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TRAVAUX DIRIGES

TRADUCTION
Exercice III :
Un fragment d’ADN bicaténaire a été isolé à partir d’E. coli. La séquence suivante représente
un des deux brins : 5’ GTAGCCTACCCATAGG 3’

1) Un ARN messager est transcrit à partir de cet ADN en utilisant le brin complémentaire
comme brin matrice. Quelle sera la séquence nucléotidique de cet ARN messager ?
5’ GUAGCCUACCCAUAGG 3’

2) Quel peptide obtiendrait-on si la traduction commençait précisément à l’extrémité 5’


de cet ARNm ? (in vitro, aucun codon de départ n’est nécessaire).
Nt Val-Ala-Tyr-Pro Ct

3) Décrire les événements, au niveau du ribosome, depuis l’arrivée de l’ARNtAla jusqu’à


son départ.
Voir les détails sur votre document de cours « Procaryote/ traduction/élongation »

Exercice IV :
Quelques acides aminés ont été enlevés à l’extrémité C-terminale de la β-lactamase de type
sauvage. Comparer cette séquence à celle d’un mutant pour lequel la phase de lecture a été
décalée d’un nucléotide (insertion ou délétion). On donne ci-dessous les séquences en acides
aminés à partir du résidu 263.

On peut déduire la séquence nucléotidique des ARNm


avec N= (A,G,C ou U), Y= (U ou C) et R= (A ou G) et (X=U,C ou A)

ARNm sauvage : AAY-AUG-AAY-GGN-AAR-???


β-lactamase Sauvage : Asn-Met-Asn -Gly -Lys- ???

ARNm mutant : AAY-AUG-AUX-UGG-GAR-AUX-UGY-GUN-AUG-AAR-GAR-Stop (URR)


β-lactamase Mutant : Asn-Met- Ile – Trp -Glu- Ile - Cys- Val -Met- Lys-Asp -Stop

Quel type d’événement mutationnel a donné naissance au mutant ? Justifier.


L’insertion d’un résidu U sur l’ARNm sauvage rend compte des modifications observées sur
l’ARNm mutant et par conséquent sur la β-lactamase du mutant. L’insertion a lieu entre les
deux résidus adénine (AAY) correspondant à l’Asn en position 265 du polypeptide sauvage.

On peut donc en déduire que la séquence de l’ARNm sauvage (en enlevant U du mutant) :
263 -264-265- 266- 267- 268- 269- 270?
AAY-AUG-AAU-GGG-AAA-UXU-GYG-UNA-UGA-ARG-AR-(UAA, UAG ou UGA)

UNA peut être traduite en Leu (UUA), Ser (UCA) ou en Stop (UAA, UGA)
UGA est un codon Stop

-1-
Déterminer le nombre d’acides aminés enlevés à l’extrémité C-terminale de la β-lactamase de
type sauvage. En déterminer si possible la séquence C-terminale.

Par conséquent, deux possibilités d’avoir le premier codon stop sur l’ARNm sauvage.
Le dernier résidu acide aminé sur le polypeptide sauvage :
- portera le numéro 269 (Val ou Ala) avec Stop (UAA ou UGA)
- ou bien le numéro 270 (Leu ou Ser) avec Stop (UGA)

Le nombre d’acides aminés enlevés à l’extrémité C-terminale de la β-lactamase de type


sauvage est respectivement 2 ou 3.

Exercice V :
Soit la séquence suivante d’un ARNm :
…………… U A C G A U G U C A G A C C …………
Au cours de la traduction, on obtient le peptide commençant par les acides aminés suivants :
Met – Ser – Asp - ……………

Si au cours d’une mutation le C indiqué par une flèche est transformé en U, quelle séquence
peptidique est alors obtenue ?

…………… U A C G A U G U C A G A C C ……

Met - Ser - Asp

…………… U A C G A U G U U A G A C C ……

Met - Leu - Asp

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