Exploration du métabolisme

lipidique
Pr. Layachi Chabraoui
Faculté de Médecine et de Pharmacie de Rabat

Cours de 2ème année de Médecine 2010-2011

 1- Lipides et lipoprotéines
• Lipides plasmatiques:
– Cholestérol,
Insolubles dans l’eau
– Triglycérides
– Phospholipides
• Apoprotéines: AI, AII, B48, B100, CI, CII,
CIII….
S’associent aux lipides et avec les Phospholipides
permettent la solubilisation de TG et du CT

LIPOPROTEINES
1-1- Structure des lipoprotéines

Phospholipides P

Cholestérol
libre ( CL)
CE

TG

P
1-2-Classification des lipoprotéines
• Ultracentrifugation:
Densité Lipides Protéines
Chylomicrons < 0,99 98% (TG 90%) Apo B48,A,C
VLDL 0,99 -1,006 90% (TG 60%) Apo B, D, E
LDL 1,019-1,063 75% (CT 50%) Apo B100
HDL 1,063- 1,21 55% (CT 45%) Apo AI, (AII)

• Electrophorèse:
β
Dépôt
lipoprotéines
- +
Pré β α
Chylomicrons lipoprotéines lipoprotéines
 Composition des lipoprotéines

Chylomicrons VLDL

TG

TG Phospho
Apo
CL
Phospho CE

Apo
CL
CE

1er
trim.
TG
Phospho
Apo
CL
CE
HDL
2e
trim.
3e
LDL trim.
Composition des LDL

TG
35%
10%
PL
Apo
10% 20%

25%
CL
CE
1-3- Métabolisme des lipoprotéines

Les Chylomicrons
– formés dans l’entérocyte à partir des produits de
la digestion des lipides (AG, monoglycéries,
lysophospholipides).

– → circulation lymphatique puis sang: Action de

la LPL (muscle et tissu adipeux) → AG +
remnants
1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les VLDL
TG endogènes (foie) → circulation sanguine:
action de la LPL et de la LCAT → AG +
IDL (densité entre 1,006 et 1,019)

Les IDL (remnants) → captation (récepteurs)

et dégradation par le foie
→ transformation en LDL
(lipase hépatique)
 1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les LDL
Proviennent des VLDL (IDL)
Riches en cholestérol (transport)
Récepteurs LDL (ApoB/E): foie et autres tissus
LDL oxydés: Récepteurs éboueurs (scavenger)
des macrophages
 1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les HDL Transport "reverse"
Chylomicrons du cholestérol
VLDL
LPL LPL AG + IDL

AG Cholestérol
+
Remnants HDL Cholestérol Récepteurs
discoïdes foie
LCAT
AI
HDL3 LCAT

Foie HDL2

Cholestérol Ester Phospholipides

2- Exploration du métabolisme
lipidique
Prélèvement
sujet à jeun depuis 12 heures+++
Sérum ou plasma hépariné

Aspect du sérum
Jaune citrin (clair)
Lactescent ou opalescent
Réexamen après une nuit à 4°C
2- Exploration du métabolisme lipidique
Dosage des Triglycérides
TG AG + Glycérol
1 Lipase ATP
Glycérol
2
Kinase
ADP

3 Glycérol P DH

P di OH Acétone Glycérol P

NAD+ NADH+
Mesure DO à 340 nm
 2- Exploration du métabolisme
lipidique
Dosage du Cholestérol

CE CL Cholesténone
Chol. Estérase Chol. Oxydase
+
H2O2
Formazan réduit
incolore Peroxydase

Formazan oxydé
coloré H2O
Mesure DO
 2- Exploration du métabolisme lipidique
Dosage du Cholestérol HDL
Méthode indirecte (TP)
• Précipitation des LDL et VLDL (lipoprotéines
contenant l’ApoB) par le sulfate de dextan de haut
PM ou par le phosphotungstate de sodium + MgCl2
• Centrifugation
• Dosage du C-HDL dans le surnageant
Méthodes directes
(Ex: Complexer les lipo non HDL par Ac anti β-lipo)
2- Exploration du métabolisme
lipidique
Le Cholestérol LDL

Calcul par la formule de Friedewald:

C-LDL = CT – (C-HDL + TG/5) en g/l

Condition de validité: TG < 3,5 g/l

Dosage direct: 4 nouvelles méthodes ont été
validées en 2005 (Article: Anales de Biologie
Clinique)
2- Exploration du métabolisme
lipidique
Valeurs usuelles
• CT: 1,40 à 2 g/l
• TG: 0,50 à 1,50 g/l
• C-HDL: 0,40 à 0,65 g/l
• C-LDL: 0,70 à 1,60 g/l
 2- Exploration du métabolisme
lipidique
Electrophorèse des lipoprotéines
Lipidogramme
• De moins en moins étudié
• Electrophorèse en milieu alcalin qui sépare les
différentes lipoprotéines:
β lipoprotéines
Dépôt
50 à 60%
- +
Pré β α lipoprotéines
Chylomicrons lipoprotéines 30 à 35%
10 à 15%
 2- Exploration du métabolisme
lipidique
Dosage des Apoprotéines
• Méthodes immunologiques: (Anticorps)
Immunoprécipitation en milieu liquide ou
sur gel:
ApoAI (HDL): 0,70 à 2 g/l
ApoB (LDL): 0,50 à 1,30 g/l
Lp (a) (LDL): < 0,30 g/l
 2- Exploration du métabolisme
lipidique
Appréciation du risque athérogène
• Rapports:
C-LDL / C-HDL < 3,5
ApoB / ApoAI < 3,5

