ACADMIE DE PARIS UNIVERSIT REN DESCARTES FACULT DE MDECINE COCHIN-PORT ROYAL Chaires de Psychophysiologie, Physiologie, Maladies Endocriniennes et Mtaboliques

ENSEIGNEMENT DE NEUROENDOCRINOLOGIE Directeurs : Professeur Andr Soulairac et Prof. Ag. Ass. Sylvain Poenaru

DIPLME D TUDE EN NEUROENDOCRINOLOGIE THSE DIABTE INSIPIDE EXPRIMENTAL

Docteur Michele Iovino
Prsente et soutenue publiquement le 9 dcembre 1981 chez l Hpital Sainte Anne, Unit Georges Cabanis, 5 rue Cabanis, 75014 Paris.

Travail effectu au Laboratoire de Neuroendocrinologie, U.E.R.

Biomdicale, sous la direction du Prof. S. Poenaru, Facult de Mdecine, 45, rue des Saints Pres, 750270 Paris Cedex 06.

Anne Universitaire 1980-1981

Table des matires

INTRODUCTION page 3 TRACTUS ET VOIE ADH.. page 5 NEUROTRASMITTEURS ADH.. page 10

ET

MO RP H I N O MI ME T I Q U E S , RE CE P T E U RS O P I O I D E S E T ADH page 13 MATRIEL MTHODES. page 19 Etude de laction dune enkphaline synthtique (FK 33-824) sur la libration de lADH chez lapin... page 20 ET

le

Effets de ladministration intraventriculaire de Mthionine-Enkphalin sur la syndrome polyuro-polydipsique par lsion des noyaux

septaux ventro-mdians rat... page 22 chez le

Effets de ladministration intraventriculaire de Mthionine-Enkphalin aprs lsions simultanes des noyaux septaux ventro-mdians et de lorgane sous-fornical chez le rat..page 27 RSULTATS ..page 32 DISCUSSION .page 34 CONCLUSIONS .page 41 BIBLIOGRAPHIE ..page 43

INTRODUCTION

Il est connu que certain formes de diabte insipide de type central ont leur origine ex tra-p o st-h y p o p h y saire et mme ex trahypothalamique.

En effet le systme limbique joue an rle important dans la rgulation vasopressine ou ADH. Azzali et al. (1963) ont report que lablation de l amygdale et de l aire prpyriforme postrieure provoque une diminution de le scrtion des noyaux supraoptiques. Hayward et Smith de la libration de la

(1963) ont observ une augmentation de la libration de l ADH aprs stimulation lectrique de l amygdale , l hippocampe, le turbecule

olfactif et la bande diagonale de Broca. Enfin, Harvey et al. (1968) ont report que lsions des noyaux septaux ventro-mdians entranent une syndrome polyuro-polydipsique. D autre part,

la synthse des morphinomimtiques a permis d voquer un rle dans le scrtion et/ou la libration de l ADH. Ce rle a t voqu par Weitzman et al. (1977), qui la suite

de ladministration intraveineuse de la -endorphine chez le lapin a observ une augmentation plasmatique d ADH, et par Bisset et al. (1978) chez le rat et par Iovino (1981) chez le lapin utilisant la mthionine-enkphaline synthtique. Nous nous sommes ainsi proposer de vrifier lhypothse dune ventuelle intervention des morphinomimtiques dans ltio-pathognie du diabte insipide, surtout dans les formes dorigine extrahypothalamiques. Un tel but nous a rclam dclairer dabord les problmes concernant les voies et le tractus A D H , les rapports existants entre neurotransmetteurs et la scrtion et/ou la libration de l ADH.

TRACTUS ET VOIES ADH

En plus de la voie neuroscrtrice classique supraoptico- et paravetriculo-posthypophysaire, des expriences de destruction chez le singe

rvlent l existence d une voie accessoire vers le systme capillaire porte de la zone externe de lminence mdiane (Zimmerman et Antunes,

1976), cette voie est vasopressinergique et, moins degr, oxcytocinique. D es fibres

vasopressinergique qui proviennent du noyau paraventriculaire (PVN) ne terminent pas exclusivement dans la posthypophyse, mais le 25% se projette dans l adenohypophyse (Dyer, 1978). Cet hormone a un rle, peut-tre, dans la fonction

de lhypophyse antrieur.

En effet, la

surrnalectomie, chez le rat, augmente le contenu en vasopressine et neurophysine immunoractive des fibres nerveuses se dirigeant vers le systme porte. L administration de

g lu c o c o rtic o d e s p ro d u it le ffe t in v e rse (Zimmerman et al., 1978). La dshydratation appauvrit le contenu hormonal de lhypophyse postrieure, mais elle naffecte pas le contenu des axones qui se dirigent vers le systme porte. La dshydratation saccompagne

galement dune lvation de la quantit de neurophysine contenu dans les tanycytes de lminence mdiane (Zimmerman et al., 1978). Le systme magnocellulaire projette galement vers lorgane vasculaire de la lamina terminale (OVLT) (Zimmerman et Antunes, 1976). Les cellules du

noyau suprachiasmatique (S C N ), mme,

contiennent de la vasopressine et de la neurophysine associe (Zimmerman et al., 1978). Des fines fibres manant de ces cellules projettent directement en direction dorsale vers le noyau paraventriculaire (PVN). La vasopressine a t mis en vidence aussi dans l amygdale et le thalamus du rat (Weindl et Sofroniew, 1976).

