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Exemple : mélange de Bouin (acide acétique + formol + acide picrique + eau), le mélange de carnoy.
b) Les fixateurs physiques
Les plus utilisés sont l'azote liquide (-196° C) et la neige carbonique (-60°C).
N.B :
Les fixateurs les plus communs à microscope optique et les plus utiliser dans le monde sont le Formol (4%),
Formaldéhyde (10%).
Les fixateurs maintiennent normal les cellules en reliant les groupements des protéines des cellules.
B. Les techniques de coloration
1) Le principe
Les tissus de l'organisme ne sont pas spontanément colorés. Cette caractéristique naturelle rend leur
observation difficile. Les colorants présentent des composants acides ou basiques en milieu aqueuse qui
forment des sels avec des radicaux ionisés.
Les composants acides colorent les zones tissulaires basophiles alors que les composants basiques colorent
ceux acidiphiles.
2) Les tissus de colorant
a) Les colorations de BRACHET et FEULGEN :
Le test de BRACHET
Il consiste a placé l'échantillon dans un mélange de vert de méthylène-pyronine pendent quelques minutes
puis à rincer l'échantillon dans l'eau.
Les verts de méthylène colorent l'ADN du noyau en vert et la pyronine colore l'ARN en rose.
Le test de FEULGEN
Il consiste à mettre l'échantillon dans un tube contenant de HCl puis placer dans un bain marie (permet la
conservation en une température donnée) à 600° pendant 10min et enfin à le récupérer et le plonger dans
le réactif de SCHIFF.
L'ADN se colore en rose.
b) La coloration hématéine-éosine-safran
C'est la coloration la plus utilisée dans l'histopathologie, on l'utilise également en hématologie.
L'hématéine est une substance basique qui colore l'ADN du noyau en violet.
L'éosine est une substance acide qui colore les protéines cytoplasmiques en rose.
Le Safran colore les fibres calogènes en jaunes.
c) La coloration may-grunwald-giémisa
Elle est utilisée en hématologie avec les frottis sanguins, les ponctions inflammatoires et les coupes
d'organes hématologiques et lymphoïdes.
MGG hématologie
Polynucléaires Basophiles Bleu
Eosinophiles Orange
Neutrophiles Rose
d) La coloration de PAPANICOLAOU
Elle est de routine en cytologique et en gynécologique.
Noyau Coloration
Cytoplasme des cellules profondes Bleu
Cytoplasme des cellules superficielles Rose
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