Organisation des enseignements Chimie

en S3 et S4
● Modules d'enseignements de Chimie
►M3303 : Techniques Spectroscopiques (Johan Alauzun  S3)
►M4104 : Analyses Électrochimiques (Olivier Fontaine  fin S3) et Méthodes
Chromatographiques (Christelle Nguefack  début S3)

● Organisation des TP (bâtiment H Chimie, RDC)

►Responsable TP : Stella Lacour (stella.lacour-cartier@umontpellier.fr)
►Fonctionnement en groupes TP, séance une semaine sur 2 pour chaque groupe TP  voir
l'EDT
►Démarrage la semaine prochaine ! : faire les binômes cette semaine
►Série 1 'Spectro/Chromato' : 4 TP tournants (4h) puis 1 partiel pratique de 2h /étudiant
 démarrage début S3 (amener blouse/lunettes/propipette)
►Série 2 'Électrochimie' : 4 TP tournants (4h) puis 1 partiel pratique de 2h /étudiant 
milieu S3 et début S4.
INTRODUCTION AUX METHODES CHROMATOGRAPHIQUES

Chromatographie = séparation, identification et dosage des constituants

chimiques d'un mélange complexe
→ Analyse qualitative et quantitative

Autres méthodes
RMN 9%
7%
HPLC 30%
UV-Visible
7%

Infra-rouge
11%

CPG 17%
Spectrométrie de
masse Autres méthodes
14% chromatographiques
5%
 I. Aspects Généraux
1- Principe de la Chromatographie
Phase Mobile = Eluant

A+B
B
A B
Phase Stationnaire
A
B

Détecteur A B

Chromatogramme

t0 t1 t2 t3 t4

Un chromatogramme est caractérisé par :

La position des pics Facteurs de Rétention
La largeur des pics Facteurs de Résolution
2- Facteurs de Rétention

S phase mobile S phase stationnaire

Cs Conc. du soluté dans la phase stationnaire

KNernst = =
Cm Conc. du soluté dans la phase mobile

= Coefficient de distribution de Nernst

tM = temps mort ou temps nécessaire pour

qu’un soluté non retenu traverse la colonne
tR = temps de rétention idéal
t’R = temps de rétention réel = tR - tM

Facteur de Rétention k Facteur de Séparation 

tR - tM t’R kA t’RA
k= =  = =
tM tM kB t’RB
3- Facteurs de Résolution
a) Efficacité d’une colonne : Modèle des plateaux
L : longueur de la colonne,
N : nombre de plateaux théoriques
H : hauteur équivalente à un plateau théorique (HEPT)
L
H=
N
 

N = 16 ( ) tR

= 5.54 ( )
tR

 : largeur du pic à sa base,
 : largeur du pic à mi-hauteur.

tR ,  et  en unité de temps.
Rappel sur les courbes de Gauss

68.3 % de l’aire du pic est comprise entre +s et -s

95.5 % de l’aire du pic entre +2s et -2s

En chromatographie
 est la largeur de la base du pic et  la largeur du pic à mi-hauteur

 = 2,35 s
 = 4 s = 1,7 
Mesure de l’aire des pics en chromatographie :

- Par « triangulation » manuelle

- Par intégration automatique

A = H
A = 1/2 H’  
b) Résolution d’une colonne
Facteur de résolution = R

tR2 - tR1 t’R2 - t’R1

R=2 =2
1 + 2 1 + 2

-1 k2
R = 1/4 N
 1+k 2

k 2 : facteur de rétention du soluté le plus lent.

c) Équation de Van Deemter
Aspect cinétique prenant en compte la vitesse de la phase mobile

B
B u opt. = C
H=A+ +Cu
u

u : vitesse linéaire moyenne d’écoulement,

A, B et C : coefficients expérimentaux reliés à la colonne.
d) Optimisation d’une chromatographie

résolution

capacité vitesse

O = meilleur compromis entre K, N, k, R et 

Analyse qualitative : identification des espèces grâce à leur temps de rétention

Analyse quantitative : dosage possible grâce au calcul de la surface des pics
II. Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG)

Gaz Vecteur

Injecteur Colonne Détecteur

Four

Intégrateur
1- Gaz Vecteur
Phase Mobile
Azote N2 ou Hélium He sec
Débit : 1 à 25 mL / min

2- Injecteur
Septum
Seringue

Gaz Vecteur Vaporisation instantanée du mélange

T injecteur > T ébullition du mélange
Insert

Colonne
3- Colonne
Placée dans un four ventilé T colonne > T ébullition du mélange

Trois types de colonnes :

a) Colonnes remplies en acier (diamètre 3.18 ou 6.35 mm - longueur 1 à 3 m)
b) Colonnes capillaires (diamètre 0.10 à 0.35 mm - longueur 15 à 100 m)
c, d) Colonnes ‘ wide-bore’ (diamètre 0.53 mm - longueur 5 à 50 m)
4- Phase Stationnaire
Faible tension de vapeur, grande stabilité thermique (Tebf > 100 Teb mélange), inertie chimique
a) Phase Liquide
-1- Polysiloxanes (gommes de silicone)
Stables jusqu’à 300-325 °C
La polarité varie en fonction de la nature des groupements R et R’ et de leur %

O R R R'
O Si O Si O Si O Si
O R R R'
m m n

-2- Polyéthylèneglycols

O CH2 CH2
n

b) Phase Solide
Matériaux adsorbants: Silice SiO2, Alumine AlO2, Verres, Polymères poreux
5- Détecteur
Grande sensibilité, grande stabilité thermique, réponse linéaire avec un temps de réponse rapide

a) Détecteur à Conductibilité Thermique (TCD) ou catharomètre

La variation de la résistance du filament est proportionnelle à la concentration des
substances analysées
 b) Détecteur à Ionisation de Flamme (FID)
Très utilisé pour détecter des composés organiques
La tension mesurée est proportionnelle à la concentration des produits

