GÃ©nie enzymatiqueGEE

Département Génie des Procédés de l’Energie et de
l’Environnement
Module : Génie des réacteurs
Génie enzymatique
Réacteurs enzymatiques
Pr. CHEBLI Bouchra
Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 1

• L’Enzymologie, branche de la biochimie, est la
discipline consacrée à l’étude des propriétés
structurales et fonctionnelles des enzymes.
• Le « génie enzymatique » est une branche de

l’ingénierie des bioprocédés qui relève de l’exploitation
des enzymes en passant par l'identification de leurs
spécificités, les conditions de leur purification, leur
modification dans le but d’améliorer leurs propriétés
et les conditions optimales de la catalyse enzymatique
et enfin la production à grande échelle à des fins
appliquées.

Génie enzymatique
• Enzymologie
•Introduction
• Cinétique et vitesse de réaction
• Mécanisme de la catalyse enzymatique
• Effet de la température du pH et de la présence des inhibiteurs sur
l’activité d’enzyme
• Production industrielle d’enzymes

• Réacteurs enzymatiques

Introduction
• Une enzyme est une protéine qui agit comme catalyseur
biochimique, un agent qui change la vitesse d'une réaction
mais qui ne change pas avec la réaction.
• A l’origine on avait pensé que cette propriété était propre au
phénomène du vivant ; aujourd’hui, il est bien acquis que
l’activité catalytique des enzymes peut s’exercer dans un
tube à essai en dehors de tout système vivant.
• Une enzyme donnée est spécifique d’une réaction, c’est-à-
dire qu’elle catalyse toujours la même transformation, se
produisant sur les mêmes corps chimiques initiaux ;
• Les protéines enzymatiques sont synthétisées par des êtres
vivants. Cette synthèse est déterminée génétiquement : sa
conservation dans le génome est favorisée par le besoin
qu’éprouve cet être vivant de faire cette réaction.

Les enzymes
Enzyme= catalyseur réagissant à faible T et permettant l’augmentation de la

vitesse de réaction sans altérer ni modifier les produits. Synthétisé par le
vivant, un enzyme est spécifique d’une réaction c’est à dire toujours la même
réaction avec les mêmes espèces chimiques initiales.
Enzyme :
• Catalysts for biological reactions
• Most are proteins
• Lower the activation energy
• Increase the rate of reaction
• Activity lost if denatured
• May be simple proteins
• May contain cofactors such as metal ions or
organic (vitamins)

Les enzymes sont des catalyseurs
extrêmement efficace
ADC = arginine decarboxylase

STN = staphylococal nuclease
FUM = fumarase
PEP = carboxypeptidase B
CMU = chorismate mutase
CAN = carbonic anhydrase
Elle peuvent accélérer une réaction des milliards de milliards de fois

Les enzymes peuvent être extrêmement spécifiques
•Grace aux interaction avec les substrats (formes, géométrie, nature

chimique)
•Elle peuvent discriminer des formes chimiques très proche, les

énantiomères …
• Les enzymes peuvent avoir une très grande affinité pour le

substrat
•Grace aux nombreuses interactions que l'enzyme peut faire avec le

substrat
(hydrophobe, liaisons ioniques, liaisons hydrogène, …) le substrat peut
être fixé a de très faible concentration (< mM, mM) .
•Une enzyme peut être très efficace à de très faible concentration.

Les cofacteurs
Les enzymes ont parfois besoin de fixer une autre partie non protéique pour
catalyser une réaction (transfert d'électrons, de protons, de groupe
phosphate,…).
Cette partie appelle cofacteurs. Cella peut être un métal, un nucléotide…
Dans ce cas la partie protéique s'appelle l'apoenzyme
La partie non protéique s'appelle le cofacteur (nécessaire à la réaction enzymatique).
L'association de la partie protéique (apoenzyme) et de la partie non-protéique

(cofacteur) constitue l'holoenzyme.
apoenzyme cofacteur
(inactif) +
holoenzyme
(actif)

– Les cofacteurs enzymatiques
Le cofacteur d’une enzyme est une molécule qui apporte

un groupement chimique important pour la catalyse
enzymatique, groupement que ne possède pas forcément
l’enzyme seule.
Il peut s’agir :
d’un ion
ou d’un coenzyme si le cofacteur est d'origine organique
(vitamine, nucléotide,…)
.

