0 Elsevier, Paris

Composition de phosphates de calcium carbonat& Ann. Chim. Sci. Mat, 2000,25, pp. 339-348

INFLUENCE DU StiCHAGE SUR LA COMPOSITION DE PHOSPHATES DE CALCIUM

CARBONATh, ANALOGUES OSSEUX

F. DABBARH”, A. LEBUGLEb, A. TAITAI’, M. BENNANI”

a Laboratoire de Physico-Chimie des Matkiaux, Faculth des Sciences, BP133, KC&a, Maroc.
b Laboratoire des Matkiaux. Equipe sur les Phosphates. ENSCT-CNRS UPRESA 5071, 38 rue des 36ponts, Toulouse,
France.

Abstract- Influence of drying on the composition of bone-like carbonated calcium phosphates.

Carbonated calcium phosphates were prepared at 37°C by coprecipitation, in partially aqueous
medium (lowered dielectric constant). Then they were either freeze dried, or oven dried at 40, 60 or
8O’C. The study of these samples by XR diffraction and IR spectroscopy showed that their
crystallisation into apatite depends both on their composition, and on their drying temperature.
Crystallisation decreases when the drying temperature decreases or carbonate content increases in
these compounds and the samples finally become amorphous. In addition, chemical analysis
showed that their carbonate content, expressed by the CO3/POd atomic ratio, decreased when the
drying temperature was raised. The decrease was due to reaction of CO3 ions with HP04 during
drying. Although this reaction has already been observed near ZOO-500°C in apatites, it is the first
time that it was noted at temperatures as low as 40°C. Apatites obtained in that way present a
potential for use as bone substitutes, due to their analogy with bone. Nevertheless before any
applications can be done, their synthesis must be fully controlled especially during drying, in order
to get materials of well defined composition.

RCsumC- Des Cchantillons de phosphate de calcium carbonat& ont CtC prkparks g 37’C, par
coprkcipitation, en milieu partiellement aqueux (constante diklectrique rkduite), puis sCchBs par
lyophilisation ou & 1’Ctuve Q 40, 60 ou 80°C. L’ktude de ces Cchantillons par diffraction des rayons
X et par spectroscopic IR montre que leur cristallisation en apatite dkpend d’une part de leur
composition, et d’autre part de la tempkrature g laquelle ils ont Ctt sCchCs. L’ktat de cristallisation se
dkgrade lorsque la tempkrature de skchage diminue, ou lorsque la teneur en carbonate dans ces
composks augmente: les composCs sont alors amorphes. Par ailleurs, l’analyse chimique rkvble que
leur taux de carbonatation, exprimC par le rapport atomique COJPO+ diminue quand la te2epCrature
de skchage croit. Cette diminution est due g la &action des ions CO3 avec les ions HP04 au tours
du skchage. Bien que cette r&action ait CtC mise en Cvidence vers 300-400°C dans des apatites, c’est
la premi&e fois qu’elle est observke ii des tempkratures aussi basses que 40°C. L’utilisation
potentielle des apatites obtenues au tours de cette Ctude comme substituts osseux en raison de leur

Tirks g Dart : A. LEBUGLE ENSCT-38, rue des 36 ponts 3 1400 Toulouse France: lebugle@cict.fr.
340 F. Dabbarh et al.

analogie avec 1’0s necessiteden contrbler parfaitement la synthbse,notamment au niveau du

sechageafin de disposerde materiaux de compositionbien detinie.

