Forêt boréale du Québec :

Une bonne source de produits

à haute valeur ajoutée?

Par
André Pichette, Ph.D.
Jean Legault, Ph.D.
Produits naturels importants des
années 1800 …

Quinine (1820) Strychnine (1818) Morphine (1804)

Quinquina (Cinchona officinalis) Vomiquier (Strychnos nux-vomica) Pavot (Papaver somniferum)

Produits naturels importants des
années 1900

Pénicilline G (benzylpenicilline)
Produits naturels importants
(1956)

Vancomycine
(Streptomyces orientalis*)

*Bactérie renommée Amycolatopsis orientalis

Autres médicaments provenant
des micro-organismes

Mévastatine Lovastatine
(Hypolipidémiant) (Hypolipidémiant)
Le paclitaxel (Taxol®)
AcO O
OH
O O

N O
H

OH
H O
HO AcO
O
O

 Actif contre le cancer du sein (1992), de 
l’ovaire (1994) et du poumon  (1999).
 Vente de taxol en 2000 : près de 2 
milliards US $.
 Valorisation des ressources forestières
Pâtes et papiers
Bois d’oeuvre

Biocarburants
Bioénergie thermique

Bioproduits

Cosmétique
Produits chimiques,
Précurseurs de synthèse
Pharmaceutique et nutraceutique

Transformer l’industrie canadienne des produits forestiers

Association des produits forestiers du Canada (APFC) Février 2010
 LA FORÊT BORÉALE :
UNE SOURCE DE
NOUVEAUX MÉDICAMENTS

• Le nombre de plantes (angiosperme et gymnosperme) à travers

le monde est estimé à près de 300 000 espèces.

• Seulement 6% ont été évaluées pour leur activité biologique.

• La composition chimique de 15% des plantes a été étudiée.

• Plus de 3000 plantes inventoriées dans la forêt boréale.

• Utilisation de plusieurs plantes à des fins médicinales par les

amérindiens et les premiers colons.
 Pharmaceutique

Activité anticancéreuse

Activité antibiotique (SARM)

Activité antivirale (herpès, influenza, VIH)

Activité anti-inflammatoire
Activité cytotoxique de l’huile
essentielle de sapin baumier
Composé responsable de l’activité de l’HE de
sapin

 L’-humulène, un sesquiterpène
responsable de l’activité anticancéreuse de
l’huile essentielle de sapin baumier 6

6
Legault, J. et al. Planta Med. 2003, 69, 402.
 L’IC50 de l’α-humulène ne peut justifier
l’activité antitumorale de l’HE de sapin
baumier
• Relation de synergie ou de
potentialisation7
32

16
Paclitaxel (nM)

0 10 20 30 40 50 60
Inhibition de la croissance cellulaire (%)

Taxol + terpène (200 µM)

Taxol + terpène (12.5 µM)
Taxol
7
Legault, J., Pichette, A. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2007, 59, 1-5.
 Effet potentialisateur du caryophyllène en
combinaison avec le docetaxel sur des souris
porteuses de tumeurs LLC

40 + FPL-99 (6.25 mg/kg)

Tumor growth inhibition (%)

35

30

25  FPL-99 in combination with Taxotere®

more than doubles growth inhibition of
20 Taxotere® alone
15  Very low toxicity was observed

10

0
FPL-99
(6.25 mg/kg) Taxotere Taxotere
(5 mg/kg) (10 mg/kg)

Treatments
Effet potentialisateur du caryophyllène
avec plusieurs agents anticancéreux
sur différentes cellules

Potentiating effect
No effect
Antagonist effect
Not determined
 Écorces du bouleau blanc: source
d’anticancéreux

H R

H
HO
H
1 R = COOH
2 R = CH2OH
3 R = CH3
Papyriferoside
Triterpènes (%) (diarylheptanoïde)

Acide bétulinique (1) 5,4

Bouleau blanc
(Betula papyrifera) Bétulinol (2) 72,4
Lupéol (3) 5,9
Gauthier, C. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry 2006, 14,
6713.
Mshvildadze, V. et al. Phytochemistry 2007, 68, 2531.
 Efficacité in vivo de l’acide
bétulinique
(modèle murin MEL-1, sous cutanée)

Pisha et al. Nature Medicine, 1995, 1, 1046-1051.