La sélectivité de l’action enzymatique Un des avantages
majeurs de l’utilisation des enzymes dans la catalyse est
leur sélectivité.
Les principaux types de sélectivités sont :
• Chimiosélectivité ; Spécificité liée au type de liaison,
groupements fonctionnels présent sur la molécule, ex :
protéases qui coupent les liaisons peptidiques NH-CO et
séparent les acides aminés
• Régiosélectivité ; ex : trypsine coupe après un acide

aminé basique, chymotrypsine après un acide aminé
aromatique
• Stéréosélectivité ; ex : L-amino-oxydase ou D-amino-

oxydase, α ou β-galactosidase, furamase qui réagit sur le
furamate en configuration E pour donner du malate…
La classification des enzymes
La commission des enzymes et l’union internationale en biochimie a
établi une classification et une nomenclature systémique, comportant :
• 6 classes
• Chacune subdivisée en sous classe
1) Oxydoréductase : assure une oxydoréduction

2) Transférase : assure un simple transfert
3) Hydrolase : assure une hydrolyse
4) Lyase: assure une addition sur une double liaison
5) Isomérase : assure une réaction d’inter conversion
d’isomères
6) Ligase ou synthétase : catalyse les réactions de création
de liaisons
(C-C/ C-N / C-S)

Nomenclature
EC number
• Chaque enzyme est assignée un code à quatre chiffres par la

Commission des Enzymes (EC) de l’union International de Biochimie
de Biochimie Moléculaire:
• Nom de l’enzyme (EC W.X.Y.Z)

– EC- système numérique de la commission des enzymes
– W- indique la réaction catalysée (1-6)
– X- indique le substrat général (ou groupe de substrats) impliqué
– Y- indique le substrat spécifique ou la coenzyme
– Z- le numéro de série de l’enzyme
• Ex. oxydase de glucose EC 1.1.3.4

Active Site
Définition :
Le site actif est une zone privilégiée, est la région tridimensionnelle qui se lie au
substrat., au niveau de laquelle s’exerce électivement le pouvoir catalytique de
l’enzyme.
Il permet:
la reconnaissance et la complémentarité de forme avec un substrat spécifique
de l’enzyme et
la réaction transformant le substrat en produit

Deux modèles pour expliquer la spécificité des enzymes:
Clé-serrure: la forme du site actif est
complémentaire à celle du substrat
Forme induite: l’enzyme change sa conformation lors

de la liaison du substrat.

Unité de l'activité enzymatique
L'activité enzymatique d'une solution est le nombre de mole de

substrat qu'elle dégrade par seconde
Katal (Kat)
L'unité officielle de la mesure de l'activité enzymatique est le Katal.
C'est la quantité d'enzyme qui catalyse la transformation d'une mole de
substrat par seconde
L'unité international (U.I)

On trouve aussi une autre unité très usuel " l'unité international"
C'est la quantité d'enzyme qui catalyse la transformation d'une mmole
de substrat par minute
1UI= 16nKat.
Dosage
La mesure de l'activité enzymatique d'une solution permet de doser une
enzyme
Il faut faire la mesure dans des conditions définies (pH, T°(souvent
25°), [S], …) et connaître l'activité de l'enzyme
Réacteurs Enzymatiques CHEBLI
17
Mécanisme général d'une enzyme
• L’enzyme accélère la réaction sans modifier l’état d’équilibre
• Les enzymes abaissent l’énergie d’activation du substrat
• La première étape implique la formation d’un complexe enzyme-
substrat
• Spécificité d’un substrat par des interactions/adaptation réciproque
via des liaisons de faibles énergies
• Les enzymes stabilisent aussi l’état de transition
• Transformation du substrat en produit, libéré avec l’enzyme

Les enzymes abaissent l'énergie
d'activation
• L'énergie d'activation ou l'énergie
libre d'activation (GA) est l'énergie
qui doit être absorbée par les
réactifs pour que leurs liaisons
soient brisées.
• Les réactifs doivent atteindre un

état de transition instable dans
lequel les liaisons sont plus fragiles
et plus faciles à briser.
• Même une réaction exergonique, où

le G est négatif, requiert
l'absorption d'énergie pour atteindre
l'état de transition.

