Hematologie fondamentale 1

PHYSIOLOGIE DU SANG

PACES 2015

Professeur RAKOTO ALSON Olivat

Professeur RAKOTO ALSON
Olivat
Enseignement de l’Hématologie
aux Facultés de Médecine
de Madagascar
Responsable des maladies du sang
Chef du Laboratoire d’Hématologie
CHU HJRA
Hematologie fondamentale 3
Docteur NIRY MANANTSOA
Stéphania

Hématologie

Hematologie fondamentale 4
HEMATOLOGIE

Hematologie fondamentale 5
HEMATOLOGIE

Hematologie fondamentale 6
 Histoire
• Population et humanité
• Hématologie géographique
• Guerre : sang+++
• Culture malgache : « fati-drà »

– SANG
• Symbole de la vie
• Sang du Christ
Hematologie fondamentale 7
 Définition
–Etymologie
• Grec, (ema) αiµα : sang
• Latin , sanguis : sang qui coule
• logos : science, étude

Hematologie fondamentale 8
Hématologie : science ou étude du sang
Branche de la médecine qui étude le sang

–Physiologie du sang
fonctionnement normal du sang

Hematologie fondamentale 9
• PACES : Physiologie
• P2/L2 : Séméiologie
• D1/L3
• D4 : Pathologie et thérapeutique

Hematologie fondamentale 10
 Objectifs
• Composition du sang
• Fonctionnement normal des cellules
hématologiques : Hématologie cytologique
• Fonctionnement normal des phénomènes de
l’hémostase
• Notions fondamentales en
immunohématologie

Hematologie fondamentale 11
Généralités

Hematologie fondamentale 12
 1. Définition du sang
• Tissu spécialisé
• Liquide physiologique rouge présent chez la
plupart des animaux évolués
• Circulant dans les vaisseaux sanguins
• Propulsé par le cœur vers les tissus et organes

Hematologie fondamentale 13
 2. Composition du sang
• Deux constituants

- phase cellulaire (45%) formée de cellules en suspension

ou éléments figurés : hématies, leucocytes, plaquettes

- phase liquide (55%) : le plasma

Hematologie fondamentale 14
 Plasma
• Jaune citrin
• Solution :
eau (91%)
Protéines (7%) : 70g/l
ions, molécules organiques, molécules inorganiques
• pH : 7,35-7,45

Hematologie fondamentale 15
 Plasma
Constituants fonctionnels
• Protéines de transport
• Protéines de défense
• Facteurs de coagulation
• Facteurs de l’inflammation
• Enzymes
Constituants nutritifs
glucose, acides aminés, lipides,
corps cétoniques, vitamines,
Déchets du métabolisme
urée, acide urique, bilirubine
Hormones

Hematologie fondamentale 16
 Plasma
Constituants minéraux : cations (Na,
K, Ca,Mg), anions (Cl, HCO3, SO4,
HPO4)
Constituants inertes : N2
Constituants accidentels : enzymes,
médicaments

Hematologie fondamentale 17
 3. Chez les autres espèces
• Chez tous les vertébrés : liquide rouge,
légèrement visqueux
• Densité variable légèrement selon les espèces
et le sexe
• Odeur : celle de la sueur de l'espèce
• Réaction toujours alcaline

Hematologie fondamentale 18
 3. Chez les autres espèces
• Température variable selon les espèces
(36- 40°)
–Hétérothermes (animaux à sang froid,
et chez mammifères hibernants) :
légèrement supérieure à celle du
milieu ambiant

Hematologie fondamentale 19
• Homéothermes (animaux à sang
chaud, comme l'humain, les
autres mammifères et les
oiseaux) : non variable

Hematologie fondamentale 20
 3. Chez les autres espèces
• Organismes inférieurs

–beaucoup moins constant et fixe

–ne renferme que des leucocytes
–couleur variable
–proportion des sels très variable
Hematologie fondamentale 21
 4. Fonctions du sang
• Transport : 02, C02, nutriments,
hormones, déchets, chaleur
• Homéostasie : maintien composition du
milieu intérieur
• Défense contre
- infections et agressions
- perte sanguine

Hematologie fondamentale 22
Rôle complexe de transporteur

Rapidité du transport importante

la totalité du sang passe dans le cœur

en 1 minute

Hematologie fondamentale 23
 Rôle complexe de transporteur
• Véhiculer les médicaments
–Mais le sang permet aussi de
•Transmettre facilement des
maladies
•Transporter les produits toxiques

