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Extraction de substances bioactives des plantes médicinales :

TP
« Extraction par hydrodistillation de la lavande »
N°1

I. Introduction :

Au fil des siècles, confrontées à des éléments souvent hostiles (parasites, champignons
microscopiques…), les plantes ont su s'adapter pour survivre. Face à ces menaces, elles se
sont dotées «d'armes» soit mécaniques (aiguilles d'orties, cactus…) ou chimiques que l'on
nomme principes actifs.

Ces principes sont de véritables agents thérapeutiques, qui agissent comme stimulateurs
des diverses fonctions organiques humaines. Les substances actives peuvent se trouver
dans la racine, les fleurs, les feuilles, l'écorce.

Un principe actif est une molécule extraite de la plante qui soigne

On dispose de deux types de techniques permettant d'extraire les principes actifs des
plantes médicinales :
- Techniques traditionnelles d'extraction : Avec les techniques traditionnelles, les
plantes peuvent être préparées en infusion, décoction ou macération.
-Techniques d'extraction scientifiques : On dispose de plusieurs techniques scientifiques
permettant d'extraire les principes actifs des plantes médicinales. Parmi elles on compte :
l'hydrodistillation, le CO2 supercritique, le cryobroyage et la centrifugation différentielle.

II. Objectif du TP :

- Extraire l’huile essentielle de lavande par la technique de « l’hydrodistillation »pour

récupérer l’essence de lavandin constituée principalement d'acétate de linalyle et de linalol.
- Faire son analyse par chromatographie sur couche mince.

La lavande est utilisée depuis toujours pour son parfum d’une fraîcheur incomparable
réputé pour favoriser le bienêtre et la relaxation.Cette plante possède aussi de multiples
vertus médicinales et est couramment utilisée en phytothérapie ou sous forme d’huile
essentielle. La lavande possède notamment des propriétés antiseptiques, bactéricides,
désinfectantes, calmantes, antispasmodiques et carminatives….

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III. Hydrodistillation de la lavande :

Principe : On introduit dans un ballon 10 g de fleurs de lavande et 100 mL d'eau distillée. Puis on
chauffe à ébullition le mélange pendant environ 30mn jusqu’à obtenir environ 70 mL de distillat.
- Pour réaliser cette expérience voir le montage ci-dessous :

✔ Déposer le ballon sur un valet et y introduire le

mélange à chauffer.
✔ Placer le ballon dans un bain marie sur
chauffante
/agitateur
. Le maintenir par une pince.
✔ Adapter sur le ballon l’ensemble
coudé/condenseur.
✔ Maintenir le condenseur par une pince. Plac
sortie une éprouvette graduée, afin de récup
distillat.
✔ Adapter le tuyau d’arrivée d’eau du condenseu
Schéma1 : l'hydrodistillation de fleurs de lavande. du bas) à un robinet d’eau froide.
✔ Placer le tuyau de sortie d’eau dans l’évier.

✔ Ouvrir doucement le robinet d’eau jusqu’à obt

débit suffisant.
✔ Mettre le chauffage en marche et agir sur le ther
afin d’assurer une ébullition douce.
✔ Durant la distillation, vérifier régulièrement
condenseur est alimenté en eau froide.

NB !
Recueillir le distillat dans une éprouvette graduée : dès que le distillat coule dans
l’éprouvette graduée, régler le chauffage pour obtenir un débit de 1 à 2 gouttes par
seconde.
Recueillir environ 50à 70mL de distillat.
Lorsque l’hydrodistillation est terminée :
✔ éteindre le chauffage.

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✔ Couper ensuite l’alimentation d’eau.

IV. Extraction liquide-liquide.de lavande :

Le distillat obtenu dans l’éprouvette graduée en sortie du montage ne permet pas la

récupération de l’huile essentielle par simple décantation. On va procéder à une extraction
par solvant de l’huile essentielle de lavande du distillat :

Mode opératoire :

✔ Ajouter 3 gr de chlorure de sodium NaCl au distillat

obtenu et agiter avec une baguette en verre pour
dissoudre le sel.
✔ Transvaser la solution obtenue dans une ampoule à
décanter et y ajouter 10 mL de cyclohexane.