Le modèle Michaelis et Menten

Graphe de Michaelis-Menten: vi en fonction de [ S ]
vmax est la vitesse maximale que peut atteindre la réaction lorsque l'enzyme
est saturée de substrat, c'est-à-dire lorsque [ E ]T = [ ES ].
KM est la concentration de substrat qui sature l'enzyme à moitié. C'est une
mesure de l'affinité de l'enzyme pour le substrat: plus l'affinité est élevée,
plus KM est petit.
k2 (= vmax/ [ E ]T) est souvent appelée constante catalytique kcat, et représente
le nombre de cycles catalytiques par seconde (nombre de rotations) dont est
capable l'enzyme Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 24
Mesure de l’efficacité enzymatique :
nombre de turn-over
« Turn-over » de l’enzyme kcat(seconde-1)
[Et] connue, Vmax = kcat [Et] kcat = Vmax /[Et]
• kcat est une constante de vitesse du premier ordre

(unité s-1),
• C’est le fréquence à laquelle l’enzyme établit l’acte
catalytique (nombre de fois par seconde) lorsqu’il est
saturé par le substrat
• 1/kcat est la durée, en s de l’acte catalytique.
• kcat donne la mesure de l’efficacité de la catalyse par
l’enzyme

Détermination de Vmax et KM
Linéarisation de l'équation de
Michaelis-Menten
La transformation en double-réciproque de Lineweaver et

Burke
1 / vi = 1 / vmax + (KM / vmax )· 1 / [ S ]

Graphe de Lineweaver-Burk: 1/vi en fonction de 1/[ S ]
Eadie-Hofstee plot
Km et Vmax sont déterminés graphiquement on traçant la courbe vi en

fonction de vi/[S]:

Le modèle de base de la cinétique enzymatique
Il y a au moins trois réactions simples:
1.Fixation du substrat (S) sur l'enzyme (E), formation du complexe (ES)
2.Transformation du substrat lié (ES) en produit lié (EP)
3.Dissociation du complexe (EP), largage du produit (P)
Pour chaque réaction il y a une différence d'énergie libre et une barrière

d'activation à franchir. A chaque constante de vitesse correspond une
énergie d'activation ΔEa

Cinétique d'une enzyme au cours du temps
K1 K2 K3
E+S ES EP E+P
K-1 K-2 K-3
Apparition du substrat au cours du temps

[P]
La vitesse peut être mesurée

avec l'apparition du produit.
Vitesse initiale
d P 
v=
dt
t
Phase
Phase Effet équilibre
préstationnaire du produit
stationnaire
[ES] [S]>>[E] [EP] [ES] [EP]
L'enzyme La vitesse Le produit qui s'accumule La concentration du

se charge est constante. ralentie la réaction produit reste constante
En enzymologie classique, on s'intéresse à la phase stationnaire (linéaire) en mesurant la vitesse initiale.

Réacteurs
Il y a un maximum d'enzyme liéeEnzymatiques CHEBLI
avec le substrat. D’où la vitesse maximale 29
En début de réaction, il n'y a pas de P, et on présume que le complexe EP se
dissocie plus vite qu'il ne se forme à partir de ES, c'est-à-dire que k3 > k2,
k-2 . La réaction qui limite la vitesse de formation de P est la réaction k2.
Dans ces conditions, le schéma se simplifie:
Leonor Michaelis et Maud Menten ont déduit de ce modèle en 1913 une

équation qui prédit la vitesse initiale (de formation de P )en fonction de la
concentration du substrat:
Vitesse initiale de la réaction:
Vi = d[P]/dt = k2·[ ES ]

La vitesse de réaction dépend de la concentration du complexe enzyme-
substrat ES.
Il faut donc calculer la concentration de ES:
ES se forme à partir de E + S et se décompose soit en E + S , soit en E
+P.
Vitesse de formation de ES: vf = k1·[ E ]·[ S ]
Vitesse de dégradation de ES: vd = (k-1+ k2)·[ ES ]
[ES] atteint rapidement une valeur constante (condition dite de "steady

state"),
donc vd = vf
(k-1+ k2)·[ ES ] = k1·[ E ]·[ S ]
[ ES ] = [ E ]·[ S ] k1/ (k-1+ k2) = [ E ]·[ S ] / KM
KM = (k-1+ k2)
k1
Constante de Michaelis (-Menten)