1. INTRODUCTION

La partie minerale des tissus calcifies est constituee par une apatite phosphocalcique
carbonateequi a la particularite de presentersimultanementdes ions HP042wet COs*- [l-2]. Bien
que la synthesedes apatitesuniquementcarbonateessoit bien connue [3-61, peu de mtthodes ont
permisde preparerde telles apatites.Parmi elles, la syntheseen milieu hydro-alcoolique a conduit a
toute une famille d’apatites pour laquelle il est possiblede faire varier de faGon competitive, la
teneur relative en ions hydrogenophosphateet carbonate[3]. Le milieu de syntheseutilise presente
une constantedielectrique plus faible que celle de l’eau. Les apatitesprepareesdansce milieu de
synthbse,presententune reactivite thermiqueanaloguea la partie mineralede 1’0s:ellesperdent les
ions carbonateen deux &tapes,l’unea bassetemperaturepar reaction avecdes ions HPOh*-,I’autrea
haute temperature par reaction avec des ions pyrophosphate [7-81. Ces apatites presententune
composition chimique comparablea celle de 1’0s.De ce fait ces composesrev&tent une grande
importance car ils sont susceptiblesd’&tre utilises comme biomateriaux de substitution osseuse.
Leur preparation s’effectuepar double decompositiond’un se1de calcium avec un phosphateou un
carbonated’ammonium.11se forme descoprecipitesgtlatineux qui ont ensuiteCtCsechesa 80°C.
On peut se demandersi leur composition, notamment leur teneur en carbonate,n’evolue pas au
tours du sechage.I1 est important en effet de pouvoir preparer de faqon reproductible, des
biomateriaux qui aient strictement la mCme composition, car on sait que cette demibre va
conditionner le comportementbiologique, notammentla biocompatibilite, l’osteoconductiviteet la
biodegradabilite.
De ce fait, nous avons CtudiCl’influence de la methodede sechagedes coprecipitessur leur
composition et leur structure. Dans ce but, descoprecipitesde carbonateet phosphatede calcium
ont CtCpreparesen milieu eau-ethanolet ils ont CtCsechessoit par lyophilisation, soit a l’etuve a 40,
60 ou 80°C pendant 18 h. Leur composition chimique, et leur nature cristallographiqueont ete
etablies.Nous rapportonsici le resultatde cette etude.

2. EXPERIMENTAL

Les Cchantillonsont itte preparesselon la methode decrite precedemment[3]. Rappelons

brievement qu’elle consisteBajouter rapidementa 37°C une solution A contenantdesions calcium,
dansune solution B contenant desions phosphateet carbonate.La solution A est constitueede 30
millimoles de nitrate de calcium, 100ml d’eauet 100ml d’ethanol.La solution B est constitute de
30 millimoles au total de phosphatebiammoniacalet de carbonated’ammonium,de 250 ml d’eau.
20 ml dune solution d’ammoniacet 295 ml d’ethanol.Le rapport molaire RL = CO3/(COj+ Pod) a
Ctechoisi tgal a 20%, 30% et 40%, car il permet l’obtention desapatitescontenanta la fois desions
HPOd*- et C03*-. Les coprecipites obtenus ont CtC&parts de la solution mere par filtration sur
bikhner, puis la&s avec 400 ml d’un melangeethanol-eaudesionisee.Ils ont ensuiteCtCgardestels
quels a (-20°C) pour empechertoute evolution, ou sCchCs par lyophilisation, ou encore sechesg
l’etuve pendant 18 h , a 40°C 60°C ou encore 80°C. 11sont alors Cteetudiespar analysechimique
(dosagedu calcium par complexometrie en retour (precision de 0,5%) [9], du phosphorepar
colorimetrie a l’aide du complexe phosphomolybdique(precisionde 0,5%) [IO]. des ions carbonate
par coulometrie (precision de 2%) Les diagrammesde diffraction des rayons X ont ete realisesB
l’aide d’un diffractometre Inel (CPS 120) Cquiped’uneanticathodeau Co (h= 1,78892A ). La taille
apparentedes cristallites a CtCdeterminCepar la formule de Scherrer B partir de la largeur B mi-
Composition de phosphates de calcium carbonat& 341

hauteur des raies de diffraction d’indices(002) et (310). L’analyseinfiarouge a et& effect&e dans
l’intervalle 400-4000 cm-’ grace a un spectrometrePerkin-Elmer FTIR 1600, sur des pastilles
contenant1 mg d’echantillondispersedans300 mg de KBr.

3 . RFBULTATS

3.1 Analvse chimioue

Les resultats de l’analyse chimique des tchantillons prepares aux differentes teneurs en
carbonateen solution (rapport RL), sontpresent& dansle tableau Z.

Tableau I. Resultatsde l’analysechimiquedescoprecipitb

gel 0,042 0,030 0,002 1,40 0,066

lyophilise 0,781 0,557 0,033 1,40 0,059
20% Btuve40°C 0,763 0,545 0,019 1,40 0,035
Ctuve 60°C 0,825 0,586 0,015 1,41 0,026
Ctuve80°C 0,830 0,592 0,015 I,40 0,025
gel 0,0595 0,040 0,005 1,49 0,125
lyophilise 0,754 0,509 0,062 1,48 0,122
30% Ctuve40°C 0,797 0,535 0,035 1,49 0,065
Ctuve60°C 0,984 0,665 0,027 1,48 0,040
ttuve 80°C 0,851 0,575 0,021 1,48 0,037
gel 0,060 0,036 0,009 1,67 0,246
lyophilise 0,800 0,480 0,109 167 0,227
40% Ctuve40°C 0,732 0,438 0,094 1,67 0,215
&we 60°C 0,802 0,480 0,084 1,67 0,174
Ctuve 80°C 0,865 0,518 * 0,082 1,67 0,160

