Module : Techniques d’Analyses

Chimiques Appliquées à la Biologie

EXAMEN TP

Prof : Mehdi
EXAMEN TP1
A = -logT = -log ( I / I 0 ) = log ( I 0 / I ) = el × l × c
• Association des 2 lois :
• L’absorbance d’un rayonnement monochromatique est donnée
par : A =  . c . l (3) → densité optique (DO) sans dim.
• Avec c la concentration (mol.l-l) , l la longueur du trajet
d’absorption (cm) et  le coefficient d’absorption (d’extinction)
molaire (l.cm-1.mol-1).
• Si c (g.l-l) , l (cm) ,  le coefficient d’absorption (l.cm-1.g-1).
•  est fonction :
• de la nature du corps absorbant ;
• de la longueur d'onde du faisceau incident ;
• de la température (l'augmentation de T  déplacement des bandes vers des  élevées)
•  est indépendant (en principe) du solvant mais est caractéristique du composé étudié.
 Rq: Validité de loi de Beer-Lambert
• la concentration de la substance absorbante ne doit pas être très
élevée (c  0,01M) ;
• Pour c  0,01 M la distance moyenne entre les espèces absorbantes est réduite.
Chaque particule perturbe la distribution de charge de ses voisines.
• Modification de la capacité des particules à absorber.
• la solution doit être limpide et non fluorescente (une suspension
cause une absorption apparente de la lumière ; la loi n'est pas suivie
dans le cas des solutions fluorescentes )

• la substance absorbante doit être stable (pas de réaction chimique en

solution ; l’état électronique de la substance absorbante peut être
modifié par son environnement qu'il s'agisse du solvant ou de corps
dissous).
Prénom ;
1 - la couleur d'une solution correspond :

à la synthèse additive des radiations colorées non absorbées par la solution.

à la synthèse soustractive des radiations colorées non absorbées par la solution.à la

couleur complémentaire de la couleur absorbée.

à la synthèse additive des radiations absorbées

2 - A la vue de ce spectre d'absorption
d'une solution colorée, on peut dire que :

λmax = 650 nmλmax

= 1,05 nm

la solution est rouge

la solution est bleue

3 - La longueur d'onde λmax d'un spectre d'absorption représente :

la longueur d'onde maximale de la radiation absorbée par la solution.la

longueur d'onde de la radiation la plus absorbée par la solution.

la longueur d'onde de la radiation la plus intense transmise par la solution. la

longueur d'onde de la radiation la moins intense transmise par la solution

1 - L'utilisation d'un spectrophotomètre nécessite :

de l'étalonner, avant toutes mesures, à l'aide d'une

solution étalon.

de travailler aves des solutions peu concentrées en

espèces colorées

d'utiliser des cuves de dimensions identiques pour