Bilirubine direct

Principe
Matériel et équipements : pipette sérologique,pipette automatique,tube
sec,tips,spectrophotomètre,poire,chronomètre,rack
Intrants : Bilirubine direct reagent,eau distillée,activator,standard.
Spécimen : sérum

Réalisation :
1)Indenfier trois tubes : blank,standard,test
2)Pipetter dans les tubes :

Blink Standard Test

Bilirubine direct Reagent 1cc 1cc 1cc

Activator 2 gouttes 2 gouttes 2 gouttes

H2O distillée 50 μL

Standard 50 μL

Test 50 μL

3)Lecture dans un spectophotomètre à 540 nm de longueur d'onde sur absorbance.

Bilirubine total

Principe
Matériel et équipements : pipette sérologique,pipette automatique,tube
sec,tips,spectrophotomètre,poire,chronomètre,rack
Intrants : Bilirubine total reagent,eau distillée,activator,standard.
Spécimen : sérum

Réalisation :
1)Indenfier trois tubes : blank,standard,test
2)Pipetter dans les tubes :

Blink Standard Test

Bilirubine total reagent 1cc 1cc 1cc

Activator 2 gouttes 2 gouttes 2 gouttes

H2O distillée 50 μL

Standard 50 μL

Test 50 μL

3)Lecture dans un spectophotomètre

à 540 nm de longueur d'onde sur absorbance. dans un spectophotomètre

Bilirubine indirect= Bilirubine total-bilirubine direct

Glycemie (Stanbio)

Principe
Matériel et équipements : pipette sérologique,pipette automatique,tube sec,tops,bain
marie,spectrophotomètre,thermomètre,poire,centrifugeuse,chronomètre
Intrant :glycose reagent .stent,eau distillét.

1)pipetter dans 3 tubes secs :

Blink Standard Test

 Cholestérol Reagent 1cc 1cc 1cc

H2O distillé 10 μL

Standard 10 μL

Filtrat HDL 10 μL

2)Chauffer dans les 3 tubes de 1cc de cholestérol reagent pendant 5 mn avant d’ajouter
l’eau distille,le standard,le serum.
3)Mélanger séparément les 3 tubes.
4)Réchauffer pendant 5 mn dans un bain-marie à 37°c
5)Lecture à 500 nm longueur d'onde dans un spectrophotomètre sur absorbance
6)Calcul : T= absT-abs blink/abs Std- abs blink× concentration Glucose (100 mg/dl)

HDL

Principe
Matériel et équipements : pipette sérologique,pipette automatique,tube sec,tops,bain
marie,spectrophotomètre,thermomètre,poire,centrifugeuse,chronomètre
Intrant : Cholestérol restent,eau distillée,precipitating reagent.
1)Préparation du filtrat :
Pipetter dans un tube 500μL de sérum, ajouter 25 μL le precipitating reagent,mélanger et
laisser reposer pendant 5mn.
2)Centrifuger pendant 10 mn
3)Chauffer dans les 3 tubes de 1cc de cholestérol reagent pendant 5 mn
4)pipetter dans 3 tube sec :

Blink Standard Test

Cholestérol Reagent 1cc 1cc 1cc

H2O distillé 25 μL

Standard 25 μL

Filtrat HDL 25 μL

5)Mélanger séparément les 3 tubes.

6)Réchauffer pendant 5 mn dans un bain-marie à 37°c
7)Lecture à 500 nm longueur d'onde dans un spectrophotomètre sur absorbance
8)Calcul : T= absT-abs blink/abs Std- abs blink× concentration Hdl(55 mg/dl)

LDL : Cholestérol-HDL-Triglyceride/5

Creatinine (Teco)

Principe

Matériel et équipements : pipette sérologique,pipette automatique,tube sec,tops,bain

marie,spectrophotomètre,thermomètre,poire,centrifugeuse,chronomètre

Intrant : Creatinine picric acid reagent,eau distillée,Creatinine buffet reagent,creatinine

standard,acid acetique.

1)pipetter dans 3 tubes secs :

 Blink Standard Test

Creatinine Picric Reagent 1.5 cc 1.5 cc 1.5cc

Creatinine Buffet Reagent 1.5 cc 1.5 cc 1.5 cc

H2O distillé 100 μL

Standard 100 μL

serum 100 μL

2)Chauffer dans les 3 tubes de 1cc de cholestérol reagent pendant 5 mn avant d’ajouter
l’eau distille,le standard,le serum.
3)Mélanger séparément les 3 tubes.
4)Réchauffer pendant 5 mn dans un bain-marie à 37°c
5)Lecture à 510 nm longueur d'onde dans un spectrophotomètre sur absorbance
6)Calcul : T= absT-abs blink/abs Std- abs blink× concentration (100 mg/dl)
7)Apres lecture, ajouter 100 μL dacide acetique dans les tubes
8)Laisser reposer pendant 5mn a temperature ambiant.
9)Lecture a 510nm:
R= test1-test2
Standard= Std1-Std2
Blk=Blk1-Blk2

SGPT
Sérum glutamyl pyruvate transaminase

Principe: Déterminer le taux de SGPT dans le sang.

Matériel et équipements:pipette automatique,pipette sérologique,embouts,poire,rack,tube

sec,bain-marie,chronomètre,spectrophotomètre,thermomètre

Intrants: substrat SGPT,NaOH,color reagent.

Réalisation:
1)identifier un tube:test SGPT avec le numéro du patient.
2)Pipetter dans le tube 500ul de substrat SGPT.
3)Chauffer ben bain-marie à 37°c pendant 3 à 5 mn.
4)Ajouter 100ul de serum,mélanger.
5)Réchauffer dans un bain-marie pendant 30 mn.
6)Ajouter 500ul de color reagent,mélanger et laisser.
7)reposer 30mn à température ambiante.
8)Ajouter 5cc de NaOH.
9)Laisser reposer à température ambiante.
10)Lecture en spectrophotomètre à 505 nm.
Effectuer la courbe.

SGOT
Sérum glutamyl oxaloacétate transaminase

Principe: Déterminer le taux de SGOT dans le sang.

Matériel et équipements:pipette automatique,pipette sérologique,embouts,poire,rack,tube

sec,bain-marie,chronomètre,spectrophotomètre,thermomètre

Intrants: substrat SGOT,NaOH,color reagent.

Réalisation:
1)identifier un tube:test SGOT avec le numéro du patient.
2)Pipetter dans le tube 500 ul de substrat SGOT.
3)Chauffer en bain-marie à 37°c pendant 3 à 5 mn.
4)Ajouter 100 ul de serum,mélanger.
5)Réchauffer dans un bain-marie pendant 60 mn.
6)Ajouter 500 ul de color reagent,mélanger et laisser.
7)reposer 20mn à température ambiante.
8)Ajouter 5cc de NaOH.
9)Laisser reposer à température ambiante.
10)Lecture en spectrophotomètre à 505 nm.
Effectuer la courbe.