsi:
𝐾𝑒𝑎𝑢 = [H3O+]•[OH−] =10-14 à 298K

• Pour l’eau pure,


[H3O+]=[OH−] =10-7M

Automne 2022 CHM106 12

12

6
2023-09-11

Forces relatives des acides et bases


• Les différents acides/bases se comportent différemment en solution.
Il est donc nécessaire d’évaluer la force relative de ceux-ci.
• Pour un acide:
• Ha+H2O ⇌ H3O+ + a- et la constante d’équilibre sera
[H3O+]•[a−]
Ka =
[Ha]•[H2O]
• Ka est la constante d’acidité; plus Ka est grand, plus l’équilibre est déplacé
vers la droite; plus Ha tend à donner son proton, plus c’est un acide fort.
• Si Ka1 > Ka2 alors Ha1 est plus fort que Ha2

Automne 2022 CHM106 13

13

Forces relatives des acides et bases


• De la même manière, pour une base,
• B +H2O ⇌ bH+ + OH- et la constante d’équilibre sera
[bH+]•[OH−]
K𝑏 =
[b]•[H2O]
• Kb est la constante de basicité; plus Kb est grand, plus l’équilibre est déplacé
vers la droite; plus b tend à capter un proton de l’eau, plus la base est forte.
• Si Kb1 > Kb2 , alors b1 est plus forte que b2
• Puisque [H2O] est le solvant, il n’intervient pas dans le calcul, donc:
[H3O+][a−] [bH+][OH−]
Ka = et K 𝑏 =
[Ha] [b]
Automne 2022 CHM106 14

14

7
2023-09-11

Protolytes forts
• Pour un acide fort, on doit écrire:
HA + H2O → H3O+ + A-
• Car la réaction réversible n’a pas lieu; seule les formes H3O+ + A- existent
à l’équilibre. A- étant la base conjuguée de l’acide fort, on dit qu’il s’agit
d’une base de force nulle.
• Ex. HCl + H2O → H3O+ + Cl-
• Encore une fois, pour une base forte nous aurons:
B + H2O → BH+ + OH-
• BH+ est alors un acide de force nulle.
• Ex. NaOH +H2O → Na+ + H2O + OH-
• Ions spectateurs
Automne 2022 CHM106 15

15

Protolytes faibles
• Le couple acide-base est défini par Ka ou Kb (ex. Ha/a-)
Ha + H2O ⇌ H3O+ + a-
• ⇌ Les trois formes existent en solution:
[H3O+][a−]
K𝑎 =
[Ha]
a- + H2O ⇌ Ha + OH-
[Ha][OH−]
K𝑏 =
[a−]
• Si on multiplie Ka par Kb
[H3O+][a−] [Ha][OH−]
K𝑎 • K𝑏 = • = [H3O+][OH−]=Keau
[Ha] [a−]

• À 25 °C , Keau vaut 10−14 ainsi, plus Ka est grand, plus Kb est petit et l’équilibre est déplacé vers la
droite.
Automne 2022 CHM106 16

16

8
2023-09-11

Challenge!
• On met 1ml (10-3L) de HCl 0,1 M dans 1 Litre d’eau. Quelle est
le ratio d’ions hydroniums (H3O+) sur les ions hydroxydes (OH-)
dans la solution finale?
• Solution: Le HCl est un acide fort, donc complétement dissocié.

Automne 2022 CHM106 17

17

Challenge!!
• Une solution à 0,04 M d’un acide monoprotique est dissocié à
13,5%. Quelle est la valeur de la constante de dissociation
acide (Ka)?
• Solution: commençons par trouver la concentration des
espèces en solution.

Automne 2022 CHM106 18

18

9
2023-09-11

Notions et concepts de pH
• Puisque les valeurs [H3O+] et [OH-] sont normalement très petite, il est plus
pratique de parler en termes de pH. La fonction ‘’p’’ est une opération
mathématique qui se résume à pX = -logX
• Le pH est défini comme la valeur négative du logarithme décimal de la
concentration des ions H3O+ en solution.
pH = -log [H3O+]
• De la même manière, le pOH sera égale à:
pOH = -log [OH-]
• Inconvénients: l’échelle de pH étant logarithmique, une petite variation de
pH peut résulter en une variation notable de la concentration de H+. Ex.
0.05 unité est équivalente à une variation de 12.2% d’erreur sur [H+].

