Acides

nucléiques et
synthése des
protéines
Les acides nucléiques
Le matériel génétique doit contenir l’information

nécessaire à la structure, à la fonction et à la

stabilité de reproduction des cellules.

Cette information est codée dans la séquence

des éléments de base du matériel génétique.

 Le matériel génétique doit pouvoir se répliquer pour
au cours des générations successives la même
information génétique soit présente dans les cellules
filles

 L’information codée dans le matériel génétique doit

pouvoir être décodée pour produire les molécules
nécessaires à la structure et au fonctionnement des
cellules.
1) Nature chimique du matériel génétique:
En 1929, Levene identifie les éléments constitutifs de
l’ADN, y compris les quatre bases adénine (A), Cytosine
(C), Guanine (G) et Thymine (T).

On distingue alors deux types d’acides nucléiques :

- L’acide désoxyribonucléique (ADN)

- L’Acide ribonucléique (ARN)

2) Structure des acides nucléiques:

Les acides nucléiques sont des macromolécules

présentes dans toutes les cellules vivantes.

Ce sont des polymères de nucléotides.

A .Structure de l’ADN:
L’ADN est un polymère formé de l’enchaînement de
nucléotides. Chaque nucléotide est formé d’un
assemblage de trois molécules :

- Une molécule de sucre (désoxyribose)

- Une molécule d’acide phosphorique

- Une molécule d’une base azotée différente selon les

nucléotides
Formation de nucléotides et poly-nucléotides

Le phosphore est attaché au carbone C’5 du

désoxyribose et à la base au carbone C’1.

La séquence des trois molécules est : base- sucre-

acide phosphorique.
Les nucléotides sont reliés les uns aux autres par des

acides phosphoriques.

Une même molécule d’acide phosphorique est d’une

part reliée au C’5 d’un sucre et d’autre part au C’3

d’un autre sucre par des liaisons ester-phosphates

Eléments constituants les nucléosides et les
nucléotides:
1- Le pentose : La structure du ribose présent dans
l’ARN et la structure du désoxyribose présent dans
l’ADN.

Dans le ribose, le carbone C2’ est lié à un groupement

hydroxyle.
Dans le désoxyribose, ce carbone est lié à un seul

atome d’hydrogène plutôt qu’au groupement

hydroxyle.

On numérote les atomes du carbone du sucre avec des

« primes » pour éviter la confusion avec les numéros

des bases.
2- Les bases azotées:

Les bases azotées des acides nucléiques

dérivent soit de la pyrimidine soit de la purine.

- Bases puriques : Elles sont formées de l’accolement
d’un cycle hexagonal à 4 carbones et 2 azotes et d’un
cycle pentagonal à 3 carbones et 2 azotes. Ces bases
sont : l’adénine (A) et la guanine (G).
-Bases pyrimidines : Elles sont formées d’un cycle
hexagonal à 4 carbones et 2 azotes.

Ces bases sont la cytosine (C), la thymine (T) pour

l’ADN et l’Uracile (U) pour l’ARN.
3- L’acide phosphorique (H3PO4):

L’hydrolyse partielle des acides nucléiques conduit à la

constitution des nucléosides et les nucléotides.

 Les nucléosides : résultent de la liaison entre une

base azotée et un pentose.

Avec une liaison N-glycosidique (β-osidique) Elle se fait

par élimination d’une molécule d’eau entre l’OH en C1'

du sucre et un H de l'azote N9 de la base purique ou

bien l'azote N1 de la base pyrimidique

Nucléoside= Ose + base purique ou pyrimidique
2- Les liaisons reliant les nucléotides
l’acide phosphorique engage deux fonctions acides dans

les liaisons dites phosphodiester (une liaison ester sert à

former un nucléotide, la deuxième sert à relier deux

nucléotides entre eux)

3-Caractéristiques de l’ADN:

L’ADN est une double hélice anti-parallèle : les

squelettes phosphate désoxyribose sont à l’extérieur

alors que les bases pointent vers l’intérieur et

s’apparient 2 à 2.
Trois caractéristiques sont propres à l’ADN, et vont

le distinguer de l’ARN :

- La nature du pentose : le pentose entrant dans la

composition de l’ADN est le désoxyribose.