Brownfield et Kozlowski (1977) ont report une voie vasopressinergique qui se projette du vers le plexus chorod ventral. Schultz et al. (1977) ont report changement ultrastructural dans le plexus chrod aprs dshydratation ou administration de vasopressine exogne, qui suggre an rle de la vasopressine dans ce structure. Autres auteurs ont trouv des fibres nerveuses vasopressinergique dans : PVN

septum mdian et latral, thalamus dorsal et latral, habenula, complexe amygdalodien (basolatral et ventromdian) et tractus olfactif (Kozlowski et al., 1978). tegmentum du msencphale, substance grise du msencphale, noyau de Edinger-Westphal, tegmentum paralemniscal et locus coruleus (Swanson, 1977). Noyau moteur du vague et noyau du tractus solitaire (Swanson, 1977).

Enfin, Simpson et Routtemberg (1972) et SummyLong et al. (1976 et 1978) ont identifi la vasopressine au niveau de lorgane sous-fornical (SFO). Cet organe, qui fait partie (avec lorgane vasculaire de la lame terminale, lorgane souscommissurale et laire postrema) des structures circumventriculaire (Epstein, 1978), joue an rle dans les mcanismes neuroendocriniens qui contrlent le comportement dipsyque, lquilibre hydrique et, probablement, la tension artrielle. En

effet, ladministration dextracts de SFO provoque diurse, natriurse et kaliurse (Summy-Long et al., 1976). Les donnes que nous avons mentionn sur les tractus principaux et accessoires ADH ont nous conduit au schma suivant (Fig. 1).

Fig. 1 : Tractus et voies ADH MFC : medial-frontal cortex ; Th : Thalamus ; CGI: Gyrus Cinguli; CN: Caudate Nucleus; HA: Habenula; CHOP: Chorod Plexus; VMS: Ventromedial septum ; ASN : Accumbens Septi Nucleus ; SNC : Suprachiasmatic Nucleus ; AT : Accessor Tractus ; MES : Mesencephalon ; AMY : Amygdale ; BS : Brain Stem ; OVLT : Organum Vasculosum Lamina Terminalis ; Area ; CSF : Cerebrospinal Fluid ; PVA: Paraventricular SON : PVN :

SC : Spinal Cord ;

Supraoptic Nucleus ; Paraventricular Nucleus ;

SFO : Subfornical Organ ; ME :

Median Eminence ; SOHT : PVHT : Paraventricular-

Supraoptic-Hypophyseal Tractus ;

Hypophyseal Tractus ; POP : Portal Plexus ; HHT : Hypothalamic-

Hypophyseal Tractus ; AHY : Adenohypophysis ; Neurohypophysis.

NHY :

NEUROTRAMITTEURS ET ADH

Contrle adrnergique : les drogues adrnergiques comme la noradrnaline inhibent la libration de l ADH. Ladministration dadrnaline ou de

noradrnaline provoque linhibition de la libration d ADH par une action, surtout, priphrique sur les barorcepteurs mais aussi par un mcanisme central. En effet ladministration de noradrnaline dans le III ventricule inhibes la libration d ADH (Barker et al., 1971 ; Moss et al., 1971). Barker et al. (1971) avec lapplication de la technique de la stimulation antidromique aux cellules du noyau supraoptique et paraventriculaire a dmontr chez

le chat que la dopamine, la noradrnaline et la srotonine rduisent lactivit lectrique de ces cellules.

Actylcholine et ADH : Dale, ds 1914, postule l existence d une mdiation actylcholinergique sur la scrtion prouve que de l ADH. Pickford (1947)

lactylcholine joue en rle primordial dans les mcanismes neuroniques qui supportent la fonction de synthse et de libration de lhormone antidiurtique ; elle tablit que des cellules cholinoceptives se trouvent dans les neurones des noyaux supraoptiques. Lintroduction du di-iso-

propyl-fluoro-phosphate, un anticholinestrasique organophosphor de synthse, induit une antidiurse durable par suite de la prolongation de la dure de vie de l actylcholine endogne (Duke

et al. , 1 9 5 0 ). In v ersemen t, u n e d ro g u e cholinolytique telle que latropine a permis Soulairac et al. (1969) de mettre en vidence, sur le plan histologique, des images de neuroscrtion tmoignant de la dpression de cette fonction, concurremment lapparition dune syndrome polyuro-polydipsique. Par ailleurs la nicotine,

ractif pharmacologique connue de longue date, est doue dune action cholinoactivatrice dont les effets stimulants sur les structures neuroscrtoires hypothalamiques antrieures sont connus de long date (Motzfeld, 1917) et lantidiurse

conscutive est lie la libration de vasopressine (Husain et al., 1975 ; Hayward et Pavasuthyprisit, 1976).

Ach

Fig. 2 : Stimulation de la production de lADH par lACh dans les neurones vasopressinergiques. Ach : actylcholine ; PV : pro-vasopressine ; VN : asopressine-

neurophysine ; V : vasopressine.

