EXAMENS DU MODULE DE BIOLOGIE MOLÉCULAIRE

1. Concernant le dosage de l’ADN :

a. Se fait par absorption des UV à 260nm
b. Une DO à 260nm est équivalente à une concentration de 50 μg/ml d’une
solution d’ADN double brin
2. Un vecteur de clonage peut :
a. Se répliquer de façon autonome
b. Être un plasmide
c. Comporter pour partie de l’ADN plasmidique et de l’ADN phagique
3. A propos de la technique du séquençage :
a. A été développée par Fred Sanger
b. Les fragments sont séparés par électrophorèse dans un gel de
polyacrylamide
c. C’est une méthode enzymatique
4. Chez les procaryotes, la transcription s’arrête quand :
a. L’ARN polymérase se fixe au facteur Rho (p)
5. Parmi les étapes suivantes, la (les) quelle (s) n’est (sont) pas utilisée (s)
dans la méthode du Northern blot
a. Digestion par une enzyme de restriction
6. La technique de la PCR :
a. Réplique un brin matrice d’ADN in vitro
b. Nécessite une Taq-polymérase
7. Une mutation par transition :
a. Est un changement purine ↔ purine
b. Est un changement pyrimidine ↔ pyrimidine
c. Est une mutation ponctuelle
8. La forme d’ADN-B :
a. Présente 10 paires de base par tour de l’hélice
b. Est la forme plus dominante dans la cellule
9. La réplication de l’ADN chez les eucaryotes :
a. Est un processus rapide
b. Copie les brins matrices en brins complémentaires
10. Pourquoi y a-t-il une différence entre la synthèse du brin conducteur et
celle du brin retardataire des molécules d’ADN ?
b. L’ADN polymérase ne peut ajouter de nouveaux nucléotides qu’à
l’extrémité 3’ du brin en cours de synthèse
11. Parmi les constituants suivants, quel sont ceux qui ont été utilisés pour
la synthèse d’un ADNc (ADN complémentaires)
a. Une transcriptase reverse
b. Les désoxyribonucléosides triphosphates : dATP, dTTP, dGTP, dCTP
12. Caractéristiques nécessaires d’un vecteur :
a. Pouvoir intégrer un fragment d’ADN étranger
b. Être introduit/ s’introduire dans un organisme hôte
c. Se relique dans l’organisme hôte
13. Retrouver la (ou les) proposition (s) exacte (s) :
a. Les endonucléases de restriction reconnaissent généralement une
séquence spécifique de 4 à 8 pb
b. La séparation des acides nucléiques utilise couramment l’électrophorèse
c. Le Northern Blot permet de détecter des molécules d’ADN
14. L’expérience de Meselson et Stahl :
a. A montré que la réplication de l’ADN est semi-conservative
b. A montré que l’hypothèse de Watson et Crick est correcte
c. Utilise un élément non radioactif
15. A propos de la technique du séquençage :
a. C’est une méthode enzymatique
b. Les fragments sont séparés par électrophorèses dans un gel d’acrylamide
c. A été développée par Fred Sanger
16. Classez dans l’ordre les étapes de la méthode du Southern Blot : (1)
électrophorèse, (2) hybridation, (3) autoradiographie, (4) transfert sur
membrane, (5) digestion de l’ADN par une enzyme de restriction
c. (5), (1), (4), (2), (3)
17. La séquence nucléotidique de l’anticodon d’un ARN de transfères est 5’-
CCU-3’. Quelle est, dans la séquence suivante d’un ARNm, le triplet
nucléotidique qui pourra s’apparier à
l’anticodon ? C.(3)
 17.
18. Pour cloner un gène eucaryote entier on doit :
a. Identifier ses produits
b. Partir de fragment d’ADN génomique après digestion par une ou
plusieurs enzymes de restriction
19. Les didésoxyribonucléotides triphosphates :
a. Empêchent l’extension du brin d’ADN dans lequel ils son incorporés
b. Peuvent être incorporés par l’ADN polymérase à l’extrémité 3’- OH d’un
brin d’ADN
20. La transcriptase inverse :
a. est une ADN polymérase ARN dépendante
b. est utilisée pour la synthèse in vitro d’ADNc
21. le génome des eucaryotes :
a. contient l’ensemble des gènes d’un organisme
22. chez les procaryotes, l’ADN polymérase I :
a. possède une activité exonucléase 5’3’
b. intervient dans le remplacement de l’amorce RNA
23. un exon est :
a. absent chez les procaryotes
b. une séquence d’ADN obligatoirement codante
c. retrouvé sous forme de séquence d’ARN dans l’ARNm mature
24. l’ARNm ;
a. est purifié grâce à une sonde poly (dT)
b. un polynucléotide moins stable que l’ADN
25. Classez dans l’ordre les étapes de la méthode du Northern Blot : (1)
électrophorèse, (2) extraction de l’ARN,(3) autoradiographie, (4)
transfert sur membrane, (5) hybridation