Automne 2022 CHM106 19

19

Notions et concepts de pH
• Si nous revenons à la constante de dissociation de l’eau:
Keau = [H3O+] [OH−]
En effectuant la même transformation mathématique (-log);
-log Keau= -log ([H3O+][OH−]) = (-log[H3O+])+(−log[OH−])
pKeau = pH + pOH log (AB) = logA + logB

• Puisque À 25 °C , Kw vaut 10−14 alors pKeau = -log(10-14)= 14


• Ainsi, pH + pOH = 14
• Pour un pH=0, on aura une solution 1M de H3O+ et un pH=14
contiendra 1M de [OH-].

Automne 2022 CHM106 20

20

10
2023-09-11

Notions et concepts de pKa


• Forces relatives des acides et bases
• Pour un acide: Ha+H2O ⇌ H3O+ + a- et la constante d’équilibre
sera
[H3O+]•[a−]
Ka =
[Ha]•[H2O]
• plus Ka est grand, plus l’équilibre est déplacé vers la droite; plus
Ha tend à donner son proton, plus c’est un acide fort.
• Donc, pKa = -logKa
• plus Ka est grand (ou pKa petit), plus la dissociation est
importante et plus l’acide est fort.
Automne 2022 CHM106 21

21

Notions et concepts de pKa


• Pour différents acides, plus le Ka est grand (ou pKa petit), plus la
dissociation est importante et plus l’acide est fort

Automne 2022 CHM106 22

22

11
2023-09-11

pKa et Henderson-Hasselbalch
[H3O+]•[a−] [H3O+]•[a−]
Ka = = ou [H+] = Ka•[Ha]/[a-]
[Ha]•[H2O] [Ha]
Appliquons l’opération ‘’p’’ de chaque côté.
(log X•Y = logX + logY)

-log [H+] = -logKa - log [Ha]/[a-]


pH = pKa - log [Ha]/[a-]
(Avec log X=-log1/X)
[a−] Base conjuguée
pH = pKa + log
[Ha] acide

Automne 2022 CHM106 23

23

Double challenge!
• Calculer le pH de l’eau pure à 25ºC (pKw=14)

• L’acide chloridrique est totalement dissocié dans l’eau. Calculer


la concentration en ions chlorure (Cl-) exprimé en molarité et en
mg•L-1 d’une solution de HCl dont le pH est égal à 1.7?

Automne 2022 CHM106 24

24

12
2023-09-11

Pourquoi?
• Le % des différentes formes chargées ou non à un pH donné,
est-ce important en pratique?
• Biologie, pharmacologie, voir même en toxicologie, répartition des
formes d’un médicament ou molécules bioactives dans l’organisme.
• Biochimie, chimie médicinale: chromatographie séparation des
analytes selon la charge, selon le pH pour l’élution.
• Chimie synthèse: solubilité en fonction de la charge permet le choix du
pH et des solvants à utiliser.
• Biologie moléculaire et purification de protéine: connaitre le pKa, la
charge (pI) et la stabilité chimique (pH, dénaturant, etc.) est important
pour les analyses. Ex. purification protéine His-tag*

Automne 2022 CHM106 25

25

Exemple de calcul
• Calcul du pH et % de protonation d’une base faible
• La méthylamine CH3NH2 (base faible) utilisée en pharmaceutique pour
la synthèse. Calculez le pH et le % de protonation d’une solution 0.20M
de méthylamine (Kb =3.6x10-4)?
• Base faible, donc pH>7 et % faible de protonation.
[CH3NH3+]•[OH−]
• CH3NH2 + H2O ⇌ CH3NH3+ + OH- et K𝑏 =
[CH3NH2]
CH3NH2 CH3NH3+ OH-
C initial 0.2 0 0
Variation [x] -x +x +x
C équilibre 0.2-x x x