A partir de cesanalyses,les rapportsWP, CO$PO4dartsles Cchantillonsont CtCcalculeset

sont consign&sdansle tableau I. On constatequ’aun rapport RL domre,le rapport CaZPne depend
Cvidemmentpas de la temperature de sechage.11augmente avec le rapport RL. La teneur en
carbonatedartsles solides,exprimte par le rapport CO#OJ augmenteavec la teneur en carbonate
en solution (RL). &pendant il apparait qu’elle decroit trbs nettement lorsque la temperaturede
sechageaugmente: il intervient une decarbonatationdes Cchantillons. Par contre, ce rapport
COs/P04varie assezpeu entre un Cchantillongel et un tchantillon lyophilist. Cesvariations seront
examineesplus en detail dansla partie Discussion-Interpretation.
342 F. Dabbarh et al.

3.2. Analvse par diffraction des ravens X

Les diagrammes de diffractions des rayons X des echantillons seches par lyophilisation ou B
l’ttuve aux differentes temperatures (40, 60 et SOT) ont CtC realises.
Les Cchantillons lyophilises presentent des diagrammes semblables. On observe, quelle que
soit la valeur du rapport RI,, un halo dont le maximum est situ? a 20=35”. I1 s’agit de composes
amorphes.
Les Cchantillons seches a l’etuve sont, soit amorphes, soit cristallises, suivant la valeur du
rapport Rt. et de la temperature de sechage. Ainsi, a 40°C l’echantillon de rapport Rr.=40% est
amorphe tandis que ceux contenant moins de carbonate (Rr =20% et 30%) correspondent a une
apatite ma1 cristallisee crigure I). On distingue la raie (002) et l’enveloppe des raies (21 l), (112),
(300), qui se superposent au halo de la phase amorphe. Par ailleurs, quelle que soit la valeur du
rapport RL, Mat de cristallisation des Cchantillons s’ameliore quand la temperature croit. Ainsi, les
gels seches a 60°C sont relativement mieux cristallisCs que ceux obtenus a 40°C. Cet &tat de
cristallisation s’ameliore encore pour ceux seches a 80°C comme on peut ie constater par exemple
sur lafigure 2 (Rr=30%). Les observations faites par diffraction des rayons X sont regroupees dans
le tableau II.

Tableau II. Phases observees dans les Cchantillons selon la composition des solutions, et les
conditions de sechages

RL
TV 20% 30% 40%
80 AP AP Ap m.c.
60 AP Ap m.c. Ap m.c.
40 Ap.mc + am Ap.mc + am am
lyophilisk am am am
Ap:apatitique, am: amorphe, m.c.: ma1 cristallisb

A partir de la largeur a mi-hauteur des raies d’indices (002) et (310), il a ete possible de
determiner la taille des cristallites en utilisant la formule de Scherrer. Les dimensions des cristallites
dans les directions perpendiculaires aux plans (002) ou (3 10) sont repartees dans le tableau II/.

Tableau III. Dimensions des cristallites dans les directions [002] et [310] (en A)

***:amorphe.
 343
Composition de phosphates de calcium carbonates

I
t
5.00 20.00 26.00 30.00 35.00 40.00 49.00 50.00 55.00 60.00 65
2*th&ta

Figure 1. Diagrammes de diffraction des rayons X des diffkrents Bchantillons sCchb A 40°C

112

s&h6 j, 80°C

s&h6 P 40°C

lyophilisb

I
t
1s.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 56.00 60.00 65.00
2*theta

Figure 2. Diagrammes de diffraction des rayons X des Mmntillons de RL Cgale 8 30% sBchCs dam
diffkrentes conditions
344 F. Dabbarh et al.