Hematologie fondamentale 24
 5. Volume sanguin

• 7 à 8 % du poids corporel
• Hématocrite : volume occupé par les globules
rouges
• Volume pouvant être calculé

Hematologie fondamentale 25
 Sérum et plasma
• Sérum : plasma dépourvu des facteurs de
coagulation
sang prélevé sans anticoagulant
(caillot de fibrine + sérum)
• Plasma :
sang prélevé sur anticoagulant
(culot globulaire + plasma)

Hematologie fondamentale 26
 HEMATOLOGIE
• Trois parties

• Hématologie cellulaire
• Hémostase
• Immunohématologie

Hematologie fondamentale 27
 I. Hématologie cellulaire

• Origine des cellules sanguines : hématopoïèse

• Physiologie des cellules sanguines
• Exploration de cellules sanguines

Hematologie fondamentale 28
Physiologie des cellules sanguines
• 1. Hématies

• 2. Plaquettes
• 3. Leucocytes

Hematologie fondamentale 30
Hématies
Érythrocytes
Globules rouges

Les plus
nombreuses

Sans noyau
Hematologie fondamentale 31
 1. Morphologie
HEMATIE VUE DE FACE

ARRONDIE (7µ)
ZONE CENTRALE PLUS CLAIRE
CORRESPONDANT A LA BICONCAVITE
Hematologie fondamentale 32
 HEAMATIE VUE DE PROFIL

FORME BICONCAVE

Avantages :
-Plus grande surface d’échanges
-- PlusHematologie
grande déformabilité
fondamentale 33
 2. Structure
• Trois éléments :
–la membrane
–l'hémoglobine
–les enzymes : molécules
énergétiques indispensables à La
survie (durée de vie : 120 jours)

34
 2.1. La membrane du globule rouge

a) bicouche lipidique + couche

intermédiaire de protéines
b) Squelette constituée de protéines
a) Spectrine
b) Ankyrine
c) Bandes 3, 4

35
 2.2 Les enzymes érythrocytaires

• Rôle  : assurer la survie du globule rouge

• Deux principales
– G6PD : glucose 6 phosphodeshydrogénase
– PK : Pyruvate kinase

36
 2.3 L'hémoglobine

• Raison d’être de l’hématie

• Principal constituant du contenu
érythrocytaire
• Pigment responsable de la coloration rouge
du sang
• Constituée d'hème et de globine

37
 3 - L'hémoglobine

• Formée de
– 4 chaînes de globine symétriques 2 à 2
• 2 chaînes de type ,
• 2 chaînes de type non-alpha
– 4 molécules d’hème: fer

38
 La molécule d’hémoglobine
hétérotétramère de globine
globine

 
Fe Fe

liaison (2-3 DPG) hème

/

 
Fe Fe

liaison
/

39
• Molécules de fer dans la poche de l'hème
– fixé à l'hème par 4 fois
– fixé à la globine au niveau de l'histidine proximale
– fixe l'oxygène dans l'oxyHb
• 2-3 DPG (diphosphoglycérate)
– présent au centre de la molécule dans la forme
oxygénée

40
 Chez l'embryon

• type particulier d'hémoglobine hémoglobine

Gowers
• associant chaînes
– - embryonnaire (,)
– - fœtale ()
– - adulte ()

• Selon l’âge de l’embryon

41
 Chez le foetus et le nouveau-né,

• type particulier : hémoglobine foetale (HbF)

(2 2)
– - forte affinité pour l’oxygène que celle de l’Hb
adulte
– - majoritaire à la naissance (80 % environ).
– - taux décroîssant au cours de la première année
de vie (traces < 1%)

42
 Chez l'adulte

• Hémoglobine A
– formée de 2 chaînes alpha et 2 chaînes bêta (2
2)
– majoritaire (> 97 %)
•  Hémoglobine A2
– formée de 2 chaînes alpha et 2 chaînes delta  (2
2)
– fraction minoritaire 1,5 à 3 %

43
 3. Vie et destinée
•  Durée de vie moyenne : 120 jours
•  Vieillissement
– anomalies de structure
– anomalies morphologiques

44
 3. Vie et destinée
• Mort : hémolyse physiologique
• Destruction
– phagocytose dans le système réticulo-endothélial
par les macrophages
• dans la moelle osseuse
• dans le foie et la rate ++
• L’ hémolyse normale est extravasculaire

