Biodisponibilité – Bioéquivalence -

Étude in-vitro
Dr. I. LIMAYEM BLOUZA
Pr. Ph. Galénique

1 03/12/2020
 Plan
 A. Biodisponibilité-bioéquivalence
 1. Historique
 2. Définition
 3. Bioéquivalence et équivalence thérapeutique
 4. Mesure de la biodisponibilité
 5. Applications pratiques
 6. Méthodes d’étude
 7. Dans quels cas faire une étude de bioéquivalence ?
 B. Essai de dissolution in vitro
 1. Intérêts
 2. Appareillage
 3. Conditions opératoires
 4. Conduite de l’essai
 5. Expression des résultats
 6. Corrélation in vitro-in vivo

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 1. Historique
 Constatation d’une inéquivalence thérapeutique entre 2
spécialités considérées jusque-là interchangeables (même PA, dose
unitaire identique, présentation pharmaceutique identique)

 Plusieurs accidents et incidents (inefficacité ou toxicité)

 Les dosages sanguins de PA notion de disponibilité et de

dose « utile » : la fraction absorbée de la dose administrée

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 2. Définition
 Depuis 1972, la définition de la biodisponibilité est la suivante
(OMS, FDA) :
"La biodisponibilité représente la fraction du principe actif
administré qui atteint la circulation générale et la vitesse avec
laquelle elle l'atteint".

 Se mesure par rapport à une forme pharmaceutique de référence

de même type (biodisponibilité relative) ou par rapport à une
solution pour injection intraveineuse (biodisponibilité absolue)

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 3. Bioéquivalence et équivalence
thérapeutique
 Deux médicaments sont dits bioéquivalents s’ils ont la même
biodisponibilité.
Il faut donc que la quantité de principe actif qui atteint le site
d’action et la vitesse à laquelle ce phénomène a lieu soient
identiques.

 Équivalence clinique ou thérapeutique:

 Médicaments, équivalents pharmacologiques, chimiques ou
pharmaceutiques, conduisant, à posologie identique, à une même
efficacité thérapeutique contrôlée ou aux mêmes incidents toxiques
chez un même individu.
5 03/12/2020
 3. Bioéquivalence et équivalence
thérapeutique
 La biodisponibilité : caractéristique d’un médicament donné
(garantie pharmaceutique) mais non de la relation malade-
médicament
 La bioéquivalence est une condition nécessaire et pas suffisante
d’une équivalence thérapeutique

 Équivalence thérapeutique: essais cliniques coûteux (nombreux

patients) étude de bioéquivalence (profils plasmatiques)
peut constituer une démonstration indirecte de l’équivalence
thérapeutique de deux formulations

6 03/12/2020
 4. Mesure de la biodisponibilité
 Il y a donc un aspect quantitatif, c'est la fraction
effectivement résorbée, c'est-à-dire le coefficient de
résorption (F), évalué d'après l'aire sous la courbe (AUC)
des concentrations/temps

 et un aspect cinétique, représenté par la vitesse de résorption,

caractérisé par Tmax et Cmax

Quantité AUC
Vitesse Tmax et Cmax

7 03/12/2020
 4. Mesure de la biodisponibilité
Profils plasmatiques de deux Profils plasmatiques de deux
médicaments bioéquivalents médicaments non bioéquivalents

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 4. Mesure de la biodisponibilité
 La vitesse d’absorption doit être prise en compte car on
peut avoir même AUC alors que les deux médicaments ne
sont pas bioéquivalents

9 03/12/2020
 4. Mesure de la biodisponibilité
 Biodisponibilité absolue et relative

La biodisponibilité d'un médicament administré par voie IV est totale et

immédiate.

F, fraction du P.A., disponible par l'organisme après administration par

voie IV est donc égale à 1 par définition.

La biodisponibilité d'un médicament administré par :

- voie différente que la voie intravasculaire peut être comparée soit à la voie IV,
on parle alors de biodisponibilité absolue.
- soit à une voie différente que la voie IV, on parle alors de
biodisponibilité relative.

