STEVIA NATURA SAS

VetAgo Sup
6 Novembre 2013

1
INNOVATION ET REGLEMENTATION

Ou comment la réglementation peut influer

sur l’innovation et le développement
d’activités économiques

2
 L’IDÉE ET LE PROJET
 Mettre à disposition des consommateurs un
édulcorant d’origine naturelle issu d’une plante
d’origine Sud Américaine :

La stevia rebaudiana

3
La stevia : Une Plante native
d ’Amérique du Sud

PARAGUAY : Districts
d’ AMAMBAY et d’IGUACU

4
Connue et utilisée depuis des siècles
par les Indiens GUARANI

Une Plante édulcorante et médicinale pour

ces populations qui l’utilisent dans l’alimentation
et comme « médecine ». C’est l’Herbe Sucrée
du Paraguay ou Ka’a Hé’e
5
 L’histoire

 Découverte pour la première fois par les

conquistadores au XVIème siècle

 C’est en 1899 que le botaniste Italo-

Suisse Moises S BERTONI en décrit les
caractéristiques botaniques

6
 Botanique

 Famille de Asteraecées
 Genre Stevia
 Plus de 200 espèces différentes
 Une seule avec un goût sucré prononcé :
stevia rebaudiana Bertoni
 Synonyme : Eupatorium rebaudiana
 Ce sont les feuilles qui contiennent le
principe sucrant de la plante

7
 La culture

 Une herbacée sauvage pérenne qui pousse

habituellement dans les zones tropicales
 Aujourd’hui cultivée industriellement
dans de nombreuses régions du monde :
 Amérique du Sud, Chine, Asie du Sud Est,
Inde, Moyen-Orient, Australie et même au
Canada et en Europe

8
DE LA SEMENCE À UN ÉDULCORANT 100% NATUREL

9
 Les steviol glycosides

 Cristallisés pour la première fois en 1931 par des

chimistes français : Bridel et Lavielle
 Ce sont des di terpènes glycosylés organisés
autour d’un noyau aglycone : le steviol

10
 La Biosynthèse

 Voie de biosynthèse des Gibbérellines

11
 LES STEVIOL GLYCOSIDES

 Une famille de molécules organisée autour du

noyau steviol
OR2
CH3 CH2

R1OOC CH3

12
 PLUSIEURS STEVIOL
GLYCOSIDES DIFFÉRENTS

Nom du composé R1 R2

Stéviol H H

Stevioside -b-glucose -b-glucose-b-glucose (2-1)

Stéviolbioside H -b-glucose-b-glucose (2-1)

-b-glucose-b-glucose (2-1)
Rebaudioside A -b-glucose
 b-glucose (3-1)

-b-glucose-b-glucose (2-1)
Rebaudioside B H
 b-glucose (3-1)

-b-glucose-b-rhamnose (2-1)
Rebaudioside C = Dulcoside B -b-glucose
 b-glucose-b-rhamnose (3-1)

-b-glucose-b-glucose (2-1)
Rebaudioside D -b-glucose-b-glucose (2-1)
 b-glucose (3-1)

Rebaudioside E -b-glucose-b-glucose (2-1) -b-glucose-b-glucose (2-1)

Dulcoside A -b-glucose -b-glucose-b-rhamnose (2-1)

13
 STEVIOSIDE ET REBAUDIOSIDE A

CH20H
CH20H
CH20H
HO
HO
HO
O
HO
HO HO
O
O CH20H
O
CH20H
O
HO
HO
HO HO
HO CH3 CH2
HO
CH3 CH2

H
H

H3C H
H3C CO
H CH20H
CO
CH20H
O
O HO
HO
HO
HO
HO
HO

Stevioside Rebaudioside A

14
 L’OPPORTUNITE

 Des molécules à fort pouvoir sucrant :

 Feuilles de 15 à 30 fois le pouvoir sucrant du

saccharose
 Steviol glycosides de 200 à 400 fois le pouvoir
sucrant du saccharose
 Sans calories avec un index glycémique nul

15
 L’OPPORTUNITE

 Un produit sucrant sans calories

un édulcorant naturel
 Dans le sens de l’évolution de la consomation :
 Des produits allégés en sucre (carbohydrates) pour
lutter contre le surpoids et l’obésité
 Des produits naturels
 Écologiques au bilan carbone positif
 Développement durable (agriculture)