MORPHINOMIMETIQUES, RECEPTEURS OPIOIDES ET ADH

La dcouverte de ces peptides a suivi celle de ce quon appelle les rcepteurs opiacs du cerveau. Lexistence de ces rcepteurs opiaces a pos la question de la nature des candidats physiologiques de ces rcepteurs (Terenius, 1973 ; Simon et al., 1973 ; Pert et Snyder, 1973). Cela a abouti tout dabord la dcouverte, en 1975, de deux pentapeptides : la mthionine-enkphaline et la leucine-enkphaline qui sont principalment localis dans le cerveau (Huges et al., 1975). Quelques gros peptides, appels endorphines ont ultrieurement t dcouverts (Watson et al., 1979). Il existe 3 endorphines connues, qui, par ordre dcroissant, sont appeles: -endorphine, endorphine et -endorphine. Ces endorphines sont localises principalement dans la glande hypophysaire et moins dans

le cerveau (Bradbury et al., 1976 ; Guillemin, 1977). La dcouverte de ces endorphines a t le rsultat de deux observations: il sest avr que le systme nerveux des mammifres contenait des rcepteurs prsentant une grande affinit avec la morphine et les composs apparents ; chez les animaux soumis aux tests la douleur peut tre allge par la stimulation lectrique de certaines zones crbrales. Cette analgsie induit par stimulation peut tre neutralise par un antagoniste de la morphine, tel que le naloxone (Akil et al., 1978). Il sest avr que la met-enkphaline correspondait la squence amino-acidique 61-65 de lhormone hypophysaire 91 acides amins, la -lipotropine. Les trois autres endorphines connues correspondent galement une partie de la squence aminoacidique de la -lipotropine. Pourtant, la -

endorphine correspond la -lipotropine 61-91, la -endorphine la -lipotropine 61-77 et l -

endorphine la -lipotropine 61-76. Toutes les

endorphines et les enkphalines ont donc une parent avec la structure molculaire de la lipotropine.

Rcepteurs des morphinomimetiques : dmontr 4 type de rcepteurs : 1) rcepteurs 2) rcepteurs k 3) rcepteurs

on a t

associs la morphine ; associs la ketocyclazocine ; associs la N-

allylnorphenazocine ; 4) rcepteurs associs les endorphines.

Localisation des rcepteurs opioides : Systme msencphalo-limbique : cortex limbique, a my g d a le , s e p tu m, h y p p o c a mp e , th a la mu s , hypothalamus, locus coeruleus, corpus strie. Neocortex.

Moelle pinire. Plexus mienterique.

La mthionine-enkphaline et la leucineenkphaline sont scrt par les cellules secrtant le GH, les endorphines par les cellules secrtant lACTH. La libration dune molcule dACTH est accompagn dune molcule de -lipoptropine. Tous les systme de contrle central de lACTH sont les mmes que pour la -lipotropine. Les morphinomimetiques sont impliqus dans la

conduction de la douleur, dans lactivit motrice et dans la rgulation de lhumeur et des phnomnes affectifs (Akil et al., 1978). Administr fort doses, elle provoque un tat semblable ltat catatonique avec retardement moteur (Bloom et al., 1976).

Enfin, les morphinomimetiques ont une action de neuromodulateur dans la neuroscrtion hypothalamo-hypophysaire. Elles donnent une augmentation de la scrtion du GH et de la PRL et inhibent la libration de FSH, LH, et ACTH (Stubbs et al., 1978). La -endorphine inject dans le III ventricule provoque

hyperglycemie et hyperglycosurie. En ce qui concerne l ADH, Weitzman et al.

(1977) chez le lapin et Bisset et al., (1978) chez le rat, ont obtenu une stimulation de la libration de l ADH la suite de ladministration intraveineuse de morphinomimetiques synthtiques. Dans ce contexte, nous avons propos le suivant schma pour expliquer le mode daction des morphinomimetiques sur la stimulation de le scrtion et de la libration de l ADH (Fig. 3).

Fig. 3 : Rle possible des morphinomimetiques sur la stimulation de la scrtion et de la libration d ADH. E : enkphaline ; Ach : actylcholine ; OR : rcepteurs opioides ; Stim. : stimulus ; PV : pro-vasopressine ; V : vasopressine ; VN : vasopressine-neurophysine.

Il est certaines que laction des morphinomimetiques sexerce par lintermdiaire des rcepteurs opioides. Les rcepteurs opioides peuvent tre situs dans le soma (Fig. 3 : 1) ou sur les terminaisons cholinergiques des neurones faisant synapse avec les cellules qui scrtent de lADH (Fig. 3 : 2). Dans ce contexte les enkphalines (et/ou les endorphines) stimuleraient la scrtion et la

libration de l ADH.

Les morphinomimetiques

pourraient intervenir galement au niveau des rcepteurs situs sur les terminaisons des neurones secrtant de l ADH (Fig. 3 : 3). Celles-ci stimuleraient ainsi seulement la libration de lADH.

MATRIEL ET MTHODES Motivations : tant donn la pnurie des travaux concernant laction des morphinomimtiques exogne sur la scrtion et/ou la libration de l ADH, nous avons voulu, dans un premier temps, vrifier nous mme lors dune exprimentation aigue laction d une enkphaline

synthtique (D-Ala-Mthionine-Enkphalinamide : DALA ; FK 33-824 Sandoz) sur la libration de l ADH chez le lapin. Dans un deuxime temps nous nous sommes proposer de vrifier lventuelle efficacit de lenkphaline synthtique DALA dans la syndrome polyuropolydipsique secondaire aux lsions exprimentales des noyaux septaux ventro-mdians (Harvey et al., 1965 ; Lubar et al., 1968), lsions qui saccompagnent de la dgnration des noyaux supra-optiques (Tangapregassom et al., 1974). Les rsultat de cette deuxime exprience tant positif ont nous conduit dvoquer lhypothse de laction des morphinomimtiques par lintermdiaire de lorgane sous-fornical, comme organe de scrtion accessoire d ADH. Afin de vrifier cette hypothse nous avons

pratiquer chez le rat, recevant de lenkphaline synthtique, des lsions simultans des noyaux du septum ventromdian (VMS) et de lorgane sous-fornical (SFO).

