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REMERCIEMENT
Mon stage de volontaire de mission a été possible grâce au soutient
infaillible d’un certain nombre de personnes. Je tiens à exprimer ma
profonde reconnaissance à tous ceux là qui de près ou de loin m’ont
toujours accordés leur assistance, me manifestant par la même occasion
un intérêt particulier.
Je remercie donc le seigneur Dieu tout puissant qui m a accordé la
force nécessaire pour la réalisation des taches qui m ont été confiés au
laboratoire du CMA de Mendong pendant cette période.
Monsieur le ministre de la jeunesse et de l’éducation civique.
Les délégués d’arrondissement sortant et entrant de Yaoundé VI
pour leurs disponibilités.
Le médecin chef du CMA de Mendong Dr ABENKOU
DANIELLE pour sa bienveillance et son attitude maternelle.
Les majors et vices majors du laboratoire respectivement Mme
EKEKE SOLANGE et Mr ASSAM BILO’O PLACIDE pour leurs
patiences, leurs compréhensions à mon égard.
Tous les titulaires en service au CMA de Mendong pour leurs
esprits d’intégration
Tous les autres stagiaires en perfectionnement pour leurs
solidarités permanentes
Je remercie particulièrement ma famille qui manifeste au
quotidien leur soutient et leurs compréhensions pour la situation socio
économique dans laquelle j évolue actuellement.
SOMMAIRE
INTRODUCTION
I- OBJECTIFS DU PROGRAMME NATIONAL DE VOLONTARIAT
II- DESCRIPTION DU CADRE DE STAGE
1- Situation générale du CMA de Mendong
2- Plan de masse du CMA de mendong
3- Organigramme du CMA
4- Organisation et fonctionnement du service de laboratoire
III- DEROULEMENT DU STAGE DE VOLONTAIRE DE
MISSION :PROTOCOL DE REALISATION DES EXAMENS DE
LABORATOIRE
A- PROTOCOL DES EXAMENS DE BACTERIOLOGIE /PARASITOLOGIE
1- ECBU
2- PCV
3- PU
4- Examen des selles
B- PROTOCOL DES EXAMEN D’ HEMATOLOGIE
1- Goutte Epaisse
2- Groupe sanguin et rhésus
C- PROTOCOL DES EXAMENS DE SEROLOGIE
1- Test du VIH
2- CRP, ASLO ; VDRL, FR
3- Test de widal et felix
4- BW (Bordet Wassermann)
5- Test du chlamydiae
6- Toxoplasmose IgM et rubéole IgG
D- PROTOCOL DES EXAMENS DE BIOCHIMIE
1- Glycemie à jeun
2- G-test
3- Bandelette urinaire :combis
4- Bandelette urinaire : albumine /sucre
5- Ionogramme
6- Transaminases
7- Urée /créatinine
8- Profils lipidiques
E- PROTOCOLDE RECYCLAGE
IV- PROBLEMES RENCONTRE PENDANT LA MISSION
V- SUGGESTION
CONCLUSION
REFERERENCE BIBLIOGRAPHIQUE
ABREVIATION
INTRODUCTION
I- OBJECTIFS DU PROGRAMME
NATIONAL DE VOLONTARIAT
17 9 10 11 12 13
7 14
18
1920
8
21 15
5
17 22
16
23
24
ENTREE
3 2 1
25
1- Bureau Médecin chef (MDC) 11- toilette du personnel 21- service d’ophtalmologie
2 - Régisseur + secrétariat du MDC 12- service de laboratoire 22- salle de réunion
3- bureau du chef du district de santé 13- surveillance générale 23- service de l’odontologie
4- secrétariat du chef du district 14 - salle d’accouchement 24- toilette publique
De santé 15- bureau des Médecins 25- incinérateur
5- jardin 16- service de la pharmacie
6 - Magasin 17- salle d’hospitalisation
7- chef bureau santé 18- UPEC
8- service de vaccination 19 – service de Diabétologie
9- bureau district de santé 20- petite chirurgie
10- service de la caisse
2- organigramme du CMA
MEDECIN
CHEF
SURVEILLANT
GENERAL
COORDONNA
TEUR DES
SERVICES
MAJORS DES
SERVICES
RESTE DU
PERSONNEL
a- matériels
On a :
Lames porte-objet et lamelles
Un flacon stérile servant à recueillir l urine
le violet de Gentiane, le Lugol, l’alcool et la Fuchsine à Gram
Les tubes stériles
Eau distillée
L’Anse de platine ou micropipette
Une centrifugeuse
b- prélèvement
c- examen macroscopique
d- examen microscopique
Résultats
- Monter la lame sur le microscope
- Examiner la lame à l’objectif à immersion (×100)
- Examiner d’ abord les bords de l’étalement où les éléments moins serrés
sont plus faciles à voir
- Noter la morphologie et la coloration des bactéries présentes : Les bactéries
Gram positif se colore en violet a lorsque les bactéries Gram négatif se
colore en rouge
b- Analyse de l’échantillon
Examen direct
Après prélèvement, il est toujours nécessaire de faire deux étalements
(frottis) sur une lame en faisant roter l’écouvillon. Ces frottis serviront à
faire : une analyse à l’état frais entre lame et lamelle (objectif 10 ,20 et
40) et une analyse après coloration de gram pour une lecture à l objectif
100.