16
 STEVIA NATURA

 Un peu d’Histoire :
 Premier intérêt pour la stevia en 1992
 Mais : interdiction de la plante et de ses dérivés à cet
époque aux USA puis en Europe et en France
 Premier avis positif du JECFA en 2004 : les steviol
glycosides ne présentent pas de risque pour la santé
humaine en tant qu’édulcorant

Démarrage du projet

17
 STEVIA NATURA

 Juillet 2004 – Décembre 2005 :

 Préparation du projet :
 Etude du marché
 Etudes techniques produits
 Etudes bibliographiques
 Janvier 2006 :
 Création de l’Entreprise
 Juin 2006 :
 Dépôt du dossier de demande de mise sur le marché

18
 LE MARCHÉ DE LA STEVIA

 Au début 2006 :

 La stevia et ses dérivés sont autorisés au Japon

depuis les années 1970.
 Les steviol glycosides représentent 40% du marché
des édulcorants intenses dans ce pays

19
 LE MARCHÉ DE LA STEVIA

 L’évolution du Marché mondial :

 en 2006 : 2000 Tonnes/an environ 15 M$

 80% de la production vient de Chine
 Projections selon Freedonia :
 Croissance 4% /an et 1 Md$ dont 30 % pour les steviol
glycosides
 Soit 10 000 tonnes d’objectif à 5, 10 ans

20
 Le Marché : Applications
• Feuilles fraîches thés, tisanes, cuisine
• Feuilles séchées thés, tisanes, cuisine
• Poudre de feuilles thés, cuisine, salades, fruits
• Extrait liquide brun thés, édulcorant, boissons
• Extrait liquide clair édulcorant, food, cuisine
• Steviol glycosides purifiés édulcorant, food, cuisine
• Mélanges Steviol glycosides :édulcorant, cuisine, table top
– Maltodextrines ingrédients
– Lactose
– FOS Fructo oligosaccharides
– Dextrose

21
Des produits existants

22
 LE MARCHÉ DE LA STEVIA

 La situation réglementaire a freiné l’utilisation de

la stevia dans le monde :

 Aux USA
 En Europe
 En France
 Dans de nombreux pays qui suivent la réglementation
des pays ci-dessus

23
 LA RÉGLEMENTATION

 Internationale :
 JECFA (OMS, FAO) :
 Avis positif provisoire : 2004, puis 2007
 Avis favorable définitf avec DJA 2008 (juin)
 Interdiction “partielle” aux USA depuis les années 1990
(DHSEA 1995 comme complément diététique)
 Interdiction dans l’Union Européenne et en France depuis
1999 et 2000
 Autorisation en Asie (Chine, Japon…)
 Certains pays s’alignent sur le JECFA…

24
 LA RÉGLEMENTATION

 La démarche de notre société :

 Demande de mise sur le marché dans la procédure
nationale
 Ne pas choisir l’Union Européenne et la procédure
Novel Foods pour éviter le lobbying : (fabricants
d’édulcorants, sucriers…)
 Choix tactique

25
 LA RÉGLEMENTATION

 La procédure Nationale : (à l’époque)

Application D.G.C.C.R.F. A.F.S.S.A.
Petitioners

Additional
Information
Information Negative
request Advice STOP

Positive
Advice

Proposed
D.G.C.C.R.F.
A.F.S.S.A. Legal Text

NO
FinalLegal
Text

YES

Ministry of
Ministry of Ministry of
Agriculture
Economy Health

Steviol glycosides as food additive

26
 LA RÉGLEMENTATION

 Les difficultés :
 Le principe de précaution
 Le lobbying pour retarder les échéances
 Autres ??
 Un long chemin :
 Dossier déposé en juin 2006
 Autorisation “partielle” en septembre 2009

27
 LA RÉGLEMENTATION

 Pourquoi finit-on par y arriver ?

