Université Mouloud MAMMERI Tizi-Ouzou

Faculté de médecine
Département de pharmacie
3ème année pharmacie

DÉVELOPPEMENT PRÉCLINIQUE
DES MÉDICAMENTS

Présenté par:
Année universitaire: 2023/2024 DR.S.TAZEKRITT
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Objectifs du cour

 Comprendre les différentes étapes du développement d’un

médicament;
 Intérêts du développement préclinique;
 Importance de la pharmacologie expérimentale;
 Importance de la toxicologie expérimentale.
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Introduction
Étape du développement
Essais précliniques
Pharmacologie expérimentale
Toxicologie expérimentale
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Substance 1 Substance 2 Substance n

Extraite de Synthèse Biotechnologie
plante

Laboratoire pharmaceutique

Activité
thérapeutique

Toxicité /mode
d’utilisation

Médicaments
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Développement d’un médicament

Phase de la recherche

Essais précliniques

Essais cliniques
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Phase de la recherche

 Identification des besoins médicaux non satisfaits;

Identification de la cible;

Validation de la cible;

Identification des HITS;

Confirmation des HITS;

Génération des leads: têtes de série;

Optimisation des leads

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Identification des besoins médicaux

• Les besoins médicaux non satisfaits: ex le cancer;

maladie rare….etc

• Essayer de répondre aux impasses thérapeutiques:

maladies sans traitements; traitements non satisfaisant

• Recherche bibliographique ou sur terrain.

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Identification de la cible
Cible connue Cible nouvelle

Approche phénotypique Approche génétique

Recherche des modifications génétiques impliqué

In vivo: rats diabétiques
dans la maladie

In vitro: cœur isolé Implication de la protéine synthétisée dans la maladie

Identification des cibles auxquelles des composés on

Ex : Etude l’impact de l’IL6 dans la PR
induit la maladie
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Validation de la cible

• Confirmation de l’implication de la cible dans la

maladie

• Utilisation de plusieurs modèles: animaux

génétiquement modifiés

Suppression ou activation d’un

gène: voir l’impact sur la maladie
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Identification des HITS

• Hit : composé susceptible d’avoir une activité
pharmacologique avec affinité élevée à la cible déjà
identifié.

• L’identification : par screening ou criblage

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Types de screening

Haut débit Orienté Sur fragments Virtuels

• Rapide • Analogie • Testé une librairie • Chimiothèque

• Bio-informatique structurelle de fragments virtuelle
• Nombre de contre la même • Complémentarité
molécules limitées cible moléculaire: 3D
• Combinaison des
fragments= hit

Criblage virtuel des

inhibiteurs de la
neuraminidase = traitement
de la grippe
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Confirmation des hits

• Quels buts?
 Eliminer les faux positifs;

 Confirmer l’activité est à un mécanisme d’action

spécifique des HITS

 Déterminer la courbe dose/effet, IC50 et DE50: définir

affinité et efficacité;

 Classification chimique des HITS

Etude des relations structure activité

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Génération des têtes de série: leads

Hit Modification Lead

Optimisation
pour essai
Screening des leads avec recueil de données préclinique
préliminaires avant essais préclinique
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Screening des leads

Etudes pharmacodynamiques
Liaison à la cible: affinité Efficacité

ADME
Induction/inhibition enzymatique/liaison aux
Clairance intrinsèque/perméabilité intestinale
PP

Physicochimique
Perméabilité Solubilité

Pharmacocinétique in vivo
Sur le même modèle d’étude de l’efficacité

Potentiel toxique
Hépato-toxicicté Génotoxicité etc
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Quels intérêts?
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Quels leads passent au essais précliniques?

• Pharmacocinétique acceptable;

• Efficacité/activité in vivo;

• Sécurité acceptable;

• Faisabilité des bonnes pratiques de fabrication;

• Profile d’interaction médicamenteuse acceptable.

