FATEHER E® Mod~rateur: A.

GRUSON (Arras) I
Avec la collaboration de BEHRINGDIAGNOSTIC

Actualit s et tendances en immunoanalyse

B. CAPOLAGHI (Thionville)

Analyse de la situation actuelle t~s d ' h o r m o n e s et d ' a b a n d o n n e r progressivement les

I. Approche analytique
L'~volution des technologies utilis~es en immunoanalyse est
paralDle & la c o m p r e h e n s i o n puis & la ma~trise des diff~rents
param~tres de la r~action immunologique tels que la recon-
naissance d'un analyte p a r une r~action de type antig&ne-
anticorps, la raise en ~vidence par une m~thode g~n~rant ou
non un signal, l'am~lioration de la sp~cificit~ et de la sensibi-
lit~ analytique, l'automatisation et la standardisation de ces
d~couvertes (1, 2).
Dans les ann~es 60, les premieres techniques radioimmuno-
Iogiques ont permis de mesurer en routine de faibles quanti-
dosages biologiques sur l'animal puis, les nombreuses
contraintes, rant r~glementaires qu'6cologiques et tech-
niques, li6es & l'utilisation d'61~ments marqu6s ont conduit
l'av&nement de technologies bas6es sur des marques non
isotopiques (3, 4).
Parmi celles-ci, la marque enzymatique est historiquement la
plus ancienne dans les applications de routine. En effet, elle
pr6sente c o m m e principaux avantages sa facilit6 d'utilisation
et le faible cofit du materiel de mesure. ParaU~lement, la
recherche de traceurs ayant une sensibilit~ de d~tection
c o m p a r a b l e aux radioisotopes a mis en avant les techniques
de fluorescence et de luminescence qui pr~sentent une
meilleure stabilit~ de la marque associ~e ~ une absence de
toxicitY.

TABLEAU I
Classification des sigles m~thodologiques les plus utilis~s

RIA I IRMA

EMIT
CEDIA ELISA I ELISA
ARIS

MC'A I IFE'A
CLEIA I'FMA
ICEMA

FPIA
SLFIA TRFIA I TRIFMA
FET[
HTRFIA

CLIA ICMA
ECL ECL
LIA ILMA

SIGNIFICATION DES SIGLES:

EMIT enzyme multiplied immuno assay test RIA radio immuno assay
CEDIA cloned enzyme donor immuno assay IRMA immuno radio metric assay
ARIS apoenzyme reactivation immuno system ELISA enzyme linked immuno sorbent assay
MCIA micro capsule immuno assay IFMA immuno fluoro metric assay
FPIA fluorescence polarization immuno assay ICEMA immuno chemiluminoenzymo metric assay
SLFIA substrate labelled fluorescence irnmuno assay TRIFMA time resolved immuno fluoro metric assay
FETI fluorescence excitation transfert immuno assay ICMA immuno chemilumino metric assay
ECL electro chemi luminescence LIA luminescence immuno assay

