Faculté de médecine Alger

Département de médecine
Module de biochimie
1ere année médecine (2023-2024)
Coordinateur Pr RAAF

Coordinatrice adjointe et responsable des TD : Dr DOUAIBIA

Série de TD ENZYMOLOGIE
Exercice n°1 :

La créatine kinase (E.C.2.7.3.2) catalyse la phosphorylation

de la créatine par l’ATP selon la réaction :

CK
Créatine + ATP Créatine phosphate + ADP

1. Pour étudier la vitesse de la réaction catalysée par la

CK, on suit l’apparition du produit en fonction du temps
dans le milieu réactionnel.
On obtient la courbe suivante (figure1)

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 2.1. Commenter l’allure de la courbe en précisant la
zone utilisable pour déterminer la vitesse initiale.

1.2.Expliquer comment déterminer graphiquement cette

vitesse initiale.

2. La phosphorylation de la créatine dépend de la

concentration en créatine et en ATP. On mesure la
vitesse initiale de cette réaction en fonction de
concentrations croissantes en ATP, la concentration en
créatine étant constante et saturante.
La figure 2 montre les résultats obtenus :

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 3.1. Déterminer graphiquement les constantes
cinétiques de la CK.

3.2. On recommence l’expérience ci-dessus mais en

faisant varier la concentration en créatine, celle de
l’ATP restant constante et saturante. On obtient une Km
(de la CK pour la créatine) égal à 20mmol.L-1. Que peut-
on conclure ?

3.3. Quelle serait l’influence de la modification du pH

du milieu réactionnel sur les constantes cinétiques ?
Justifier la réponse.

4. La CK est une enzyme dimérique formée de deux sous

unités polypeptidiques M (Muscle) et B (Brain).

4.1. Donner la définition des isoenzymes.

4.2. Quelles sont les structures possibles de la CK.

Exercice 2 :

Soit une enzyme dont l’étude a été effectuée en absence et

en présence d’inhibiteurs.
En représentation de Lineweawer et Burk, les résultats
suivants sont obtenus :

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Identifier les courbes obtenues (en justifiants vos réponses) :
− En absence d’inhibiteur ;
− En présence d’inhibiteur non compétitif ;
− En présence d’inhibiteur non compétitif.

EXERCICE 3
Répondez par Vrai ou Faux ? Justifiez.
1) La plupart des enzymes sont des protéines, mais toutes les
protéines ne sont pas des enzymes.
2) Les enzymes changent de forme après une réaction
biochimique

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3) Les enzymes ont des sites actifs qui retiennent la molécule de
substrat pour une réaction chimique.
4) Les coenzymes sont des molécules chimiques nécessaires à
l'activité catalytique de nombreuses enzymes.
5) L’holoenzyme correspond à l’association de l’apoenzyme avec
son coenzyme.
6) Les holoenzymes sont des enzymes catalytiquement actives qui
sont couplées à des cofacteurs ou groupements prosthétiques.
7) Les hydrolases sont des enzymes catalysant le réarrangement
du groupement atomique sans modifier le poids moléculaire ou le
nombre d'atomes du substrat.
8) Le site actif d'une enzyme reste rigide et ne change pas de
forme.
9) Le site actif d'une enzyme se trouve au centre des enzymes
globulaires.
10) Vmax est la vitesse de réaction maximale à laquelle la plupart
des enzymes sont liées au substrat
11) Km est la concentration de substrat qui permet à l'enzyme
d'atteindre la moitié de Vmax.
12) Nous pouvons déterminer Vmax et Km pour une réaction en
traçant un graphique de la vitesse de réaction (v) en fonction de la
concentration de substrat [S].

13) Un Km petit indique que l'enzyme n'a besoin que d'une petite
quantité de substrat pour se saturer
14) Les inhibiteurs compétitifs entrent en compétition avec le
substrat naturel pour leur fixation sur les sites actifs de l'enzyme.
15) Dans l'inhibition compétitive, l'inhibiteur se lie au site
allostérique de l'enzyme.
16) Lorsqu'une enzyme est en présence d'un inhibiteur compétitif,
le Km et Vmax diminueront.
17) Les inhibiteurs non compétitifs modifient la conformation de
l'enzyme.

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18) Un inhibiteur incompétitif affecte la constante de Michaelis et
mais pas la vitesse de réaction maximale d'une enzyme ?
19) Les zymogènes sont la forme inactive des enzymes qui sont
généralement activées par l'action d'une autre enzyme ou de
composés chimiques.
20) Les enzymes allostériques sont constituées de plusieurs
chaînes polypeptidiques.
21) Une enzyme allostérique est un complexe de deux enzymes ou
plus avec une fonction identique mais une structure différente.
22) Le site allostérique est lui-même le site actif, où certaines
substances hors substrats peuvent se lier.
23) Les enzymes allostériques obéissent à la cinétique de
Michaelis-Menten.

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