b. 2-1-4-5-3

26. Les enzymes de restriction :

a. Peuvent couper aussi un ADN circulaire
b. Ont une fonction chez les bactéries d’où on les extrait
c. Reconnaissent le plus souvent des séquences palindromiques
27. Parmi les codons suivants quels sont ceux qui correspondent au codon
 d’initiation de la traduction et aux codons de terminaison d’une protéine

a. AUG ;; UAA
28. La synthèse de l’ADN lors de la réplication
a. Nécessite des amorces d’ARN
b. S’effectue toujours dans le sens 5’  3’
29. Le génome des eucaryotes :
a. Contient l’ensemble des gènes d’un organisme
b. Est distribué dans les différents chromosomes d’un organisme
30. Dans une molécule d’ADN :
a. Les bases A et T sont appariées par deux liaison hydrogènes
b. Les deux chaînes d’une molécule d’ADN sont antiparallèles
31. Parmi les enzymes suivantes, laquelle ou lesquelles sont utilisées dans
la technique de RT-PCR :
b. ADN polymérase thermostable
c. Transcriptase inverse
32. Une mutation par transvasions
a. Est un changement purine pyrimidine
b. Est une mutation ponctuelle
33. Les enzymes de restrictions :
a. Sont indispensables au clonage
b. Coupent parfois loin du site spécifique reconnu
d. Reconnaissent des sites avec souvent des zones palindromiques
34. Les ARNm ont des propriétés particulières
a. Ils sont issus de l’étape de transcription
b. Ils utilisent la copie de l’information génétique correspondant à un gène
35. L’ARNm chez les eucaryotes :
a. Possède une séquence complémentaire du brin antisens de l’ADN
génomique
b. Peut comporter une partie seulement des exons
c. Possède une longue répétition poly adénylique
36. Retrouvez-la (ou les) proposition (s) exacte (s) :
a. Les endonucléases de restriction reconnaissent généralement une
séquence spécifique de 4 à 8 pb
b. L’unité de base d’un brin d’ADN est représentée par un nucléotide
c. L’Adn est riche en charge électriques négatives
37. les liaisons phosphodiesters des polynucléotides réunissent :
a. les nucléotides monophosphates
38. concernant l’ADN complémentaire :
a. l’ADN complémentaire est synthétisé par transcriptase inverse à partir
d’ARN messager
a. les banques d’ADNc préparées à partir de différents tissus humains (foie,
poumon, cœur, …) ont en commun les séquences correspondant aux
gènes domestiques
b. La séquence en acide aminés d’une protéine peut être déterminée à
partir d’une séquence d’ADNc
39. Laquelle (ou lesquelles) parmi les techniques ci-dessous permet (tent)
la localisation des sites de liaison de l’ADN :
a. Le retard sur gel
b. « foot printing » ou empreinte à la DNA
40. Indiquez les propositions exactes concernant le 7-methyl-guanosine :
a. C’est un composant de l’ARNm mature
b. Il protège l’acide nucléique de l’action des ribonucléases
41. Indiquer les propositions exactes concernant l’ADN des eucaryotes :
a. Le rapport [(A+G) / (C+T)] est égal à 1
b. La double hélice d’ADN fait tour complet toutes les 10 paires de
désoxyribonucléotides
Les définitions :
1. Epissage alternatif : se fait de façon différente d’une cellule à l’autre,
c’est-à-dire peut conduire à plusieurs structures de l’ARNm, chaque
ARNm alternatif a propre exon ainsi que des exons en commun
2. Cosmides : sont des molécules d’ADN circulaire hybrides construite à
partir des phages λ et des plasmides
3. Ribozyme : sont des ARN ayant la capacité à agir comme enzyme
4. Puce à ADN : est un ensemble de molécules d’ADN fixées en rangées
 ordonnées sur une petite surface qui peut être du verre, du silicium ou
du plastique
5. Vecteur BAC : est un chromosome bactérien artificiel, c’est un vecteur
construit à partir du plasmide de E. Coli qui est capable d’intégrer de
très grand fragment d’ADN
6. Répression catabolique : mécanisme de régulation de la synthèse
enzymatique, qui repose sur une protéine à régulation allostérique et
une molécule effectrice
7. Banque d’ADNc : banque construite à partir d’ADNc, dont les ARNm
sont le point de départ de la construction de la banque
8. Opéron : est une unité génétique trouver uniquement chez les
procaryotes et composée des gènes adjacents dont l’expression est
Coordonnée par un même prompteur et des opérateurs de
transcription
9. Température de fusion : est celle pour laquelle la moitié d’ADN est
dénaturé
10. Northern Blot : est une méthode de biologie moléculaire qui permet
l’analyse de l’ARN
11. Southern Blot : technique d’hybridation des ADN qui permet l’analyse
d’un fragment d’ADN
12. Enzyme de restriction : sont des endonucléases produit par des
bactéries et participent à un mécanisme de défense vis-à-vis des virus
13. Opéron lactose : opéron nécessaire au transport et au métabolisme
du lactose chez E. Coli
14. Opéron inductible : est un opéron qui ne fonction que s’il est induit
par une molécule effectrice capable de lever l’effet de répression