186 Revue frangaise des laboratoires, avril/mai 1995, N ° 275

 L'~tude men&e par GOSLING ~ partir de l'ensemble des tra-
vaux publi&s entre 1980 et 1990 (5) montre que les mar-
queurs isotopiques sont pass&s de 60 ~ 25 % alors que les
marques enzymatiques ont progress& de 20 a 45 % et que
les compos&s fluorescents et luminescents sont stables avec
20 %. Cette stabilit& des signaux luminescents est & nuancer,
car la r@artition inclut les marques complexes enzyme-sub-
strat fluorescent ou luminescent dans la cat&gorie enzyme.
A partir des ann~es 1970, parall&lement ~ la recherche de
nouvelles marques, de nombreux progr&s sont r&alis~s autour
de la r&action immunologique :
- fixation d'un anticorps sur une phase solide pour simplifier
la s&paration et le lavage des fractions libres et li&es (6) ;
- mai'trise des dosages immunom~triques utilisant 2 anti-
corps en "sandwich" pour un antig&ne (extraction-satura-
tion). Cette m~thode permet d'utiliser un large exc&s d'anti-
corps et ainsi d'&liminer les limites li~es aux mol&cules
faible concentration molaire (7, 8) ;
- mise au point de diff~rents supports solides : r~sine, billes,
tubes, cuvettes, particules de latex, particules magn~tiques,
pour standardiser et automatiser la m&thode (9) ;
- &clatement de la phase solide en microparticules pour
acc~l&er la r~action immunologique ;
- fabrication et utilisation des anticorps monoclonaux appor-
tant simplicit~ et sp&cificit& (10, 11).
Toutes ces am&liorations portent sur des techniques o~ le
signal g~n~r& par la marque n'est pas modifi& par la liaison
de l'anticorps-antig&ne, d'oC~ la n~cessit~ d'une ~tape de
s&paration avant la mesure pour r&partir les mol&cules libres
ou li~es en 2 compartiments distincts.
Afin d'4viter cette phase de r&partition, RUBENSTEIN et
coll. (12) pr&sentent, en 1971, le premier immunodosage o0
le r~actif marqu& ~met un signal cliff&rent. Cette modulation
du signal, sous l'effet de la r~action anticorps-antig~ne, per-
met une mesure au sein du milieu r~actionnel sans s&para-
tion pr&alable (phase homog~ne), d'o0 une grande simplicit~
op~rationnelle.
Dans les ann&es 1980, la ma~trise industrielle des anticorps
monoclonaux, l'am&lioration de la stabilit~ des r~actifs et les
ameliorations apport4es aux m~thodes immunologiques, ont
permis d'ouvrir la vole fi l'automatisation de ce secteur
d'immunoanalyse e t ~ l'important d&veloppement que l'on
conna~t aujourd'hui.
II existe un nombre consid4rable de m~thodologies utilisant
un r&actif marqu4 pour doser les antig&nes ou les anticorps
(13, 14). L'analyse ~conomique de cette activit~ montre une
utilisation annuelle de plus de 100 millions de tests d'immu-
noanalyse r~alis~s dans le monde, avec une pr&vision conti-
nue de croissance des immunodosages pour ces prochaines
ann~es. Les m&thodes les plus couramment utilis~es ces der-
ni&res ann&es sont pr&sent&es dans le tableau I.
L'~mergence de ces techniques non isotopiques a mis en
~vidence l'importance cruciale de l'activit~ sp~cifique de
l'immunoanalyte marque. Cependant, peu d'&tudes &valua-
tives ont &t& publi&es, car la comparaison entre deux
marques pour un m~me param&tre implique une optimisa-
tion identique de la r~action immunologique (15).
La notion de marque n'est pas simple, car la nature du
signal peut @tre ambigu~. Une m~me marque peut @tre r~v~-
l~e de diverses fagons et produire des signaux diff&ents.
C'est pourquoi, on d&finit la marque comme l'ensemble des
~l&ments aboutissant au signal (16). Elle comprend la
marque proprement dite (isotope, enzyme,...) et le signal
final (isotopique, photonique, luminescent...) et appara~t
comme un param&tre majeur de la m&thode immunolo-
gique. Elle se d~finit par son activit~ sp&cifique, sa facilit& de
marquage et d'utilisation, sa force de liaison et sa sensibilit&
aux interf&rences, responsable du bruit de fond qui peut ~tre
consid&~ comme le principal facteur limitant.