Figure 3. SpectresIR desdiffkrents Cchantillonsde RI=30% sCchCs

Adiffkrentes tempkratures

Figure 4. SpectreslR desCchantillonssCchCs

B40°C prksentantdiffirents rapportsRI
Composition de phosphates de calcium carbonates 345

A un rapport RL donnk, les dimensionsdes cristallites dansles directions perpendiculaires

aux plans(002) et (310) augmententlorsquela tempkraturede skchagecroit de 40°C & 80°C. A une
tempkraturedorm&e,elle diminue quandRL cro?t.11apparaitdanstous les casque la croissancedes
cristallites est beaucoup plus dCveloppCedans la direction de l’axe c que dans une direction
perpendiculaire.

3.3. Analvse par spectroscopicd’absorptionintiarouge

Lesobservationsfaites par spectroscopicd’absorptioninfiarouge sent en accord aveccelles

faitespar diffraction desrayonsX.
Dansle casdesCchantillonslyophilik, les spectresIR sont cornparables.On distinguedans
tous les cas,des bandeslarges?I 1036et 550 cm-’ qui sont caract&istiquesdesgroupementsPOd3-
dansun environnementnon organisk[ 1l] (&w-e 3). Par ailleurs, on observeune bandea 868 cm-’
et deux bandessymktriquesde mCmeintensitk k 1420et 1490cm-’ qui peuvent Ctreassocitesk des
groupementscarbonatedansune structure amorphe[12]. L’intensitt?de cesbandesaugmenteavec
RL.
Dans le cas des Bchantillons s&h&s g 8O”C, les spectresd’adsorption infrarouge sont
similaires g ceux d’un phosphatede calcium carbonat& de structure apatitique &we 3). On
observedes bandesphosphate.g 571, 601, 962, 1040, 1087 cm-‘, propres aux groupementsPOa3‘
dansun environnement apatitique [13]. On note Cgalementla prksencede bandesg 1415, 1450,
1470cm-l associkesaux groupementscarbonateapatitique de type B, et celle d’unebandede faible
intens& vers 1545 cm-’ due aux ions carbonatede type A. [ 14-161.On constatela prksenced’une
bandevers 875 cm“ qui peut Ctreattribute &desions HP0d3-ouCO3’-. Aux faiblesteneurs en C032-
apparaitun kpaulementB 534 cm-’ attribuable aux ions HPO4’-[17], ainsi que desCpaulementsB
&30 et 3560 cm-’ correspondantaux ions OH- dans une apatite [18]. 11sdisparaissentaux fortes
teneursen C032-, (RL=0,4). Toutes les bandesqui viennent d’Ctred&rites, s’tlargissentlorsqueRL
augmente.
Les spectresdes coprki it&s s&h& g 60°C ou k 40°C sont cornparables.L’intensitt des
bandesattribubesaux ions CO3t augmentelorsque la tempkraturediminue, ou bien Cvidemment
quandle rapport RL croit Q&we 4). Cependantun abaissementde la tempkraturede skchageou une
augmentationdu rapport RL entrainent tous deux le msmeeffet: les bandessent de plus en plus
larges.A 4O”C, lorsqueRL est Cgal2 0,4, le spectreIR correspondg celui d’un phosphatede calcium
carbonat&amorphe,comparable?Iceux obtenusavec les Cchantillonslyophilisks.

4. DISCUSSION-INTERPRETATION

Les etudespar diffraction desrayons X et par spectroscopicIR ont montrCque la nature des
coprkipitks de phosphatede calcium-carbonatede calcium dkpend g la fois de la tempkraturede
skchageet de leur teneur en carbonate.Leur cristallisationen apatiteest d’autantmeilleureque cette
tempkature est plus ClevCeet que la teneuren carbonateestplus faible. A l’oppost, lesCchantillons
prkparksavec un rapport RL Clew?,et sCchCg bassetempkrature(40°C) sent amorphes.On retrouve
bien l’effet dkfavorable desionscarbonatesur la cristallisationdesapatites[3].
Cependant, cette Ctude montre surtout que la teneur en carbonate dans les Cchantillons
dependde la temperatureg laquelleils ont BtCskchts. Afin de pouvoir comparerde faqon plus aiske
les rksultats de l’analyse chimique, en s’aftianchissant des quantitks d’eau rksiduelles trks
diffkrentes, duesg l’absenceou g des skchageseffectuks Bdestempkraturesvarikes, la composition
descoprkcipitb a CtCexprimBe par rapport k 1 groupementPOd3-,a partir desvaleurs cons&&es
dansle tableau IV. Le respectde la rkgle de Mectroneutralitk conduit Bintroduire desions HP0d2-.
346 F. Dabbarh et al.

