Les Travaux Pratiques à l’Université Oran1-Ahmed Ben Bella

Fiches Techniques

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie

Département de Biologie
Master M1 Ecophysiologie végétale Semestre S1
 T.P. N°01
 Matière: Physiologie cellulaire végétale

 Intitulé : Mise en évidence de la lamelle moyenne

 Protocole :

 Principe: Mise en évidence sous microscope optique de la lamelle moyenne par

coloration
 Méthodologie (succincte) :
- Prélèvement de cellules de l’épiderme de l’écaille d’oignon
- Coloration au rouge de ruthénium et observation microscopique

Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels

 Ammoniaque  Verres de montres  Microscopes
 Rouge de ruthénium  Lames portes
objets
 Lamelles

T.P. N°02
 Matière: Physiologie cellulaire végétale

 Intitulé : Mise en évidence des composés de la paroi

- La cellulose
- La lignine

 Protocole :

 Principe: Coloration des tissus à paroi cellulosique en rouge par le rouge Congo et les
parois lignifiées en vert par le vert de méthyle.

 Méthodologie (succincte): Coupes transversales réalisées dans des tiges ou racines de

plantes différentes. Elles sont vidées par l’eau de javel, mordancées par l’acide acétique
puis colorées par le vert de méthyle et enfin le rouge Congo. Les coupes sont montées
entre lame et lamelle et observées au microscope optique.
Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels
 Rouge Congo  Verres de montre  Microscopes
 Vert de méthyle  Pipettes pasteur  Lames portes objets
 Acide acétique  Lamelles
 Hypochlorite de sodium
 T.P. N°03
 Matière: Physiologie cellulaire végétale

 Intitulé : Mise en évidence des radicaux coniferyls et syringyls des lignines par tests
spécifiques

 Protocole :

 Principe: Les lignines de la paroi secondaire ces cellules végétales sont composées
d’alcools en proportions différentes selon les familles botaniques et qui peuvent être
mis en évidence par des réactions histochimiques spécifiques.

 Méthodologie (succincte):
Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels
 Phloroglucine  Verres de montre  Microscopes
 Alcool 95°  Lames portes objets
 HCl  Lamelles
 KMnO4
 NH4OH

T.P. N°04
 Matière: Physiologie cellulaire végétale

 Intitulé : Extraction et mise en évidence des pectines pariétales solubles et insolubles

 Protocole :
 Principe: Extraction et étude des propriétés de pectines végétales

 Méthodologie (succincte): Les pectines sont des substances insolubles dans l’alcool qui
peuvent être extraites soit par l’eau chaude (pectine de la pomme) ou à l’aide d’un
chélateur du calcium (cas du soja) Leurs propriétés sont mises en évidence par l’ajout
d’alcool en présence du rouge de ruthénium, ou par l’addition de chlorure de calcium.
Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels
 EDTA  Tubes à essai  Bain marie
 Rouge de ruthénium  Entonnoirs
 Alcool 95°  Papier filtre
 CaCl2

T.P. N°05
 Matière: Physiologie cellulaire végétale

 Intitulé : Isolement, purification et observation microscopique des chloroplastes

 Protocole :
  Principe: L'étude du chloroplaste après isolement et fractionnement par centrifugation

 Méthodologie (succincte): L’échantillon végétal est broyé puis centrifugé. La fraction

brute de chloroplastes est remise en suspension dans le tampon. On prépare des tubes à
centrifugation contenant deux couches de saccharose de concentration différente. Les
chloroplastes intacts sont récupérés puis observés sous microscope.
Produits chimiques Consommable/Verrerie Petits Matériels
 Saccharose  Tubes à essai  Centrifugeuse réfrigérée
 Tampon phosphate pH  Tubes falcon  Microscopes
6.5  Tubes à hémolyse
 Lames portes objets
 Lamelles
 Mortiers