L'activit& sp&cifique d'une marque en immunoanalyse est
li~e ~ la fraction disponible pour la d~tection, au degr~
d'amplification et au rendement de l'~mission du signal. De
ce fait, la qualit~ premiere d'un traceur se traduit par une
activit& sp&cifique optimale (maximum de signal pour un
Revue frangaise des laboratoires, avril/mai 1995, N ° 275
minimum d'&v&nements immunologiques) et peut &tre &va-
lu&e par la limite de d~tection, t&moin de l'immunor&activit&
du r4actif conjugu~ ; l'id&al ~tant d'obtenir un rendement
maximum de l'~mission lumineuse associ& a un seuil de
d~tection faible.
Actuellement, le seuil de d&tection des diff~rentes marques
varie approximativement de 109 & 10 ~0 tool selon le type de
signal (photonique, fluorescent, isotopique, luminescent) et
la marque donn&e (enzymatique, fluorig&ne, fluorophore,
isotopique, luminog&ne).
2. Approche instrumentale
L'&volution tr~s rapide des technologies adapt~es & l'immu-
noanalyse a permis l'essor parall&le de syst&mes automati-
s&s (17, 18) disponibles pour le laboratoire de biologie cli-
nique grace ~ un formidable effort scientifique et industriel
pour synchroniser l'offre et la demande (figure I ).
Face & l'importante demande issue du caract&re multidiscipli-
naire de l'immunoanalyse, les industriels ont appliqu~ les
nouvelles m&thodologies aux marques non isotopiques, lls
ont tout particuli&rement utilis& les progr&s concernant
l'immobilisation des anticorps et l'optimisation des diff&-
rentes phases solides.
La commercialisation de ces cliff&rents instruments illustre :
la stabilit& de la marque et des r&actifs ;
-
la recherche d'une grande sensibilit& et amplitude du signal ;
-
- l a ma[trise des dosages en phases homog&ne et h~t~ro-
g&ne ;
la diversit& des phases solides utilis~es (tubes, billes, micro-
-
particules, films, fibre de verre,...) d'oQ une amelioration de
la qualit& de liaison des anticorps, une acc&l&ration de la
r&action immunologique et des capacit&s d'automatisation
accrues ;
- la diminution des temps d'incubation ;
- la prise en compte des &tapes de s&paration par des proc&
d&s rapides et innovants (magnfitisme, adhfirence, centrifu-
gation axiale, chromatographie,...) ;
une &volution vers des analyseurs multis~lectifs simultan&s
-
automatisfis (random access), v&ritables syst&mes int&gr&s
haut niveau d'autocontr61e.
Les analyseurs proposes par les fournisseurs s'approchent
de plus en plus des concepts retenus sur les automates de
biochimie de routine (19).
II s'agit de syst&mes automatisms multis~lectifs simultan&s
(random access) avec stockage, gestion et thermostatisation
des r~actifs sur l'appareil, permettant l'utilisation des tubes
primaires avec lecture code-barres, ainsi que des proc&dures
de dilution automatique et b~n&ficiant d'une informatique
conviviale, d'une importante gamme de param~tres, de cali-
brages espac&s, d'une absence de contamination et d'une
grande s~curit~ biologique.
Cette ~volution des mat&riels accompagne celle de la
demande des laboratoires dont les besoins peuvent &ire r~su-
m&s aux points suivants :
- int&gration facile dans le laboratoire ;
- facilit~ de manipulation ;
- chargement continu, gestion par patient ;
- disponibilite rapide des r~sultats : faible d~lai de r~ponse,
cadence ~lev&e ;
- accessibilit& & l'urgence ;
- menu de parametres ~tendu ;
- performances analytiques &lev&es : grande lin&arit&, haute
sensibilit&, bonne reproductibilit~ et faible incidence des lots
de r&actifs ;
- besoin de standardisation ;
- diminution des coots.
Devant la diversit& des besoins exprim&s par chaque labora-
toire, il apparait clairement qu'aujourdhui l'unicit& d'un
appareil n'est encore qu'un souhait et ne peut &tre r~alis&e
que dans des structures dont le volume et la diversit~ des
parametres demand~s restent faibles.
187
 FIGURE 1
Les syst~rnes d'immunoanalyse automatis@s sur le march@ frangais

