La structure bactrienne

1 Gnralits sur les tudes morphologiques :

1.1. Etat frais :
La prparation est traverse par les photons. Le fond de la prparation est clair.
Les microorganismes vivants sont visibles grce leur diffrence de rfringence par rapport
au milieu.

1.2. La coloration de Gram :

La coloration complexe utilise les affinits des structures cellulaires pour les colorants. Les
photons traversent la prparation, les microorganismes absorbent une partie des rayons
lumineux. Ainsi, ils apparaissent plus ou moins colors et diversement colors.

2 Structure bactrienne :
Lobservation dune cellule bactrienne peut se faire ltat frais ou la coloration de Gram.
On met en vidence :

La taille.
La morphologie.
Le mode de groupement.

La cellule bactrienne est quivalente un

systme clos protg du milieu extrieur par
une membrane et diffrentes structures
extrieures. Une bactrie peut aussi avoir
des appendis tels que les flagelles
ou le pilis.

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2.1. La capsule :
2.1.1. Mise en vidence :
La mise en vidence dune capsule peut se faire par
microscopie optique (sur un tat frais lencre de Chine).

2.1.2. Formation de la capsule (capsulognse) :

Laptitude des bactries produire une capsule dpend de son matriel gntique et des
conditions de culture.

2.1.3. Nature biochimique :

La capsule est forme de couches de polymres organiques accumuls lextrieur de la
paroi. Selon les espces, ces polymres peuvent tre :

Nature polyosidique :

Polymres doses et de drivs osidiques.

Nature polypeptidique :

Polymres dacides amins.

2.1.4. Rles de la capsule :

Protection :

Elle favorise la survie des bactries. Elle a un rle dans la virulence et dans la pouvoir invasif
de certaines bactries. Elle empche la phagocytose et protge la bactrie vis--vis des
bactriophages.

Energtique :

Les polymres accumuls lextrieur de la bactrie peuvent reprsenter une source de

carbone et dnergie. Elle intervient dans la fixation des ions.

Antignique :

Les constituants de la capsule ont un rle immunogne.

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2.2. La paroi :
2.2.1. Structure :
2.2.1.1. Mthodes dtude :

Isolement de la paroi bactrienne :

Extraction chimique par les solvants.

Traitement mcaniques visant dchirer la paroi.

Traitement enzymatique.

Isolement puis purification des parois brutes.
Etude de la paroi :

Coloration diffrentielle de Gram.

Examen au microscope lectronique.

Etude physique.

Analyse biochimique des parois.

2.2.1.2. Constituants essentiels de la paroi des Gram + :

La paroi des Gram + est une paroi paisse constitu dune couche paisse de peptidoglycane.
Elle possde :

Des protines.
Des acides teichoques.
Des acides lipoteichoques.
Un peptidoglycane.
Une membrane plasmique.

2.2.1.3. Constituants essentiels de la paroi des Gram - :

La paroi des Gram est plus complexe et plus stratifi.

Des lipopolysaccharides (LPS) :

 Une partie lipidique (lipide A), qui
permet dencrer le LPS dans la
membrane externe.
 Une partie glucidique
(polysaccharide), form dun
noyau interne et dun noyau
externe.
 Une chane 0 spcifique, qui varie
selon le srotypes.
Des protines.
Des porines.

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Des lipoprotines.
Un peptidoglycane.
Une membrane plasmique.

2.2.1.4. Peptidoglycane :
Cest un glycoaminopeptide, qui est constitu :

Dune partie glucidique :

Form par un enchanement de deux

drives osidiques appels osamines.
Le peptidoglycane est constitu dun
enchanement de NAG et NAM, reli
entre eux par des liaisons glycosidique
1 4.

Dune partie peptidique :

Un ttra peptide est fix sur la partie glucidique au niveau des groupements carboxyliques de
NAM. Ce peptide est constitu par des acides amins que lon ne trouve pas dans les protines
car ils font parties de la srie D. Pour de nombreuses bactries, lordre des rsidus par les
acides amins du ttra peptide est le suivant :

L-ALA
D-GLU
Acide diaminopimlique
D-ALA

Lacide diaminopimlique nest rencontr que chez les bactries aussi, ils constituent un
vritable marqueur des bactries. Les divers ttras peptides sont relis entre eux par des
liaisons interpeptidiase.

2.2.2. Rles physiologiques :

Protection mcanique lgard des agents physico-chimiques.

Rle morphologique pour la bactrie.
Rles dans les colorations.
Rles immunogne et antignique.
Rle dans la division cellulaire.
Rle dans les changes.
Rle dans lexpression de la mobilit.
Rle dans le diagnostic bactrien.

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2.3. Le LPS :
2.3.1. Localisation et relations du LPS avec la cellule bactrienne :

Origine :

Les toxines LPS sont prsentes chez toutes les bactries Gram ngatif.

Localisation :

Le LPS est toujours li aux bactries. Il nest libr dans le milieu extrieur que lorsquil y a
lyse ou de la multiplication de ces germes.
Il est situ dans la paroi eu niveau de la membrane externe.