1) tude de laction dune enkphaline synthtique (DALA : FK 33-824) sur la libration de

l ADH chez le lapin. LFK 33-824 (D -A la2-MthionineEnkphalinamide synthtique long-acting : Sandoz, Basel) a t administr pour voie

intraveineuse a 5 lapins dun poids variant de 2-2.5 kg. LFK 33-824 a t administr la dose de 0.05 mg en 1 ml de solution saline isotonique. Les tmoins reurent une solution saline isotonique ou une solution hypertonique (200 gr de Na Cl/L) une dose de 1

ml/kg. Des dosages radioimmunologiques de lADH dans le sang per la mthode de Kamoi et Hama (1978) ont t pratique dans tous les lots avant et aprs ladministration de la dose test (Fig. 4). A cette occasion nous avons observ que soit lFK 33-824 soit lhypertonique saline

provoquent una augmentation de l ADH plasmatique, mais leffet de lFK 33-824 sur la libration de l ADH est de plus longue dure (Fig. 4).

Fig. 4 : Taux plasmatiques dADH dans les animaux qui ont reu la mthionine-enkphaline FK 33-824 () ou la solution saline isotonique () La flche indique le temps de linjection de FK 33-824 ou de la solution saline. (), la solution hypertonique

2) Effets de ladministration intraventriculaire dune Mthionine-Enkphaline synthtique (D-Ala2Mthionine-Enkphalinamide : FK 33-824) dans la syndrome polyuro-polydipsique exprimental par lsion des noyaux septaux ventro-mdians (VMS) chez le rat. Ltude a t men chez 33 rats males adultes de race Sprangue-Dawley dun poids variant de

250-300 gr., rpartis en 3 lots : Lot A : tmoins = 5 rats ; Lot B : fausses interventions = 10 rats ; Lot C : lsions du VMS = 18 rats. Chaque animal a t plac dans une cage mtabolique permettant de mesurer la diurse/24 h. Toutes les cages ont t places leur tour dans une chambre avec temprature et humidit constantes. Dans ce conditions la prise deau et de la nourriture ont t ad libitum. Aux animaux du lot C une micro-canule mtallique de type stainless steel dun diamtre de 0.7 mm a t introduite dans le ventricule latral trois jour avant les lsions du VMS. Le socle de celle-ci a t fix la boite crnienne par ciment dentaire. Les repres pour limplantation de la canule et de latteinte des VMS ont t prises laide dun strotaximtre de type Stoelting Stereotaxic Instrument daprs lAtlas de Pellegrino et Cushman (1967) selon les coordonnes suivantes :

pour limplantation de la cannule : -coordonnes rostro-caudales: 1 mm en arrire du bregma. -coordonnes mdio-latrales: 1 mm de la ligne mdiane ; -coordonnes dorso-ventrales: 5 mm de la boite crnienne. b) pour latteinte des noyaux VMS : -coordonnes rostro-caudales: 2.2 mm en avant du bregma -coordonnes mdio-latrales: 0 mm de la ligne mdiane ; -coordonnes dorso-ventrales : 7.5 mm de la surface de la dure mre.

Pour les lots B et C, l anesthsie pratiques concerne l administration par voie intra-pritonale de 45 mg pro kg de Nembutal. Pour les lsions lectrolitiques des noyaux VMS nous avons utilis un Grass LM-4 Radiofrequency

Generator comportant une lectrode de thorium de 30 m de diamtre et des courants lectriques de 5 mAmp/5 sec., dun voltage de 75 V, une frquence de 100 kHz. Ladministration intraventriculaire de D-Ala2Mthionine-Enkphalinamide (FK 33-824) au

group C a t faite ainsi : le 4mejour aprs lsions du MVS: 3.125 g FK 33-824 ; le 5me jour aprs lsions du MVS: 6.25 g FK 33-824 ; le 6me jour aprs lsions du MVS: 12.5 g FK 33.824. Les choix des doses de FK 33-824 a t conditionne par lexprience de Sprick et al. (1981). Le 7me jour les animaux ont t sacrifis par dcapitation. A cette occasion des dosages radioimmunologiques de lADH dans le sang par la mthode de Kamoi et Hama

(1978) ont t pratiqu dans tous les lots. Des contrles microscopiques des structures rhinencphalo-hypothalamiques ont t pratiques dans les lots B et C. Ces dernires ont confirm la destruction des noyaux VMS (Fig. 5), et montr des images de dgnrescence au niveau des noyaux supraoptiques dans le dernier lot des animaux.

Fig. 5 :

Section frontale dune lsion lectrolityque des noyaux

VMS. L : lsion au niveau du MVS ; CO : chiasma optique ; CC : corps calleux ; cpn : noyaux caud et putamen ; cba : commissure blanche antrieure.

RESULTATS :

Diurse/24 heures (Fig. 6) : On remarque : la constante de la diurse/24 h dans les lots A et B ;

laugmentation nette de la diurse/24 h le 3me jour dans le lot C ; la diminution progressive de la diurse/24 h dans le lot C lors de ladministration de l enkphaline synthtique (FK 33-824).

Fig. 6 :

Diurse/24 h ds trois lots danimaux.

Lot A : tmoins ;

lot B : fausse intervantion ; lot C : lsions du MVS. D ans le lot C nous avons adminis tr pour voie intracerebroventriculaire l enkphaline synthetique (FK 33-824) partir du 3me jour.

