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Les techniques d’ensemencements et les examens

macroscopiques des cultures bactériennes

Objectifs : * Connaître les techniques d’ensemencement (GN, GNi, BN)


* Déterminer l’intérêt d’un isolement
* Savoir décrire les caractères macroscopiques en milieu liquide et sur gélose
inclinée solide
* Savoir décrire une colonie isolée sur gélose nutritive en boîte de Pétri
* Savoir mettre en relation des résultats de l'observation macroscopique des
colonies avec les examens microscopiques réalisées sur cette souche.

1er jour

Manipulation :
Culture pure de souches :
K, B ou S
Réaliser un état présentée en bouillon
frais et un Gram nutritif ordinaire

Ensemencer par stries Ensemencer


1 GN inclinée 1 BNO grâce à une oëse

Isoler sur 4 GNO


en boîte de Pétri par les techniques usuelles

Incuber boîtes de Pétri et tubes à 37°C pendant 48 h (noter bien vos


initiales ou votre numéro de poste, température et durée d’incubation).
Pensez à bien retourner vos boîtes dans l’étuve.

2ème jour

Manipulation !: Réalisation d’un état frais et d’une coloration de Gram à


partir des tubes et / ou des boîtes de Pétri.

Compte-rendu :
décrire l’aspect macroscopique du bouillon.
Décrire l’aspect macroscopique de la culture bactérienne sur Gni.
Décrire l’aspect macroscopique d’une colonie isolée sur une des boites de Pétri.
Réaliser les examens microscopiques de la souche à partir du bouillon nutritif.

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