Biologie 

: l’expérience de Meselson et Stahl

Cette expérience est réalisée pour la première fois en 1958 par Matthew Meselson et Franklin Stahl. Elle
démontra le caractère semi-conservatif de la réplication de l’ADN.

Hypothèses :

Ils émettent 3 hypothèses quant au modèle de réplication de l’ADN :

- Hypothèse 1 : modèle CONSERVATIF 

À partir d’une molécule d’ADN bicaténaire mère, on forme une nouvelle molécule d’ADN bicaténaire. On garde
donc ici une molécule d’ADN mère, non modifiée (elle est donc conservée), tout en formant une nouvelle molécule
fille.

- Hypothèse 2 : modèle SEMI-CONSERVATIF

On dissocie les deux brins de la molécule d’ADN bicaténaire mère.
Chaque brin sert donc de matrice à la synthèse d’un brin complémentaire, l’ensemble reformant une
molécule d’ADN bicaténaire. Chaque nouvelle molécule d’ADN fille ne conserve donc que la moitié de la
molécule d’ADN mère (1 brin de la molécule mère et l’autre néoformé).

- Hypothèse 3 : modèle DISPERSIF

On dissocie les deux brins de la molécule d’ADN bicaténaire mère.
Chaque brin sert donc de matrice à la synthèse d’un brin complémentaire, l’ensemble reformant une
molécule d’ADN bicaténaire. Chaque nouvelle molécule d’ADN fille ne conserve donc que la moitié de la
molécule d’ADN mère (par fragment de molécule d’ADN mère et de molécule d’ADN néoformé).
Déroulement de l’expérience de Meselson et Stahl :

Des bactéries Escherichia coli (c. procaryote) sont cultivées sur un milieu ne contenant que de l’azote lourd
(15N, sachant que l’azote « naturel » est 14N). Leur ADN est donc composé avec des atomes d’azote lourd.

Ces bactéries sont ensuite placées sur un milieu ne contenant que de l’azote léger 14N. L’ADN maintenant
synthétisé sera donc constitué d’azote 14N, le seul présent dans le milieu. Les divisions des bactéries sont
synchronisées sur quelques générations.

Le schéma suivant présente les molécules d’ADN suivant les trois hypothèses :
Pour savoir quel modèle est le bon, l’ADN des bactéries est extrait après la première, la deuxième et la
troisième réplications (rappelons que les divisions ont été synchronisées donc toutes les bactéries sont au
même stade de leur cycle cellulaire en même temps), placé dans une solution de chlorure de Césium et
centrifugé 24h (à 100 000g). La position des ADN est repérée par une mesure de la densité optique. Cette
manipulation permet de séparer les molécules d'ADN selon leur poids. Le résultat est le suivant :

Interprétations des résultats et conclusion :

Après la 1ère division (donc première réplication de l’ADN), il n’y a que de l’ADN hybride (contenant 14N
et 15N). Ensuite, après la deuxième réplication, il y a de l’ADN hybride et de l’« ADN 14N ». Cette
configuration ne peut correspondre que à l’hypothèse du modèle semi-conservatif.

Explications complémentaires :

Point important pour que la conclusion garde du sens :

- Les bactéries sont synchrones sur quelques générations, elles se divisent en même temps
- Il sépare les ADN sur un gradient qui permet de mettre en évidence leurs très faibles différences de
densité

Différence entre l’azote 15 et l’azote 14 :

L’azote 14 est l’isotope de l’azote le plus abondant sur terre (+ de 99%).

L’azote 15 est plus lourd que l’azote 14 car il possède un neutron de plus. Cette différence de masse permet
de comparer la masse de chaque molécule d’ADN après une et deux réplications.
Séparation de la présentation :

1) Introduction (Nom + Exp.)

2) Les hypothèses
3) Le déroulement de l’expérience + différence 15N et 14N
4) Première observation après la première réplication et rejet première hypothèse
5) Deuxième observation après la deuxième réplication et rejet deuxième hypothèse
6) Conclusion + demander si questions