Auraflax
Nombre
50 OPUS magnum
tmmulite
Atpha 4 Quartus
B~rilux 400
45 Cis Pack 4200
ES 300 AL
ES 700
Lia mat S 300 Auto Delfts
40
Mini Vides Axsym
Prism Imrnuno 1
Stratus II EL-SH Magis 8000
35 Radias
Solaris
Vista
30

25 ACS 180
AIA 600 Affinity
AIA 1200 Amerlita PC
Auto EIA Auto Cap
20 ES 300 Biotrol 7000
PK 310 Coba~ Core
B@rilux 250 IMx seloct
15 OPUS
SR1
Stratus EL
TDx-FLx
10
Vidas

Magic lite
ES 600 IMx
Stratus
TDx Amarlite

I I ~ | [' ' 'I ~ "t'" f ~ f Ann6e

co oo GO cO oo ~o co

D'autre part, ranalyse des syst@mes int@gr@s montre que la
r@solution des difficult@s techniques li@es aux immunodosage
pousse les industriels & proposer sur le march@ un automate
compact et ferm@ pour lequel le constructeur prend un enga-
gement de fiabilit@ et de performances analytiques, contrai-
rement aux syst~mes ouverts et modulaires.
Ainsi, la tendance est de privil~gier des marques perfor-
mantes pour am@liorer la sensibilit@ des dosages, comme par
exemple les marques fluorescentes et luminescentes. Des
param@tres tels que la TSH ont pu b@n@ficier de ces avan-
c@es technologiques qui ont @t@ illustr@es par le d@veloppe-
ment de TSH dite de 3 ~ g@n@ration.
Face & la demande multidisciplinaire des param@tres et
l'organisation actuelle des laboratoires, la solution est donc
provisoirement de sp@cialiser les syst@mes automatis@s
d'immunoanalyse au laboratoire.
Sch@matiquement, et selon la taille ou la nature priv@e-
publique des laboratoires, trois cr@neaux peuvent @tre identi-
fi@s :
- le secteur de biochimie-urgences o~ les param~tres r@pon-
dant aux besoins de cette unit@ peuvent @tre Iocalis@s sur un
automate & faible d@bit, utilisant le concept unitaire et b@n@-
ficiant d'un d@lai de r@ponse faible ;
- le secteur de s@rologie infectieuse, s'il est individualis@,
peut justifier d'un syst~me propre organis@ ou non autour de
la microplaque (20) ;
- runit@ d'immunoanalyse regroup@e sur un ou plusieurs
appareils selon le d@bit et la nature des param~tres dos@s.
L'organisation de cette structure @volue vers une diminution
du nombre de syst@mes utilis@s et ceci parall@lement
l'effort des constructeurs pour proposer des menus de plus
en plus larges. La seule justification & plusieurs analyseurs
sera, & terme, un volume d'activit@ @lev@ trait@ par l'unit@ de
travail.
3. Evolution et tendances au niveau du signal
Les diff@rentes voies de recherche visant ~ am@liorer le
signal se r@partissent entre la d@couverte de nouvelles
marques plus performantes et la mise au point d'immunodo-
sages ultrasensibles (21, 22).
Concernant les e n z y m e s , les efforts sont orient@s vers la
recherche d'une marque stable permettant une amplification
associ@e & un rapide turn-over. La pyrophosphatase en est
un exemple (23). Elle clive une mol@cule de pyrophosphate
en deux mol@cules de phosphate r@v@l@par le molybdate
d'ammonium et le vert malachite, permettant ainsi de dou-
bler la g@n@ration du signal.
L'amplification enzymatique (24, 25), en multipliant les
mol@cules de produit d@tectable & partir d'une mol@cule de
conjugu@, apparait comme un moyen efficace pour am@lio-
rer la sensibilit@ des dosages immunoenzymatiques. Cette
amplification peut @tre obten~ue en faisant appel & un second
syst@me enzymatique qui est modul@ par le produit de la
r@action catalys@e par la marque enzymatique d'o~ une aug-
mentation du signal mais aussi du bruit de fond. Les modules
]es plus @tudi@s actuellement tournent autour d'une amplifi-
cation d@velopp@e pour la phosphatase alcaline et des sub-
strats de type FADP ou NADP.
Parall~lement, d'autres solutions sont propos@es autour de la
marque enzymatique comme :
- la d@tection thermom@trique. II s'agit de mesurer la chaleur
produite par la r@action enzymatique dans un micro calori-
m~tre. La mesure de l'activit@ de la phosphatase alcaline
peut @tre am@lior@e d'un facteur 10 ;
- radaptation de la "polymerase chain reaction" en immuno-
analyse (Immuno-PCR). Dans ce cas, un morceau d'ADN est
utilis@ comme marque et amplifi@ apr@s la r@action immuno-
Iogique ce qui permettrait une amplification th@orique