On peut aussi avoir un examen après culture qui permettra de réaliser si
possible l’antibiogramme et ou d’identifier avec précision le germe en
cause.
3- PU (Prélèvement Urétral)
Ils sont de deux type, les examens des selles KOAP ou parasitaires
et les examens des selles Gram ou Cyto-Bactériologique. Les conditions
de prélèvement des selles sont les suivantes :
- Les selles doivent être émises de préférence au laboratoire.
- Recueillir dans un pot propre.
* Ne jamais mettre dans le papier hygiénique.
* Ne jamais mettre dans la boite d’allumette ou le carton.
* Ne jamais mettre dans le plastique
* Ne jamais garder les selles plus de 30 minutes avant d’apporter au
laboratoire.
* Ne jamais mélanger les selles à des urines.
L’examen des selles passe par l’état frais entre lame et lamelle
après ou non une étape de concentration. On peu par la suite réaliser le
Gram si le personnel consultant en à fait la demande.
L’examen à l’état frais commence par un examen
macroscopique au cours duquel on note la couleur de la selle, sa
consistance, son odeur, la présence de mucus, de sang ; de débris et de
dépôt de toute sorte. Ensuite, la selle doit être étalée. Pour cela il faut :
- Déposer séparément sur une lame propre une goutte d’eau physiologique
ou de Lugol et préparer l autre pour un éventuelle gram.
- Triturer les selles à l’aide d’un embout afin de dégager et de porter tous
les éléments présents dans les selles.
- Enlever une petite quantité de selles puis déposer sur la lame portant la
goutte d’eau physiologique et sur l autre faire un étalement le plus fin
possible et la laisser sécher à l air libre .
- Bien mélanger s’elle à la goutte d’eau, le tout afin d’obtenir une solution
homogène.
- Prendre une lamelle puis déposer sur la goutte d’eau physiologique
(mélangée à la selle) de telle sorte que le liquide occupe toute la surface
de la lamelle sans laisser place à aucune bulle d’air. Faire de même avec
le Lugol.
- Déposer la lame sur le microscope et la parcourir à l’aide du plus petit
objectif (objectif 10). Lorsqu’un élément suspect est visualisé, passer au
fort grossissement (objectif 40) afin d’avoir une image plus claire de ce
dernier. Pour la seconde lame procéder à la coloration de gram et lire à
l’objectif 100
1- la goutte épaisse
La goutte épaisse est une technique très simple qui permet de mettre
en évidence les éléments parasitaires (plasmodium falciparum,
microfilaire) dans le sang ; Il est ce pendant difficile d’observer les
globules rouges car sont écrasés pendant la réalisation du test. Au CMA
de mendong, la GE reste l examen le plus demandée car le paludisme est
de loin la première cause de mortalité au Cameroun.
a- le matériel
b- Procédure
- A laide de la pipette, déposer une goutte de sang sur une lame bien
dégraissée et étaler le sang en écrasant les GR grâce à la micro spatule
- laisser sécher à l’air libre
- Colorer au giemsa pendent 15 à 30 minutes
- Rincer, laisser sécher et passer à la lecture au microscope à l’objectif 100
avec l’huile à immersion
- compter le nombre de parasites par champ microscopique
nombre de cas
4; 2%
12; 7%
palu simple adulte
palu grave femme enceinte
34; 19%
palu grave adulte
palu simple enfts de 0 à 5 ans
99; 57%
palu grave enfts de 0 à 5 ans
20; 12%
palu négatitif enfts de 0 à 5 ans
6; 3%
C’est un travail qui consiste à classer les échantillons du sang par groupe
dans le système ABO associé au rhésus ; Le système ABO et Rh se
caractérise par la présence ou l’absence d’antigène A et /ou B et Rh+ à la
surface des globules rouge.
La transfusion sanguine respecte le groupage sanguin qui suit le schéma
suivant :
A
O AB
Ainsi don le groupe sanguin O peut donner à tout le monde et par ricochet le
groupe AB lui peu recevoir de tout le monde, du moment que le groupe
rhésus est identique.
a- Materials
1- le test du VIH
a- matériels
- Gants et seringue
- Garrot
- Centrifugeuse
- Coton et alcool pour asepsie
- Tube à essai étiqueté
- Test Détermine HIV-1/2
- Pipette de précision et embout pour distribution de 50µL
b- Principe
c- Procédure
Remarque :
i- Les résultats sont positifs même si la barre du patient est plus claire ou
plus foncé que la barre contrôle
ii- L’intensité de la barre du patient n’est pas nécessairement corrélée
avec le titre de l’anticorps se trouvant dans l’échantillon.
a- Matériels et réactifs
b- Principe
c- Procédure
REMARQUE :
i. Ne pas tester les échantillons hémolytiques
Programme national de volontariat Page 24
Rapport du volontariat de Mission au CMA de Mendong
4- BW :
Principe : Le test est basé sur le principe selon lequel les particules
sensibilisées sont agglutinées par la présence d’anticorps au tréponème
pâle éventuellement présent dans le sérum humain.