45
 3. Vie et destinée
• Catabolisme de l’hémoglobine
– → pigment résiduel : biliverdine
– →réduite en bilirubine
– → plasma, liée à l’albumine, vers le foie

46
 3. Vie et destinée
• Cellules hépatiques
– Conjugaison → diglucuronate de bilirubine,
hydrosoluble et excrété par la bile
•  Intestin
– → stercobilinogène et stercobiline (coloration des
selles)
•  Urines
– → urobilinogène et urobiline (coloration des urines)

47
 4. Eléments nécessaires à la
synthèse des GR
• Synthèse d’ADN
• Vitamine B12
• Acide folique ou vitamine B9
• Synthèse de l’hémoglobine
• Fer
• Protéines
• Vitamine B6
48
 5. Répartition
–Nombre des hématies
• 4 - 6 1012/l (Tera/l ou T/l)
• ou 4 .000.000-6.000.000 / mm3
–Moins chez la femme
–Moins chez l’enfant
–Beaucoup chez le nouveau-né : > 6 T/l
(polyglobulie physiologique)
49
 6.Fonctions

• Transport O2 vers les tissus

(oxygénation tissulaire)
• Transport CO2
• Système tampon

Hematologie fondamentale 50
Plaquettes ou thrombocytes

Les plus
petites
cellules
sanguines

Sans noyau
Hematologie fondamentale 51
 Plaquettes
• Thrombocytes

• Platelet (Angl)

52
 1.Morphologie

• Particules anucléées discoïdes

53
 2. structure

• différents composants :
• divers types de granules (alpha, dense)
• deux systèmes canaliculaires
– connecté à la surface
– tubulaire dense
• sous forme de vésicules intracytoplasmiques

54
55
56
 2. Structure

• 1. Cytosquelette :tubuline et actine

• 2. Membrane
• 3. Granules

57
 2. Membrane
• Deux couches lipidiques :
phospholipides, acide arachidonique,
cholesterol
• Couche protéique : glycoprotéines

58
 2.Membrane
–GP Ib IX :
• Adhésion des plaquettes à la
matrice extracellulaire
vasculaire par le facteur de
von Willebrand vWF
• 25 000 /plaquette
Hematologie fondamentale 59
 2.Membrane
–GP IIbIIIa :
• Activation pour l’agrégation des
plaquettes entre elles par le
fibrinogène
• 50 000/plaquettes et 30 000 sur
les granules alpha

Hematologie fondamentale 60
 2. Membrane
• 2 systèmes canaliculaires

– Système canaliculaire ouvert (ouvert

et connecté au niveau de la
membrane plaquettaire)
– Système tubulaire dense
• non connecté à la surface
61
 3. Granules plaquettaires
• Lors de l’activation plaquettaire

– vont s’unir à la membrane externe ou celle du

système connecté en surface
– leur membrane s’unit à celle de la plaquette et
leur contenu se déverse à l’extérieur

– Deux types

62
 A. granules alpha (a)
• 8-10 par plaquette
• Contenu
– protéines synthétisées : thromboglobuline,
facteur 4 plaquettaire, vWF
– protéines plasmatiques : fibrinogène,
thrombospondine
• Facteurs de régulation de croissance (PDGF
growth factor)

63
 B. granules denses

• 4-5 par plaquette

• Contenu
– ATP et ADP (synthèse au niveau local)
• libérés lors de l’activation (release)
• hydrolyse de l’ATP permet la polymérisation
de l’actine
– Ca++
– sérotonine (provenance du plasma)
•
64
 Facteur de von Willebrand
–Protéine
• dans le plasma
• dans les granules alpha
(Synthétisée lors du stade
mégacaryocytes)
• dans la matrice sous-endothéliale
(corps de Weibel Palade)
65
 Facteur de von Willebrand
– Rôles :
• adhésion des plaquettes à la plaie
vasculaire ( récepteur GP Ib-IX)
• Liaison au facteur anti hémophilique
VIII

66
 3. Nombre et répartition
• Taux normal dans le sang circulant
– 150 à 400 x 109/l ou 150-400 G/l
– Constant
• 30% de la masse totale dans la rate
→Une augmentation importante du volume de la
rate fait baisser le chiffre des plaquettes circulants

67
 4. Origine et durée de vie
• Origine
– mégacaryopoïèse
– Un mégacaryocyte produit 2000 à 8000 plaquettes
– Durée de vie 7-10 jours (raccourcie si activation
de l’hémostase)