 Acide Bétulinique: un Agent Anticancéreux
Prometteur

OH

HO

• Préparé à partir du bétulinol.

• Antivirale spécifique VIH de type 1 (PA-457 ou bevirimat).
• Cytotoxicité sélective envers cellules cancéreuses.
• Pas d’effet secondaire notable chez la souris (doses >500
mg•kg-1).
• Inclus sur le programme RAID du National Cancer Institute.*

Pichette, A. et al. Synthetic Communications 2004, 34,

3925.
Cichewicz, R. H. et al. Medical Research Review 2004, 24,
90.
Adamson, C. S. et al. Journal of Virology 2006, 80, 10957.
Kessler, J. H. et al. Cancer Letter 2007, 251, 132.
Pisha, E. et al. Nature Medecine 1995, 1, 1046.
 - Développement de BetA entravé par sa faible
biodisponiblité
• Non-respect d’une des règles de Lipinski -(Log P >5).
• Faible hydrosolubilité (0,02 μg•mL-1).
• Problèmes avec la formulation et le mode d’administration.
Solution? Coupler sections polaires hydrosolubles (positions 3
et 28)
O O
H H
N N
OH O
O H O NHBoc

HO O

HO
O OAc

O O

AcO O
OH

Jäger et al. Planta Med. 2007, 73, 157.

Jeong et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 1201.
Saxena et al. Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 6349.
Kvanisca et al. Bioorg. Med. Chem. 2005, 13, 3447.
 Approche: Préparation de
glycosides
Pourquoi préparer des glycosides
triterpéniques ?
Triterpène  Nombreux glycosides naturels (rôle de
transporteurs au sein des plantes)
 Améliorer l’hydrosolubilité et/ou ADME
Sucre OH
 Augmenter l’activité anticancéreuse
OH O  Cibler les cellules cancéreuses (sélectivité)
O
HO O  Glycosides de source naturelle (isolation, <
OH %)
 Glycosides hémisynthétiques (>%)
 Étude des relations structure-activité (SAR)
- Activité anticancéreuse des glycosides d’acide bétulinique -

OH OH

HO
BetA
IC50 = 10,3 µM (A549)
IC50 = 12 µM (WS1)
Faible sélectivité
(Molécule naturelle)
HO
Bet
IC50 = 3,8 µM (A549)
IC50 = 3,6 µM (WS1)
Aucune sélectivité
(Molécule naturelle)

OH OH OH
HO O
HO
HO
HO O
HO O O
OH
XylBet ManBet
IC50 = >75 µM (A549) IC50 = 7,3 µM (A549)
IC50 =>75 µM (WS1) IC50 = 5,1 µM (WS1)
Inactif Aucune sélectivité
(Molécule naturelle)

OH OH

O O

O O O
OH
OH O
OH AraBetA HO RhaBetA
IC50 = 10 µM (A549) HO IC50 = 2,6 µM (A549)
IC50 = 47 µM (WS1) OH IC50 = 31 µM (WS1)
Sélectivité 5x Sélectivité 12x
(Molécule naturelle)

Gauthier et al. Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 6713.

Thibeault, D. et al. Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 6144.
Pichette, Legault, Gauthier, Canadian & United States Patent application 2008, 73
 DÉCOUVERTE DES ANTIBIOTIQUES

Penicilline (1928)

Alexander Fleming
 Introduction des nouvelles classes d’antibiotiques

1940 1950 1960 1970 1980 1990 2000

TMP 1970 Lipopeptides

2003
Quinolones 1962
Daptomycin
Streptogramines 1962
Oxazolidinones
Glycopeptides 1958 2000
Macrolides 1952
Aminoglycosides 1950
Chloramphenicol 1949
Linezolide
Tetracyclines 1949
Penicillines 1940
Sulfas 1936 TMP : triméthoprime
APPARITION DES BACTÉRIES RÉSISTANTES

Staphylococcus Aureus
Résistant à la Méthycilline.
(SARM)

Entérocoque Résistant à
la Vancomycine
(ERV)
 Composés antibactériens de
Populus balsamifera

Extrait EtOH de
P. balsamifera

Soluble dans Soluble dans

l’hexane le méthanol

Soluble dans Soluble dans

l’éther l’eau
 HO OH R1

R2

OH O

Famille 1
R3
R5

HO O


R6 R4

OH

Famille 2

Chromatographie SiO2 + Chromatographie C-18

HPLC semi-réparatif
Développement d’une banque de Staphylococcus
aureus résistant à la méthycilline (SARM)
70
S. aureus sensible
SARM ˃ 62,5 µM ˃ 62,5 µM ˃ 62,5 µM