Il faut maintenant connaître la concentration de l'enzyme libre [ E ].
[ E ] = [ E ]T - [ ES ]
où [ E ]T est la concentration totale d'enzyme, libre ou lié. On a donc:
[ ES ] = ([ E ]T - [ ES ])·[ S ] / KM
= [ E ]T·[ S ] / KM - [ ES ]·[ S ] / KM
[ ES ] + [ ES ]·[ S ] / KM = [ E ]T·[ S ] / KM
[ ES ]·( 1 + [ S ] / KM ) = [ E ]T·[ S ] / KM
[ ES ]·(KM + [ S ]) / KM = [ E ]T·[ S ] / KM
[ ES ]·(KM + [ S ]) = [ E ]T·[ S ]
[ ES ] = [ E ]T·[ S ] / (KM + [ S ])
On peut enfin introduire ce terme dans l'équation pour la vitesse initiale:

Vi = k2·[ ES ] = k2·[ E ]T·[ S ] / (KM + [ S ]) = vmax·[ S ] / (KM+ [ S ])
Equation de Michaelis-Menten Vi= Vmax [S]/ Km + [ S ]

Facteurs influençant la vitesse enzymatique
1. Extreme Temperature are the most

dangerous
- high temps may denature (unfold) the
enzyme.
2. pH (most like 6 - 8 pH near neutral)

3. Ionic concentration (salt ions)
4. Inhibitors

Température
• Agit de 2 manières :
– Augmentation de la vitesse de réaction (selon la loi d’Arrhénius)
– Déstabilisation de la structure de l’enzyme

Factors Affecting Enzyme Action

Factors Affecting Enzyme Action: Substrate
Concentration
• Increasing substrate concentration increases the rate of reaction

(enzyme concentration is constant)
• Maximum activity reached when all of enzyme combines with substrate.

Inhibition enzymatique
Inhibition compétitive

Inhibition non compétitive

Inhibition incompétitive

Cas particulier : Inhibition par le substrat ou par le produit
Substrat inhibition
Inhibition par le produit

Les producteurs d’enzymes
• Novozyme (Danemark) : 50%
• DSM (Hollande) : 20%
• Genencor International (USA) :15%
• Solvay-Miles (USA) : 5%
• Amano, Nagase (Japon)

Intra/extra
Enzymea EC numberb Source Industrial use
-cellularc
Animal enzymes
Catalase 1.11.1.6 Liver I Food
Chymotrypsin 3.4.21.1 Pancreas E Leather
Lipasee 3.1.1.3 Pancreas E Food
Rennetf 3.4.23.4 Abomasum E Cheese
Trypsin 3.4.21.4 Pancreas E Leather

Plant enzymes
Actinidin 3.4.22.14 Kiwi fruit E - Food
a-Amylase 3.2.1.1 Malted barley E +++ Brewing
b-Amylase 3.2.1.2 Malted barley E +++ Brewing
Bromelain 3.4.22.4 Pineapple latex E - Brewing
b-Glucanaseg 3.2.1.6 Malted barley E ++ Brewing
Ficin 3.4.22.3 Fig latex E - Food
1.13.11.1
Lipoxygenase Soybeans I - Food
2
Papain 3.4.22.2 Pawpaw latex E ++ Meat

Bacterial enzymes
a-Amylase 3.2.1.1 Bacillus E +++ Starch
b-Amylase 3.2.1.2 Bacillus E + Starch
Asparaginase 3.5.1.1 Escherichia coli I - Health
Glucose isomeraseh 5.3.1.5 Bacillus I ++ Fructose syrup
Penicillin amidase 3.5.1.11 Bacillus I - Pharmaceutical
Proteasei 3.4.21.14 Bacillus E +++ Detergent
Pullulanasej 3.2.1.41 Klebsiella E - Starch

Fungal enzymes
a-Amylase 3.2.1.1 Aspergillus E ++ Baking
Pharmaceutica
Aminoacylase 3.5.1.14 Aspergillus I -
l
Glucoamylasek 3.2.1.3 Aspergillus E +++ Starch
Catalase 1.11.1.6 Aspergillus I - Food
Cellulase 3.2.1.4 Trichoderma E - Waste
Dextranase 3.2.1.11 Penicillium E - Food
Glucose oxidase 1.1.3.4 Aspergillus I - Food
Lactasel 3.2.1.23 Aspergillus E - Dairy
Lipasee 3.1.1.3 Rhizopus E - Food
Rennetm 3.4.23.6 Mucor miehei E ++ Cheese
Pectinasen 3.2.1.15 Aspergillus E ++ Drinks
Pectin lyase 4.2.2.10 Aspergillus E - Drinks
Proteasem 3.4.23.6 Aspergillus E + Baking
Raffinaseo 3.2.1.22 Mortierella I - Food
Yeast enzymes
Invertasep 3.2.1.26 Saccharomyces I/E Confectionery
Lactasel 3.2.1.23 Kluyveromyces I/E Dairy
Lipasee 3.1.1.3 Candida E Food
Raffinaseo 3.2.1.22 Saccharomyces I Food

Préparation des enzymes
• Screening enzymatique
• Fermentation pour la production d’enzyme
• Extraction et purification
• Formulation
• Respect des normes et de la législation pour
l’utilisation d’enzymes.