B) ADH plasmatique (7me jour) (Fig. 7). On constate dune part les taux dADH quasiment superposable chez les lots A (2.1 0.5 U/ml) et B (2.3 0.6 U/ml ) et dautre part leur diminution dans le lot C (1.1 0.1 U/ml).

Fig. 7 : 7me jour.

Taux plasmatiques d ADH dans les trois lots le

3) Effets de ladministration intraventriculaire dune mthionine_enkphaline synthtique (D-Ala2Mthionine-Enkphaline : FK 33-824) aprs lsions simulanes des noyaux VMS et de lorgane sousfornicale (SFO). L tude a t men chez 51 rats males adultes de race Sprangue-Dawley d un poids variant de 250-300 gr., rpartis en 4 groups : group A : tmoins (control) = 5 rats ; group B : fausse intervention = 10 rats ; group C : lsions du MVS = 18 rats ; group D : lsions du SFO+VMS = 18 rats. Chaque animal a t plac dans une cage mtabolique permettant de mesurer la diurse/24 h. Toutes les cages on t places leur tour dans une chambre avec temprature et humidit constantes.

Dans ces conditions la prise deau et de la nourriture ont t ad libitum. Aux animaux du group C et D une microcanule mtalique de type stainless steel dun diamtre de 0.7 mm a t introduite dans le ventricule latral trois jour avant les lsions du VMS et de SFO. Le socle de celle-ci a t fix la boite crnienne par ciment dentaire. Les repres pour latteinte de l SFO a t prises laide d un strotaximtre de type Stoelting Stereotaxic Instrument selon les coordonnes suivantes: - coordonnes rostro-caudales : de bregma ; - coordonnes mdio-latrales : 0 mm de la ligne mdiane ; coordonnes dorso-ventrales : 5 mm de la 1 mm en arrire

surface de la dure mre. Pour le lsions lectrolytiques de lSFO nous avons utilis

un Grass LM-4 Radiofrequency Generator comportant une lectrode de thorium de 30 m de diamtre et des courants lectriques de 5 mAmp/5 sec., dun voltage de 75 V, une frequence de 100 kHz. Les lsions des noyaux VMS et de lSFO ont t fait dans la mme session. Ladministration de la DALA a t fait selon lexprience de Sprick et al. (1981) : nous avons doubl le 2me jour et tripl le 3me jour dadministration les doses de la DALA. Le 7me jour les animaux ont t sacrifi par dcapitation. cette occasion des dosages radioimmunologiques de lADH dans le sang par la mthode de Kamoi and Hama (1978) ont t pratiqu dans tous les 4 groups. Des contrles

microscopiques des structures rhinencphalohypothalamiques et circumventriculaires ont t pratiques dans les groups C et D. Elles ont

dmontr la destruction des noyaux VMS (Fig. 5)

et de l SFO (Fig. 8 b).

SHAPE \* MERGEFORMAT Fig. 8 a : Microphotographie d un organe sous-fornicale (SFO) intact. Le SFO est dans le cercle.

SHAPE \* MERGEFORMAT

Fig. 8 b : Microphotographie d une lsion lectrolytique d un organe sous-fornicale (SFO). Le SFO lsion est dans le cercle.

RESULTATS Diurse/24 heures (Fig. 9) On remarque : La constante de la diurse/24 h dans les groups A et B ; Laugmentation nette de la diurse/24 h le 3me jour dans les groups C et D ; La diminution progressive de la diurse/24 h dans le group C lors de ladministration de la DALA ; Le constant haut niveau de la diurse/24 dans le group

D lors de ladministration de la DALA. SHAPE \* MERGEFORMAT

Fig. 9 : Diurse/24 h des 4 groupes danimaux. Group A : tmoins ; Group B : fausses intervention Group C : lsions du VMS ; Group D : lsions du SFO+VMS. Dans le group C et D nous avons administr pour voie intraventriculaire la DALA partir du 3me jour.

B) ADH plasmatique (7me jour) (Fig. 10) On remarque : Les taux dADH quasiment superposable chez le group A (2.1 0.5 U/ml) et B (2.3 0.6 U/ml) ; Des taux d ADH relativement bas dans le group C (1.1 0.5 U/ml). Des taux plasmatiques d ADH presque non dosables dans le group D (non dtectable niveaux 0.5 U/ml).

Fig. 10 : Taux plasmatiques d ADH dans les 4 groups le 7me jour.

DISCUSSION En ce qui concerne laction de la mthionineenkphaline, inject par voie intraveineuse chez le lapin, nos rsultats (Fig. 4) sont en accord avec les rsultats obtenus par Weitzman et al. (1977) et Bisset et al. (1978). Dans ce contexte nous avons dmontr que la stimulation de la libration de l ADH, aprs injection intraveineuse de mthionineenkphaline, est plus grand et de plus long dure en rapport ladministration dune solution hypertonique saline, qui mme s timu le la lib r a tio n d A D H p a r augmentation de losmolalit plasmatique.

