FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE

D’AGADIR

GLYCOLYSE
Pr Aissam EL MAATAOUI
Professeur de Chimie clinique
Pharmacien spécialiste en Biologie médicale
Docteur es-sciences
prelmaataoui@gmail.com

1
 INTRODUCTION

La glycolyse est la source principale d’énergie des

érythrocytes et certains types fibres musculaires.

Les maladies métaboliques associés au déficit de la glycolyse

sont associés à une anémie hémolytique et des myopathies.
 INTRODUCTION

Voie du catabolisme oxydatif , cytoplasmique, anaérobique

avec production de:
– Deux molécules de pyruvate (C3)
– Molécules riches en énergie (NADH,H+ et ATP)

10 réactions /10 enzymes

Deux phases
– Activation des réactifs (réaction 1 à 5), consommation
d’énergie.
– Oxydation et production d’enérgie (réaction 6 à 10)
LES RÉACTIONS DE LA
GLYCOLYSE
 R1: Hexokinase
Exergonique

-Hexokinase: Ubiquiste, non spécifique du glucose, forte affinité

(faible Km), toujours active, soumise à regulation. Inhibition
allostérique par l’ATP au niveau des muscles / Pas d’inhibition
allostérique au niveau du cerveau
-Glucokinase: hépatique et pancréatique, spécifique du glucose,
faible affinité, n’est active qu’en période post-prandiale
 R2: glucose 6-P- isomérase
transformation d’un aldose en cétose

Glucose-6-phosphate Fructose-6-phosphate
Réaction réversible

Aldose Cétose
 R3: Phosphofructokinase (PFK 1)
Exergonique

Réaction: spontanée, exergonique (DG = -25,9 kJ/mol)

-La Phosphofructokinase (PFK1):
- enzyme clé de la glycolyse
- Etape la plus lente de la glycolyse, réaction limitante
- Etape majeure de régulation de la glycolyse
 R 4+ R5: Aldolase
scission du fructose en 2 trioses
Fructose-1,6-bisphosphate 2 trioses phosphate
(isomères)
 R 6:
Glycéraldéhyde 3- phosphate déshydrogénase

Mécanisme réactionnel couplant : oxydoréduction + transfert de phosphate

Formation de NADH, H+
 R 7: Phosphoglycérate kinase (PGK)
1,3-Bisphosphoglycérate 3-Phosphoglycérate

Phosphoglycerate Kinase
O OPO 32− ADP ATP O O−
1C 1
C
H 2C OH H 2C OH
2− Mg2+ 2−
3 CH 2 OPO 3 3 CH 2 OPO 3

1,3-bisphospho- 3-phosphoglycerate
glycerate

- Réaction de phosphorylation liée au substrat:

Produit une molécule d’ATP
 R 8: Phosphoglycérate mutase
3-phosphoglycerate 2-phosphoglycerate
 R9: Enolase
Réaction de déshydratation Mg++-dependent
 R 10: Pyruvate Kinase

- Réaction exergonique irréversible

- Enzyme clé de la glycolyse
- Le phosphate est transféré à l’ADP avec formation d’ATP
(Phosphorylation au niveau du substrat)
En Résumé
Bilan énergétique
1 glucose + 2 ATP + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+
10 enzymes

2 pyruvate + 2 NADH, H+ + 2 H2O + 4 ATP

 BILAN DE LA GLYCOLYSE
• Glycolyse (-O2)
– Réactions 7 et 10 : 4ATP
– Départ : Réactions 1 et 3 : dépense - 2 ATP
– Bilan net 2 ATP

• GLYCOLYSE (+ O2)
– Réaction 6: 2 NADH réd.(CRM) 6 ATP
– Réactions 7 et 10 : Kinase 4 ATP
– Départ : Réactions 1 et 3 : dépense - 2 ATP
– Bilan net 8 ATP
12
La destinée de NADH et Pyruvate
Oxydation mitochondriale Réduction en lactate Reduction en ethanol

1 NADH --> ~3 ATP levure

 Bilan global variable
• Condition anaérobiques: pyruvate lactate

• Condition aérobiques: mitochondrie

• Pyruvate: cycle de krebs

• NADH, H+: chaine respiratoire mitochondriale (3 ATP)

Régulation de la glycolyse
Objectif et moyens de la régulation
• Piloter la glycolyse en fonction de chaque organe: foie, muscle ++++
– Gain d’énergie
– Production de matériaux de biosynthèse

• Régulation intéresse les enzymes clés

– Catalysent réactions fortement exergoniques
– Irréversibles

• Grande importance l’étape limitante

– Catalysée par enzyme clé
– Réaction la plus lente de la voie métabolique: vitesse dépendante de
l’activité enzymatique et non de la fourniture du substrat

• Moyens de régulation: transcriptionnelle, covalente, cinétique,

allostérique,…..
 Les étapes clés de la glycolyse

Les enzymes catalysant des réactions très exergoniques

– Hexokinase

– Phosphofructokinase-1 (PFK1)

– Pyruvate kinase
 DGo' DG
Glycolysis Enzyme/Reaction kJ/mol kJ/mol
Hexokinase -20.9 -27.2
Phosphoglucose Isomerase +2.2 -1.4
Phosphofructokinase 1 -17.2 -25.9
Aldolase +22.8 -5.9
Triosephosphate Isomerase +7.9 negative
Glyceraldehyde-3-P Dehydrogenase -16.7 -1.1
& Phosphoglycerate Kinase
Phosphoglycerate Mutase +4.7 -0.6
Enolase -3.2 -2.4
Pyruvate Kinase -23.0 -13.9
*Values in this table from D. Voet & J. G. Voet (2004) Biochemistry, 3rd Edition, John
Wiley & Sons, New York, p. 613.
 1) Régulation de l’Hexokinase:
contrôle allostérique
Hexoses
(glucose,
Glucose
fructose, galactose)
ATP
Glucokinase Hexokinase
(liver; pancreas)

