Techniques de base en Microbiologie

1) Installation du poste de travail en Microbiologie

En Microbiologie, presque la majorité des manipulations sont effectuées au sein d’un poste appelé « Poste
de travail ». Avant toute manipulation, ce poste doit être bien organisé pour pouvoir manipuler
correctement.
Le manipulateur doit déposer sur la paillasse tout le matériel dont il aura besoin pour effectuer sa
manipulation. Le manipulateur doit éviter, au maximum, de se déplacer pendant qu’il manipule.
Le poste de travail (Fig 1) doit être bien organisé de la façon suivante :
Pour un manipulateur droitier, tout le matériel avec lequel on travaille (anse de platine, pipettes Pasteur,
pipettes graduées, micropipettes, pinces etc.) doit être déposé A DROITE du Bec Bunsen. Tout le matériel
sur lequel on travaille (boites de Pétri, tubes à essai, tubes à hémolyse, lames, flacons de milieux de culture
etc) doit être déposé A GUACHE du Bec Bunsen.
Derrière le Bec bunsen et légèrement à droite doit être déposé un bocal d’eau de Javel pour récupérer tout
le matériel en verre contaminé (lames, pipettes Pasteur ou graduées etc.). Aussi, le Manipulateur aura besoin
d’une boite pour récupérer tous les déchets infectieux.

g h
c

d
b
f e a

Fig. 1 : Poste de travail en Microbiologie

https://lh3.googleusercontent.com/proxy/xWJcrE5rp8i_yqNz0BF8ojuga2vk5FI8e2HodY3bk8dbS1hpK4uWVspfyZWnrPwQ
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a= Bec Bunsen, b= micropipettes, c= anse de platine et pipettes, d= portoir avec tubes à essai, e= boite de
Pétri avec milieu de culture, f= flacon de prélèvement, g= poubelle pour déchets, h= bocal d’eau de Javel.
 Bec Bunsen ou Bruleur
Le Bec Bunsen (Fig 2) constitue la pièce maitresse au niveau du poste de travail. Un bruleur = Bec bunsen= il
sert à stériliser le matériel avec lequel on manipule les bactéries. Il permet de maintenir un champs stérile en
repoussant les microorganismes de l’air = création de la zone d’asepsie

Fig. 2 : Bec Bunsen

https://encryptedtbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRE8DFMlRQZCfpMT5HnJXlS6_GVrntC5bc8vw&usqp=CAU

Zone d’asepsie
Zone d’asepsie= zone qui entoure le Bec Bunsen. Elle correspond à un diamètre de 15 à 20 cm autour du Bec. Une fois
allumé par les deux vannes à gaz, le Bac Bunsen doit être réglé par la girole pour obtenir une flamme très chauffante.
Généralement quand le Bec est allumé on peut obtenir différents types de flammes (Fig. 3). Le manipulateur doit
régler le Bac pour obtenir une flamme bleue (type 4). Cette flamme, avec un cône bleu, est très puissante.

Fig. 3 : Flammes émises par un Bec Bunsen

https://encryptedtbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcTzyvfYTZN0map9a2o7iuRAHHxpss1yNBKKHA&usqp=CAU
 2) Exemple de manipulations en Bactériologie

Fig.4 : Ensemencement d’un bouillon nutritif

https://encrypted-tbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcQYgTeq8_wDwU4RroZ_t-7aORYiUjSwC3BOvg&usqp=CAU

Fig.5 : Prélèvement d’un inoculum bactérien

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