- Les bases : l’uracile remplace le thymine dans

l’ARN.
Les deux chaines de nucléotides : généralement, une

molécule d’ADN est formée de 2chaines (2brins) de

nucléotides, alors que l’ARN est dans la grande majorité

des cas, simple brin (l’Arn bi-caténaire existe chez

certains virus dont le matériel génétique est l’ARN.

Complémentarité : Les deux chaines d’ADN sont

complémentaires, car chaque nucléotide d’un

brin, établit des liaisons chimiques avec le nucléotide

correspondant de l’autre brin.

Cette liaison chimique correspond à des liaisons H entre

les bases azotées des nucléotides.

La règle de complémentarité est : en face de A on a T et

en face de G on a C, ainsi la séquence en bases

azotées de l’un des brins permet de déterminer celle de

l’autre brin et ce, grâce à la règle de complémentarité.

Transmission de
l’information
génétique
la transmission de l’information génétique dépend

d’un processus de division cellulaire appelé

mitose et la méiose qui est une autre façon pour

les cellules de se diviser mais qui ne concerne

que les cellules produisant les gamètes.

1.La mitose:

La mitose joue un rôle important dans la division

cellulaire qui favorise la croissance et la régénération

des organismes

La mitose permet de créer des copies identiques des

cellules.
Définition : mode de division des cellule somatiques
dans laquelle a lieu un dédoublement des
chromosomes qui permet au cellules nouvellement
formées de posséder le même nombre de
chromosomes que la cellule mère.

1Cellule mère 2n chromosome donne 2 cellules filles

Les phases de la division mitotique:

A. L’interphase : est la plus longue période du cycle,

elle correspond à la période comprise entre la fin d’une

division et le début de la suivante.

L’interphase se décompose en trois phases successives

: la phase G1, la phase S et la phase G2.

 Phase G1 :
La phase G1 est une phase de présynthèse au cours de
laquelle :

 la cellule se prépare à la réplication (synthèse

d’enzymes) et accumule des réserves pour la division
cellulaire,

 synthétise les molécules d’ARN (messagers,

ribosomaux et de transfert) et les protéines
nécessaires à l’accroissement cellulaire.
 Phase S :

c’est la phase de synthèse caractérisée par :

la duplication de l’ADN, la synthèse des

histones.

la duplication du centriole.

 La phase G2 :

c’est la phase prémitotique, Un certain nombre de

facteurs y sont synthétisés, en particulier les facteurs de

condensation de la chromatine.

Comme la phase G1, elle représente une phase de

croissance cytoplasmique.
B. La phase M : ou la mitose:
2.La méiose:
Mode de division des cellules sexuelles dans

laquelle on assiste a une double division

cellulaire permettant la formation de gamètes, ou

cellules sexuelles chez les organismes

eucaryotes
A partir d’une cellule diploïde (2n), on obtient 4

cellules haploïdes (n chromosomes) qui sont les

gamètes.

Ce processus passe par deux divisions

successives :
• la première est réductionnelle (réduction

du nombre de chromosomes)

• une deuxième division dite équationnelle

REPLICATION DE L’ADN
Définition :
La réplication est le processus par lequel la cellule copie
son ADN avant de se diviser.

 Ce mécanisme est nécessaire pour la transmission du

matériel génétique aux cellules filles.

 C’est est un phénomène complexe et ordonné sous le

contrôle de plusieurs enzymes, et de protéines dont
les ADN polymérases.
la réplication se déroule pendant l’interphase avant toute

division cellulaire.

Elle se produit exactement au cours de la phase S

(synthèse) de l’interphase chez les cellules eucaryotes.

Mécanisme de la réplication :

La réplication débute par la séparation des deux brins de

l’ADN.

L’ADN est déroulé en un point précis appelé : origine de

la réplication. A partir de l’origine de réplication apparait

une fourche mobile ayant la forme de Y.

La réplication débute dans les02 sens à partir d’un

point commun.

