Exploration biochimique de la thyroïde

Dr Niokhor Ndane Diouf

MCA en biochimie
UASZ-UFR2S
 Plan
I. Généralités

II. Hormones iodées thyroïdiennes

II.1-Apport alimentaire
II.2-Biosynthèse au niveau de la thyroïde
II.3-Régulation de la biosynthèse
II.4-Transport des HT
II.5-Transformation de T4 et T3
II.6-Mode d’action des HT
II.7-Catabolisme périphérique
 Plan
III. Exploration de la fonction thyroïdienne
III.1-Explorations statiques
III.2-Explorations dynamiques

IV. Pathologies thyroïdiennes

 I. Généralités

 La thyroïde est une glande d’environ 25 à 30 g

 située sur la face antérieure du cou, en avant de la

trachée

 Formée de 2 lobes réunis par un isthme, positionnée au

regard du 3e cartilage

 En place dès le 70e jour de vie fœtale (12e semaine)

 Volume et poids variable en fonction des saisons surtout

chez la femme en activité génitale
 I. Généralités

 Thyroïde = ensemble tissulaire à structure

folliculaire comprenant ≈ 3 millions de follicules
(thyréocytes)

 Cellules de type sécrétoire dont l’espace interne

contient une substance colloïde riche en Gp iodée, la
thyroglobuline

 Fonction essentielle thyroïde est la synthèse des

hormones iodées thyroïdiennes
 I. Généralités

 Fonction essentielle de la thyroïde est la synthèse des hormones iodées

thyroïdiennes (HT)

 HT contrôlent le métabolisme général, le développement et la différenciation

tissulaire

 Parenchyme parafolliculaire contient les cellules C responsables de la synthèse de la

calcitonine, hormone qui régule le métabolisme phosphocalcique

 Dosage calcitonine associée à celui de la thyroglobuline présente un intérêt dans le

suivi dans le diagnostic et le suivi du cancer médullaire de la thyroïde
 II. Hormones iodées thyroïdiennes

 Les iodures nécessaires à l’hormonogenèse dépend :

Du recyclage de l’iode par récupération endogène

D’un apport alimentaire, nécessaire voire indispensable dans certaines circonstances,

notamment la grossesse
 II-1. Apport alimentaire

 Les besoins sont de 100 à 150 µg/j et jusqu’à 200 µg/j lors de la grossesse et
l’allaitement

 L’iode alimentaire est réduit en iodures dans l’estomac

 Les iodures sont absorbés au niveau de l’intestin grêle et subissent pour l’essentiel
une captation par la thyroïde et une élimination rénale

 Variations de l’iodémie et l’iodurie liées aux apports exogènes et permettent de

dépister et de surveiller les surcharges iodées
 II-2. Biosynthèse au niveau de la thyroïde

 Captation des iodures par le thyréocyte s’effectue au pôle basal de la cellule grâce
à la pompe à iodures

 Mécanisme de transport actif nécessitant de l’ATP

 Symporteur Na+/I- avec échange de Na+

 Inhibée par les ions de même signe : Bromures, thiocyanates, perchlorates

 II-2. Biosynthèse au niveau de la thyroïde

 Thyroglobuline (Tg) : protéine essentielle pour la biosynthèse des hormones thyroïdiennes

 Gp de 660 kDa, constituée de 2 sous unités identiques

 Synthétisée exclusivement par les cellules thyroidiennes en s’aggrégeant dans la lumière

folliculaire

 Iodation thyroglobuline comporte plusieurs étapes, toutes dépendantes d’une enzyme, la

thyroperoxydase (TPO)

 S’effectue dans la lumière folliculaire au contact de la membrane apicale du thyréocyte

 II-2. Biosynthèse au niveau de la thyroïde

 1èrement : oxydation des I- avec formation de radicaux libres I. grâce à la TPO et en présence
de H2O2

 2èment : fixation de ces radicaux sur certains sur certains résidus tyrosyl de la Tg

 Formation MIT et DIT par iodation en 3 et en 5 des résidus tyrosyl grace à la TPO

 Couplage des résidus MIT et DIT amène au sein de la Tg la formation de tri-

iodothyronine et de tétra-iodothyronine

 Stockage de la Tg iodée se fait dans le colloïde

 II-2. Biosynthèse au niveau de la thyroïde

 Chaque Tg contient de nombreux résidus tyrosyl iodés

 Libération des différents produits hormonaux à partir Tg iodée

 Par endo et exopeptidases dans la cellule folliculaire

 Il se forme 3 à 4 molécules HT (20% des produits iodés)

 Seules T4 essentiellement produite et T3 passent dans le sang

 II-2. Biosynthèse au niveau de la thyroïde

 Dans la circulation sanguine, T4 et T3 sont fixées sur des protéines vectrices

 Autres produits iodés libérés, MIT et DIT sont désiodés par une iodotyrosine déshalogénase
microsomale

