REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA

RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE HASSIBA BENBOUALI DE CHLEF

FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE

DEPARTEMENT DE BIOLOGIE

TP02 :
Dosage d’alcool dans le sang (Alcool Test)

L3 Biochimie

Module : Toxicologie .

 Réalisé par :
 ELAIEIDA Halima .

Plan de travail :
 Introduction .
Principe .
Objet .
Matériel .
Mode opératoire .
Résultats .
Conclusion .

 Introduction :
  L’alcool contenu dans les boissons est l’éthanol, CH3CH2OH. Il n’est pas transformé
dans le tube digestif et il passe dans le sang très rapidement après l’ingestion.
 La concentration maximale dans le sang est appelée alcoolémie et est atteinte en une
demi-heure, si l’on est à jeun, ou en une heure quand on mange.
 L’alcoolémie est la concentration de l’éthanol dans le sang. Son estimation est faite à
partir d’une mesure sur l’air expiré.
 L’alcoolémie est proportionnelle à la concentration de l’éthanol dans l’air expiré
qu’indiquent les éthylotests :

0,25 mgéthanol/Lair expiré correspond à une alcoolémie de 0,5 g/L.

 Principe :
L’ALCOTEST permet de déceler la présence d’alcool dans le sang à partir de l’air
expiré. Ce test est utilisée par la prévention routière. Le principe de cette technique
est basé sur le fait qu’environ 2 L d’air alvéolaire contiennent la même quantité
d’éthanol qu’un (01) ml de sang.

 Description du matériel de l’ALCOTEST :

Les boites ALCOTEST contiennent 10 tubes réactifs, 10 embouchures stérilisées et

un poche en matière plastique. Les tubes. ALCOTEST, scellés aux deux extrémités,
contiennent une masse réactive jaune qui se colore en vert en présence de vapeurs
d’alcool.

Sur le tube ALCOTEST sont imprimés:

1. a) Une flèche indiquant le sens dans lequel doit être expulsé l’air expiré;
2. b) Un anneau repère blanc, qui divise la Coluche réactive jaune en deux
parties égales.
 Objet :

 Dosage de l’alcool dans un faux sang par spectrophotométrie .

 On va doser l’éthanol (CH3CH2OH) qui est une molécule organique
liposoluble .

 Matériel :
 Pipettes jaugées .
 Bécher .
 Fiole jaugée .
 Tubes à essai + Support .
 Pissette .

 Mode opératoire :

 On a préparer 7 tubes :
 6 tubes avec des concentrations connus .
 1 tube avec concentration inconnus .
 Résultats :
-interprétation :

Après l’ensemencement de la souche bactérienne qu’on a (Gélose

Désoxycholate) sur des milieux de culture ordinaires , et après
l’incubation pendant 24 h on a pu remarquer :
 Un petit changement de couleur du milieu dans la colonie ensemencée
en surface du rouge violacé au rouge rosé .
 Tandis que comparant le résultat qu’on a obtenu de l’incubation de la 2
ème colonie (ensemencée en masse) est que la couleur du milieu a
changé du rouge au jaune (vert) .
 Et aussi la couleur du milieu qui est dans le tube incliné a changé vers la
couleur jaune sur la surface ensemencée .
  La couleur du milieu qui contient l’ADH a changé du violet vers la couleur
bleu .

 Discussion :

Dans ce milieu, il n'y a que

des bactéries Gram négatif (-),
donc labactérie que nous avons
étudiées appartiennent à ce
milieu et cela indique la couleur
jaune apparaissant dans
l'expérience . ensemencement
en masse et en surface elles
donnent la couleur orange
(bactérie Gram négatif)  et semi
incliné dont la couleur jaune Et
dans le tube ils nous ont donné
la couleur bleue à cause de la
contamination du milieu au lieu
la couleur jaune.

 Conclusion :

Les techniques d'ensemencement et d'isolement sont des téchniques

qui nous a permet d’isoler et cultiver des colonies et d’étudier l’effect des
composants des milieux utilisés sur la croissance bactérienne permettant
ainsi d’obtenir des informations sur les reactions biochimiques.
.