Nous avons abord cette tude pour vrifier si existent au niveau du systme nerveux central des structures extrahypothalamiques vasopressinergiques et pour tudier le rle des morphinomimetiques au niveau de ces mmes structures aprs dgnrescence des noyaux supraoptiques. On sait que le Septum, une structure tlencphalique constitu de diffrent noyaux c y to lo g iq u e me n t e t b io lo g iq u e me n t htrognes (septum mdian, septum latral et noyau accumb ens septi), p armi ses nombreuses fonctions se trouvent un contrle direct exerc sur lactivit des noyaux supraoptiques (Hayward et al., 1963 ; Powell et Rorie, 1966 et 1967 ; et al., 1974). Tangapregassom

La destruction des noyaux

septaux entrane lapparition dune syndrome polyuro-polydipsique (Harvey et al., 1965). Les travaux de Harvey repris par nombreuses

auteurs (Lubar et al., 1968 et 1969) signalent que seulement la lsion du septum ventromdian (VMS) provoque lapparition dune syndrome polyuro-polydipsique durable. Lorens et al. (1970) prcisent que la lsion de la structure adjacente, septi, n induit que le noyau accumbens

des perturbations transitoires de la soif. Enfin, Lubar et al. (1969) ont prouv que la

syndrome septal de polyuro-polidipsie tait du une carence en hormone antidiurtique (ADH). En ce qui concerne les siges des rcepteurs opioides impliqus dans la libration de lADH il est logique de considrer qu il existe au moins cinq possibilits : des rcepteurs opiodes situs sur les terminaisons mdioseptal-supraoptiques. D ailleurs Uhl et al (1978)

confirment lexistence dune assez grande densit de rcepteurs morphiniques de lhypothalamus antrieur du singe et Tangapregassom et al. (1974) se rapportant au modle exprimental que nous avons utilis voques la possibilit quun nombre non ngligeable de terminaisons nerveuses faisant relais sur le noyaux supraoptique chappent au processus de dgnrescence conscutif aux lsions du VMS ; des rcepteurs opiodes au niveau des noyaux paraventriculaires qui secrtent galement de l ADH, apparemment non lis aux affrences du VMS ; des rcepteurs morphiniques situs sur les terminaisons du tractus supraoptico-neurohypophysaire qui vhicule l ADH. Dans ce sens plaident les travaux d Iversen et al. (1980) qui voquent lexistence de tels rcepteurs dans la neurohypophyse du rat ; Des rcepteurs opiodes situs sur les structures nerveuses qui reoivent des projections contenant de l ADH limbique [noyau accumbens septi - peu probable, puisque selon Lorens et al. (1970) et Tangapregassom et

al. (1974), les lsions de ce noyau ninduisent pas que une syndrome polyuro-polydipsique transitoire et

amygdala], habenula, thalamus dorsal, noyau caud, msencphale, tronc crbrogyrus cinguli et cortex mdio-frontal ; Des rcepteurs opiodes situs dans la rgion priventriculaire, confirm par Hockfelt et al. (1978) et au niveau de lorgane vasculaire de la lame terminale (OVLT) et de lorgane sous-fornicale (SFO). Dailleurs, Weindl et Sofroniew (1976) attestent le rle de l OVLT et Summy-Long et al. (1976 et 1978) et Simpson et Routtemberg (1972) confirment le rle de l SFO dans la libration de l ADH. Dans lorgane sous-commissurale, aussi, Epstein (1978) a dmontr des rcepteurs opiodes, mais a ce niveau n existe pas de l ADH et donc le rle de ces rcepteurs nest pas encore clair. Au niveau des

structures circumventriculaire l SFO est le plus riche en ADH, qui augmente surtout

en condition de dehydration Long et al., 1978).

(Summy-

D autre part la vasopressine a t identifi en fort quantit dans le SFO par Simpson et Routtemberg (1972) et Summy-Long et al. (1976 et 1978). C et organe circumventriculaire a un rle dans les mcanismes neuroendocriniens qui contrlent le comportement dipsyque et l quilibre hydrique.

Dans ce contexte nous avons voulu vrifi si ce niveau existent des rcepteurs opiodes qui contrlent la scrtion de l ADH. A tel but nous avons fait des lsions de l SFO et vrifier si aprs ces lsions peut exister encore une scrtion d ADH. Selon nos rsultats lefficacit de laction de la DALE (inject par voie intraventriculaire) sur la diminution de la diurse est nette, bien

que celle-ci reste suprieure la valeur moyenne des tmoins, seulement dans les rats avec SFO intact. En effet la DALE reste inefficace dans les rats avec lsions de l SFO. Ces observations prouvent que, au moins, dans le diabte insipide dorigine VMS o des dgnrescence des noyaux supraoptiques surviennent, la enkphaline exerces son mthionine-

action par lintermdiaire de l SFO. Cette observation voque lexistence quasiment certaine d une voie SFO SON (noyau supraoptique) , et peut-tre galement d une voie SON SFO. Enfine, on peut

galement voquer lexistence de rcepteurs opiodes au niveau de l SFO (Fig. 11).

Fig. 11 :

Possible rle des morphinomimetiques sur la

scrtion de l ADH au niveau de lorgane sous-fornicale et du noyau supraoptique. SON : noyau supraoptique ; SFO : organe sousfornicale ; PV : pro-vasopressine ; VN : vasopressine ; C S F : liq u id e cp h a lo - ra ch id ien n e ; A ch :

actylcholine ; Enk : enkphaline ; TSOH : tractus supraoptique-hypophysaire ; NHY : neurohypophyse.

CONCLUSIONS Les morphinomimetiques stimulent la scrtion et/ou la libration de l ADH. Dans ce sens il est possible que leur principal rle sexerce par lintermediaire de lorgane sous-fornicale. Certaines formes de diabte insipide dorigine apparement extra-hypophysaire ou extra-hypothalamique peuvent avoir une tiologie hypomorphinomimetique.