Extraction et purification
Figure: Flow diagram forRéacteurs

the preparation of enzymes
Enzymatiques CHEBLI 50
Table The effect of number of steps on the yield and costs in a typical enzyme
purification process. The realistic assumptions are made that step yields are 75%, step
purifications are three-fold and step costs are 10% of the initial costs (later purification
steps are usually intrinsically more expensive but are necessarily of smaller scale).
Cost Cost
Relative Yield Specific Total
Step per per
weight (%) activity cost
weight activity
1.000 100 1 1.00 1 1.00
1 0.250 75 3 1.10 4 1.47
2 0.063 56 9 1.20 19 2.13
3 0.016 42 27 1.30 83 3.08
4 0.004 32 81 1.40 358 4.92
5 0.001 24 243 1.50 1536 6.32

Ion – exchange Chromatography
Elution
AFFINITY CHROMATOGRAPHY

Immobilisation d’enzymes
L’immobilisation d’enzyme consiste en sa

rétention dans une phase insoluble
• L’intérêt d’utilisation d’enzymes

immobilisés dans les bioréacteurs:
– Possibilité de récupération à la fin du cycle
– Utilisation en continu
– Résiste au forces mécaniques de dénaturation
par agitation

Sur support Réticulation
Cross-linking

• The degree of mass transfer control is
frequently expressed by the stationary
effectiveness factor η :
Where :
νimm. and νfree are the rates of the reaction catalyzed by immobilized
and free enzyme at the same condition of the active enzyme

Types de Réacteurs
• Batch
– No flow of material in or out of reactor
– Good mixing, constant volume
• Continuous
– Flow in and out of reactor
– Continuous Stirred Tank Reactor (CSTR)
– Plug Flow Reactor (PFR)

Les réacteurs sont classés selon :
• La forme, soluble ou immobilisée de l’enzyme
utilisé
• Le mode de fonctionnement du réacteur,
continu ou discontinu
• La géométrie du réacteur de type cuve (tank)
ou tubulaire
• Le comportement hydrodynamique des fluides.

Critères de chois du réacteur
• Il y a plusieurs facteurs importants qui déterminent le choix du
réacteur pour un processus particulier.
• En général, le choix dépend:
– Du coût d'une productivité prédéterminée selon les caractéristiques de

produit. (Ceci inclus les coûts liés au substrat(s), au traitement, au
développement de processus, en plus des coûts concernés par le
bâtiment et le fonctionnement du réacteur.
– L'enzyme (libre ou immobilisé),
– L'attention doit également être prêtée à la balance de l'opération

(contrôle du pH et de température, de l'approvisionnement et du
déplacement des gaz et de la stabilité de l'enzyme, du substrat et du
produit.

Les réacteurs agités à fonctionnement discontinu ou
Batch Stirred Tank Reactor (BSTR)

Avantages
• Leur simplicité de mise en service et le développement de

processus (Le substrat et l'enzyme sont mis en contact et
maintenus au pH et à la température désires. Pour cette raison ils
sont préférés pour la production de petite taille, particulièrement
où le même équipement doit être employé pour un certain nombre
de conversions différentes.
• Ils offrent un environnement étroitement contrôlable qui est utile

pour des réactions lentes, où la composition peut être exactement
surveillée, et des conditions (par exemple la température, pH,
concentrations de coenzyme) changent durant la réaction.
• Ils sont utiles également quand l'opération continue d'un processus

s'avère difficile due à la nature visqueuse du mélange de la réaction

Inconvénients
• La simplicité de ce système discontinu entraîne en

contrepartie de nombreux inconvénients :
– une consommation importante d'enzyme,
– d'énergie et
– de temps.
• Les frais d'exploitation des réacteurs batch sont plus

élevés que pour des processus continus dus à la nécessiter
que le réacteur soie vidés et rempli régulièrement.
• Ce procédé est non seulement cher mais signifie qu'il y a

des périodes considérables où de tels réacteurs ne sont
pas productifs.