Les exercices :
Expliquez brièvement la technique de la PCR : cette technique
consiste à réaliser une très élevé de copies d’une séquence d’ADN
choisi par l’expérimentateur ce qui facilite sont études et son
exploitation, utilisant une ADN polymérase Taq thermostable pour
catalyser la réaction de la polymérisation à partir d’amorces
 complémentaires de chaque brin d’ADN à amplifier, constitue de 3
étapes : dénaturation-hybridation- polymérisation

1. Lac I 2. CAP 3. ARN polymérase 4. Promoteur

5. Operateur 6. Lac Z 7. Lac Y 8. Lac A
Cette structure existe-elle aussi chez les eucaryotes ? Expliquer :
Non car chez les eucaryotes chaque gène est fabriqué sur des
ARNm individuels et chaque gène a son propre promoteur, donc
il ne nécessite pas d’opéron pour la transcription

1. ADN binding protéine 7. Brin matrice

2. Hélicase 8.Brin conducteur
3. Protéine SSB 9.Brin retardataire
4. Primase 10 .Fragment d’okazaki
5. ADN polymérase 11.Amorce ARN
6. Fourche d’ADN a’ ; 5 ET b’ ; 3’
Décrivez les différentes étapes de ce phénomène ainsi que les
 activités enzymatiques qui sont impliquées
-Initiation de la réplication au niveau d’un site et la formation de l’œil
de la réplication
Ouvertures d’œil de réplication par l’hélicase pour forme deux
fourche de réplication, les hélicases coupent les liaisons hydrogène
qui stabilise les nucléotides
Les forme simple brin sont stabilisée par les protéines SSB pour que
l’ADN polymérase III commence son travail dans le sens 5’ 3’ suit a
une amorce synthétise par l’ADN primaire
Polymérisation du brin suiveur se fait par les mêmes enzymes d’une
manière discontinue sous forme des fragments d’Okazaki, en suite le
fragment voit être liées par l’ADN ligase
Ce phénomène se passe-t-il de la même manière chez les eucaryotes
? Citez les points de différence au niveau de la réalisation de ce
phénomène chez les eucaryotes et procaryotes ?
La réplication est réalisée d’une manière similaire chez les eucaryotes
et les procaryotes
Les différences entre les 2 portent principalement sur les ADN
polymérase :
ADN-polymérases eucaryotes : α β γ δ ε
ADN-polymérases procaryotes : I II et III
Chez les procaryote ADN-polymérase III fait le gros du travail sur les 2
brins et nécessite chaque fois un facteur d’initiation
Chez les eucaryotes, ADN-polymérase α est associé à une ADN primase
travaille sur le brin retardataire alors que sur le brin conducteur une
autre ADN-polymérase δ spécifique
Mécanisme de traduction
1. Liaison peptidique 5. Séquence poly A
2. Site P 6. Anticodon
3. Petite sous-unité 7. Site A
4. Codon 8. Brin accepteur
9. Grande sous-unité
- -Triplet A : AUG
- -Molécule X : ARNm
- -Molécule Y : ARNt
- -Molécule Z : chaine polypeptidique
 Les étapes de la traduction :
L’initiation : l’étape limitant de la traduction, qui consiste au
recrutement du ribosome sur l’ARNm et à la reconnaissance de
codon d’initiation
L’élongation : la synthèse proprement dite de la protéine par le
ribosome à partir de la séquence des codons
La terminaison : qui se produit lorsque le ribosome arrive sur le codon
stop et qui permet la libération de la chaine protéique terminée et le
recyclage des sous-unités du ribosome