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 5. Applications pratiques
 La biodisponibilité est un moyen de rationalisation du
développement d’un médicament:
 PA nouveau
 Suite à des modifications (physico-chimiques du PA, formulation,
technologie…)

 La bioéquivalence :
 Application dans le cadre de médicaments génériques
 Considérée pour juger l’interchangeabilité de médicaments

11 03/12/2020
 5. Applications pratiques : Générique
 D’après l’article L5121-1 du Code de la Santé Publique:
« La spécialité générique d’un produit de référence est définie
comme celle qui a:
• la même composition qualitative et quantitative en principe actif
• la même forme pharmaceutique
• dont la bioéquivalence avec la spécialité de référence est
démontrée par des études de biodisponibilité appropriées. »

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 5. Applications pratiques : Générique
 Commercialisé lorsque le brevet du princeps est tombé dans
le domaine public
 Son prix est inférieur de 30 à 50%
 Son autorisation de mise sur le marché est rapide à obtenir
après la seule étude de bioéquivalence
 Son nom peut être celui de la molécule suivi du nom du
laboratoire : Amiodarone BIOGARAN ou plus rarement
d’un nom original
 Il doit répondre aux même critères de qualité, d’efficacité
et de sécurité
13 03/12/2020
 5. Applications pratiques
 Brevet d’invention : titre délivré par l’état qui confère à son
titulaire un droit exclusif d’exploitation de l’invention
Durée : 20 ans + CCP

 Médicament sous licence: médicament identique à l’original

 Médicament de contre façon: copie non autorisée d’un

médicament autorisé (PA protégé par un brevet d’invention)

 Spécialité de référence (princeps): spécialité qui a bénéficié

d’une AMM grâce à un dossier pharmaceutique,
toxicologique et clinique complet

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 6. Méthodes d’étude
Sujets :
 Sains sauf si substance à caractère toxique (dans ce cas patients
avec signature de consentement éclairé)
 Des 2 sexes, entre 18 et 55 ans
 Nombre minimal : 12 individus pour une étude croisée
 Etude réalisée dans un centre agréé et basée sur des taux
plasmatiques de principe actif ou sur une activité
pharmacologique
 Interprétée et évaluée par un expert reconnu.

15 03/12/2020
 6. Méthodes d’étude
Conditions :
 A jeun ou repas standard à une heure spécifiée avant
l’administration
 Repas et heure de prise standardisés de même que l’apport
hydrique
 Pas de co-médication, alcool, tabac, bases xanthiques,
pamplemousse…
 Si médicament à forte clairance, la position et l’activité doivent
être standardisées

16 03/12/2020
 6. Méthodes d’étude
 La méthode statistique pour tester l’équivalence est basée sur
l’intervalle de confiance fixé à 90 % pour le rapport des moyennes
des valeurs des paramètres considérés (Test/ référence)
 Limites de bioéquivalence 80 – 125 %

Bioéquivalence

80 100 125

17 03/12/2020
 7. Dans quels cas faire une étude de
bioéquivalence ?

 Formes orales sèches

 Formes transdermiques
 Suppositoires et ovules à action systémique

18 03/12/2020
 7. Dans quels cas faire une étude de
bioéquivalence ?

 Médicaments à marge thérapeutique étroite

 Médicaments à libération modifiée
 Médicaments en association (plus d’un PA)
 Principe actif à solubilité inférieure à 5 mg/ml

19 03/12/2020
 Dérogation aux études de
biodisponibilités
 Non obligatoires pour :

 Les solutions orales sauf s’il y a des excipients qui peuvent

modifier l’absorption
 Les formes parentérales (IV, S/C, IM) en solution aqueuse
 Des formes en poudre destinées à être administrées en
solution après reconstitution
 Les gaz médicaux
 Médicaments à usage auriculaire, ophtalmique, topique et
les produits pour inhalation et pulvérisation
20 03/12/2020
 Dérogation aux études de
biodisponibilités
 Si le principe actif appartient à la classe I et III de la
classification bio-pharmaceutique de Gordon Amidon