2.3.2. Structure du LPS :

Le lipide A :

Principal constituant de la couche externe de la

bactrie.

Structure :

Il possde une structure constante chez les

diverses espces bactriennes. Le lipide A est
un glycophospholipides, compos de
glucosamines, de groupes phosphates, de
longues chaines dacides gras.

Proprits :

Cest le principe actif du LPS. Il est responsable

du pouvoir immuno-virulent du LPS, faible
dose et des proprits toxiques, forte dose.

Noyau oligosaccharidique.
Chaines polyosidiques O spcifiques
des souches S.

2.3.3. Proprits physico-chimiques :

Thermostabilit.
Rsistance au traitement par le mthanol HCHO.

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2.3.4. Proprits immunologiques :

Le LPS induit la synthse danticorps prcipitant et agglutinant.

2.4. La membrane plasmique :

Lexistence de cette membrane plasmique se dduit de diffrentes observations :

Le phnomne de plasmolyse.
Lobservation au microscope lectronique.
La centrifugation diffrentielle.

2.4.1. Structure :
Elle forme un feuillet continu.
Elle est constitue dune bicouche fluide
de phospholipides dans laquelle sont
incorpors des protines globulaires.
Les glucides sont associs aux protines
de surfaces (glycoprotines) ou aux
phospholipides (glycolipides).
Cette structure est dynamique et
conforme au modle de la mosaque fluide.

2.4.2. Composition chimique :

2.4.2.1. Les lipides :
Ce sont des molcules amphiphiles, c'est--dire
c'est
:

Une partie hydrophile.

Une partie hydrophobe.

A cause de leurs proprits, ils sorganisent spontanment en bicouche avec deux surfaces
hydrophiles externes spares par une zone centrale hydrophobe. Les lipides de la membrane
plasmique sont essentiellement des phospholipides.

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2.4.2.2. Les protines :

On distingue deux classes de protines :

Intrinsques :

Ce sont des protines transmembranaires. Elles sont globalement hydrophobes et sassocient

en un complexe stable avec les phospholipides. En effet, les rgions les plus hydrophobes de
la protine sont au niveau de la couche hydrophobe lipidique, alors que la partie hydrophile
est au contact de lespace pri-plasmique ou du cytoplasme.

Extrinsques :

Riche en acide amins hydrophiles et peuvent tre soit pri-plasmique, soit cytoplasmique
proximit de la membrane.

2.4.3. Fonction de la membrane plasmique :

La membrane plasmique isole la bactrie du milieu extrieur tout en permettant les changes
avec celui-ci, elle a donc une permabilit slective. Ainsi, elle joue un rle de barrire mais
aussi de transport.

2.4.3.1. Rle de barrire :

Elle soppose la fuite, vers lextrieur, de constituants libres dans la cellule. Elle soppose
lentre, vers lintrieur, de constituants indsirables. Elle permet aussi lentre de molcules
et de dchets.

2.4.3.2. Rle de transport :

La bactrie puise dans le milieu extrieur, des substances nutritives et y rejette des produits
devenu inutiles, ce qui permet de maintenir les conditions ncessaire la vie de la cellule. Les
protines jouent un rle essentiel dans cette fonction.
Les mcanismes de transports sont nombreux mais on distingue deux mcanismes
principaux :

Passif :

Diffusion simple :

Passage direct, au travers de la membrane, pour des molcules hydrophobes ou le dioxygne,

et par lintermdiaire dun canal protique pour les petites molcules hydrophiles.

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Lorsque se sont des molcules deau qui diffusent au travers dune membrane dont la
permabilit est slective, on parle dosmose.

Diffusion facilit :

Un transporteur intervient pour les molcules hydrophiles.

Actif :

Ncessite de lnergie et seffectue dans le sens inverse du gradient de concentration du

compos. Pour cela, la prsence dune permase est ncessaire. Les permases correspondent
des ensembles de protines situs dans la membrane cytoplasmique dans lespace pri
plasmique. Ces protines ont une activit enzymatique. Elles reconnaissent des substrats
spcifiques et les transportent. Lnergie ncessaire, vient de lhydrolyse de la molcule
dATP (transport actif primaire) ou du gradient dion travers la membrane, coupl avec le
transport du compos.

2.4.3.3. Autres fonctions :

Elle a un rle :

Dans la respiration et la production dnergie.

Dans la synthse de la paroi et des lipides.
Dans la division cellulaire.

2.5. Le cytoplasme :
2.5.1. Le Hyaloplasme (ou le cytosol) :
Liquide
pH
Pression osmotique
Composition chimique

Cytoplasme homogne, fluide, clair, transparent.

7 - 7,2
Eleve
Eau, minraux, acides amins, nuclotides, lipides,
protines, ARN, composs mtaboliques

2.5.2. Les Ribosomes :

Ce sont des particules sphriques, de 20nm de diamtre,
prsents en trs grand nombre dans le cytoplasme bactrien.
Les ribosomes sont rpartit dans tout le cytoplasme mais ne
sont pas accrochs aux chromosomes bactriens.
Ils sont constitus de deux sous-units, qui sont chacun constitus de protines et dARN
ribosomaux (ARNn).
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Le ribosome assure la traduction des ARNm en protine.