Au niveau de chaque origine de réplication, un réplicon

se développe.

-La double hélice de l’ADN est déroulée par une enzyme

l’hélicase.
Les protéines SSB s’attachent à chacun des 02

brins pour garder les 02 brins séparés et

empêcher la reformation de la double hélice.

-La synthèse des 02 brins d’ADN se déroule de façon

simultanée, ils sont déroulés dans des sens opposés.

Le mécanisme de réplication est différent pour chacun

des brins, car les 02 brins sont antiparallèles.

La réplication est continue pour un brin dit : brin précoce

(de 5’à 3’), et pour l’autre brin dit : brin tardif (de 3’ à 5’)

le nouvel ADN est synthétisé sous forme de petits

fragments appelés : fragments d’Okasaki.

L’initiation de la réplication ne peut se faire qu’avec une

amorce (primers) constituée par un petit fragment d’ARN

(court fragment de 8 à 12 nucléotides complémentaires

à une région spécifique) synthétisé par une ARN

polymérase (ou primase).

L’enzyme responsable de la synthèse de l’ADN est une

ADN polymérase III.

Les amorces doivent être supprimées avant la fin de la

réplication, les lacunes temporairement créées sont

comblées par l’ADN.

- La terminaison correspond à l’arrêt de la réplication

lorsque deux fourches de réplication se rencontrent ou

lorsqu’une fourche rencontre un signal de terminaison

de la réplication.

Les 02 molécules filles sont séparées grâce à l’action

des topoisomérases II.

*ADN polymérase I a 3 fonctions :

- Une fonction de polymérisation 5' => 3' pour le

remplacement des amorces d'ARN par un brin d'ADN

et le remplissage des lacunes au cours de la réparation

de l'ADN.

- Une fonction exonucléasique 5' => 3'qui va éliminer les

amorces d'ARN
- Une fonction exonucléasique 3'=> 5' qui va éliminer les

nucléotides mal appariés et progresser en les

remplaçant par des nucléotides corrects.

Cette activité auto-correctrice permet de diminuer le taux

d’erreur.
*ADN polymérase II : impliquées essentiellement dans la
réparation de l'ADN endommagé.
*ADN polymérase III possède 2 fonctions :

- Une fonction polymérase:

C'est cette enzyme qui fonctionne aux fourches

de réplication, c’est la réplicase

- Une fonction exonucléase 3'=>5' comme pour

l’ADN polymérase I
Les ADN ligases :ont pour fonction de relier de façon
covalente deux morceaux d'ADN.

Grâce à une molécule d'ATP qui leur fournit l'énergie

nécessaire, les ADN ligases créent une liaison
phosphodiester entre deux nucléotides,

l'ADN ligase 1 intervient lors de la réplication de l'ADN,

lorsque les nouveaux brins synthétisés (les fragments
d'Okasaki) doivent être reliés entre eux.
La réplication est semi-conservative

La molécule mère donne un de ses brins à

chaque molécule fille, qui est complété par une

chaîne nouvellement synthétisée.

L'expression des gènes
Le gène est l'unité fonctionnelle de l'information
génétique.

Il est constitué d'un ensemble de nucléotides qui

contient toutes les informations nécessaires pour
transcrire un ARNm
L'expression d'un gène est un ensemble de processus
par lesquels l'information héréditaire stockée dans ce
gène est utilisée pour fabriquer des protéines qui jouent
un rôle dans le fonctionnement de la cellule.
L'expression d'un gène passe par un processus de
transcription
La biosynthèse des protéines
La synthèse des protéines, un processus

cellulaire, se fait en deux étapes : transcription et

traduction.
I. La transcription de l’ADN :produit trois sortes
d’ARN, tous nécessaires à la synthèse des
protéines.
• L’ARN messager — ARNm
• L’ARN de transfert — ARNt
• L’ARN ribosomique — ARNr et les ribosomes
la transcription est réalisée par l’intervention d’un

complexe enzymatique l’ARN polymérase.

De nombreuses molécules d’ARN sont transcrites

simultanément sur chaque gène et leur longueur

croissante indique l’état d’avancement de la transcription

sur la molécule d’ADN.