Automne 2022 CHM106 26

26

13
2023-09-11

Exemple de calcul
• Calcul du pH et % de protonation d’une base faible
[CH3NH3+]•[OH−]
• CH3NH2 + H2O ⇌ CH3NH3+ + OH- et K𝑏 =
[CH3NH2]
CH3NH2 CH3NH3+ OH-
C initial 0.2 0 0
Variation [x] -x +x +x
C équilibre 0.2-x x x

• Insérons les [Céquilibre] dans Kb


x•x
• Kb = = 3.6x10-4 = X2 + 3,6x10-4X - 7,2x10-5 (éq. Quadratique: ax2 + bx + c)
0.2−x
−𝑏± 𝑏2 −4𝑎𝑐
• 𝑥= ainsi X=8.3x10-3 ou -8,7x10-3 (toujours considérer la racine positive seulement)
2𝑎
• pOH = -log [OH-] = -log (8,3x10-3) = 2.08
• pH = 14-pOH = 14-2.08 = 11.92
• % de protonation = (8.3x10-3/0.2)•100 = 4.2%

Automne 2022 CHM106 27

27

Exemple de calcul
• Calcul du pH et % de protonation d’une base faible
[CH3NH3+]•[OH−]
• CH3NH2 + H2O ⇌ CH3NH3+ + OH- et K𝑏 =
[CH3NH2]
CH3NH2 CH3NH3+ OH-
C initial 0.2 0 0
Variation [x] -x +x +x
C équilibre 0.2-x x x

• Insérons les [Céquilibre] dans Kb


x•x
• K b = 0.2−x = 3.6x10-4 puisque x est ≪ 0.2M, on pourrait approximer en
remplaçant 0.2 –x par 0.2 seulement et obtenir:
x•x
• K b = 0.2 = 3.6x10-4 = x2=7,2x10-5 et x=8.5x10-3

Automne 2022 CHM106 28

28

14
2023-09-11

pH et hydrolyse des sels


• Un sel est le produit de la réaction entre un acide et une base
en qtté équivalente (neutralisation): HA +B → BH+ + A-
• HCl + NaOH → NaCl +H2O ou plutôt Na+(aq) + Cl-(aq)
• B + Ha → (bH+ , a-) Hydrolyse du sel
• Plus soluble que la forme acide ou basique.
• Le pH de la solution du sel dépend des forces relatives de BH+
et de A-.

Automne 2022 CHM106 29

29

pH des solutions aqueuses


• Acides forts et bases fortes
• Complétement dissociés.

• Acides ou bases faibles


• Tenir compte des constantes de dissociation

Automne 2022 CHM106 30

30

15
2023-09-11

Ex. Acétate de sodium


• CH3COONa → CH3COO- + Na+ (complétement
dissocié)
• CH3COO- + H2O ⇌ CH3COOH + OH-
• Kb = [CH3COOH]• [OH-]/ [CH3COO-]
• En multipliant par [H+]/[H+] (équivalent de x1)
• [CH3COOH]• [OH-]/ [CH3COO-] • [H+]/[H+] = Keau/Ka
• Ainsi, Kb = 1x10-14/1.75x10-5 = 5.7 x10-10

Automne 2022 CHM106 31

31

Challenge!
• Quel est le pH d’une solution 0.1M d’acétate de sodium? Kb= 5.7 x10-10
• CH3COONa → CH3COO- + Na+
• CH3COO- + H2O ⇌ CH3COOH + OH-
CH3COO- CH3COOH OH-
C initial 0.1-x x x

Automne 2022 CHM106 32

32

16
2023-09-11

Sel d’acide fort et base forte


• La solution est neutre (pH =7.0) puisqu'elle contient BH+
(acide de force nulle) et A- (base de force nulle).
• Ex. pH d’une solution de nitrate de sodium (NaNO3) 0.2 M.
• NaNO3 + H2O → NaOH + HNO3
• HNO3 : pKa =-1,8; NaOH pKa>14
• Totalement dissocié dans l’eau. Na+ et NO3- : base et acide
de force nulle, le pH est celui de l’eau, pH = 7.0