68
 4.Origine et durée de vie
• Destruction
– Plaquettes vieillies éliminées par les macrophages
de la moelle osseuse (rate et foie)
• A l’extérieur du corps,
– les plaquettes sont détruites par le froid
– elles ne sont plus fonctionnelles à pH acide

69
 5. Fonctions
• DANS L’HEMOSTASE
•  
• Deux premiers temps de l’hémostase
– Rôle principal : formation du clou plaquettaire
dans l’hémostase primaire
– Support à l’activation des facteurs de coagulation
dans l’hémostase secondaire

70
 5. Fonctions
• Autres
– Immunité non spécifique : inflammation

• Pathologiques
– Constitution athérosclérose
– Dans le cancer

Hematologie fondamentale 71
Leucocytes
Les moins
nombreuses

Les plus
volumineuses

Avec noyau

Plusieurs
catégories

Hematologie fondamentale 72
 Nombre de leucocytes

• 4-10 G/l (4000-10000/mm3)

Hematologie fondamentale 73
 3 types
• 1. Polynucléaires ou granulocytes
– Neutrophiles
– Eosinophiles
– Basophiles
• 2. Lymphocytes
• 3. Monocytes
A. Les polynucléaires

75
 Polynucléaires
• noyau multilobé
• cytoplasme contenant
des granulations
(granulocytes)
• affinités tinctoriales
différentes au May
Grünwald Giemsa (MGG)

76
 Trois catégories
• polynucléaires neutrophiles :
granulations, fines à coloration neutre
• polynucléaires éosinophiles :grosses
granulations réfringentes de couleur
orange
• polynucléaires basophiles, peu
abondant, grosses granulations rouge
violacé dites métachromatiques
77
I Polynucléaires neutrophiles
PNN

78
 1 - Morphologie 
• Taille 10 à 14 µ
• Noyau 2 à 5 lobes
• Chromatine assez dense
• Cytoplasme abondant
contenant de fines
granulations neutrophiles,
marrons
•  

79
 2 - Nombre et répartition 
• Les plus nombreux des leucocytes
sanguins
– 50 à 75% des leucocytes
• 2 -7,5 109/l ou (G/l)

80
 Deux secteurs ou pools

• 1. le secteur circulant
–le seul mesuré directement lors de
la prise de sang pour numération

81
 2- le secteur marginal
• PNN plaqués contre les parois des vaisseaux
(rate, foie et poumons)

• non mesuré mais quantité égale au secteur

circulant

• fonctionnels et immédiatement disponibles

82
 3. Fonctions
• Propriétés
– Mobilité
– Diapédèse
– Chimiotactisme (éléments bactériens, fragments du
complément)
– Phagocytose. en plusieurs étapes. (Adhésion,
ingestion, formation d'une vacuole de phagocytose)
– . Bactéricidie.
–

83
 Phagocytose

• Synthèse de radicaux oxygénés, à l'aide de

peroxydase

• Grâce à des enzymes : lysozyme, hydrolase,

phosphatase

84
 Phagocytose

• Après phagocytose, le PNN

meurt et forme le pus

85
II Polynucléaires éosinophiles
PNE

86
 1. Morphologie
• Taille 10 -15µ
• Noyau à 2 lobes réunis
par un pont
• Chromatine dense, sans
nucléoles
• Cytoplasme incolore,
abondant

87
 1. Morphologie
• granulations secondaires spécifiques
–volumineuses (0,5 à 1,5µ),
–rondes ou ovales,
–assez régulièrement réparties,
–de teinte orangée au MGG,

88
 Granulations
• dans les tissus à haute concentration
d'éosinophiles, responsables de la formation
des cristaux de Charcot-Leyden

89
 2 - Numération et répartition
• 1 à 5% des leucocytes sanguins
• 40 à 500 par mm3 ( < 0,5 109/l)
• temps de transit dans le sang : 6 à 8 heures
• durée de vie moyenne : 3 à 8 jours

90
 3 - Fonctions

• Cellules essentiellement tissulaires

• Migration par diapédèse régulée par des substances
chimiotactiques
• Défenses immunitaires
– pouvoir phagocytaire (faible)
– Substances dans granules (Major Binding Protein) très
toxiques
• Utiles contre les parasites

•  
91
• Défenses immunitaires
– Phénomènes allergiques, hypersensibilité
immédiate, présence IgE
• Absence de lysozyme : pas de pouvoir
bactéricide efficace