188 Revue franqaise des laboratoires, avril/mai 1995, N ° 2 7 5

d'environ I0 millions de fois (26). Cette m6thodologie com-
pl~terait l'approche mol6culaire actuellement disponible en
phase homog~ne sous forme d'utilisation de fragments
d'enzymes recombinants (CEDIA) (27).
Cependant, la tendance actuelle est plut6t d'augmenter la
sensibilit~ en privil~giant des compos~s fluorig~nes ou
luminog&nes b&n&ficiant d'une ~mission de signal plus per-
formante.
Le seuil de d&tection des techniques utilisant des fluoro-
phores (substances directement fluorescentes par excitation)
ou des fluorig&nes (substances fluorescentes apr~s transfor-
mation) est comparable ~ celui obtenu en RIA tout en pr&-
sentant une meilleure stabilit~ du marqueur associ&e & une
absence de toxicitY.
Les inconv&nients majeurs des techniques de fluorescence
sont les ph~nom~nes d'auto-fluorescence et de "Quenching".
Ainsi, les applications en immunoanalyse utilisent essentiel-
lement des techniques d&riv~es de traitement du signal afin
d'~liminer les probl~mes li~s 8 la lumi~re parasite et aux phi-
nom~nes de diffusion.
Cette approche est illustr&e dans une m~thodologie originale
bas~e sur l'amplification du signal par transfert d'&nergie (28).
Elle repose sur l'amplification de fluorescence du donneur (en
g~n&ral un cryptate d'europium ~ fluorescence Iongue) par
l'~nergie de transfert li~e ~ la proximit& de l'accepteur (un
compos& fluorophore, tel que l'allophycocyanine) Iorsque les
deux conjugu&s sont engages dans la r~action immunolo-
gique. L'effet d'auto-extinction de la fluorescence (Quenching)
est ma~tris& par l'ajout d'ions fluorures. Cette technique, asso-
ci&e ~ une mesure en cin&tique, permet de r~aliser un immu-
nodosage en une ~tape et permet d'obtenir une grande sensi-
bilit~ associ&e & une large gamme de mesure.
Les compos~s chemi et bioluminescents offrent la sen-
sibilit~ d'une d~tection fluorim~trique sans les inconv~nients
li~s aux ph~nom~nes de diffusion (29, 30). De ce fait, ce
type de signal fait l'objet de nombreux d&veloppements.
En effet, les avantages, compar&s a l'inconv~nient de la
fugacit4 du signal, sont nombreux : s&curit4, absence de
toxicit&, stabilitY, sensibilit4 due ~ un faible bruit de fond,
~conomie, r&ponse lin~aire, gamme de mesure tr&s ~tendue,
rapidit~ et sp4cificit4 (bioluminescence).
A c6t4 des compos4s luminescents les plus utilis&s comme
les acylhydrazides (luminol) et les esters d'acridinium, les 1,2-
Dioxetanes confirment leur potentiel en immunoanalyse
alors qu'apparaissent les esters d'oxalate dont la particularit4
est de transf~rer l'~nergie de la r~action ~ une mol~cule fluo-
rescente (rubrene) ce qui leur donne une grande flexibilit4
d'utilisation.
De nombreux travaux sont actuellement en cours pour cou-
pler la sensibilit~ et la rapidit& de mesure du marqueur lumi-
nescent avec la facilit~ d'utilisation potentielle des dosages
en phase homog&ne (sans s~paration) :
- transfert d'4nergie entre un marqueur chemiluminescent
(luminol) coupl& ~ l'antig~ne et un marqueur fluorescent
(fluoresc~ine) (31) ;
- utilisation de syst&mes enzymatiques bioluminescents stabi-
lis4s par immobilisation sur un support solide (32) ;
- r~g~n~ration &lectrochimique de la marque luminescente.
Ce proc~d~ appel& ~lectrochemiluminescence (ECL) utilise
comme marqueur le ruthenium ou le terbium. La marque
subit, dans une chambre a flux continu en presence de tri-
propylamine (TPA), un cycle d'oxydor~duction qui apporte
l'~nergie n4cessaire g~l'excitation et 8 la r4g~n~ration de la
mol~cule (33). L'application de cette technologie en immu-
noanalyse peut paraitre tr&s s4duisante du fait de la rapidit4
de mesure, de la grande stabilit~ de la marque et d'une limite
de d~tection tr&s performante.
D'importants espoirs reposent aussi sur l'utilisation de
marques phosphorescentes, telles que les "Europium-activa-
ted yttriumoxisulfide phosphors" du fait de leur exception-
nelle stabilitY.
Les marques bioluminescentes connaissent ~galement un
regain d'int4r@t. En effet, leurs principaux d&fauts, instabilit~
Revue franqaise des laboratoires, avril/mai 1995, N ° 275
et perte d'activit~ apr~s conjugaison, seront bient6t ma~tris~s
gr&ce au clonage des g~nes de lucif~rase et d'aequorine.
Une prospective plus Iointaine peut ~tre le d~veloppement
