Glycolyse

Pr Aissam EL MAATAOUI
Professor of clinical chemistry
PharmD PhD
 INTRODUCTION

La glycolyse est la source principale d’énergie des

érythrocytes et certains types fibres musculaires.

Les maladies métaboliques associés au déficit de la glycolyse

sont associés à une anémie hémolytique et des myopathies.
 INTRODUCTION

Voie du catabolisme oxydatif , cytoplasmique, anaérobique

avec production de:
– Deux molécules de pyruvate (C3)
– Molécules riches en énergie (NADH,H+ et ATP)

10 réactions /10 enzymes

Deux phases
– Activation des réactifs (réaction 1 à 5), consommation
d’énergie.
– Oxydation et production d’enérgie (réaction 6 à 10)
LES RÉACTIONS DE LA
GLYCOLYSE
 R1: Hexokinase
Exergonique

-Hexokinase: Ubiquiste, non spécifique du glucose, forte affinité

(faible Km), toujours active, soumise à regulation. Inhibition
allostérique par l’ATP au niveau des muscles / Pas d’inhibition
allostérique au niveau du cerveau
-Glucokinase: hépatique et pancréatique, spécifique du glucose,
faible affinité, n’est active qu’en période post-prandiale
 R2: glucose 6-P- isomérase
transformation d’un aldose en cétose

Glucose-6-phosphate Fructose-6-phosphate
Réaction réversible

Aldose Cétose
 R3: Phosphofructokinase (PFK 1)
Exergonique

Réaction: spontanée, exergonique (DG = -25,9 kJ/mol)

-La Phosphofructokinase (PFK1):
- enzyme clé de la glycolyse
- Etape la plus lente de la glycolyse, réaction limitante
- Etape majeure de régulation de la glycolyse
 R 4+ R5: Aldolase
scission du fructose en 2 trioses
Fructose-1,6-bisphosphate 2 trioses phosphate
(isomères)
 R 6:
Glycéraldéhyde 3- phosphate déshydrogénase

Mécanisme réactionnel couplant : oxydoréduction + transfert de phosphate

Formation de NADH, H+
 R 7: Phosphoglycérate kinase (PGK)
1,3-Bisphosphoglycérate 3-Phosphoglycérate

Phosphoglycerate Kinase
O OPO 32− ADP ATP O O−
1C 1
C
H 2C OH H 2C OH
2− Mg2+ 2−
3 CH 2 OPO 3 3 CH 2 OPO 3

1,3-bisphospho- 3-phosphoglycerate
glycerate

- Réaction de phosphorylation liée au substrat:

Produit une molécule d’ATP
 R 8: Phosphoglycérate mutase
3-phosphoglycerate 2-phosphoglycerate
 R9: Enolase
Réaction de déshydratation Mg++-dependent
 R 10: Pyruvate Kinase

- Réaction exergonique irréversible

- Enzyme clé de la glycolyse
- Le phosphate est transféré à l’ADP avec formation d’ATP
(Phosphorylation au niveau du substrat)
En Résumé
Bilan énergétique
1 glucose + 2 ATP + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+
10 enzymes

2 pyruvate + 2 NADH, H+ + 2 H2O + 4 ATP

 BILAN DE LA GLYCOLYSE
• Glycolyse (-O2)
– Réactions 7 et 10 : 4ATP
– Départ : Réactions 1 et 3 : dépense - 2 ATP
– Bilan net 2 ATP

• GLYCOLYSE (+ O2)
– Réaction 6: 2 NADH réd.(CRM) 6 ATP
– Réactions 7 et 10 : Kinase 4 ATP
– Départ : Réactions 1 et 3 : dépense - 2 ATP
– Bilan net 8 ATP
12
La destinée de NADH et Pyruvate
Oxydation mitochondriale Réduction en lactate Reduction en ethanol

1 NADH --> ~3 ATP levure

 Bilan global variable
• Condition anaérobiques: pyruvate lactate

• Condition aérobiques: mitochondrie

• Pyruvate: cycle de krebs

• NADH, H+: chaine respiratoire mitochondriale (3 ATP)

Régulation de la glycolyse
Objectif et moyens de la régulation
• Piloter la glycolyse en fonction de chaque organe: foie, muscle ++++
– Gain d’énergie
– Production de matériaux de biosynthèse

• Régulation intéresse les enzymes clés

– Catalysent réactions fortement exergoniques
– Irréversibles

• Grande importance l’étape limitante

– Catalysée par enzyme clé
– Réaction la plus lente de la voie métabolique: vitesse dépendante de
l’activité enzymatique et non de la fourniture du substrat

• Moyens de régulation: transcriptionnelle, covalente, cinétique,

allostérique,…..
 Les étapes clés de la glycolyse

Les enzymes catalysant des réactions très exergoniques

– Hexokinase

– Phosphofructokinase-1 (PFK1)

– Pyruvate kinase
 DGo' DG
Glycolysis Enzyme/Reaction kJ/mol kJ/mol
Hexokinase -20.9 -27.2
Phosphoglucose Isomerase +2.2 -1.4
Phosphofructokinase 1 -17.2 -25.9
Aldolase +22.8 -5.9
Triosephosphate Isomerase +7.9 negative
Glyceraldehyde-3-P Dehydrogenase -16.7 -1.1
& Phosphoglycerate Kinase
Phosphoglycerate Mutase +4.7 -0.6
Enolase -3.2 -2.4
Pyruvate Kinase -23.0 -13.9
*Values in this table from D. Voet & J. G. Voet (2004) Biochemistry, 3rd Edition, John
Wiley & Sons, New York, p. 613.
 1) Régulation de l’Hexokinase:
contrôle allostérique
Hexoses
(glucose,
Glucose
fructose, galactose)
ATP
Glucokinase Hexokinase
(liver; pancreas)