93
III Polynucléaires basophiles
PNB

94
 1 - Morphologie

• Taille moyenne
• Noyau assez volumineux
• Cytoplasme et noyau
recouverts de grosses
granulations
– basiques (très bleues)
– métachromatiques par présence
de mucopolysaccharide acide

95
 2 - Nombre et répartition

• les moins nombreux :< 1 % des leucocytes

• <100 par mm3 (0,1 109/l)

• équivalent dans les tissus : mastocytes

96
 3 - Fonction
• doués de chimiotactisme
• pas de capacité de phagocytose ni de
bactéricidie
• phénomènes d'hypersensibilité immédiate
grâce à un récepteur de surface pour les IgE

97
 4 - Fonction
• interactions des IgE membranaires avec
l'antigène correspondant → dégranulation 
• →libération des produits très actifs :
– Histamine : vaso active
– Héparine
•  

98
 Origine

• Granulopoïèse

99
B. MONOCYTES MACROPHAGES

100
1 - Morphologie

101
 Monocyte
• le plus grand des leucocytes (20µ)
• RNC bas (< 50%)
• contours nucléaires irréguliers, noyau
rubané
• Cytoplasme étendu, hétérogène,
violacé, très finement granulaire avec
vacuoles
• limites cytoplasmiques nettes,
festonnées
•Macrophage
 Grande taille entre 20 à 80µm
 Noyau excentré
 Cytoplasme est basophile, étalé
avec des vacuoles
 2 - Nombre et répartition

• 2 à 10 % des leucocytes sanguins

• 0,1 à 1 109/l
• transit sanguin 20 à 40 heures
• 3 pools : circulant, marginal et tissulaire
• passage dans les tissus : macrophages

106
 3 - Fonctions

• a) Phagocytose
– le monocyte ne meurt pas après la phagocytose 
• b) Présentation d’antigène
– Dans l’immunité à médiation cellulaire

•  

107
 4. Origine
• Monocytopoïèse

Hematologie fondamentale 108

C. LYMPHOCYTES

109
Ce sont les cellules de l’immunité
spécifique

110
 Origine

• Lymphopoïèse

Hematologie fondamentale 111

 1. Morphologie
• Les lymphocytes ont une taille variable
• On distingue parfois
– les petits lymphocytes, diamètre d'un globule
rouge (6 à 8 µ)
– les grands lymphocytes, de 10 à 15 µ de diamètre
• Cellules à noyau arrondi ou ovoïde
• Chromatine dense, sans nucléole

112
 1. Morphologie
• Cytoplasme
– souvent assez basophile
– peu abondant dans les
petits lymphocytes
– plus abondant dans les
grands lymphocytes

113
 – quelquefois
granulations
azurophiles
(violet)
•  

114
 1. Morphologie

• Etude morphologique ne distingue pas les LT

des LB

115
 2. Numération et répartition
• Adulte
– 20 à 40 % des leucocytes sanguins
– 1,5 à 4 x 109/l de sang (1,5- 4 G/l)
• Chez l'enfant
– plus nombreux, 60 % des leucocytes sanguins :
lymphocytose physiologique de l'enfant
•  

116
 2. Numération et répartition
• Au niveau du sang: très faible partie du pool
lymphocytaire de l'organisme
• Au niveau des organes lymphoïdes
secondaires
– Rate
– Ganglions
– Organes lymphoïdes des muqueuses

117
 3. Fonctions
• Morphologie identique
• Cellules spécifiques de l’immunité
• Mais deux sous-populations très différentes
– Lymphocytes B : cellules de l’immunité à
médiation humorale SECRETION D ANTICORPS
– Lymphocytes T : cellules de l’immunité à
médiation cellulaire

118
 Deux classes de LT matures
• L T4 ou auxilliaires (helper)
– portant le récepteur CD4
– 60-80% des LT
• LT8 (suppresseurs) pour la plupart
– portant le récepteur CD8.

119
 LT

• Cellule de l’immunité à médiation cellulaire

120
 LB matures
• Récepteur
• CD 20
• CD 19

Hematologie fondamentale 121

 Autres populations lymphocytaires

• ni LB ni LT
• Cellules NK (Natural Killer)

122
 Plasmocyte
• Cellule tissulaire ou
ganglionnaire

• Exceptionnellement
dans le sang

123
 Plasmocyte
• dérivent des lymphocytes B
• durée de vie brève : 4 à 6 jours
• Responsable de la synthèse et secrétion des
anticorps
• Un clone plasmocytaire ne peut sécréter
qu'un seul type d’immunoglobuline ( M, G, D,
A, E)

124