Test de cytotoxicité pour l'utilisation de membranes

amniotiques lyophilisées contre la viabilité,

la prolifération et l'apoptose sur culture de cellules
cérébrales : une étude in vitro
Boumlite Randa Medjidah Asma
Proposé par: DR.LEBSIR.D
 1.Résume
Notre étude se concentre sur l’effet des membranes amniotique lyophilisées sur la viabilité ,la prolifération et l’apoptose
des cellules cérébrales de rat . pour examiner les implication potentielles de ces membrane nous avons utilise troi
échantillons : contrôle, exposition moyenne et exposition directe à la membrane amniotique, chaque groupe a été coloré
au MTT, au DAPI et à l'annexine V, et l'analyse statistique a été réalisée par test ANOVA ou test de Kruskal-Wallis Cette
étude in vitro démontre que les membranes amniotique lyophilisées favorisent la viabilité des cellules cérébrales en
culture ,alors que la prolifération et l’apoptose ne sont pas affectées.
Mots clés : Cytotoxicité, Anomalie de la dure-mère, Viabilité de la membrane amniotique lyophilisée .

2 .Introduction et Objectif
o Les processus iatrogénes et les patologique
peuvent provoque des anomalies durales ,la
fermeture durale doit étre faite éviter les fuite du
liquide cephalo rachidien soit avec fermeture
primaire ou un greffe si nécessaire . l’utilisation
de greffons capable d’entraine, des infections , et
des inflammations , et cela va conduire a une
augmentation d’imminosupréssion et infiltration
des cellules malignes.
o Plusieurs études ont montre que la membrane
amniotique est le meilleur griffon pour la
duraplastie en raison de leur binifique anti
inflammatoire , faible imminogenicité.
o Cette étude vise à réaliser un test de
cytotoxicité de l'utilisation de membranes
d'amnios lyophilisées contre la viabilité, la
prolifération et l'apoptose dans la culture de
cellules cérébrales.
 3.Les Tests et les Méthodes

La préparation de la membrane amniotique

lyophilisées.

Culture cellulaire caractérisation.

• Les Tests de cytotoxicité:

Coloration MTT.

Coloration au6-diamidino-2-
phénylindole (DAPI).

Annexine-V–Coloration conjuguée à
l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC).
 4. Resultats

Figur.1Pourcentage de viabilité cellulaire, contrôle 100,00±0,00,

milieux conditionnés76,99±10.20 et membrane amniotique
90.36±23,31 (p = 0,001 ; IC 99%) .
 Figur3. Tableau de Résultats médians pour la coloration DAPI.
Figure 2.Coloration DAPI dans le groupe témoin, milieu conditionné et
membrane amniotique. Images fluorescentes visibles avec DAPI bleuâtre
dans le noyau cellulaire. La lecture a été réalisée dans une pièce sombre
pour mesurer l'intensité des cellules immunoréactives. (Microscope à
fluorosité Olympus IX71, grossissement .
Figure 4.Moyenne de la coloration à l’Annexine-V. Le résultat a été obtenu à partir de la lecture d’images sur coloration simple
et double coloration av.
 5. Conclusion
Les expériences que nous avons examinées révèlent une différence dans la viabilité et l'effet des cellules lorsqu'elles sont
exposées à la membrane amniotique. Ce dernier est non toxique, sans danger pour la transplantation et n’affecte pas l’apoptose des
cellules cérébrales de rat en culture. Des recherches supplémentaires devraient être menées sur des modèles animaux ainsi que sur
l'évaluation et la comparaison des réactions des tissus inflammatoires aux corps étrangers .
 6.Références
• Rahadian Indarto Susiloun, Joni Wahyuhadiun, je Ketut Soudanab, Fedik Abdoul Rantamc.d, Neurochirurgie
interdisciplinaire : techniques avancées et gestion Volume 23, March 2021, 100947.