 Iode minéral recyclé dans le follicule thyroïdien

 Principal niveau de régulation axe hypothalo-hypophysaire

 Synthèse HT sous contrôle de la TSH=thyréostimuline

 TSH active toutes les étapes de l’hormonogenèse thyroidienne après fixation de récepteurs
membranaires
 II-3. Régulation de la biosynthèse

 Principal niveau de régulation axe hypothalo-hypophysaire

 Synthèse HT sous contrôle de la TSH = thyréostimuline

 TSH active toutes les étapes de l’hormonogenèse thyroidienne

après fixation de récepteurs membranaires

 TSH rétroinhibée par HT

 Sécrétion de TSH est sous le contrôle de la TRH =

thyréolibérine
 II-3. Régulation de la biosynthèse

 TRH inhibée par HT et catécholamines et activée par froid ou stress

 Oestrogènes ont activité stimulatrice sur hypophyse, androgènes et

glucocorticoïdes l’inhibent

 Système intrathyroidien autorégulateur/ fortes doses iodures ou iode inhibent

iodation Tg (effet Wolff-Chaikoff)
 II-4. Transport des HT

 HT circulent sous forme libre et liée à des protéines plasmatiques

 Thyroxin-binding prealbumin (TBPA) appelée actuellement Transthyrétine (TTR)

 Thyroxin-binding globulin (TBG)

 Albumine

 TBPA et TBG en faibles concentration mais fortement affines

 Albumine peu affine

 II-4. Transport des HT

 TBG présente une affinité pour T4 supérieure à celle pour T3

 Lie les ¾ T4 et T3, présente un site de liaison/molécule

 En infime proportion, forme libre HT est seule fraction physiologiquement active

 T4 libre (T4L ou FT4) représente 0,03% de la T4 totale, a ½ vie de 6 jours

 T3 libre (T3L ou FT3) représente 0,3% de la T3 totale, a ½ vie d’un jour

 II-4. Transport des HT

 Augmentation concentration protéines de transport entraine augmentation

concentrations de T3 et T4 totales

 Concentration hormones libres non modifiées

 C’est le cas sous l’induction des œstrogènes (grossesse, contraception, traitement

de la ménopause) ou corticoïdes

 Certains médicaments peuvent perturber l’affinité de la TBG pour la T4

(phénytoїne, salicylés, clofibrate…)
 II-5. Transformation de T4 en T3

 T4, produite majoritairement dans le tissu thyroïdien, représente surtout un

précurseur de la T3

 Désiodation de T4 se réalise dans tous les organes cibles (foie, reins et muscles)
par la thyroxine 5’désiodase

 Induit formation de T3 et T3 reverse (T3r), hormone sans activité biologique

 Jeûne, diminution des apports glucidiques, traitement médicamenteux

(amiodarone, thiouracile) augmente l’activité de cette enzyme
 II-5. Transformation de T4 en T3

 Chez le sujet normal, T4 totale et T4L sont le reflet de l’activité thyroidienne

 T3 constitue forme active

 T3 plus diffusible, plus rapidement catabolisée et 5 fois plus active

 II-6. Mode d’action HT

 HT pénètrent dans le noyau des cellules cibles et se fixent sur une protéine
nucléaire non histone

 Ce récepteur est plus affin pour la T3

 Il s’ensuit activation de la transcription et augmentation activité des ARN

polymérases et protéines kinases

 Tous les tissus sont sensibles aux HT et les effets biologiques sont multiples
 II-6. Mode d’action HT

 HT dégradés au niveau foie et rein

 Une faible partie ne subit aucune transformation

 HT conjugués à l’acide glucuronique +++ et dérivés conjugués sont éliminés par

voie biliaire et hydrolysés au niveau intestinal

 Réabsorption possible des dérivés hormonaux iodés par cycle entérohépatique

 Ces hormones peuvent aussi subir une désamination et une décarboxylation

 III.1 Explorations statiques

Dosage de l’iode protéique ou Iode sérique

 Minéralisation conduisant à l’obtention d’ion iodure

 Réaction de Sandell et Kolthoff: apprécier le pouvoir catalytique de l’iodure sur la

réduction du sulfate de cérium par l’anhydride arsénieux. Lecture à 420 nm

 Valeurs physiologiques: 270 et 600 nmol/l, soit 34 et 76 µg/l

 III.1 Explorations statiques

Dosage de la TSH
 TSH, molécule centrale de la régulation, considérée comme l’indicateur le plus sensible
pour évaluer un dysfonctionnement thyroïdien

 TSH beaucoup plus informative que la T4L dans le dépistage des hypo- et hyperthyroidies

 Dosage effectuée par méthodes immunologiques de type « Sandwich » :