Certainement une telle hypothse doit tre confirm par des dosages des endorphines et enkphalines endogne, que nous navons pas pu pratiquer. Malgr les controverses qui persistent sur laction des morphinomimetiques chez lhomme (Bronwell et al., 1980) sur la scrtion et/ou la libration de lADH et en fonction des rsultats des dosages des morphinomimetiques endognes on peut voquer l utilisation dun test la mthionine-enkphaline synthtique dans le diabte insipide central non hypophysaire . Les

rsultats dun tel test pourra ventuellement nous orienter sur lorigine et galement sur la sige des atteintes incrimins dans l tiopathognie de certaines formes

centrales de la syndrome polyuro-polydipsique. En fonction de lvolution des recherches sur la

synthse des morphinomimetiques (la mise au point de nouvelles molcules dpourvu des ffets de dpendance) on pourra ventuellement envisager la possibilit de lutilisation de ces substances dans le traitment des

formes de diabte insipide qui justifient l utilisation d un tel schma thrapeutique.

BIBLIOGRAPHIE

AZZALI G, MACCHI G., CARRERAS M.:

Modificazioni

morfo-funzionali del sistema Ipotalamo-Neuroipofisario e della costellazione endocrina dopo lesioni Rinencefaliche. Bol. Soc. Ital. Biol. Sper. 39, 688, 1963. AKIL H., RICHARDSON D.E., HUGHES J., J.D.: BARCHAS

Enkephalin-like material elevated in ventricular

cerebrospinal fluid of pain patients after analgesic focal

stimulation. Science 201, 463, 1978. BARKER J.L., CRAYTON J.W., NICOLL R.A.: Antidromic and orthodromic responses of paraventricular and supraoptic neurosecretory cells. Brain Res. 33, 353, 1971. BARKER J.L., CRAYTON J.W., NICOLL R.A.: Nor-

adrenaline and acetylcholine responses of supraoptic neurosecretory cells. J. Physiol. (London) 218, 19, 1971.

BISSET G.W., CHOWDERY H.S., FELDBERG W. : Release of vasopressin by enkephalin. 370, 1978. BLOOM F., SEGAL D., LING N., GUILLEMIN R.: Endorphins: profound behavioural effects in rats suggest new etiological factors in mental illness. Science 194, 630, 1976. BRADBURY A.F., SMYTH D.G., SNELL C.R., BIRDSALL N.J.M., HULMES E.C.: C fragment of lipotropin has a high Br. J. Pharmacol. 62,

affinity for brain opiate receptors. Nature 260, 793, 1976. BROWNFIELD M. S. , KOZLOWSKI G. P. : Immunohistochemical studies of the extrahypothalamic vasopressinergic fibres. Cell Tissue Res. 178, 111, 1977. DALE H.H.: The action of certain esters and ethers of choline

and their relation to muscarine. J. Pharmacol. 6, 147, 1914. DUKE H., PICKFORD M., WATT J.A.: The immediate and

delayed effects of diisopropylfluorophosphate injected into the supraoptic nuclei of dogs. J. Physiol. (London) 111, 81, 1950. DYER R.G.: Localization of neurosecretory cells by

electr ophysiological methods. I n: Cell Biology of Hypothalamic Neurosecretion, edited by J.D. Vincent and C. Kordon, CNRS Ed., Paris, Ch 19, 323, 1978. EPSTEIN A.N.: The Neuroendocrinology of Thirst and Salt

Appetite. In: Frontiers in Neuroendocrinologiy, vol. 5, edited by W.F. Ganong and L. Martini, Raven Press, New York, Ch 4, 101, 1978. GUILLEMIN R.: Endorphins, brain peptides that act like

opiates. New Engl. J. Med. 296, 226, 1977. HARVEY J.A., LINTS C.E., JACOBSON L.E., HUNT H.F.: Effects of lesions in the septal area on conditioned fear and discriminated instrumental punishment in the albino rat. Comp. Physiol. Psychol. 59, 37, 1965. HAYWARD J.N., PAVASUTHIPAISIT K.: released by nicotine in the monkey. Vasopressin J.

Neuroendcrinol. 21, 120,

1976. HAYWARD J.N., SMITH W.K.: Influence of limbic system

on neurohypophysis. Arch. Neurol. 9, 171, 1963. HOKFELT T., JOHANSSON O., ELDER R., LJUNGDAHL A., FUXE K., GOLDSTEIN M.: Comparative topography of

catecholamines and neuronal peptides in the hypothalamus. In: Cell Biology of Hypothalamic Neurosecretion, edited by J.D. Vincent and C. Kordon, CNRS Ed., Paris, Ch. 25, 415, 1978. HUGHE S J. , S MI T H T . W. , KOS T E RL I T Z H. W. , FOTHERGILL L.A., MORGAN B.A., MORRIS H.R.: Identification of two related peptides from the brain with potent opiate agonist activity. Nature 258, 577, 1975. HUSAIN M.K., FRANTZ A.G., CIAROCHI F., ROBINSON A.G.: Nicotine-stimulated release of neurophysin and

vasopressin in humans. J. Clin. Endocrinol. Metab. 41, 1113, 1975. IOVINO M.: ADH activation by methionine-enkephalin

analogue (FK 33-824) in rabbits. Pan. Sanit. 3, 17, 1981. IVERSEN L.L., IVERSEN S.D., BLOOM F.F.: Opiate

receptors influence vasopressin release from nerve terminals in

rat neurohypophysis. Nature 284, 350, 1980. KAMOI K., HAMA H.: Radioimmunoassay of the

antidiuretic hormone. Acta Med. Biol. 25, 101, 1977. KOZLOWSKI G.P., BROWNFIELD M.S., HOSTETTER G.: Evolutionary Aspects of Neuroendocrinology, edited by A.L. Polenov, W. Bargman and B. Sharrer, Springe-Verlag, Berlin, 1978. LORENS S.A., SORENSEN J.P., HARVEY J.A.: Lesions in

the nuclei accumbens septi of the rat: behavioural and neurochemical effects. 1970. LUBAR J.F., BOYCE B.A., SHAEFER C.F.: polydipsia Etiology of J. Comp. Physiol. Psychol. 73, 284,

and polyuria in rats with septal lesions. Physiol.