 Il faut tenir et pour cela faire un peu de business !
 Export
 Internet
 L’environnement aide :
 Décision en 2007 de grandes multinationales de se lancer
sur ce marché (Cargill, Coca-Cola, Pepsico, Merisant…)
 Autorisation en Suisse et en Océanie (Australie, NZ..) fin
2008

28
 LA RÉGLEMENTATION

 A ce jour :
 En France : autorisation pour le rebaudioside A en tant
qu’additif alimentaire (E 960) entre septembre 2009 et
décembre 2011
 Aux USA : plusieurs produits ont obtenu le statut GRAS : les
steviol glycosides totaux, le rebaudioside A
 En Europe : l’EFSA a donné un avis positif pour les steviol
glycosides totaux (95% de pureté)en avril 2010.La directive
1333 et son annexe ont été publiés le 11 novembre 2011 pour
une mise en application au sein de l’UE le 2 décembre 2011.

29
 UNE RÉGLEMENTATION “COMPLEXE”

 Au niveau mondial une réglementation

“étrange” :
 Asie : pas de recommendation particulière de la
poudre de feuille au RebA purifié
 OMS : steviol glycosides totaux 95% de pureté
 Australie, Suisse : STG 95%
 USA : GRAS selon les cas
 France seul le RebA était autorisédécembre 2011
 Europe : les steviol glycosides totaux à 95% de pureté

30
 LE CAS DE L’EUROPE

 La plante est considérée comme Novel Food : on

ne peut pas utiliser la feuille ou la poudre de
feuille (France compris), mais on peut acheter
des plantes ou des graines dans le commerce.

31
 LE CAS DE L’EUROPE

 Néanmoins certains pays comme l’Allemagne

commercialisent des produits issus de feuilles de
stevia :

32
 LE CAS DE L’EUROPE

 L’Allemagne (et l’EUSTAS) contestent le

classement de la Stevia comme « Novel Food »
 Les tribunaux ont, « pour l’instant » donné raison
à cette société Allemande
 La libre circulation des marchandises au sein de
l’UE devrait permettre de commercialiser ces
produits en France (et partout en UE) ??
 ???

33
 STEVIA NATURA

 Pour que l’entreprise se développe:

 Développement des procédés et des produits
 Recherche d’investisseurs
 Poursuite de la “lutte” réglementaire
 Etudes scientifiques, collecte d’informations
 Aide de l’EUSTAS
 Intervention des politiques
 Développement des marchés :
 Travail avec les prospects

34
 DÉVELOPPER LES PROCÉDES

• Infusion dans l’eau

• Précipitation clarification
• Purification sur résine d’adsorption
• Atomisation

• Plus : purification spécifique par cristallisation

fractionnée dans l’éthanol : Rebaudioside A
• Développement des technologies par filtration (BIO ?)

35
 Développer les méthodes
Préparation purifiée analysée par HPLC (Méthode
officielle)
Stevioside
Steviolbioside Rebaudioside A
Dulcoside Rebaudioside C
DA D1 A , Sig=205,4 Ref =550,100 (STEV 2009\STEV0003.D)

9.019
mA U
300

250

200

150

15.202
100
11.162

50
4.500

6.548

2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 22.5 min

36
 DÉVELOPPER LES MÉTHODES

 Analytique, Contrôle Qualité

DA D1 A, S ig=205,4 Ref=550,100 (STE V0301\S TE V0005.D)

9.573
mAU

350

300

250

200

Steviol glycosides
150

15.996
100

11.808
50
4.915

6.975

2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 22.5 min

DA D1 A , S ig=205,4 Ref=550,100 (S TE V3101\S TE V0002.D)

15 .446
m AU

350

300

250

Rebaudioside A 200

150

100

50
7.622

2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 22.5 m in

37
 DÉVELOPPER DES PRODUITS

 Industriels :
 Poudres de Steviol Glycosides
 STG 80%, STG 95%, RebA 80%, Reb A 98%
 Sirops de Steviol Glycosides
 De 20 à 50 % de matière sèche, dans l’eau ou dans
l’eau/éthanol
 Grand Public :
 Poudres édulcorantes, Sucrettes, Liquides à la marque
STEVIA NATURA ®

38
 DES PRODUITS INDUSTRIELS

 Pour :

 L’Agro alimentaire
 L’alimentation animale
 La cosmétique
 La parapharmacie
 La pharmacie
 …

39
DES PRODUITS GRAND PUBLIC

40
DES PRODUITS GRAND PUBLIC

41
 RECHERCHER DES INVESTISSEURS

 Toujours en cours……….
 Difficultés :
 Le capital risque sans les risques
 La réglementation
 Trouver le bon partenaire :
 Financier
 Industriel
 Les deux… ??