Automne 2022 CHM106 33

33

Dosage d’un acide faible par une base forte

x
À l’équivalence
pH = pK a + log10 c AVA = cBVeq
1− x

pH varie très faiblement lors de l’ajout de base: c’est l’effet


TAMPON – il se produit lorsque pH = pKa ou (A- = AH)

Veq

http://www.ilephysique.net/forum-sujet-231068.html

34

17
2023-09-11

Solution tampon
• Une solution tampon est une solution dont
la variation de pH, après ajout d'acide
fort (H3O+) ou de base forte (OH–), est
petite comparativement à celle qui aurait
été obtenue après ajout, à un volume
d'eau équivalent, des mêmes quantités
d'acide fort ou de base forte.

• Une solution tampon contient dans la


grande majorité des cas un acide faible et
sa base conjuguée (en concentrations
suffisamment grandes).

Automne 2022 CHM106 35

35

Solution tampon
• Concentration (Ct) d'un tampon
• Ct = |HA| + |A−|
• Exemple: Calculer la concentration Ct d’un tampon obtenu par
dissolution de 0.050 mole d’acétate de sodium dans 1.00 litre
d’acide acétique 0.075 M.
• [CH3COOH] = 0.075 M [CH3COONa] = [CH3COO– ] = 0.050 M
• constitutifs du tampon, exprimées en molarité :
• Ct = [CH3COOH] + [CH3COO– ] = 0.075 + 0.050 = 0.125 M

Automne 2022 CHM106 36

36

18
2023-09-11

Calcul du pH d’une solution tampon


• Henderson-Hasselbalch
[a−] Base conjuguée
• pH = pKa + log
[Ha] acide

• Exemple: Quel est le pH de la solution précédente:


• Dissolution de 0.050 mole d’acétate de sodium dans 1.00
litre d’acide acétique 0.075 M. (CH3COOH: pKa =4.7)
• pH = 4.7 + log (0.05/0.075)= 4.7 -0.18=4.5

Automne 2022 CHM106 37

37

Calcul du pH d’une solution tampon

Automne 2022 CHM106 38

38

19
2023-09-11

Calcul du pH d’une solution tampon

Automne 2022 CHM106 39

39

Capacité tampon
• Elle correspond à la capacité du système à céder (ou à capter) un proton avec
une faible variation du pH.
• Tant que le rapport des concentrations de l’acide à la base conjuguée (CA/CB ) reste
compris entre 0,1 et 10, l'addition de H3O+ ou de OH– dans la solution tampon n'entraîne
qu'une variation minime du pH.
• En effet, une des deux réactions suivantes intervient :
• H3O+ + A− → HA + H2O et OH− + HA → A− + H2O

• Tout se passe comme si l'acide fort (H3O+ ) était remplacé par l'acide faible (HA)
ou la base forte (OH–) par la base faible (A–), ce qui explique la faible variation de
pH.
• Pratiquement, cette capacité tampon s’exerce donc dans les limites: pH = pKa± 1