Procédure du test : TPHA
- Pipeter 190 ul de sérum dans Le puits 1 de la microplaque
- Y ajouter 10ul de sérum du patient
- Pipeter 75ul du control test dans le second puits
- Pipeter aussi 75ul du test cellulaire dans le troisième et dernier puits
- Retirer 25 ul du puits 1 l ajouter dans le puit2
- Retirer aussi 25ul du puit 1 et l ajouter dans le puits 3
- Couvrir et attendre 1h pour la lecture de résultat
5- test de chlamydia
a- Mode opératoire
a- Matériels et Réactifs.
b- Principe
AgHBs
Le principe de ce test se base sur la formation du complexe anticorps-
antigène, qui se distingue par une ligne rouge sur la bandelette du test. En
fait, la bandelette a été imprégnée des antigènes AgHBs ; donc en cas de
présence de ces antigènes dans le plasma/sérum, les deux entités forment
un complexe qui se matérialise par une ligne rouge.
HCV
Ici également le test se base sur la formation du complexe anticorps-anticorps
dans la région indiqué du test (ligne rouge) sur la bandelette. La
membrane de la bandelette a été imprégnée des anticorps qui fixent
d’autre anticorps luttant contre le virus de l’Hépatite C et présent dans le
sérum/plasma.
c- procédure
Interprétation.
- Positive : Apparition de deux lignes rouges distinctes ; une ligne au
niveau de la région du contrôle(C) et l’autre dans la zone du test (T).
- Négative : Apparition d’une seule ligne dans la région du contrôle (C).
- Invalide : Lorsqu’aucune ligne n’apparait ou lorsque la ligne du contrôle
n’apparait pas .
NB bien que causée par agents différents (La toxoplasmose est causée
par un parasite appelé Toxoplasma gondii et l’autre étant l’œuvre d’un
virus de la famille des Togavirus) ces deux examens reste important dans
le circuit de la femme enceinte car les germes qu’ils identifient font
partis des premiers responsables des malformations congénital et des
avortements précos.
1- glycémie à jeun
a- Matériels
- Gant de soins
- Glycomètre
- Bandelette pour glycémie
- Coton imbibé d’alcool
- Biseau d’aiguille ou lancette
b- Procédure
2- G-Test
a- matériels
- Bandelette pour G-test
- Gants des soins
- Flacons d’urine ou sang étiquetée
b- principe
c- procédure
C’est un test qui permet d identifier les molécules se trouvant dans les
urines et leurs concentration. Ces éléments sont : urobilinogène, glucose,
bilirubine, cétone, densité, sang, Ph, protéine, nitrite, leucocyte, acide
ascorbique. C’est une méthode de diagnostic du fonctionnement rénal et
de la qualité du Métabolisme.
a- matériels
- Flacon d’urine étiqueté
- Bandelette urinaire
- Gants des soins
b- procédure
5- Ionogramme
5.1- Calcium
a- Matériels
b- Procédure
5.2- Magnésium
a- Matériels
b- Procédure
5.3- Potassium
a- Matériels
b- Procédure
5.4- Sodium
a- Matériels
b- Procédure
6- les transaminases
a- Matériels
b- Procédure
7- urée / créatinine
7.1- Urée
a- Matériels
b- procédure
7.2- Créatinine
a- Matériels
b- procédure
8- profils lipidiques
a- Matériels
b- Procédure
a- Matériels
-
- 3 tubes à essaie (bl, std et ech)
- Echantillons du sérum du patient
- 2 pipettes réglables de 1000 et 50 ou200 ul
- Réactifs (R, Standard std)
b- Procédure
a- Matériels
b- Procédure
D- PROTOCOL DE RECYCLAGE
le matériel est rincé à l eau deux fois, séchés et classés près pour une
nouvelle utilisation.
B- PROBLEMES RENCONTRE
PENDANT LA MISSION
C- SUGGESTION FAITE AU
MINISTERE DE LA JEUNESSE ET
DE L’EDUCATION CIVIQUE
CONCLUSION
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Manuel des Techniques de Base pour le Laboratoire Médical :
Organisation Mondial de la Sante(OMS), Genève 1993.
Dictionnaire Médical le FLA MMARION, Pr Michel LEPONIER.
Registres du laboratoire.