21 03/12/2020
 Dérogation aux études de
biodisponibilités
 Équivalence démontrée par une épreuve de dissolution in vitro (OMS):

 Médicaments dont la cinétique de dissolution est très rapide,

 Médicaments de différents dosages d’une même formulation produite par le

même fabricant lorsque :
 La composition qualitative des différents dosages est essentiellement la même
 Le rapport entre PA et excipients est essentiellement le même pour tous les dosages,
 Une étude de bioéquivalence a été effectuée sur au moins un des dosages

 Les médicaments à action systémique dont les études ont montré que la
pharmacocinétique est linéaire sur toute la plage thérapeutique.

22 03/12/2020
 B. Essai de dissolution in vitro

1. Intérêts
2. Appareillage
3. Conditions opératoires
4. Conduite de l’essai
5. Interprétation des résultats
6. Corrélation in vitro-in vivo

23 03/12/2020
 1. Intérêts
 En développement :
Aide à l’optimisation de la formule et du processus de fabrication

 En contrôle de routine :
Assure la qualité et les performances des produits pharmaceutiques

 Étude d’équivalence in vitro :

Comparaison des profils de dissolution entre princeps et générique

24 03/12/2020
 2. Appareillage : Appareil à panier (1)
 Récipient de forme cylindrique à fond
hémisphérique, d’une contenance de 1 L,
en verre (ou matériau transparent inerte),
toutes les dimensions sont codifiées;

 Dispositif d’agitation : tige servant d’axe

moteur et un panier cylindrique en acier
inoxydable, grillagé (ouverture de maille
de 0,36-0,44 mm)

 Couvercle : évite l’évaporation

25 03/12/2020
 2. Appareillage : Appareil à palette (2)
 Même configuration que l’appareil 1

 Élément agitateur : palette = pale + tige

 Toutes les dimensions sont codifiées

 Préparations ayant tendance à surnager : maintien en immersion au

moyen de dispositif codifié
Dissolutest

26 03/12/2020
 2. Appareillage : Appareil à pistons (3)
 Un jeu de vases cylindriques en verre à fond plat;
 Un jeu de pistons tubulaires en verre;
 Des tamis, constitués d’un matériau non réactif
 Un moteur et un système d’entraînement
permettant d’imprimer aux pistons un mouvement
vertical alternatif à l’intérieur des vases
 Les vases sont équipés d’un capuchon régulant
l’évaporation, qui reste en place durant l’essai.

27 03/12/2020
 2. Appareillage : Cellule à flux continu (4)
 Un réservoir;
 Une pompe assurant la circulation du milieu de dissolution;
 Une cellule à flux continu (matériau inerte et transparent), montée
verticalement et surmontée d’un filtre assurant la rétention dans la
cellule des particules non dissoutes;
 Un bain d’eau thermostaté permettant de maintenir la température
du milieu de dissolution à 37 ± 0,5 °C.

28 03/12/2020
 3. Conditions opératoires
 Température :
 Formes orales : 37  0,5 °C
 Formes transdermiques : 32  0,5 °C
 Agitation du milieu : renouvellement des couches de liquide autour du PA
(généralement 100 rpm pour panier, 50 rpm pour palette et un débit de
240 à 960 ml/h pour cellule à flux continu)
 Niveau du panier ou de la palette : 25  2 mm / fond du récipient
 Volume du milieu de dissolution : conditions Sink
 pH : - eau (dissolution pH non dépendante)
- respecter variation de pH du tractus gastro-intestinal (pH 1,2 pH
4,5 et pH 6,8)
- Formes à libération retardée : phase acide puis phase tampon