Promoteur: Site sur l'ADN d'une centaine de

bases auquel l'ARN polymérase (ainsi que les

facteurs d'initiation requis) se fixe pour

commencer la transcription.
La synthèse de l'ARN, comme presque toutes les

réactions biologiques de polymérisation

comprend trois étapes: l'initiation, l'élongation, et

la terminaison.
- La transcription au contraire de la traduction se fait au

niveau du noyau.

- Elle nécessite plusieurs facteurs d'initiation (facteurs

généraux de transcription (FGT: TFIIA, TFII B, TFII D

(TBP, TAF), TFII E, TFIIH).

ARN polymérase
L'ARN polymérase assume de multiples fonctions dans

le processus de la transcription:

- Elle cherche les promoteurs

- Elle déroule le fragment à transcrire pour produire une

matrice simple brin

- Elle sélectionne les NTPs corrects et catalyse la

formation des liaisons phosphodiester.

- Elle détecte les signaux de terminaison.

- Elle interagit avec les protéines de régulation de

l'expression génétique (activateurs, répresseur).

1- Initiation:
Chaque début d’une unité de transcription est marqué
par un promoteur. Il s’agit d’une séquence d’ADN
reconnue par une ARN Pol.

Le point de départ de la transcription se trouve dans le

promoteur situé avant la séquence codante du brin
matrice et comprenant environ 25 nucléotides. L’ARN
polymérase se fixe au promoteur
2. élongation:

Le complexe ouvert se forme pour qu’un

nucléotide complémentaire d’ARN s’associe à

chaque nucléotide du brin matrice, qui est celui

transcrit par la protéine.

Les deux brins d’ADN se déroulent progressivement à

mesure que l’ARN polymérase avance sur le brin

matrice.

Les nucléotides d’ARN complémentaires se trouvant

dans le milieu sont ajoutés à l’extrémité 3’ du brin

synthétisé.
3.La terminaison:
La transcription de l’ADN se termine une fois que l’ARN
polymérase atteint le terminateur, qui se trouve après la
séquence codante.

Chez les eucaryotes, la phase de terminaison s’ensuit

d’une autre phase de maturation de l’ARN. Cette
dernière étape permet de préparer l’ARN à la traduction.
La maturation se fait en 3 étapes:

Excision: consiste a retirer les partie non codante

(introns)

Épissage (ligature): recollage des exons

Renforcement :Un capuchon 5' est ajouté au début du

transcrit d'ARN, et une queue en 3' est ajoutée à la fin.

L’ARNm mature peut donc sortir du noyau par les pores
de l’enveloppe nucléaire
II. La traduction:

 ARNt: Ils fournissent l'interface entre les acides

aminés ajoutés à la chaine peptidique en croissance

et les codons dans l‘ARNm.

 Aminoacyl-ARNt synthétase: Ces enzymes
couples des acides aminés avec des ARNt spécifiques
qui reconnaissent le codon approprié.

 Ribosomes: Le ribosome coordonne la

reconnaissance de l'ARNm par chaque ARNt et
catalyse la formation de la liaison peptidique entre la
chaîne polypeptidique
le code génétique:
La séquence des acides aminés est gouvernée par celle

des nucléotides de l’ARNm suivant un système de

correspondance : le code génétique

Cette traduction est réalisée par triplets de nucléotides,

appelés codons
Le code génétique est :
-Universel

-Non ambigu : à un codon correspond un seul et unique

acide aminé

-Dégénéré : à un acide aminé peuvent correspondre

plusieurs codons (il existe 64 codons et seulement 20
acides aminés)
La traduction débute au codon d’initiation et s’arrête au

codon stop

Elle nécessite un système de traduction constitué par les

ribosomes .Les ribosomes parcourent l’ARNm depuis le

codon d’initiation jusqu’au codon stop assurant ainsi la

mise en place séquentielle des acides aminés

La synthèse démarre par la mise en place d’un codon

initiateur AUG qui code pour la méthionine.