42
 RECHERCHER DES INVESTISSEURS

 Augmentation de capital de l’entrepise au

31/07/2012 :
 Entrée de Crédit Agricole Développement dans le
capital de Stevia Natura (20%)
 Lancement de l’investissement industriel nécessaire
pour une augmentation de capacité

43
 RECHERCHER DES INVESTISSEURS
 Nouvelle augmentation de capital de l’entrepise
au 31/08/2013 :
 Entrée de Stevia Internacional Europe dans le capital
de Stevia Natura (30%)
 Lancement de la construction d’une usine à Riom :
Production de steviol glycosides en France, seul
producteur Européen

44
L’USINE STEVIA NATURA

45
 AFFINER SA STRATÉGIE

 Maîtrise des approvisionnements

 Comment exister sur un marché qui va devenir
(peut être) un marché de commodités ?
 Tracabilité
 Agriculture biologique
 Développement durable
 Responsabilité sociale et écologique
 Pour ne pas lutter uniquement par le prix

46
 AFFINER SA STRATÉGIE

 Accords de partenariat en Amérique du Sud et en

Inde (signatures de JV)
 Première transformation sur place (près des champs)
:
 Moins de transport
 Développement économique local
 …
 Purification Finale en France
 Création d’un filière Française
47
 AFFINER SA STRATÉGIE

 Un objectif :
 Etre la première entreprise européenne à produire et
transformer de la stevia cultivée en France

48
 UNE FILIERE FRANCAISE
 Plusieurs projets en cours :

49
UNE FILIERE FRANCAISE

50
 PRÉPARER L’OUTIL INDUSTRIEL

 Définition des outils et dimensionnement

 Investissements nécessaires
 Capacité attendue
 Etudes techniques
 Cahier des charges
 ….
 Business plan

51
 DÉVELOPPER LES MARCHÉS

 Préparer les marchés :

 Travail avec des prospects :
 Envoi d’échantillons
 Aide technique et réglementaire

 Mise place de partenariats :

 Leroux
 Stroms Drinks
 Groupe Hermès
 …...

52
 MAIS POUR TOUT CELA :

 Besoin d’une réglementation claire :

 Quel produit pour quel pays ?
 L’investissement industriel en dépend :
 Quel technologie pour quel produit ?
 Le développement produit en dépend :
 Quel étiquetage pour quel produit ?

53
 STEVIA NATURA

 Conclusion :
 Les évolutions réglementaires sont de plus en plus
complexes entre les pays (continents ?), sans parler
des douanes !
 L’environnement réglementaire local entraîne une
compétitivité plus ou moins bonne sur les marchés
internationaux (en plus du reste…)
 Une plus grande difficulté pour les TPE, mais un beau
challenge…

54
 STEVIA NATURA

 SAS au capital de 195 190 €

 Créée en février 2006
 Objectif : Production et commercialisation de
produits dérivés de Stevia rebaudiana Bertoni,
notamment les steviol glycosides
 CA 2012 : 2 000K€
 RN 2012 : 155 K€

55
 STEVIA NATURA

 7 employés
 Commercialisé en 2012 : 12 tonnes
 Dépenses de R&D : env. 60 K€ (2012)
 Investissement prévu en 2013 : une usine de
production (2 000 K€) pour 60 tonnes/an d’extraits de
Steviol glycosides purifiés

56
FAQ’s

57
58
SUMMARY
STEVIA Extraction Technologies

 What to extract
 Steviol glycosides
 Rebaudioside A

 How to extract
 Different steps
 Different technologies

 Results and Comments

59
WHAT TO EXTRACT ?
 The sweetening agents of Stevia rebaudiana
Bertoni

 Steviol glycosides
 Primary processing

 Rebaudioside A
 Secondary processing

60
EXTRACTION TECHNOLOGIES
HISTORY

 First isolation of steviol glycosides :

 1931 by Bridel et Lavielle by extraction and crystallization

in solvents like Ethanol, Methanol and Ether
 Development of extraction technologies in the 70’s mainly
in Japan

 Industrial extraction of steviol glycosides started in

the 70’s

61
HOW TO EXTRACT ?
 With the use of structure and chemical and
physical properties of the molecules
 Steviol glycosides are soluble in water and solvents :
 This is the main property used to separate and purify them.