Automne 2022 CHM106 40

40

20
2023-09-11

Pouvoir tampon

X=0.5 demi-neutralisation: pouvoir tampon maximum

Automne 2022 CHM106 41

41

Influence de la concentration

Automne 2022 CHM106 42

42

21
2023-09-11

Influence de la concentration

Automne 2022 CHM106 43

43

Influence de la concentration

Automne 2022 CHM106 44

44

22
2023-09-11

Influence de la concentration

Automne 2022 CHM106 45

45

Points importants

Acide faible

Automne 2022 CHM106 46

46

23
2023-09-11

Mélange d'acides, polyacides


• Mélange d'acides forts
• Ceux-ci étant totalement solvolysés, il est impossible de les doser
séparément : la courbe obtenue est identique à celle d'un acide fort dont la
concentration serait égale à la somme des concentrations de chacun de
ceux-ci.
• Mélange d'acides faibles
• Si la différence des pKa est suffisamment importante (ΔpKa > 4) chaque
acide peut être dosé séparément avec une bonne précision. Les courbes de
neutralisation n'interférant pratiquement pas, la neutralisation a lieu en
commençant par l'acide le plus fort (dont le pKa est le plus petit).
• Mélange d'acide fort et d'acide faible
• L'acide fort est dosé en premier, l'acide faible en second : les deux courbes
de neutralisation se développent l'une après l'autre.

Automne 2022 CHM106 47

47

Mélange d'acides, polyacides


• Le cas des polyacides reprend les raisonnements précédents,
sachant qu’on peut considérer qu’un polyacide est un mélange
d’acides en concentration équimoléculaire.

Automne 2022 CHM106 48

48

24
2023-09-11

Tampon phosphate

Automne 2022 CHM106 49

49

Challenge!
• À partir de deux solutions, une de sodium phosphate monobasique anhydre (Na2HPO4) et
l’autre de sodium phosphate dibasique (NaH2PO4) à 1M, calculer le volume de chacune
des solutions à mélanger pour obtenir un litre de tampon phosphate à 100mM et pH=7.6?
• NaH2PO4 + H2O ⇌ Na+ + H2PO4-
• Na2HPO4 + H2O ⇌ 2Na+ + HPO4-2

Automne 2022 CHM106 50

50

25
2023-09-11

Les tampons en biochimie


• La préparation des tampons est essentielle. De très nombreuses ‘recettes’
existent.
• Tables de préparation et disponibles commercialement.
• Le choix d’un bon tampon est crucial pour le bon fonctionnement des expériences.
• Sans interactions avec les autres constituants: Ex. tampon cacodylate réagit avec les thiols (cystéines
et gluthatione), Tampon Phosphate avec cations divalents (+2)
• Bonne capacité tampon (pKa, concentration et force ionique): Ex. tampon NaPO4 50 mM à différents
pH
• Sans interférences avec les mesures des appareillages: concentration de sels vs méthodes
spectroscopiques

• Attention, il faut toujours vérifier ses résultats avec le pH mètre, car les tampons sont en
général assez concentrés (et les activités diffèrent alors des concentrations).

Automne 2022 CHM106 51

51

Implication biologique
• Dissociation des acides aminés
(a.a.):
• Les a.a. sont, tout comme l’eau, des
ampholytes: ils se comportent comme
une base et un acide à la fois.

Zwitterion ou ion dipolaire

Automne 2022 CHM106 52

52

26
2023-09-11

Implication biologique

Automne 2022 CHM106 53

53

Point isoélectrique
• Lorsque la charge nette d’une molécule
est nulle (zéro), ex. Zwitterion, la molécule
est électriquement neutre: isoélectrique.

• Le pH à laquelle une molécule dipolaire


ne migre pas dans un champ électrique se
nomme: point Isoélectrique (pI).

• Pour un a.a. diprotique comme la glycine,


le pI est la moyenne du pKa du carboxyle
(2,34) et de l’ammonium (9,60).

• Ainsi le pI de la glycine:
(2.34 + 9.60)/2 = 5.97

Automne 2022 CHM106 54

54

27
2023-09-11

Titration de protéine
• Ex. la ribonucléase
(enzyme)
• De pH 1 à 5: 11 protons se
dissocies
• Entre pH 5-8: 5 protons sont
dissociables
• De pH 8-12: 17 protons se
dissocient.
• Le pI se situe autour de pH
=10 pour la ribonucléase.
Automne 2022 CHM106 55

55

Focalisation isoélectrique
• Séparation des protéines
selon leur pI:
• Permet de séparer un
mélange de protéines avec
des pI’s différents et
d’évaluer le pI de chaque
protéine pour purifications
ultérieures.

Automne 2022 CHM106 56

56

28

Vous aimerez peut-être aussi