Electrode Intégrateur
Collectrice

Air
Brûleur
H2

Colonne
III. Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC)

Eluant Pompe

Injecteur Colonne Détecteur

Intégrateur
1- Solvant ou phase mobile
Le solvant est introduit dans la colonne par l’intermédiaire d’une pompe

Débit : 0.1 à 10 mL / min

Pression max. : 350 bars

Solvants utilisés : Eau H2O, Méthanol CH3OH, Acétonitrile CH3CN…

Un seul solvant = mode isocratique
Plusieurs solvants = gradient d’élution
2- Injecteur
L’injection doit être rapide afin de ne pas perturber la dynamique de la colonne

Pompe
Pompe

1 2 Colonne 1 2
Colonne
3 3
6 6
5 4 5 4

" Poubelle "

S eringue

Boucle

Load Inject
3- Colonne
Tube droit en acier inox
Longueur : 3 à 25 cm / Diamètre interne : 0.5 à 5 mm
4- Phase stationnaire
Gel de silice transformé SiO2(H2O)n avec n proche de 0

OEt
OEt H2O urée, formol, pH = 2
Si SiO2 matrice polymère
EtO OEt

Chauffage
O2

Groupements OH : Caractère acide (pKa = 10)

Surface Spécifique : de 5 à 350 m2 g-1
 Les silices greffées
Gels de silices transformées
 Phases monomériques
Epaisseur de 10 à 15 mm
OH O SiMe2R
ClSiMe2R
OH OH

OH O SiMe2R

gel de silice R = C8H17 ('C8'), C18H37 ('C18')

 Phases polymériques
Epaisseur 25 mm Me Me
O ...
OH O Si Si
Cl2SiMeR R
OH OH R
H2O Me
OH O Si O Me
R Si ...
gel de silice R
Les interactions entre phases stationnaires et phases mobiles
5- Détecteur
Détecteur UV-visible (loi de Lambert-Beer)

 Détection monochromatique
Source au Deutérium ou à vapeur de Hg
Monochromateur pour isoler une bande passante étroite (10 nm) ou une raie (254 nm du Hg)

 Détection polychromatique
6- Chromatographie de Partage

Phase mobile liquide

Phase stationnaire = solvant immobilisé sur grain de silice par adsorption physique ou par des
liaisons chimiques, et se comportant comme un liquide
Temps Rétention = f(Coefficient de Distribution de Nernst)

Phase mobile
: soluté

Si Phase stationnaire

: solvant immobilisé sur silice

Si-(CH2)17CH3
IV. Autres méthodes chromatographiques
1- La chromatographie ionique (CI)
Phase mobile aqueuse où les solutés sont sous forme ionique
Phase stationnaire = résine échangeuse d’ions

Colonne à rétention d’une espèce cationique M+

[Résine-SO3]-, H+ + Eluant-M+ [Résine-SO3]-, M+ + Eluant-H+

Colonne à rétention d’une espèce anionique A-

[Résine-NR3]+, OH- + Eluant-A- [Résine-NR3]+, A- + Eluant-OH-

A- E
-
N E N A N E N E
-
A E
N E N E -
N E N A

N E N E N E N E

N = groupement ammonium
E = contre-anion
A = anion à analyser
= sens de l'élution
Les résines
 Les copolymères de synthèse
Particules sphériques de 10-20 mm

n
n

SO3- H+ NR3 OH
+ -

 Les silices greffées

Obtenues par fixation de liaisons covalentes de chaînes aromatiques à groupements sulfonés
ou ammonium

Les éluants
Solutions aqueuses chargées d’ions salins ou organiques avec si nécessaire un peu de méthanol
ou d’acétone pour faciliter la dissolution des solutés
2- La chromatographie planaire ou en couche mince (CCM)

Cuve à CCM

Plaque de CCM

Front de solvant
Eluant

Fine couche de f stationnaire

(100 - 200 mm) : silice modifiée
 d0

dB

dA
Plaque de verre, de plastique ou
d'aluminium

Dépôt d'un mélange de

solutés A et B
Le rapport frontal Rf est une caractéristique donnée pour chaque couple (soluté, éluant)

Les formules générales de chromatographie peuvent s’appliquer à la CCM

distance parcourue par le soluté di

Rf = =
distance parcourue par le solvant d0

dB - dA
di 2 di
N = 16
( ) 
H=
N
R = 2
B + A
3- La chromatographie d’exclusion stérique (CES)
Séparation basée sur la taille des molécules
Les plus grosses molécules sont éluées en premier, les plus petites étant retenues au sein
de la phase stationnaire
Méthode rapide pour déterminer la masse molaire des composés étudiés

4- La chromatographie en fluide supercritique (SFC)

Un fluide supercritique a l’aspect d’un liquide et les caractéristiques d’un gaz
Il est caractérisé par sa température critique Tc et sa pression critique Pc
Les fluides supercritiques permettent de dissoudre les grosses molécules

Exemple : Dioxyde de carbone CO2

Tc = 31 °C / Pc = 7400 kPa
V. Conclusion
Masse molaire des analytes étudiés

M < 500 CPG

ionique CI, HPLC

hydrosoluble

non ionique HPLC

M < 2000
polaire HPLC

organosoluble

non polaire HPLC

M > 500

CES
hydrosoluble HPLC
CI

M > 2000

organosoluble CES