Pas de régulation allostérique

ADP

Glucose-6-P Hexose-6-P
(G6P) Feedback inhibition
par glucose-6-P

glucose-6-phosphate: inhibiteur allostérique de l’hexokinase

 2- Régulation de la PFK1
contrôle allostérique

Phosphofructokinase
6 CH OPO 2− 1CH2OH 6 CH OPO 2− 1CH2OPO32−
2 3 2 3
O ATP ADP O
5 H HO 2 5 H HO 2

H 4 3 OH Mg2+ H 4 3 OH
OH H OH H
fructose-6-phosphate fructose-1,6-bisphosphate
 PFK1: Étape limitante glycolyse+++
- Inhibiteurs allostériques: ATP, citrate

- Activateur allostérique: Fructose 2,6 biphosphate (F2,6BP)

– Provient du fructose 6 P
– Enzyme bifonctionnelle PFK2:
• Une partie PFK2 (phosphofructokinase 2)
• Une partie F2,6BPase2 (fructose 2,6 biphosphatase)
 Formes interconvertibles du PFK2
Passage de la forme phosphorylée à la forme déphosphorylée: contrôle hormonal

• Dans le foie:
– Forme déphosphorylée, à activité PFK2 (active)
– Forme phosphorylée, à activité F2,6BPase
• En période post prandiale, L’insuline:
– active la phosphodietérase, déphosphorylation de la PFK2 (active )
– Production de F2,6BP
– Activation de la glycolyse et inhibition de la gluconéogenèse.
• En période de jeûne physiologique, le glucagon:
– active la PKA, formation de l’AMPc, phosphorylation de la PFK2:
inactive
– déphosphorylation F2,6BP : inhibition de la glycolyse
– Glucose réservé aux tissus gluco-dépendants
3- Régulation de la Pyruvate kinase
contrôles: allostérique et covalent

Pyruvate Kinase
O O− O O−
ADP ATP
C
1 1
C

2
C OPO 32− 2
C O

3 CH2 3 CH3
phosphoenolpyruvate pyruvate

Delta G = -27,2 kJ/mol

• Régulation allostérique de la pyruvate kinase:

– Activateur allostérique: F-1,6-BP (témoin de l’activité de la

glycolyse)

– Inhibiteurs allostériques : acétyl- CoA, ATP, Alanine et citrate

• Régulation covalente hormonale de la pyruvate

kinase:

– Forme déphosphorylée active

• Dephosphorylation par l’insuline par l’intremédiaire d’une
phosphatase

– Forme phosphorylée inactive

• Phosphorylation par le Glucagon par l’intermédiaire de
l’ AMPc et protéine kinase A (PKA)
 Glucagon +

proteine kinase A
ATP ADP
Pyruvate
+ ATP

OH OPO32-
citrate
Pyruvate
Pyruvate
Kinase
- ATP
alanine kinase
(active) (inactive)
Pi

Phosphoenolpyruvate proteine
+ ADP phosphatase

Insulin +

Régulation dans le foie de la pyruvate kinase.

 Hiérarchisation des principaux moyens de régulation
métabolique
• Régulation allostérique: immédiate et brève (ms ou min)
effecteurs formés dans la cellule influencent activité enzymatique sans
modifier le site actif de l’enzyme
– ATP, NADH,H+ et citrate: témoins disponibilité de l’énergie, inhibent glycolyse
– AMP, ADP: témoins déficit énergie, activateurs glycolyse
• Régulation covalente, Phosphorylation- déphosphorylation: moins
immédiate et moins brève (s ou min)
enclenchement ou extinction de l’activité enzymatique sous l’influence
d’hormones, avec amplification de la réponse au signal
– Glucagon: secrété quand glycémie basse, augmente concentration AMPc
(signal de faim), phosphorylation et activation des enzymes clés de glycolyse
– Insuline: effet inverse glucagon, déphosphorylation et inhibition enzymes
glycolyse
• Induction ou répression de gènes: à long terme (délai en heures ou jours)
– gènes codant les enzymes
5- Utilisation d’autres sucres dans glycolyse
6- Principales anomalies de la glycolyse
 Déficit enzymatique héréditaire: déficit en pyruvate kinase érythrocytaire

Dans les hématies l’ATP est utilisée pour assurer le fonctionnement de la pompe
sodium (Na)-potassium (K) afin de maintenir le taux de K intracellulaire

Déficit en pyruvate kinase : déficit en ATP, la pompe NA-K est non

fonctionnelle: hémolyse, ictère, anémie.
 Déficit en transporteurs
Déficit en GLUT2
• syndrome de Fanconi-Bickel
(SFB)

• Accumulation de glycogène
dans le foie et les reins

• Hépatosplénomégalie

• Insuffisance rénale tubulaire

sévère
 La glycolyse
Ce qu’il faut retenir
• Glycolyse: voie catabolique cytoplasmique

• 1 glucose → 2 pyruvate + 2ATP + 2NADH,H+

• Devenir des produits de la glycolyse:

variable en fonction conditions aérobiques ou
anaérobiques de la cellule

• Régulation de la glycolyse: +++

– Intéresse réactions irréversibles
– Enzymes clés: HK, PFK 1, et PK