N.B : Le cyclohexane est un solvant dont il faut éviter de

respirer les vapeurs. Gants et lunettes sont obligatoires.

✔ Agiter l’ampoule à décanter en n’oubliant pas de la

purger assez régulièrement.
Schéma 2 : Décantation d'huile essentielle de
✔ Laisser reposer.
lavande.
✔ Identifier et recueillir dans un bécher sec la phase
organique.
✔ Ajouter dans le bécher un sel desséchant (carbonate de
potassium anhydre) et agiter avec une tige en verre.
✔ Filtrer la phase organique.

V. Chromatographie de l’essence de lavande :

Principe de la chromatographie sur couche mince : La CCM est une méthode

permettant de contrôler la pureté d’une substance, de séparer les constituants d’un mélange
et éventuellement de les identifier.

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Le mélange est fixé sur un support appelé phase stationnaire (un gel de silice déposé en
couche mince sur une plaque d’aluminium). Il est entraîné par un solvant approprié (phase
mobile ou éluant) qui migre par capillarité sur la plaque. Les constituants du mélange se
séparent par migration différentielle : chacun d’eux est d’autant plus entraîné par l’éluant
qu’il est plus soluble dans celui-ci et moins absorbé par la phase stationnaire.
Après migration les taches doivent être révélées; c’est la détection qui peut se faire par
pulvérisation d’un réactif caractéristique ou par immersion dans un bain de permanganate
de potassium ou par observation à la lumière UV si la plaque de silice comporte un
indicateur de fluorescence.
Mode opératoire :
Sur une plaque de chromatographie
réaliser 3 dépôts : ✔ Mettre de l’éluant (dichlorométhane) dans une cuve de chromatographie
sur une hauteur de 5 à 8 mm.
dépôt 1 : le linalol
dépôt 2 : l’acétate de linalyle ✔ Tracer un léger trait de crayon (pour éviter d’abîmer la plaque)
dépôt 3 : essence de lavande extraite parallèle au bord inférieur de la plaque à une distance de 1.5 cm. Les
produits sont déposés juste au-dessus de cette ligne, à 1 cm du bord
de laplaque et espacés de 1 cm.
✔ Déposer une petite quantité de solution en un point précis, on utilise
des « piques apéritifs » dont le bout a été écrasé. Déposer la solution
pendant une durée très brève afin d’éviter l’étalement du dépôt. Le
diamètre optimal de la tâche est 2-3 mm.
✔ Disposer la plaque dans la cuve, le dépôt doit être au-dessus du
niveau de l’éluant. Recouvrir la cuve de chromatographie avec une
Schéma 3 : Chromatographie sur
plaque.
couche mince
✔ Quand le front de l’éluant arrive à 1 cm du bord supérieur, retirer
la plaque. Sécher la plaque à l’air.
✔ On la trempe quelques secondes dans une solution très diluée de
permanganate de potassium
✔ Entourer les taches au crayon de papier.

Questions :
Q1 : A partir de quel moment va-t-on obtenir le distillat ? Expliquer le principe de la
technique employée.
Q2 : Quel est l'aspect du distillat obtenu ? Recueille-t-on uniquement de l'huile essentielle
de lavande ?

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Q3 : Pourquoi ajoute-t-on du cyclohexane ?

Q4 : Pourquoi faut-il agiter l’ampoule à décanter et la purger de temps en temps ?
Q5 : Comment appelle-t-on l’étape où l’on utilise l’ampoule à décanter ?

Q6 : On récupère la phase organique. Pourquoi faut-il enlever le bouchon de

l’ampoule à décanter ?
Q7 : Pour améliorer le rendement, on pourrait faire une extraction à l’éther. Quelles
précautions faudrait-il alors prendre
Q8 : Comment récupérer l’huile essentielle de lavande ?
Q9 : Représenter la plaque de chromatographie (avant et après l’élution)