 But : Among thousands of plant molecules

 42 % of them are water and solvent soluble
 Only 6 to 20% are Steviol glycosides

62
PROPERTIES USED FOR
EXTRACTION TECHNOLOGIES

 Water, Solvent or Water/Solvent solubility

 Size of the molecules, molecular weight

 Polarity in water and Water/Solvent

 Ionic Charges of the molecules

 Crystallization in Solvent

63
HOW TO EXTRACT ?
 The first step is always to extract soluble Steviol
glycosides with the adapted solvent and them
separate them from the insoluble material

 1 Infusion with a solvent

 2 Filtration to remove insoluble material

64
1. INFUSION

 Can be done with water or water/solvent or

water alone
 In batch systems
 In continuous systems
 With supercritical CO2 Extraction
 With fresh leaves or dried leaves

 Aim : to solubilize as much as possible steviol

glycoside avoiding too many impurities
65
1. INFUSION
 Conditions :
 Water, water/solvent ratio, solvent type (methanol,
ethanol,…)
 Temperature, pH, type of extraction
 Stevia leaves

 Whatever the technology used after water/solvent

extraction is always the first step

66
 CONDITIONS

- Solvent : Water, Alcohol …

- Temperature
- Continuous or Batch
- Stirring
- Time

Dried Leaves with solvent

67
2. FILTRATION
 To remove solid particles and insoluble material from the
infusion material

 Press leaves to remove the maximum solvent

 Filtrate with different possible systems :

 Classical filters
 Press filters
 Tangential filters
 Centrifugation
 ….

68
 Dried Leaves with solvent

CONDITIONS

- Press or not
- Centrifuge
- Surface
- Size
RETENTATE
Insoluble
Material

PERMEATE
Soluble
Material
69
 How to extract ?

 The second step consist to discard some soluble

molecules by rendering them insoluble using
chelating agents and then separate them again by
filtration.
 This is a sedimentation technology
 Steviol glycosides will remain soluble

 1 Treatment with a chelating agent

 2 Filtration to remove insoluble material

70
 Infusion with Sedimentation agent
(Ca OH, Al SO4, Fe SO4…)

CONDITIONS

- Solvent : Water, Alcohol …

- pH
- Temperature
RETENTATE -Time
Insoluble
Material

PERMEATE
Soluble
Material

71
INFUSION
 All the technologies used are based on the know
how developed for optimizing solubilization of
steviol glycosides and improving the ratio
steviol glycosides versus impurities

 At the end of these steps and after elimination of

solid materials a dark tea is obtained

72
INFUSION : RESULTS
 The dark tea obtained is composed of thousands of
soluble plant molecules
DAD1 A, Sig=210,5 Ref=480,100 (E090216\STEVIA11.D)
mAU

2000
Steviol glycosides
1500

1000

500

2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 22.5 min

 The following steps will purify steviol glycosides

from other plant soluble material with separation
techniques
73
 SEPARATION TECHNOLOGIES
 Laboratory techniques :
 Very efficient (for example preparative High Pressure
Liquid Chromatography) but not adapted to industrial
production

 Industrial techniques :
 Based mainly today on two different techniques :
 1. Polarity and ionic properties
 2. Size and molecular weight of the molecules

74
 RESINS TECHNOLOGIES

 Use of different resins to separate steviol

glycosides :

 Ionic resins for retention of charged molecules

(discoloration – deionization)

 Polar resin to specifically retain molecules by their

polar/unpolar properties

75
 Resins Technologies
 Ionic Properties :

 This separation is based on the ionic charge of the

different molecules (+ or -)

 Steviol glycosides are not charged, they are not retained

on anionic or cationic resins

76
IONIC SEPARATION
Crude
Extract

Water

Retained charged
molecules

Anionic Cathionic

Steviol
glycosides
Collect
Eluate
77
 RESINS TECHNOLOGIES
 Polarity :

