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Aspect microscopique
Bacilles Gram +
prsentant une spore
lEF : mobiles le
plus souvent par
ciliature pritriche
Distinction de trois
groupes:
Bacillus spore
ovale non dformante,
Bacillus spore
ovale dformante,
Bacillus spore
ronde dformante
Observation au MEB
Bacillus anthracis
Observation microscopique
Grand bacille (5 m de long, 1
m de large),
Gram +,
Formant une spore ovalaire
centrale non dformante.
immobiles
capsul
Caractres biochimiques:
AAF, glucose +, non exigeant, VP
+ (caractre de la classification
des Bacillus), glatinase +,
urase -, maltose +, saccharose
+ trois facteurs agissant
Il labore une toxine comprenant
en synergie:
facteur I oedmatogne
facteur II immunogne
facteur III ltal
Incuber 24 heures
37C
Glose loeuf
Glose trypticase-soja 10% de jaune duf strile
Ensemencer par une strie centrale
partir dune suspension
bactrienne.
Ou en faisant 5 ou 6 dpts dse
sur la glose
Incuber 24 heures
37C
Milieu TCA
Source N
Composition
Peptone trypsique de casine
Chlorure de sodium
Sulfite de sodium
Cystine
Rouge de phnol
Glose
ED
pH = 6,8 7
20 g
5g
0,5 g
0,5 g
0,017 g
2,5 g
qsp 1 L
Sources minrales
Source de C et N
Indicateur de pH
Ensemencement
Rgnrer les milieux 20 min au BM 100C.
Refroidir les tubes 45C.
Incorporer le sucre dsir pour une concentration
finale de 1% (10g.L-1).
Solidifier les milieux sous leau froide.
Ensemencer par piqre centrale.
Incuber 24 heures 37C.
Milieu de Mossel
Composition
Extrait de viande
Peptone
Mannitol
Chlorure de sodium
Rouge de phnol
Agar
ED
pH = 7,1
Source N
1g
10 g
10 g
10 g
0,025 g
12 g
qsp 1 L
Sources de carbone
Sources minrales
Indicateur de pH
Ensemencement
Glose au lait
Glose blanche 2,5 3% dagar en solution dans leau dans
laquelle on ajoute la mme quantit de lait strile.
Ensemencer en faisant 5 ou 6
dpts dse sur la glose
Incuber 24 heures
37C
Glose lamidon
Glose luf
Lecture directe:
claircissement du milieu de
culture les bactries ont
hydrolys les lcithines du
jaune duf , test positif
Pas de changement du milieu
test ngatif
Glose Mossel
Colonies rouges entoures dun
halo opaque et blanchtre
suspicion de Bacillus cereus,
LECITHINASE +++
Glose au lait
Lecture directe aprs culture
Correction du TP
1er jour
2nd jour
Coloration des spores au vert de
Malachite
Lecture du VF
N impair: culture en surface AS
1re orientation: bacilles Gram +, mobiles, catalase
+, VP+, non exigeants,(sporogne), AS
orientation vers le genre Bacillus.
N pair: culture dans tout le tube
AAF
1re orientation: Bacilles Gram +, mobiles,
VP+, non exigeants, sporognes, AAF
orientation vers le genre Bacillus.
gluco
se
Virage de lindicateur
de pH glucose +
xylos
e
Virage de lindicateur
de pH xylose +
arabino
se
Virage de lindicateur
de pH arabinose +
N pair
gluco
se
Virage de lindicateur
de pH glucose +
xylos
e
Pas de virage de
lindicateur de pH
xylose -
arabino
se
Pas de virage de
lindicateur de pH
arabinose -
n
impair
Pas de modification autour de la
culture les lcithines nont pas
t hydrolyses.