29 03/12/2020
 4. Conduite de l’essai
 Démarrage de l’essai quand la température atteint 37 °C
 L’essai est réalisé sur 6 unités (1 par récipient ou par piston ou par cellule)
 Mettre l’appareil en marche (à la vitesse, fréquence ou débit spécifiés)
 Prélever un échantillon du milieu de dissolution dans l’intervalle de temps
spécifié ou à chacun des temps indiqués :
 Dans une zone située à mi-distance de la surface du milieu et du haut du panier ou
de la pale et au moins à 1 cm de la paroi du récipient
 Dans une zone située à mi-distance de la surface du milieu et du fond de chaque
vase
 Recueillir l’éluat
 Remplacer les échantillons prélevés par des volumes égaux du milieu de
dissolution
 Procéder à l’analyse de l’échantillon par une méthode de dosage appropriée

30 03/12/2020
 5. Interprétation des résultats
 Formes à libération conventionnelle :

Nombre Critères d’acceptation

d’unités
examinées
6 Aucune unité n’est inférieure à Q + 5 %.
6 La moyenne des 12 unités est égale ou supérieure à Q et
aucune unité n’est inférieure à Q − 15 %.
12 La moyenne des 24 unités est égale ou supérieure à Q, au
maximum 2 unités peuvent être inférieures à Q − 15 %
et aucune unité n’est inférieure à Q − 25 %.

Q : quantité spécifiée de PA passée en solution exprimée en % de la teneur

indiquée sur l’étiquette
31 03/12/2020
 5. Interprétation des résultats
 Formes à libération prolongée :
Nombre Critères d’acceptation
d’unités
examinées
6 Aucune valeur individuelle ne se situe en-dehors des différents intervalles spécifiés ni n’est inférieure à la
quantité spécifiée au temps final de l’essai.

6 La moyenne des 12 unités est comprise dans chaque intervalle spécifié et n’est pas inférieure à la quantité
spécifiée au temps final de l’essai ; aucune valeur ne présente, par rapport aux différents intervalles
spécifiés, un écart supérieur à 10 % de la teneur indiquée sur l’étiquette ni n’est inférieure de plus de 10 %
de la teneur indiquée sur l’étiquette à la quantité spécifiée au temps final de l’essai.

12 La moyenne des 24 unités est comprise dans chaque intervalle spécifié et n’est pas inférieure à la quantité
spécifiée au temps final de l’essai ; au maximum 2 des 24 valeurs peuvent présenter, par rapport aux
différents intervalles spécifiés, un écart supérieur à 10 % de la teneur indiquée sur l’étiquette ; au maximum
2 des 24 valeurs peuvent être inférieures de plus de 10 % de la teneur indiquée sur l’étiquette à la quantité
spécifiée au temps final de l’essai ; aucune valeur ne présente, par rapport aux différents intervalles
spécifiés, un écart supérieur à 20 % de la teneur indiquée sur l’étiquette ni n’est inférieure de plus de 20 %
de la teneur indiquée sur l’étiquette à la quantité spécifiée au temps final de l’essai.

32 03/12/2020
 5. Interprétation des résultats :
Test de dissolution - Équivalence

Cinétique de dissolution des comprimés de chloroquine

33 03/12/2020
 6. Corrélation in vitro-in vivo
 Selon la FDA : une corrélation = une relation entre 2 paramètres :
relation entre la vitesse de dissolution in vitro ou ses caractéristiques
et la vitesse de dissolution in vivo
 On définit 3 niveaux de corrélation :
 Niveau A : relation unité/unité en comparant la courbe de dissolution in
vitro à la fonction d’absorption in vivo
 Niveau B : relation entre le temps moyen de dissolution in vitro et le
temps moyen de séjour in vivo ou au temps moyen d’absorption in vivo
 Niveau C : comparer un seul paramètre pharmacocinétique (AUC, Cmax,
Tmax…) à un seul point de dissolution (t50%, t90%...)
 Niveau A : meilleures prévisions et permet de dispenser d’une étude
de bioéquivalence

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