 This separation is based on the polar status of the

steviol glycosides with a lot of OH and COOH groups

 Steviol glycosides are retained on a adsorbent resin

and then eluted with a mixed solvent Ethanol/water

78
ADSORBTION
1. Crude extract

2. Water wash
ADSORPTION CONDITIONS

- Temperature
- Flow
- Resin quality and quantity Steviol Glycosides
- Ratio length-width retained on the resin
- Water only beads

Absorbent

3. Elimination
79
DESORBTION
4. Ethanol/water Elution

ELUTION CONDITIONS

- Temperature
- Flow
-Ratio Ethanol:Water Steviol Glycosides eluted
from resin beads

Absorbent

5. Collect Eluate
80
 MEMBRANES TECHNOLOGIES
 Based on the size of the molecules, steviol glycosides
are separated by a cascade of filtration techniques :
 Filtration
 Micro filtration
 Ultra filtration/Dia filtration
 Nano filtration

 Going from classical sieves up to ceramic membranes

with calibrated pores

81
 MEMBRANES TECHNOLOGIES
Molecular Size (nm)

1000 100 10 1 0.1

Micro Ultra Nano

Filtration Filtration Filtration Filtration
Crude Extract

Reverse
Steviol glycosides Osmosis
Steviol Glycosides :
MW : 800 – 1000
Size : 1 – 2 nm

82
FINAL STEPS

 Eluate collected after separation technologies

consist of 90 to 99% purified Steviol glycosides
 Steviol glycosides are finally Concentrated and
Spray dried to obtain a fine powder
DA D1 A, Sig=205,4 Ref =550,100 (STEV2311\STEV0013.D)
8.902

mA U

250

200

14.202
150

100
10.760

50
38
.1
01
4.667

:2
6.718

ea
Ar
0

2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 22.5 min

83
 SECONDARY PROCESSING
 Objective : to separate Rebaudioside A from
other purified steviol glycosides molecules

84
 SECONDARY PROCESSING
 Property used for this purification :

 Differential solubility of steviol glycosides molecules

in water/alcohol solvents

 In proper conditions rebaudioside A crystallize

alone and is separated from other steviol
glycosides

85
SECONDARY PROCESSING
Alcohol Water Steviol glycosides
Solvent powder

CRYSTALLIZATION CONDITIONS

- Alcohol type (C1-C5)

- Water alcohol ratio
-Temperature
- Stirring
- Time
- Cooling time
- ….

Collect, Wash and Dry

crystallized Rebaudioside A

86
 RESULTS AND COMMENTS

 First Processing : Steviol glycosides extraction :

 Yield is good, up to 80 to 90% of the steviol

glycosides present in the leaves are extracted and
purified after the first processing techniques

 Final purity depends a lot on the process conditions, it

goes from 80 to 95 % + of the Dry Matter

87
 RESULTS AND COMMENTS
 Second Processing : Rebaudioside A purification :

 Yield is good with all the different existing variations of

the process, more than 90% of the rebaudioside A
present in the steviol glycosides extract is purified

 Purity is very high and can go up to 99% depending on

the conditions and on the number of successive
crystallizations

88
 RESULTS AND COMMENTS
 Important parameters for industrial efficiency:

 Quality of leaves :
 Steviol glycosides content
 Percentage of rebaudioside A among steviol glycosides

 Technology and process conditions used

 Choice of used technology and processes
 Developed know-how by the users on the first or second
processing

89
 RESULTS AND COMMENTS

 Choice of a technology :

 Must be driven by the following parameters :

 Type of product to be extracted

 Yield and purity objectives
 Investments costs vs search objectives
 The need of a natural product (GMO, enzymatic
modification, chemical treatments…)

90
 RESULTS AND COMMENTS

Natural Status of the final product :

 All the technologies described in this paper only use

physical techniques for extraction and purification
 There is no chemical modification, no chemical
reaction on the purified steviol glycoside molecules
 The steviol glycosides and rebaudioside A are exactly
the same as they are in the leaves

91
 RESULTS AND COMMENTS

Steviol glycosides and Rebaudioside A are

and must be considered and labeled as
100% natural sweeteners

92