Quand deux acides aminés sont côte à côte, le ribosome

entraîne la fabrication d’une liaison peptidique puis le

ribosome se décale de la longueur d’un codon sur

l’ARNm.
Il y a arrêt de la synthèse quand le ribosome lit un codon
stop (ou non sens) : UAA- UAG-UGA
Les ribosomes sont les ateliers de la synthèse des
protéines
Ils permettent de décodé de façon ordonnée la
séquence d’ARNm en acides aminés Ils lisent l’ARNm
dans un seul sens .
Les enzymes utilisés en

biologie moléculaire
Les enzymes de réplication de l'ADN:
 Les ADN polymérases

 L'hélicase

 La primase

 L'ADN ligase

 La transcriptase inverse :sert à synthétiser un ADN à

partir d'un ARN.
Les enzymes utilisées pour l'amplification de
l'ADN
La Taq polymérase :est une enzyme clé pour la
technique de la réaction en chaine par polymérase qui
est une technique d'amplification de l'ADN quand il est
en trop petite quantité. Cette enzyme est une ADN
polymérase ADN dépendante et qui a la propriété de
résister à de fortes températures
Les enzymes de restriction:
Les enzymes de restriction servent à cliver l'ADN.

Parmi les enzymes de restriction on retrouve l'ADN

topoïsomérase.

La topoïsomérase I est une enzyme hélicase

La topoïsomérase II est une enzyme gyrase

Les technique utilisées de

biologie moléculaire
La biologie moléculaire désigne l’étude des acides
nucléique, ribonucléique (ARN) et désoxyribonucléique
(ADN).

Ces techniques reposent essentiellement sur

l’hybridation moléculaire, sur la réaction de
polymérisation en chaîne (PCR) et sur le séquençage
des acides nucléiques.
PCR (polymerase chain reaction)
Cette technique (1985 K. MULLIS Prix Nobel dès 1993)

permet d’amplifier des séquences d’ADN de manière

spécifique et d’augmenter de manière considérable la

quantité d’ADN dont on dispose initialement.

Le principe de la PCR

Deux amorces (oligonucléotides d’environ 20

bases) spécifiques du fragment à

rechercher et situées à chaque extrémité de la

cible sont utilisées comme "têtes chercheuses".

Bien choisies, ces amorces sont incapables de
s’hybrider de façon efficace ailleurs que sur le
fragment ciblé, ce qui explique la spécificité de la
PCR.

Une fois la cible trouvée, une enzyme thermostable (la

Taq Polymérase) synthétise de façon très fidèle de
nouveaux fragments d’ADN similaires à ceux de la
séquence originale présente dans le prélèvement.
Ces cycles d’hybridation des amorces et de

polymérisation d’ADN sont répétés au moins 30 à

50 fois aboutissant à une multiplication

exponentielle de la séquence cible originale.

Cette amplification explique la sensibilité des
techniques PCR (ou plutôt leurs seuils de
détection très bas : la présence de quelques
copies de génome viral donne naissance en deux
heures à plusieurs milliards de fragments
identiques)
Réalisation d'une PCR
Chaque cycle de PCR est constitué de trois

phases différentes à trois températures

différentes : la dénaturation, l'hybridation

(ou annelage) et l'élongation (ou extension des

amorces)
Introduction à la Génie
génétique
QU'EST-CE QUE LE GÉNIE GÉNÉTIQUE?

Le génie génétique est le processus par lequel on

identifie et isole l'ADN d'une cellule vivante

ou morte pour l'introduire dans une autre cellule vivante.

Avant d'introduire le matériel génétique, on peut le

modifier en laboratoire.
Lorsque la manipulation génétique réussit, le

nouvel ADN est intégré à jamais dans les chromosomes

de la nouvelle cellule, et apparaîtra également dans
l'ADN des cellules des descendants.

Comment les scientifiques peuvent-ils faire des

manipulations génétiques? Ils utilisent la technologie de
recombinaison de l'ADN.
TECHNOLOGIE DE RECOMBINAISON DE
L'ADN
On appelle technologie de recombinaison de
l'ADN les méthodes mises au point pour isoler,

manipuler, amplifier, couper et épisser des

séquences identifiables d'ADN.