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OBJECTIFS
a- Les Micro-organismes
• Les bactéries : Production de substances à haute valeur
ajoutée (AA, Vitamines…) polysacchrides (Xanthane :
Xanthomonas compestris, Dextrane : Leuconostoc
mesenteroïdes) Starter, environnement…
• Les Levures : Alcool, P.O.U., Lipides…
• Actinomycètes et Champignons : Enzymes, Acides
organiques, Antibiotiques…
• Les Algues : P.O.U., Enzymes (SuperOxide Dismutase),
Colorants, Lipides (phospholipides, A. arachidonique
précurseur des prostaglandines), -carotène…
MICROORGANISMES
INDUSTRIES
Pharmaceutiques et médicales
Anti-inflamatoires:
(B. pumilus) ENVIRONNEMENT
AGRICULTURE
Insuline, Hormones de croissance (Traitement des
(B. thuringiensis) effluents)
Chimiques
Acides aminés, A. Organiques
Alimentaires
Arômes, Conservation…
En effet, l’utilisation des cellules libres est basée sur une caractéristique
biologique fondamentale qui est la CROISSANCE CELLULAIRE qui lui
confère une énorme potentialité car elle en fait une réaction
AUTOCATALITIQUE (càd le taux de croissance est proportionnel à la
concentration cellulaire présente initialement) schématisée ainsi :
Dans la réaction schématisée ci-dessus apparaissent les trois raisons fondamentales justifiant
l’utilisation industrielle de la FERMENTATION
a- Processus AEROBIE
b- Processus ANAEROBIE
Xéno Biotiques : Substances fabriquées par l’Homme et dont la nature n’a jamais
été en contact EXEMPLES : le DTT ½ vie est de 40 ans, les ORGANOCHLORES.
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
B- PRODUCTION DE MICRO-ORGANISMES (BIOMASSE)
Plusieurs modèles ont été décrits pour caractériser ces types de croissance.
Ainsi la réalisation de fermentations industrielles nécessite-t-elle des
étapes successives d’accroissement de la masse cellulaire afin de limiter la
durée de la phase de latence citée dans le modèle de Monod.
— Batch : terme anglo-saxon qui correspond à une opération dans un réacteur, ici la
fermentation.
— Culture continue : technique par laquelle il est possible d’entretenir une population
cellulaire constante dans un réacteur continu en procédant à une alimentation continue en
milieu nutritif et au soutirage d’un volume équivalent d’un milieu épuisé contenant des
cellules et de jus de fermentation lorsque le moût est débarrassé des cellules.
— Inoculum : tout ou partie d’une culture qui est utilisée pour ensemencer un milieu.
— Substrat : élément constitutif du milieu de culture assimilable par les cellules. À l’usage on
s’intéresse particulièrement aux sources de carbone et d’azote. Il a pour symbole S, et pour
unités g/L ou kg/m3. S représente le substrat présent initial S initial - S final
= S consommé.
— Volume utile : volume du réacteur occupé par le milieu de culture, dans les conditions de
fermentation, en tenant compte de l’agitation et de l’aération.
Sonde
température qui
mesure la T°C
du milieu
thermorésistance
commandée par
module de
contrôle
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
Réacteurs agités mécaniquement
L’agitation doit assurer un bon transfert de matière et un bon
transfert de chaleur tout en préservant l’intégrité des cellules.
turbine à hélice
pales Débit radial Débit axial marine
droites ou
incurvées Traumatisme + Traumatisme –
Cisaillement + Cisaillement – Pour les
Pour les
cellules
bactéries Efficacité transfert O2 + Efficacité transfert O2 -
Bioréacteurs (B. CHEBLI) fragiles
Fermenteurs airlift
La stérilisation par filtration est plus adaptée pour l’air ou le gaz de
fermentation et les solutions de composés thermolabiles tels que
vitamines et enzymes ou les liquides peu chargés comme l’eau du milieu
de culture. Cette filtration ne permet pas d’éliminer les particules
virales et les bactériophages, qui peuvent être préjudiciables aux
cultures cellulaires et microbiennes.
Il est d’usage d’utiliser des filtres dont les pores sont calibrés à 0,2
mm pour assurer une stérilité microbienne des fluides.
r µ. X k . X
x d
Capacité de transfert
La quantité d’oxygène OTR (en mol/L· h) transférée est donnée par la relation:
OTR=KLA(C*-CL)
avec KLA (h-1) coefficient de transfert de masse, C* et CL (mol/L) concentrations en
oxygène respectivement à saturation et dans la phase liquide.
Q=h S ∆T
Isolement, Purification et
amélioration génétique.
Optimisation du procédé
en définissant une stratégie
de conduite de fermentation
SUBSTRAT
d ( XV )
µXV dX
µX
dt dt
Pas de limitation:
croissance maximale
µ max X
dX
dt
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
Culture en batch-alimenté (Fed-Batch)
Physiologie Biochimie
microbienne
d ( SV ) 1 d ( XV )
FSc m( XV )
dt YFX / S dt
Croissance
exponentielle
d ( XV )
µ f (S )
µ ( XV )
dt
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
F représente le débit volumique de l’alimentation
dV = F Fa Fb Fam Féva
+ + + -
dt
Variation Alimentation Acide Base Anti- Evaporation
du volume mousse
Régulation pH
EVAPORATION
X Alimentation
Etat Stationnaire
Etat transitoire
Temps
D’INHIBITION PAR
De MONOD LE SUBSTRAT
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
Bilan biomasse d’une culture continue
mono-étagée avec alimentation stérile
La croissance est réalisée dans un réacteur
homogène parfaitement agité: CSTR (Continuous
Stirred Tank Reactor°)
Injection du milieu F
frais: S0, N0,
Oligo…
X
S P
F
N
Air X, S, N, P
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
BILAN BIOMASSE
dX
V FX 0 FX VµX
dt
Alimentation stérile X0 = 0
dX
V FX VµX X (Vµ F )
dt
Etat stationnaire:dX/dt = 0 F
Vµ(B.CHEBLI)
Débit d’accumulation est nul Bioréacteurs F 0 µ D
V
La relation Dµ est très important
1
Ts Ts est le temps de séjour
D
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
On peut exprimer X et rx en fonction de D
X YFX / S ( S 0 S )
Ks D
X YFX / S ( S 0 ) Eq 2
µ max D
Ks D
rx D YFX / S ( S 0 ) Eq 3
µ max D
Bioréacteurs (B. CHEBLI)
X S
rx µ max S 0
D*
Ks S 0
S 0 Ks
D* µ max
Dopt D* D
BATCH
BATCH-ALIMENTE
Métabolites primaires et secondaires. La
plupart des cultures sensibles
CULTURE CONTINUE
Levure, SCP, Ethanol, Bière, Vinaigre,
Traitement des effluents…
Culture continue: Durée importante
Contamination, Réversion
Bioréacteurs (B. CHEBLI)