REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SEPERIEUR ET DE LA RECHERCHE

SCIENTIFIQUE
UNIVERSITÉ D’ALGER 1 FACULTÉ DE SCIENCE
DÉPARTEMENT DE SCIENCE DE LA MATIERE
MASTER 2: CHIMIE ANALYTIQUE

La centrifugation pour l’extraction

du liquide apoplastique de feuilles à
l’aide de phaseolus vulgaris « les
•
haricots »
Réalisée par :
Chettibi Marwa
MODULE : ANALYSE BIOCHIMQUE

• Chabane Linda
• Khalfouni Rayane Fatma Zohra Modérée par :DR LAKEHAL
• Touzene Abderrahmane Ramzi
2023/2024
 sommaire :

01. Introduction
02. Preparation et caractérisation
03. Pratique

-Conclusion Références
INTRODUCTION

Figure 1: schéma de liquide apoplastique

Figure 2: centrifugation
a

Phaseolus vulgaris :
Phaseolus vulgaris L., une plante annuelle originaire d'Amérique centrale et
d'Amérique du Sud, a été domestiqué il y a plus de 5000 ans, puis transporté vers
d'autres continents depuis le 16ème siècle. En plus de jouer un rôle essentiel dans
l'alimentation humaine en tant que source de vitamines, protéines et fibres.

Figure 4: Phaseolus vulgaris Figure 3: Amérique

Les différentes types de cellules :

La cellule

Les cellules procaryotes Les cellules eucaryotes

Animal Végétale
 La cellule végétale :

Les cellules végétales, unités élémentaires des organismes végétaux, ont une

forme géométrique due à leur paroi squelettique rigide .

La paroi:
La paroi cellulaire, composée de couches intermédiaire, primaire et membrane
plasmique, assure la rigidité et le soutien de la plante grâce à des composants
tels que la cellulose, la pectine et l'hémicellulose.

Figure 6: structure des parois cellulaire végétale

Figure 5: la cellule végétale

 Matériels de centrifugation:

Il existe plusieurs types de centrifugation, alors nous

avons utilisé la centrifugeuse a table .
C’est une modelé le plus simple qui caractérise d’une
faible accélération (1000 a 3000 xg ) a des vitesses de

rotation relativement basses (moine de 3000 RPM) .

Figure 8 :Centrifugeuse a table

 Les différentes types de centrifugation

 Centrifugation différentielle :
Dans ce type de centrifugation ,le principe est de séparer les différents
constituants le plus souvent a l’aide de plusieurs cycles de centrifugation a
accélération croissante.
 Centrifugation par gradient de densité:

La séparation des substances par centrifugation en gradient de densité consiste à concentrer les particules dans des
solutions de sels de césium ou de saccharose. Cette méthode permet de fractionner les particules en fonction de leur
densité de flottabilité.
 Préparation de la solution de nettoyage apoplastique:

Choisir l'appareil en Infiltration des feuilles à

fonction de la taille des l'aide d'une seringue de 60 ml
feuilles
 Optimisation de l’infiltration et de centrifugation à lame

Optimisation de la source de tissu végétal

Discussion

Limites de la technique
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LES ETAPES :
 Résultats :

Phaseolus vulgaris

Volume de FAE (g/mL FW feuilles) 0,49±0.09

Protéine concentration (Mg/mL) 0,18±0,08

Facteur de dilution 2,3±0,3
Glc-6-P(mg/mL) Aucun détecté
Activité MDH(U/mL) 2,5±0,9

Tableau 1.1 :Les résultats typiques pour les extractions de la FAE P. vulgaris cv.
Tendergreen feuilles
·

•
 CONCLUSION :
On conclure l'utilisation de Phaseolus vulgaris et de la
centrifugation dans l'extraction du liquide apoplastique
représente une avancée précieuse pour la recherche en
biologie végétale, contribuant ainsi à approfondir nos
connaissances sur le fonctionnement interne des
plantes et leurs interactions avec leur environnement.