2.6. Les plasmides :

2.6.1. Dfinition :
Petite squence circulaire de dsoxyribonuclotides. Cette fraction dADN correspond une
structure hlicodale trs enroule. Sa prsence dans la bactrie est indpendante de celle du
chromosome bactrien. La localisation est cytoplasmique. Il porte des informations
gntiques secondaires. Il a de nombreux rles dans la vie de la bactrie et il est capable de
rplication autonome.

2.6.2. Rplication du plasmide :

Le plasmide est un rplicon :

Molcule dADN ou une squence de dsoxyribonuclotides qui possdent une origine de

rplication et qui est capable dtre rpliquer.

Mcanismes de rplication de lADN plasmidique :

La rplication de lADN plasmidique ncessite des enzymes.

Inhibition de la rplication du plasmide et limination des plasmides :

Il existe divers traitements empchant la rplication du plasmide mais cela naffectent pas la
rplication du chromosome bactrien ni la division bactrienne.

2.6.3. Transmission des plasmides :

Les plasmides peuvent tre transmis dune bactrie donatrice de matriel gntique une
bactrie rceptrice.
Le mcanisme de transfert peut tre la transduction ou la conjugaison.

2.7. Appareil nuclaire :

Mthodes cytochimiques :

Hydrolyse pralable de lARN.

Coloration de lADN.

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Technique de microscopie lectronique.

Morphologie :

Les rgions nuclaires ont des aspects variables selon :

Lespce.

La phase de croissance.

Ltat physiologique de la bactrie.
Organisation de lappareil nuclaire :

Les mcanismes de transfert gntique et la conjugaison bactrienne ont suggr que le

chromosome avait une structure circulaire.
Il est constitu dun chromosome unique, continu et circulaire.
Lenroulement de lADN en nuclotides est en corrlation avec lactivit de lappareil
nuclaire.

2.8. Les pili :

Se sont des structures inconstantes externes pour les bactries.

2.8.1. Pili communs :

Ils sont prsents en grand nombre autour de la bactrie (100 200), trs court (< 1 m),
rigide. Constitus par lassemblage de sous units de piline, ils participent au pourvoir
pathogne des bactries en leur permettant dadhr aux membranes des cellules et joue un
rle dans les proprits dHmagluttination.

2.8.2. Pili F :
Peu nombreux (1 4), un peu plus longs avec une extrmit arrondie, cods par des plasmides
conjugatif (plasmide F) et sont synthtiss seulement par les bactries mles. Les bactries
capables de produire le pili sexuel sont des bactries mles loppos des bactries femelles.
Ils interviennent dans la conjugaison bactrienne, dans la reconnaissance mle/femelle. Des
bactriophages spcifiques peuvent sadsorber lextrmit de certains pili sexuel et injecter
leur gnome viral dans le canal du pilis.

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2.9. Les flagelles :

On peut observer les flagelles au microscope optique mais il faut les paissir par un mordant
nergtique, puis dans une solution collodale qui se dispose sur le mordant et paissit le
diamtre des flagelles. La meilleure observation se fait sur un microscope lectronique.

2.9.1. Description :
Les flagelles sont des lments long (8 20m), ils sont fins (10 25nm). Ils se fixent sous la
membrane plasmique. Ils sont constitus par un assemblage de flagelline de forme
hlicodale. Le nombre de flagelles varie de 1 30. Leur disposition autour de la bactrie
varie selon le type de ciliature.
Les flagelles sont constitus :

De filaments (flagelline).
De crochet situ prs de la surface de la cellule.
Danneaux qui encrent le flagelle au niveau de la bactrie.

2.9.2. Comportement :
Ils sont dous de chimiotactisme. Les bactries ne se dplacent pas de manire dsordonnes,
mais en fonction du chimiotactisme positif, attir pas les nutriments ou en fonction du
chimiotactisme ngatif, rpulsion par des agents microbiens.
Lactivation de la mobilit peut tre due un puisement en nutriment.

2.10 Les spores :

Elle est appele endospore quand elle
est lintrieur et exospore lorsquelle est libre.
Toutes bactries ne peuvent pas sporuls.
Lors de la maturation, la pr-spore sentoure
de ces diffrentes enveloppes, cest--dire :

De la paroi.
De la tunique.
De lexosporium.

La germination seffectue suivant les tapes :

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Lactivation :

Lors de ce stade, laction dun agent qui lse les tuniques (de labrasion, destruction physique,
un agent chimique acide ou la chaleur). Le plus souvent entre 60 et 70 C, il y a activation du
processus de germination.

Linitiation :

Il y a rhydratation de la spore (gonflement de celle-ci). Le cortex est solubilis et dtruit. Des

enzymes hydrolytiques dtruisent les autres enveloppes de la spore.

Lexcroissance :

Cest la phase active de la biosynthse qui permet la cellule vgtative de reprendre ces
processus mtaboliques et de reprendre une vie normale.
Les spores sont un problme dans lagro-alimentaire et dans le milieu hospitalier car elles
rsistent la strilisation classique.
Certaines spores sont pathognes.

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