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Essais précliniques

Pharmacologie expérimentale

Toxicologie expérimentale

Pharmacologie d’innocuité
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Pharmacologie expérimentale

La pharmacologie expérimentale sert à:

Identification et évaluation des effets

Détermination des effets potentiels

Comprendre le mécanisme et cible d’action

Etude des propriétés pharmacocinétiques

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Etude de pharmacocinétique et métabolisme

• Etude des voies d’absorption et d’élimination

• Etude de la distribution et métabolisme;

choix de la voie d’administration et forme galénique.

• Définir les différences avec l’homme  déterminer les

doses pour la toxicologie expérimentale et le choix du

modèle animal.
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Pharmacologie d’innocuité
• Identification des effets pharmacodynamiques
indésirables aux thérapeutiques prévues.

• Définir le mécanisme de survenue;

• Evaluation de ces effets.

Métabolites Isomères Produit fini

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Pharmacologie d’innocuité
• Même voie prévue chez l’homme;

• Dose unique ou répétée si nécessaire;

• Doses: permettent le lien dose/effet, doses incluse et excèdent la

marge thérapeutique.
Avant ou en parallèle aux essais cliniques

Tests essentiels Tests de suivi Tests complémentaires

• Les principaux • SNC • Appareil urinaire

systèmes: SNC; SNA; • CV • Digestif
respiratoire; CV…etc • Respiratoire • Cutané
• Avant essais
cliniques Recommandés avant toutes commercialisation

Selon les données de littératures; structures chimiques; tests essentiels….etc

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Modèles expérimentaux utilisés

Modèles in vivo

Modèle
induit

Modèle pathologique
spontané

Modèle
transgénique
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Modèles expérimentaux utilisés

• Modèle ex vivo

• Modèle in vitro: culture cellulaire;

fragments membranaires

• Modèle in silico
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Toxicologie expérimentale

Quantitative

Qualitative

Essais prérequis Essais post requis

 Essais pré-requis avant les essais cliniques

Administration unique Essais de Mutagenèse

Toxicité aigueaigue

Administration réitérée à court terme

Toxicité subaigüe

Essais post – requis

Essais de Essais de tératogenèse

cancérogenèse reprotoxicité

Administration réitérée à long terme

Toxicité chronique
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Toxicité aigue : protocole

1 seule administration 2 voies d’administrations
2 espèces rongeurs:
4 niveaux de doses rat/souris
Evaluation de la mortalité Observation pdt 14 jours
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Méthodes de calcul de la DL50

• Méthode mathématique:

• Méthode graphique: conversion log-probit

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DL50 graphique: conversion log-probit

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Calcul de la DL 50 par méthode graphique

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Données de toxicité à dose unique

• Determination de la dose maximale tolérée (MDT);

• Les signes d’un surdosage;

• Les systèmes touchés;

• Prévoir les doses à administrer chez l’homme;

• Définir les doses à utiliser dans la toxicité par gamme de

dose.
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Détermination de l’index thérapeutique

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Toxicité subaiguë: par gamme de dose

• Pourquoi?  les médicaments sont pris à dose répétée
 a dose unique il faut une dose élevée pour avoir des effets
toxique
• Quels intérêts?

 Evaluation des effets toxiques après exposition répétée en fonction de la

posologie et les rythmes d’administration
 Mimer l’exposition dans le temps

 Déterminer les organes cibles

 Connaitre les effets réversibles ou irréversibles

 Connaitre l’existence ou non de phénomènes cumulatifs et d’effets retards.

 Déterminer le niveau « sans effet » de la substance (limite d’innocuité

expérimentale)
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Toxicité subaiguë: par gamme de dose

• Deux espèces: rongeur et non rongeur;

• Les deux sexes: 5 animaux/rongeur et 1/autres espèces

• 4 niveaux de doses: sans avoir une dose toxique létale;

• Voie d’administration: celle prévue en clinique

• Durée: 90% de la durée total de vie de l’espèce testé

 dépend de la durée d’utilisation de la molécule en clinique. Ex si < 7jours

: la durée de l’étude 14 jours

• A le fin de l’étude la moitié des animaux seront sacrifiés : examen

microscopique macroscopique; anapath des organes

• Les animaux vivants: étude de la réversibilité des effets.