 Chimiluminescence ou électrochimiluminescence +++

 Immunoenzymatique

 radioimmunologique
 III.1 Explorations statiques

Dosage de la TSH

 Concentrations sériques basales de TSH : 0,25 à 5 mUI/l

 III.1 Explorations statiques

 Variations physiologiques :
 TSH augmente chez le nouveau né

 Diminue légèrement durant le 1er trimestre de grossesse

 Variations pathologiques :
 Dimunition dans les hyperthyroïdies primaires

 Augmentation dans les hypothyroïdies primaires

 Normale ou légèrement élevée dans les hyperthyroidies centrales

 III.1 Explorations statiques

Dosage des HT libres T4L et T3L

 Fraction libre active, indépendante des protéines de transport plasmatique et responsable du
rétrocontrôle négatif

 T4L reflet majeur de l’activité sécrétoire de la glande thyroide, variation minime de T4L
entraine de grandes variations de TSH

 T4L : dosage de 2ème intention après dosage TSH

 T3L marqueur périphérique (15 à 20% sont d’origine thyroïdienne)

 Dosage par méthodes immunologiques

 III.1 Explorations statiques

Dosage des HT libres T4L et T3L

 Fraction libre active, indépendante des protéines de transport plasmatique et
responsable du rétrocontrôle négatif

 T4L reflet majeur de l’activité sécrétoire de la glande thyroïde, variation minime

de T4L entraine de grandes variations de TSH

 T4L : dosage de 2ème intention après dosage TSH

 Dosage effectuée par méthodes immunologiques de type « Sandwich » :

 III.1 Explorations statiques

 Valeurs physiologiques

T4L : 8 à 25 pmol/l ou 6,5 à 20 ng/l

T3L : 3 à 8,5 pmol/l ou 2 à 5,6 ng/l

 III.1 Explorations statiques

 Variations physiologiques :
 HT augmentent chez le nouveau né et la femme enceinte

 Variations pathologiques :
 Hyperthyroïdie primaire franche : TSH diminuée, T4L augmentée et T3L augmentée

 Hypothyroïdie primaire franche : TSH augmentée, T4L diminuée et T3L diminuée

Dans les hyper et hypothyroïdies primaires infracliniques, le taux de TSH est perturbé mais celui
des HT est normal

 Hyperthyroïdie centrale : TSH normale ou augmentée, T4L augmentée et T3L augmentée

 Hypothyroïdie centrale : TSH normale ou diminuée, T4L diminuée et T3L diminuée

 III.1 Explorations statiques

Dosage de la thyroglobuline circulante

 Marqueur de la présence du tissu thyroïdien, sa concentration augmente de façon
non spécifique dans :
Hypertrophies (goitre, nodule)

Hyperthyroïdies primaires

Pathologies inflammatoires glandulaires

 Dosage par méthode immunologique/ indication dans la surveillance des cancers

thyroïdiens
 III.1 Explorations statiques

Dosage des auto-anticorps

 Auto-Ac sont nombreux et leur dosage aide au diagnostic étiologique des affections thyroïdiennes
auto-immunes

 Les plus recherchés sont :

 Auto-ac anti-thyroglobuline

 Auto-ac anti-TPO : thyroïdite de Hashimoto (95%) et maladie de Basedow (70%)

 Auto-ac anti-récepteur de la TSH :

2 types d’Ac : stimulants, mimant l’action de la TSH (les + fréquents)
bloquants, ayant une action antagoniste de la TSH
Les 2 types d’Ac peuvent coexister chez un même individu (spécifiques de la maladie de Basedow)
 III.2 Explorations dynamiques

Epreuve au TRH
 Injection par voie IV 250 µg de TRH

 Dosage de la TSH avant puis 30 mn et 60 mn après injection

 Réponse appréciée par la différence entre la concentration basale et le pic de sécrétion

(normalement < 20 mUI/l)

 Indications : insuffisances hypophysaires, hypothyroïdies frustres, sécrétion inappropriée de

TSH

e
 III.2 Explorations dynamiques

Test de stimulation par la TSH

 Stimuler la thyroïde par injection IM de 100 mg de TSH, 3 jours de suite

 Indications : diagnostic de nodules chauds toxiques, protocole de surveillance des

cancers thyroïdiens
 III.2 Explorations dynamiques

Test de suppression par la T3

 Apprécier la diminution de la captation de l’iode radioactif après administration de
T3 pendant 8 jours

 Diminution (≥ 30%) indique la thyroïde est sous la dépendance de la TSH

 Réponse négative témoigne d’une autonomie de la glande ou de la présence d’une

stimulation anormale (maladie de basedow)
 III.2 Explorations dynamiques

Test à la pentagastrine
 Administration de pentagastrine stimule la calcitonine par les cellules C du
parenchyme parafolliculaire

 Indication dans le diagnostic du cancer médullaire de la thyroide et le suivi de son

traitement
IV. Pathologies thyroïdiennes