Enzyme Batch Reactor
(constant volume, well mixed)
dS vmax S
vi = − =
dt K M + S
• integrate from t = 0 to t = t, we
obtain
vmax t=([S]o -[S])-Kmln (S/ S0)
avec X : le taux de conversion
La productivité est :
vmax t = [S]oX-Km ln(1- X)
Continuous Stirred Tank Reactor
Réacteur continu parfaitement agité (CSTR)

Enzymes CSTR
(Enzyme immobilisée)
Input - output + generation - consump = accumulation
dS
FS0 − FS − viV = v
dt
F – Débit
S – conc. substrat
V- volume réacteur
vi– vitesse de la réaction
À l’équilibre (Steady State) dS/dt = 0

CSTR - enzymes
viV = F(S0 - S)
or vi = F/V(S0 - S) = D(S0 - S)
• D= taux de dilution (hr-1)

• t = temps de résidence (hr)
si
vmax S
vi =
KM + S
Alors
vmax St
S = −KM +
S0 − S
Le taux de réaction dans un CSTR est obtenu par la formule suivante:
Par conséquent:
Par conséquent :

• Le temps de séjour est ζ = V/F, où
V est le volume de réacteur, et F est le débit;
• le temps de séjour c'est le temps relatif qui est

exigé pour un volume de réacteur pour passer
dans le réacteur).
• Le temps de demi vie de l’enzyme libre

Plug Flow Reactor (PFR)
Réacteur piston
• Tubular Reactor
• Pipe through which fluid flows and reacts.
• Poor mixing
• Difficult to control temperature variations.
• An advantage is the simplicity of construction.
Assumption of “good mixing” applies only to the small volume element
Vmax v/F = [S]oX-Km ln(1- X)= Vmax ζ

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Pr. CHEBLI Bouchra

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 1

• Le « génie enzymatique » est une branche de

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 2

• Production industrielle d’enzymes

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 3

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 4

Enzyme= catalyseur réagissant à faible T et permettant l’augmentation de la

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 6

ADC = arginine decarboxylase

Elle peuvent accélérer une réaction des milliards de milliards de fois

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 7

•Grace aux interaction avec les substrats (formes, géométrie, nature

•Elle peuvent discriminer des formes chimiques très proche, les

• Les enzymes peuvent avoir une très grande affinité pour le

•Grace aux nombreuses interactions que l'enzyme peut faire avec le

•Une enzyme peut être très efficace à de très faible concentration.

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 8

La partie non protéique s'appelle le cofacteur (nécessaire à la réaction enzymatique).

L'association de la partie protéique (apoenzyme) et de la partie non-protéique

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 9

Le cofacteur d’une enzyme est une molécule qui apporte

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 10

• Régiosélectivité ; ex : trypsine coupe après un acide

• Stéréosélectivité ; ex : L-amino-oxydase ou D-amino-

1) Oxydoréductase : assure une oxydoréduction

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 12

• Chaque enzyme est assignée un code à quatre chiffres par la

• Nom de l’enzyme (EC W.X.Y.Z)

• Ex. oxydase de glucose EC 1.1.3.4

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 13

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 14

Forme induite: l’enzyme change sa conformation lors

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 16

L'activité enzymatique d'une solution est le nombre de mole de

L'unité international (U.I)

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 18

• Les réactifs doivent atteindre un

• Même une réaction exergonique, où

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 19

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 20

• kcat est une constante de vitesse du premier ordre

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 25

La transformation en double-réciproque de Lineweaver et

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 26

Km et Vmax sont déterminés graphiquement on traçant la courbe vi en

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 27

Pour chaque réaction il y a une différence d'énergie libre et une barrière

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 28

Apparition du substrat au cours du temps

La vitesse peut être mesurée

[ES] [S]>>[E] [EP] [ES] [EP]

L'enzyme La vitesse Le produit qui s'accumule La concentration du

En enzymologie classique, on s'intéresse à la phase stationnaire (linéaire) en mesurant la vitesse initiale.

Leonor Michaelis et Maud Menten ont déduit de ce modèle en 1913 une

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 30

[ES] atteint rapidement une valeur constante (condition dite de "steady

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 31

On peut enfin introduire ce terme dans l'équation pour la vitesse initiale:

Equation de Michaelis-Menten Vi= Vmax [S]/ Km + [ S ]

Réacteurs Enzymatiques CHEBLI 32

1. Extreme Temperature are the most

2. pH (most like 6 - 8 pH near neutral)