Cependantla teneur reelle de ces ions peut Ctre superieureen raison de l’hydrolyse intracristalline
&ions POd3-en ions HP04*- et OH- [18]. 11a CtCmontre dans une etude anterieure que cette
hydrolyse est trbs faible dansle casd’apatitescarbonateesprepartesdanscesconditions[3,7]. A des
temperatures de sechage plus basses,le taux d’hydrolyse sera encore plus faible et m&me
negligeable,car ce phenomeneestactive thermiquement[ 181.

Tableau IV. Compositionchimiquedesdifferents echantillons

Ce tableau montre tout d’abord qu’a une temperaturedomreeles Cchantillonscontiennent

davantage de carbonate et moins d’ions HP04’- lorsque RL augmente.11permet de constater en
outre que pour un rapport RL don&, la teneur en ions C03*-diminue avec la temperature: il
intervient une decarbonatationau tours du sechage.Deux reactionspourraient permettrede rendre
comptede ce phenomene[ 19,20]:

C032‘ + HZ0 + co* + 2 OH‘ (1)

co32- + 2 HP04*- ----+ CO2 + 2 POd3- + H20 (2)

La reaction (1) a lieu a haute temperaturedans les apatites carbonateesde type B. La

reaction (2), suggereepar Greenfield, a lieu a plus bassetemperature,entre 200 et 5OO”C,dansles
apatitescontenantsimultanementdesions C032-et HP04“ commeFont montreBennani et col. [7].
I1 est possiblede choisir entre ces deux hypothesesen calculant a partir du Tableau IV, la p&e
relative en carbonateentre un Cchantillonlyophilise et un Cchantillonsechea 80”, 60 ou 4O”C, a
differentes valeurs de RL. Cesvaleurs sont consigneesdansle tableau V, ainsi que celle du rapport
Composition de phosphates de calcium carbonat& 347

HP04/COs dans les echantillons lyophilises. La variation de la perte relative en carbonate est
representeeen fonction de RLdanslafigure 5.

Tableau V . Valeur du rapport (HPOJCO& desproduits lyophiliseset perte relative en carbonate

entre un Cchantillonlyophilist et s&he k l’etuve

Perte relative en carbonate

80%
-+- c%uve 40°C
. Btuve 60°C
60% . &uue 80°C

4
091 072 093 094 0,5 RL
Figure 5. Variation de la perte en carbonatedans les differents Cchantillonsen fonction de la
temperaturede sechage

Ce tableaupermet de constaterque la perte relative est la plus importante, non pasavec les
Cchantillons les plus riches en carbonate (R~=40%), ni avec ceux les plus riches en HP0d2-
(R~=20%), mais avec ceux qui contiennent simultanementdes ions HPOd*-etCO3*-.On remarque
que ce rapport corresponda celui dorm6par le schemareactionnel (2), c.A.d. pour les Cchantillons
avec RL Cgalg 30%. On peut done en conclure que la decarbonatationne seproduit pas selon la
reaction (I), mais selon la reaction (2). I1 est remarquableque cette reaction intervienne a des
temperaturesaussibassesque 40°C. 11faut noter cependantque la reaction nest pas totale car ces
deux types d’ions subsistentdans les Cchantillonspour RL Cgal a 20% ou 30%, apressdchagea
80°C. Cette observationpeut s’interpreteren considerantque la reaction necessitela presenced’eau
pour avoir lieu, et qu’elle s’arrete dbs qu’il n’y en a plus sufIisamment. Par ailleurs, le taux de
decarbonatationaugmenteavec la temperaturea laquellele sechageest conduit: la reaction entre les
ions CO,*- et HP0d2- apparait done &tre thermiquementactivee. Le fait que les echantillonsSOUS
forme de gels, ou sechespar lyophilisation, aient sensiblementle memerapport CO$PO4, signifie
que cette reaction n’a pas eu lieu au tours du sechage,trbs certainementen raisonde la temperature
tres basse21laquelleestconduite la lyophilisation.
Cette etude montre que la composition des apatites contenant simultanementdes ions
HP04*‘ et CO3*-,dependdtroitement de la methodede sechageemployee.11est donenecessairede
348 F. Dabbarh et al.

contraler rigoureusement ce paramktre afin de disposer de composCs utilisables comme substituts

osseux prksentant des prop&& biologiques parfaitement dCfmies.