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Détermination de la NOAEL

Dose sans effet observé ou NOAEL «No

ObservedAdverse EffectLevel» = la dose la plus
élevée sans effet toxique significatif clinique
biologique ou anatomopathologique.
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Essai de mutagenèse

Mutagène: modification brusque, permanente et transmissible du matériel

génétique par changement dans le nombre ou la qualité des gènes.

La recherche d’un potentiel mutagène

La prédiction de la cancérogenèse et/ou d’un effet sur les

fonctions de la reproduction.

Aberrations chromosomiques Mutations géniques

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Essai de mutagenèse

• Les agents mutagènes augmentent la fréquence des mutations

spontanées.

• Touteatteintequalitativeouquantitativedel’ADNpeutinduireu

nemutation.

• Tout agent affectant l’ADN d’un organisme (uni ou

pluricellulaire) peut affecter l’ADN des cellules humaines

Principe de l’essai
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Essai de mutagenèse
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Essai de mutagenèse
• Essai relatif aux mutations
géniques : test d’AMES
 mutation génique réverse in
vitro, sur cellule procaryote
• Recherche de mutation génique
réverse «restauration de la
fonction du gène sur Salmonella
typhimurium
• Souche auxotrophe  agent
mutagène  souche
prototrophe
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Essai de mutagenèse Test au micronucléus

• Essai relatif aux aberrations chromosomiques

Exemple: un test d’aberration chromosomique in

vivo sur cellules hématopoïétiques de rongeur
• Principe:

Détection de dommages induits par la substance

d’essai aux chromosomes ou à l’appareil
mitotique des érythroblastes par l’analyse des
érythrocytes prélevées dans la moelle et/ou le
sang périphérique des souris/rats
L’augmentation du taux d’érythrocytes
polychromatiques micronucléus est une
indication de dommages chromosomiques induits
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Essai de mutagenèse: évaluation

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Essais post requis: toxicité chronique

• Affiner ou compléter les informations sur la toxicité du

produit;

• Déterminer les organes cibles (altérations fonctionnelles

et anatomopathologiques);

• Mise en évidence d’effets réversibles et non réversibles;

• Existence ou non d’effets cumulatifs ou retard;

• Enrichir les connaissances cliniques.

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Essais post requis: toxicité chronique

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Les examens nécessaires

• Les examens:

 Consommation nourriture et eau.

 Examen fonctionnel et biologique.

 Examen cliniques (poids, comportement).

 Autopsie.

 Histopathologie : organes prélevés

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Essais post requis: essais de cancérogenèse

• Evaluer le potentiel cancérigène/capacité d’augmenter l’incidence

des tumeurs spontanées/capacité de raccourcir le temps de latence
des tumeurs spontanées.
• Attention particulière aux:
Molécules administrées en chronique;

Molécules suspectes lors des premiers essais toxiques (images

histologiques suspectes);
Molécules ayant une analogie structurale avec des produits
cancérigènes;
Molécules dont les tests de mutagénicité se sont révélés positifs.
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Essais post requis: essais de cancérogenèse

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Essais post requis: essais de cancérogenèse

• Il faut notifier:

• Les examens à effectuer:

Biologiques;
Cliniques;
Histopathologiques;
Autopsie : Recherche de tumeurs
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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Essais post requis: essais de reprotoxicité

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Conclusion
• Propriétés d’un bon candidat pour les essais cliniques

• 1. chimiques: synthèse simple stable,

• 2. physicochimiques : perméabilité; solubilité;

• 3. pharmacodynamie: liaison à la cible avec forte affinité, sélectivité , activité in

vitro, efficacité sur modèle animal pathologique.

• 4. pharmacocinétique: biodisponibilité, t ½ et distribution acceptables chez

l’animal/Caractérisation des voies métaboliques et évaluation de l’activité

métabolites

• 5. innocuité/ toxicité potentielle: liaison sans toxicité pas de génotoxicité ni d’

hépatotoxicité , profile d’induction et d’inhibition du CYP450 , pas de toxicité

grave chez l’animal
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