Behav. 3, 289, 1968. LUBAR J.F., SCHAEFER C.F., WELLS D.G.: The role of

septal area in the regulation of water intake and associated motivational behaviour. 1969. MOSS R.L., DYBALL R.E.J., CROSS B.A.: Responses of Ann. NN.Y. Acad. Sci. 152, 875,

antidromically identified supraoptic and paraventricular units to

acetylcholine, noradrenaline, and glutamate applied iontophoretically. Brain Res. 35,573, 1971. MOTZFELD K.: Experimental studies on the relation of the

pituitary body. J. Exp. Med. 25, 153, 1917. PICKFORD M.: The action of acetylcholine in the supraoptic nucleus of the chlorased dog. 1947. PELLEGRINO L.J., CUSHMAN A.J.: Stereotaxic Atlas of J. Physiol. (London) 106, 264,

the Rat Brain. Appleton Century Crofts, New York, 1967. PERT C.B., SNYDER S.H.: Properties of opiate-receptors

binding in rat brain. Proc. Natl. Acad. Sci. 70, 2243, 1973. POWELL E.W.: Septal efferents in the cat. Exp. Neurol. 14, 328, 1966. POWELL E.W., RORIE D.K.: functioning in oxytocin release. 1967. SCHULTZ W.J., BROWNFIELD M.S., KOZLOWSKI G.P.: Effects of vasopressin and dehydration on choroid plexus. Cell Tissue Res. 178, 129, 1977. SIMON E.J., MILLER J.M., EDELMAN I.: Stereospecific Septal projection to nuclei Am. J. Anat. 120, 605,

binding of the potent narcotic analgesic (H)-etorphine to rat brain homogenate. 1973. SIMPSON J.B., ROUTTEMBERG A.: Subfornical organ and carbachol-induced drinking. Brain Res. 45, 135, 1972. SOULAIRAC A.: The adrenergic and cholinergic control of Proc. Natl. Acad. Sci. USA 70, 1947,

food and water intake. Ann. N.Y. Acad. Sci. 157, 934, 1969. SPRICK U., OITZL M.S., ORNSTEIN K., HUSTON J.P.: Spreading depression induced by microinjection of enkephalins into the hippocampus and neocortex. 1981. STUBBS W.A., DELITALA G., JONES A., JEFFCOATE W.J., EDWARDS J.W., RATTER S.J., BESSER G.M., BLOOM S.R., ALBERTI M.M.: Hormonal and metabolic Lancet, Brain Res. 210, 243,

responses to an enkephalin analogue in normal men. II, 1225, 1978.

SUMMY-LONG J.Y., CRAWFORD I.L., SEVERS W.B.: Effects of subfornical organ extracts on salt-water balance in the rat. Brain Res. 113, 499, 1976. SUMMY-LONG J.Y., KEIL L.C., SEVERS W.B.:

Identification of vasopressin in the subfornical organ region: effects of dehydration. Brain Res. 140, 241, 1978. SWANSON L.W.: Extrahypothalamic sites containing Brain Res. 128, 346,

oxytocin, vasopressin and neurophysins. 1977.

TANGAPREGASSOM A.M., TANGAPREGASSOM M.J., SOULAIRAC A., SOULAIRAC M.L.: Effets des lsions Ann.

septales sur lultrastructure du noyau supra-optique. Endocrinol. (Paris) 35, 149, 1974. TERENIUS L. :

Characteristics of the receptor for narcotics

analgesics in synaptic plasma membrane fraction from the rat brain. Acta Pharmacol. Toxicol. 33, 377, 1973. UHL G.R., CHILDERS S.R., SNYDER S.H.: peptides and their receptors. In: The opiate Frontiers in

Neuroendocrinology, vol. 5, edited by W.F. Ganong and L. Martini, Raven Press, New York, Ch.. 5, 1978. WATSON S.J., AKIL H., BERGER Ph.A., BARCHAS J.D.: Some observations on the opiate peptides and schizophrenia. Arch. Gen. Psychiatry 36, 35, 1979. WE IDL A. , SOFRONIE W M. V. : Demonstration of

extrahypothalamic peptide secreting neurons. A morphologic contribution to the investigation of psychotropic effects of

neurohormones. Pharmakopsychiatr. Neuro-psychopharmakol.. 9, 226, 1976, WETZMAN R.E., FISHER D.A., MINICK S., LING N., GUILLEMIN R.: -endorphin stimulates secretion of arginine vasopressin in vivo. Endocrinology 101, 1643, 1977. ZIMMERMAN E.A., ANTUNES J.L: Organization of the

hypothalamic-pituitary system: current concepts from immunohistochemical studies. 807, 1976. ZIMMERMAN E.A., STILLMAN A.M., RECHT L.D., MICHAELS J., NILAVER G.: The magnocellular J. Histochem. Cytochem. 24,

neuroscretory system: pathways containing oxytocin, vasopressin and neurophysins. In: Cell Biology of

Hypothalamic Neurosecretion, edited by J.D. Vincent and C. Kordon, CNRS Ed., Paris, Ch. 22, 375, 1978.

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