C-LDL et seuils d’intervention

1,9 g/l si aucun facteur de risque
1,6 g/l si un facteur de risque
1,3 g/l si deux facteurs de risque
1 g/l si pathologie coronarienne
 3- Classification des
hyperlipoprotéinémies

• ↑ des TG et ou du CT
• ↑ du Cholestérol surtout le C-LDL car
athérogène +++
• Hyperlipoprotéinémies secondaires
• Hyperlipoprotéinémies familiales
(primaires)
 Hyperlipoprotéinémies primaires
Classification
Aspect du
Internationale Fréquence CT TG Lipoprot
sérum
(Fredrickson)
IIa fréquent Clair +++ N LDL

IIb fréquent opalescent ++ + LDL,VLDL

III rare opalescent ++ ++ Broad β

I très rare lactescent N ou + +++ Chylo

IV fréquent opalescent N ou + ++ VLDL

V rare lactescent N ou + +++ VLDL Chylo

Classification selon De Gennes Fredrickson
Hypercholestérolémies essentielles CT/TG > 2,5 IIa
1 ) Forme mineure : expression biologique permanente,
manifestations cardiovasculaires occasionnelles
2) Forme majeure : xanthomatose tendineuse
hypercholestérolémique familiale (XTHF)
3) Forme monstrueuse de XTHF
Hyperlipidémies mixtes CT/TG ≤ 2,5 TG/CT ≤ 2,5
1) Forme mineure: expression biologique permanente, IIb
quelques manifestations cardiovasculaires
2) Forme majeure avec ou sans xanthomatose III

Hypertriglycéridémies majeures TG/CT > 2,5

• Formes exogènes dépendantes des graisses (LPL↓) I
• Formes endogènes indépendantes des graisses ( glucido- IV
dépendantes ou éthanolodépendantes, (LPL normale)
• Formes exogènes et endogènes V
 Hyperlipoprotéinémies secondaires
Types selon
CT TG
Fredrickson
Pathologies métaboliques IV ou IIb N ou + +
Diabète
Insuffisance rénale
Hyperuricémies
Syndrome néphrotique IIb ou IV + +
Pathologie Hormonale
IIa ou IIb ++ N ou ++
Hypothyroïdies
HyperLipoProtéinemies
latrogènes
Contraceptifs stéroïdiens IIb ou IV N ou + +
Beta-Bloquants IV N +
Diurétiques thiazidiques IIb + +
Corticoïdes IV ou IIb N ou + +
 Hypolipoprotéinémies

Secondaires
• Hyperthyroïdies
• Malnutrition
• Insuffisance hépatocellulaires
Primaires
• Maladie de Tangier: absence des α lipo
• Maladie de Bassen Kornzweig: Abétalipo
 Sphingolipidoses
• Anomalies héréditaires du métabolisme
des sphingolipides qui sont des lipides
complexes tissulaires: système nerveux
• Structure de base = sphingosine: alcool
aminé à 18 atomes de carbone
• La substitution de la fonction amine en 2
par un AG en C18 à 26 → Céramide
• La substitution de la fonction alcool en 1
donne 4 types de composés:
1. Sphingomyélines =
Céramide lié au phosphorylcholine
2. Cérébrosides =
Céramide + Oligosaccharide
3. Sulfatides =
Cérébrosides sulfatés
4. Gangliosides =
Cérébrosides + molécules d’acide
sialique
Ces sphingolipides sont catabolisés par des enzymes
spécifiques.
Le déficit d’une enzyme entraîne l’accumulation du
sphingolipide non dégradé et détermine une sphingolipidose
Sphingolipidose Enzyme déficient Sphingolipide
accumulé
GM1 Gangliosidose β Galactosidase GM1 ganglioside
GM2 Gangliosidose GM2 ganglioside
Tay-Sachs Hexosaminidase A
Sandhof Hases A et B
Maladie de Fabry α Galactosidase A Globotriaosylcéramide
Maladie de Gaucher Glucocérébrosidase Glucosylcéramide
Maladie de Farber Céramidase acide Céramide
Leucodystrophie Arylsulfatase A Sulfatide
métachromatique
Maladie de Krabe Galactosylcéramidase Galactosylcéramide
Maladie de Sphingomyélinase Sphingomyéline
Niemann-Pick