60

50
MIC90 (µM)

40

30

20

˃ 12,5 µM

10

3,1 µM
1 µM 0,5 µM 0,5
0
Rifampicin Cefotoxin Amoxicillin Levofloxacin
Activité des composés isolés de P. balsamifera
sur S. aureus sensible et les SARM
70
S. aureus sensible
SARM
> 62,5 > 62,5 > 62,5
60 HO OH R1

R2

50 OH O

Famille 1
MIC90 (µM)

R3
40 R5

HO O



30 R6 R4

OH

Famille 2
20
>12,5
10
3,1
1,5 1,5 0,5 1,5 1 0,5 0,5
0
Famille 2 Famille 1 Rifampicin Cefotoxin Amoxicillin Levofloxacin
 Nutraceutique et
Nutrition animale
µmole Trolox/mg 25 10 X Activité antioxydante
20

15

10 O2
280 articles scientifiques
5 700 produits commerciaux

0
Épinette noire Pycnogenol
(écorces)

Fibroblastes de peau humaine

 Cosmétique

Fibroblastes de peau humaine en culture

Activité antioxydante

Activité anti-inflammatoire

Stimulation de la production du collagène

Stimulation de la production de l’élastine

Inhibition de la collagénase et de l’élastase

AGE CONTROL SUPREME
AGING OF THE SKIN

Ceramides

Oxidatio Collagen Loss of

n Elastin function

Inflammatio Collagenase
n
AGING
Elastase

Skin structure
LABRADOR TEA LEAVES EXTRACT
(Ledum groenlandicum)
Development of an innovative
method of extraction

Extract rich in phenolic compounds

Anti-aging property:
– Antioxidant

Extract rich in Ursolic Acid

Anti-aging properties:
– Anti-inflammatory
– Anti-elastase
– Anti-collagenase
– Stimulates the production
of ceramides
 Sélection des plantes à étudier
• Médecine traditionnelle Amérindienne
– Native American Ethnobotany (Moerman)
– Use of plants for food and medicine by Native
Peoples of eastern Canada (Arnason)
• Folklore
• Informations de nature écologique
• Utilisations traditionnelles de plantes
apparentées
– Médecine traditionnelle chinoise
 Remerciements

Charles Gauthier, Balla Sylla, Marianne Piochon,

Serge Lavoie, Anne-Françoise Close, Sylvain
Mercier, Doriane Avezard, Hubert Marceau, Alexis
St-Gelais, Hassan Haffad, Vakhtang Mshvildadze,
François Simard, Hélène Gagnon, Carole Grenon,
Simon Rondeau, Dominic Thibeault, Jimmy
Bouchard, Philippe Dufour, Samuel Tremblay, Karl
Girard-Lalancette, Cindy Tremblay, Catherine
Dussault, Line Bouchard, Isabelle Côté.
 REMERCIEMENTS
 UQAC, FUQAC, IRSC, CRSNG, FRSQ,
FQRNT, FCI, MEQ, FPL Pharma, INSERM,
MRN, Scierie Thomas-Louis Tremblay,
Industries John Lewis, Groupe Marcelle-Lise
Watier, DEC, IRDA, Santé Canada, Agriculture
Canada, CREB, SiliCycle, Galenova,
FauneNord, Boréaceutique, Pfizer, PRODEX,
Nutrinor, Produits sanitaires Lépine, FPI
Innovations, Québec international, MDEIE.
 Activités biologiques des extraits et
produits non cytotoxiques
Séparation Séparation
grossière Fraction A fine Produit A,
non active
non actif

Fraction B Produit B, Anti­oxydante

active
Extraction non actif
Anti­inflammatoire
Matériel Extraits
végétal bioactifs Antimutagène
Fraction C Produit C, Antibiotique
non active actif
Antivirale

Produit D,
Fraction D
non actif
non active
 Développement de médicaments

Démonstration
Sur modèle
animal

Identification Évaluation
Étude
de composés de la
d’analogues 
bioactifs toxicité

Étude
du mécanisme
d’action

Activités de recherche du LASEVE