5. BLBLIOGRAPHIE

[II R. Legros, N. Balmain, G. Bonel, Structure and Composition of Mineral Phase of Periosteal Bone, J.
Chem. Res. synop. 1, (1986) 8-9,
PI R. Legros, N. Balmam, G. Bone], Age related changes in mineral of rat and bovme cortical bone.
Calcif. Tissue Int. 41 (1987) 137-144,
[31 M. Bennani, A. Lebugle, G. Bonel, Contribution B l’etude des apatites carbonattes deficientes en ions
calcium: i- Synthtse et ttude des coprCcipites de phosphate-de calcium-carbonate de calcium apr&s
sCchage, Ann. Chim. Fr., 16 (199 1) 607-6 17.
t41 R. Legeros, 0. Trauz, J. Legeros, E. Klein, Carbonate substitution in the apatite structure, Bull. Sot.
Chim. Fr. (1968) 1712-1718.
PI R. Legeros, 0. Trauz, J. Legeros, E. Klein, Spectral proprieties of carbonate in carbonate-containing
apatltes, Dev. Appl. Spectrosc. 7B (1970) 3-12.
[61 JC. Labarthe, G. Bonel, G. Montel, Localisation of carbonate ions m apatite latices, Ann. Chim. 4
(1973) 523-527.
[71 M. Bennani, A. Lebugle, G. Bonel, Contribution g 1’Ctude des apatites carbonatees dtficientes en ions
calcium: II-Dtcomposition thermique des copr&ipitCs de phosphate de calcium-carbonate de calcium
de structure apatitique, Ann. Chim. Fr, 18 (1993) 245-256.
PI R. Legros, C. Godinot, L. Ton-es, G. Bonel, Sur la stabilitt thermique des apatites carbonatkes des
tissus osseux, J. Biol. Buccale, 10 (1982) 3-9.
[91 G. Charlot, Les mkthodes de la chimie analytique; analyse quantitative et minerale, gena tdition,
Masson, Paris, (1966).
PO1 A.Gee, V.R. Deitz, Determination of phosphate by differential spectrophotometry., Anal. Chem. 25
(1953) 1320-1324.
[Ill A.Gee, V.R. Deitz, Pyrophosphate formation upon ignition of prkcipitated basic calcium phosphate, J.
Am. Chem. Sot. 77 (1955) 2961-2965.
WI G. Bonel, Contribution g I’Ctude de la carbonatation des apatites, Th&se de Doctorat d’Etat, Universite
Paul Sabatier, Toulouse, (1970).
[I31 S. Gadelta, E. Paschalis, R. Mendelsohn, A. Boskey, Fourrier transform infrared spectroscopy of the
solution-medlated conversion of amourphous calcium phosphate to hydroxyapatite: new correlation
between x-ray diffraction and infrared data, Calcif. Tissue Int. 58 (1996) 9-16.
[I43 C. Rey, B. Collins, T. Goehl, R. Dlckson, and M. Glimcher, The carbonate environement in bone
mineral, a resolution-enhanced fourrier transform infrared spectroscopic study. Calclf. Tissue Int., 45
(1989) 157-164.
[I51 J. Elliott, D. Holcomb, R. Young, Infrared determination of the degree of substitution of hydroxyl by
carbonate ions in human dental enamel. Calcif.. Tissue Int. 37 (1985) 372-375.
1161 M. Vignoles, G. Bonel, D. Holcomb, R. Young, Influence of preparation conditions on the
compositlon of type B-carbonated hydroxyapatite and on the localisation of carbonate ions. Calcif.
Tissue Int. 43 (1988) 33-40.
[I71 D. Nelson, J. Fertherstone, Preparation, analysis and characterisation of carbonated apatite. Calcif.
Tissue Int. 34 (1982) S69-S81.
[I81 S. Shimoda, T. Aoba, E. Moreno, and Y. Miake, Effect of solution composition on morphological and
structural features of carbonated calcium apatites. J. Dent. Res.,69 (11) (1990) 173 l-1740.
[I91 J.C. Heughebaert, Contribution g l’etude de l’evolution des orthophosphates de calcium prCcipitCs
amorphes en orthophosphates apatitiques. These de Doctorat d’Etat, INPT Toulouse (1977).
WI D. Greenfield, J. Ten-nine, E. Eanes, Chemical study of apatite prepared by hydrolysis of amorphous
calcium phosphates in carbonate-containing aqueous solutions, Calcif. Tissue. Res. 14 (1974) 131-
138.

(Article requ le I8/06/99, SOLIS forme dtfinitive le 18/I li99)