Pas de régulation allostérique

ADP

Glucose-6-P Hexose-6-P
(G6P) Feedback inhibition
par glucose-6-P

glucose-6-phosphate: inhibiteur allostérique de l’hexokinase

 2- Régulation de la PFK1
contrôle allostérique

Phosphofructokinase
6 CH OPO 2− 1CH2OH 6 CH OPO 2− 1CH2OPO32−
2 3 2 3
O ATP ADP O
5 H HO 2 5 H HO 2

H 4 3 OH Mg2+ H 4 3 OH
OH H OH H
fructose-6-phosphate fructose-1,6-bisphosphate
 PFK1: Étape limitante glycolyse+++
- Inhibiteurs allostériques: ATP, citrate

- Activateur allostérique: Fructose 2,6 biphosphate (F2,6BP)

– Provient du fructose 6 P
– Enzyme bifonctionnelle PFK2:
• Une partie PFK2 (phosphofructokinase 2)
• Une partie F2,6BPase2 (fructose 2,6 biphosphatase)
 Formes interconvertibles du PFK2
Passage de la forme phosphorylée à la forme déphosphorylée: contrôle hormonal

• Dans le foie:
– Forme déphosphorylée, à activité PFK2 (active)
– Forme phosphorylée, à activité F2,6BPase
• En période post prandiale, L’insuline:
– active la phosphodietérase, déphosphorylation de la PFK2 (active )
– Production de F2,6BP
– Activation de la glycolyse et inhibition de la gluconéogenèse.
• En période de jeûne physiologique, le glucagon:
– active la PKA, formation de l’AMPc, phosphorylation de la PFK2:
inactive
– déphosphorylation F2,6BP : inhibition de la glycolyse
– Glucose réservé aux tissus gluco-dépendants
3- Régulation de la Pyruvate kinase
contrôles: allostérique et covalent

Pyruvate Kinase
O O− O O−
ADP ATP
C
1 1
C

2
C OPO 32− 2
C O

3 CH2 3 CH3
phosphoenolpyruvate pyruvate

Delta G = -27,2 kJ/mol

• Régulation allostérique de la pyruvate kinase:

– Activateur allostérique: F-1,6-BP (témoin de l’activité de la

glycolyse)

– Inhibiteurs allostériques : acétyl- CoA, ATP, Alanine et citrate

• Régulation covalente hormonale de la pyruvate

kinase:

– Forme déphosphorylée active

• Dephosphorylation par l’insuline par l’intremédiaire d’une
phosphatase

– Forme phosphorylée inactive

• Phosphorylation par le Glucagon par l’intermédiaire de
l’ AMPc et protéine kinase A (PKA)
 Glucagon +

proteine kinase A
ATP ADP
Pyruvate
+ ATP

OH OPO32-
citrate
Pyruvate
Pyruvate
Kinase
- ATP
alanine kinase
(active) (inactive)
Pi

Phosphoenolpyruvate proteine
+ ADP phosphatase

Insulin +

Régulation dans le foie de la pyruvate kinase.

 Hiérarchisation des principaux moyens de régulation
métabolique
• Régulation allostérique: immédiate et brève (ms ou min)
effecteurs formés dans la cellule influencent activité enzymatique sans
modifier le site actif de l’enzyme
– ATP, NADH,H+ et citrate: témoins disponibilité de l’énergie, inhibent glycolyse
– AMP, ADP: témoins déficit énergie, activateurs glycolyse
• Régulation covalente, Phosphorylation- déphosphorylation: moins
immédiate et moins brève (s ou min)
enclenchement ou extinction de l’activité enzymatique sous l’influence
d’hormones, avec amplification de la réponse au signal
– Glucagon: secrété quand glycémie basse, augmente concentration AMPc
(signal de faim), phosphorylation et activation des enzymes clés de glycolyse
– Insuline: effet inverse glucagon, déphosphorylation et inhibition enzymes
glycolyse
• Induction ou répression de gènes: à long terme (délai en heures ou jours)
– gènes codant les enzymes
5- Utilisation d’autres sucres dans glycolyse
6- Principales anomalies de la glycolyse
 Déficit enzymatique héréditaire: déficit en pyruvate kinase érythrocytaire

Dans les hématies l’ATP est utilisée pour assurer le fonctionnement de la pompe
sodium (Na)-potassium (K) afin de maintenir le taux de K intracellulaire

Déficit en pyruvate kinase : déficit en ATP, la pompe NA-K est non

fonctionnelle: hémolyse, ictère, anémie.
 Déficit en transporteurs
Déficit en GLUT2
• syndrome de Fanconi-Bickel
(SFB)

• Accumulation de glycogène
dans le foie et les reins

• Hépatosplénomégalie

• Insuffisance rénale tubulaire

sévère
 La glycolyse
Ce qu’il faut retenir
• Glycolyse: voie catabolique cytoplasmique

• 1 glucose → 2 pyruvate + 2ATP + 2NADH,H+

• Devenir des produits de la glycolyse:

variable en fonction conditions aérobiques ou
anaérobiques de la cellule

• Régulation de la glycolyse: +++

– Intéresse réactions irréversibles
– Enzymes clés: HK, PFK 1, et PK