de mol~cules hybrides produites par la fusion du g~ne de
lucif~rase ou d'aequorine et du g~ne d'un anticorps ou d'une
prot~ine antig~nique.
Le d~veloppement des marques non isotopiques a stimul~
~galement la recherche de nouveaux traceurs.
A cot~ de l'utilisation ponctuelle de phages, de radicaux
fibres, de marqueurs de spin et de m~taux, il est int~ressant
de mentionner la d~tection de surface sans amplification
mol~culaire. Son principe tient compte du fait que la liaison
antig~ne-anticorps peut ~tre consid~r~e comme un empile-
ment mol~culaire. Si elle se r~alise sur une surface plane, les
faibles modifications interfaciales qu'elle entra~ne peuvent
@tre d~tect~es par la m~thode de r~flexion totale (34) dont le
principe de base consiste ~ propager sur une surface m~tal-
lique une onde g~comportement ~vanescent des deux c6t~s
de la surface.
Pour obtenir ce ph~nom&ne connu sous le nom de r~so-
nance des plasmons de surface, l'hypot~nuse d'un prisme
est recouverte d'une couche mince m~tallique (or ou argent).
Un faisceau lumineux traverse le prisme, se r~fl~chit sur
cette surface, puis est mesur~ ~ la sortie du prisme: L'appari-
tion d'une couche superficielle sur la surface se traduit par
un d~placement du pic de r~flectivit~. Des variations de
l'indice de r~fraction peuvent ~tre d~tect~es Iors d'une liai-
son immunologique entre un hapt~ne et son anticorps pr~a-
lablement immobilis~ sur la surface d'argent.
Cette m~thode permet une analyse en temps r~el des inter-
actions biosp~cifiques et trouve des applications dans le
domaine des biocapteurs (35, 36).
Une autre approche fort attractive repose sur le concept des
immunoanalyses multiples simuitan~es. Ce type de
dosages, applicable en principe & toutes les m~thodes, per-
met d'aboutir & la d~termination en une ~tape de plusieurs
analytes dans une m~me goutte de sang (37, 38, 39).
Diff~rentes dans leurs principes, ces techniques se classent
en trois sous-groupes selon qu'elles mettent en jeu :
- plusieurs sites r~actionnels et un m~me type de signal (d~ter-
mination simultan~e sur support solide des IgE sp~cifiques) ;
- plusieurs sites et un type de signal & caract~re variable (uti-
lisation de plusieurs lanthanides tels que Eu, Sin, Tb, Dy
coupl~s 5 des antig&nes diff~rents) ;
- plusieurs sites et plusieurs types de signaux (concept de la
multianalyse en microspot d'Ekins).
Les applications potentielles sont nombreuses autour de la
d~termination simultan~e de diff~rents param~tres sous
forme de "panels" et de la prospective d'un coot r~duit et
d'une cadence augment~e.
Coupl~es & l'automatisation des analyseurs, ces procedures
apparaissent pleines d'avenir et font l'objet de nombreuses
recherches.
Conclusion
L'am~liOration du secteur d'immunoanalyse passe par la
n&cessit~ d'optimiser l'organisation du laboratoire et de dis-
poser de m&thodologies et d'analyseurs de plus en plus per-
formants.
Parall~lement ~ l'optimisation des syst~mes existants sur des
points tels que la robotique, l'ergonomie de l'automate, la
securit~ biologique, le traitement du signal, la standardisation
des conditions de r~action, la diminution des temps d'incuba-
tion ou l'am~lioration des capteurs, l'importance de la sensibi-
lit~ des techniques d'immunoanalyse en pratique quotidienne
place la recherche de nouvelles marques non isotopiques
comme un des ~l~ments essentiels de d~veloppement.
Les progr~s r~alis~s permettent d'obtenir des seuils de quan-
tification de l'ordre de la zeptomole (10 -21 mole) voire de
l'yoctomole (10 24 mole) et ainsi d'ouvrir de nouvelles appli-
cations pour l'immunoanalyse dans les prochaines armies.
189
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Investir en immunoanalyse:
le point de vue d'un industriel 6 travers son offre
G. CASTERA
En cette fin d'ann~e 1994, la question des investissements
est au coeur des r~flexions budg~taires de nombreux biolo-
gistes. En immunoanalyse, comme ailleurs, le projet d'inves-
tissement conduit & l'~tude des objectifs, des risques inh~-
rents ainsi qu'& l'~valuation de l'offre.
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(Behring Diagnostic)
I. Les objectifs
Sch~matiquement, l'analyse permet de diff~rencier les prin-
cipaux objectifs potentiels :
- le maintien de la capacit~ d'analyse,
Revue frangaise des laboratoires, avril/mai 1995, N ° 275