TD N° 02 en Microbiologie

Techniques de Stérilisation

Objectif :

* Connaître les principales techniques de stérilisation

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Les principales techniques de
stérilisation

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 La stérilisation

La stérilisation est une opération qui vise à détruire

tous les micro-organismes d'un objet ou d'une
préparation.

Elle est notamment utilisée dans la microbiologie, la

médecine et l'industrie pharmaceutique.

On ne peut stériliser que ce qui est propre

(décontamination).

Il existe quatre formes principales de stérilisation :

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 1/ Stérilisation 2/ Stérilisation 3/ Stérilisation 4/ Stérilisation
par chaleur par filtration par radiations chimique

* Flambage (chauffage direct):

On stérilise, par simple passage à travers
la flamme bleue de Bec Bunsen, les fils en
platine et les pipettes pasteur.

*Crée un globe virtuel stérile de 10

cm de la flamme.
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par chaleur par filtration par radiations chimique

•stérilisateurs à air chaud : (fours

Pasteur, Poupinel)
•C’est un four classique utilisé pour la
verrerie, porcelaine et instruments
métalliques.
•Les spores et germes sont détruits en
chaleur sèche, par un chauffage de :
• 2 h à 160 °C ;
• 1 h à 170 °C ;
• 30 min à 180 °C.

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*Chaleur humide :
La chaleur associée à l'humidité provoque
la destruction totale des germes.
A- Autoclavage
Ceci est réalisé à 121°C pendant 15 min au
minimum.
A utiliser pour les milieux de culture, matériel
en caoutchouc, la verrerie …..

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par chaleur par filtration par radiations chimique

*Chaleur humide :
B- Les bain-marie ou bain- thermo statés
( ébullition ):
Un chauffage de 30 min à 100°C par
ébullition ou un maintien dans la vapeur
d'eau bouillante suffit à détruire toutes les
formes végétatives.
A utiliser pour la stérilisation des produits
liquides délicats : milieux albumineux, lait,
gélatine… Dr MAHDJOUR.S
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*Chaleur humide :
C- Pasteurisation
*Conservation des produits naturels pendant un temps limité,
ne détruit que les formes végétatives mais pas les spores.
*Le liquide est porté rapidement à 90°C pendant 30s, par ex, puis
on le refroidit brusquement à 10°C.
*Conservation des produits alimentaires

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par chaleur par filtration par radiations chimique

*Chaleur humide :
D-Tyndallisation: la tyndallisation consiste en une série de 3
pasteurisations de 1h. à 70 - 80°C, séparées par un intervalle de 24
heures à température ambiante, ce qui permet la germination et la
destruction des spores, sans l'emploi d'une température excessive.
Cette méthode est utilisée pour les milieux fragiles contenant
sérum, œuf ou toute substance thermosensible de forte viscosité
qui ne peut être stérilisée par filtration.

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par chaleur par filtration par radiations chimique

Technique qui consiste à faire passer un liquide à travers un filtre

dont les pores ont un diamètre de 0.2 µm. Cette technique est
intéressante lors d’utilisation de produits thermolabiles (c’est-à-dire
qui ne résistent pas à la chaleur) comme certains acides aminés,
vitamines, hormones, sérum et une bonne partie d’antibiotiques.

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par chaleur par filtration par radiations chimique

-Les rayons ultra-violets (UV) sont utilisés au laboratoire pour la

décontamination de l’air et des paillasses.

- Les rayons X et les rayons gamma utilisée pour la stérilisation des

boites de Pétri en matière plastique et de produit pharmaceutiques.

- Les micro-ondes utilisée pour la pasteurisation des jus de fruits

frais et la stérilisation du lait.
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par chaleur par filtration par radiations chimique

•Stérilisation à l’oxyde d’éthylène

• La stérilisation au gaz tue tous les germes et spores.
•Ce gaz est souvent utilisé pour stériliser les instruments
chirurgicaux, gants, seringues en plastique, aiguilles jetables,
ensembles de tubes, et appareils de dialyse.
• Les temps de stérilisation varient entre 2 et 6 heures à une
température de 55°C.

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•Stérilisation à l'acide peracétique

•C’est un oxydant biocide connu. Il est efficace dans l'élimination des
contaminants tels que les protéines sur les surfaces des
équipements chirurgicaux.
•Le mode d'action est peu connu et l'information limitée à ce sujet.
•On pense que leur action dénature les protéines et détruit
efficacement les parois cellulaires.

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 CONDITIONS A RESPECTER

Pour qu’une stérilisation soit efficace, il faut

respecter :
- La décontamination et désinfection préalable du matériel à
stériliser (trempage, lavage, brossage) : "On ne stérilise bien
que ce qui est propre".
-Les paramètres : durée et température
-La technique de stérilisation
- Le conditionnement : emballage perméable à la stérilisation et
à l’air

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