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Staphylococcus aureus

Objectifs pédagogiques
• Décrire les caractères généraux de la famille des Micrococcaceae
• Décrire la morphologie du Staphylocoque
• Citer les milieux de cultures appropriés pour l’isolement de
Staphylococcus aureus
• Citer les principales infections provoquées par le Staphylococcus
aureus et les autres Staphylocoques
• Identifier le Staphylococcus aureus
• Faire le diagnostic différentiel entre Staphylococcus aureus et
autres staphylocoques

Fam. : Microccocaceae

A. Généralités

1. Caractères généraux :
Cocci gram positif en amas
Catalase positive
Aérobies ou anaérobie.

2. Genres :
La famille comprend les genres suivants :
- Staphylococcus : regroupe les espèces pathogènes pour l’homme
et les animaux
- Micrococcus : espèces à pouvoir pathogène pratiquement nul
- Planococcus : rencontrés dans les eaux marines.
- Stomatococcus
- Aloiococcus

3. Genre : Staphylococcus
Comprend plusieurs espèces. Parmi les espèces rencontrées chez
l’homme, trois occupent une place privilégiée : S. aureus, S.
epidermidis et S. saprophyticus.
Par opposition aux autres espèces, le S. aureus est pathogène et
produit une coagulase.

3.1 Habitat :
Ce sont des germes très répandus dans la nature (air, eau, sol).
Les staphylocoques, en particulier le S. aureus, S. epidermidis font
partie de la flore normale de nombreux individus qui sont des porteurs

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asymptomatiques (25 à 75%) mais ces souches peuvent être à l’origine
d’auto infections ou contaminer d’autres individus.
On les trouve au niveau de la peau ; S. aureus (5-25%), S. epidermidis
(85 à 100%) surtout dans les zones humides comme le creux axillaire,
les fosses nasales antérieures (S. aureus 30 à 40%, S. epidermidis 30 à
100%) dans les selles (S. aureus 30- 50%).

La transmission est surtout interhumaine directe (contact,


dissémination manuportée, le nez) ou indirecte par l’intermédiaire des
aliments ou milieu extérieur.

B. Staphylococcus aureus

I. Caractères bactériologiques :
1. Morphologie :
Ce sont des cocci Gram positif groupé en amas irrégulier ayant l’aspect
de grappes de raisin.

2. Caractères culturaux :
Bactérie aéro-anaérobie facultative. Elle cultive sur :
 Gélose ordinaire en donnant des colonies lisses, rondes, bombées
souvent dorées ou citrin dû à la production d’un pigment jaune
doré ou jaune citrin non diffusible dans le milieu.

 En bouillon ordinaire, la culture est rapide en quelques heures


avec un trouble homogène.

 Chapman mannité à 7,5% NaCl : les colonies sont jaunes dû à


l’acidification du mannitol.

La température de croissance optimale est de 37°C.

3. Caractères biochimiques :
Catalase est positive ; l’oxydase est négative ; le glucose, le mannitol,
le lactose et le maltose sont acidifiés sans gaz.

II. Pouvoir pathogène naturel :


Les infections staphylococciques occupent une place importante en
pathologie infectieuse par leur nombre et leur gravité.

 Infections cutanées, sous cutanées et muqueuses : elles


peuvent présenter la porte d’entrée et la forme initiale

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d’infection septicémique. L’évolution peut se faire sous forme de
furoncle localisé au niveau de la peau et dont les récidives sont
souvent liées au diabète.

 Infection ORL se manifestent sous forme de sinusites, otites,


angines etc.

 Septicémies : 2ème rang en fréquence (20 à 30%) après celle


provoquée par les bacilles à gram négatif. Elles succèdent à une
infection cutanée muqueuse ou généralement à une infection à
localisation pleuro- pulmonaire ou ostéo-articulaire.

 Infections viscérales : se manifestent sous forme


d’ostéomyélites, pyélonéphrites, ou endocardites.

 Infections uro génitales : pyélonéphrites.

 Infections neuro méningées données par les méningites rares.

 Intoxications alimentaires : elles font suite à l’ingestion de


l’entérotoxine élimée dans l’aliment et qui résiste à la chaleur,
et aux sucs gastriques. L’intoxication se manifeste au bout de 3
heures par des vomissements et de la diarrhée sans fièvre.

III. Substances produites par le S. aureus :


Elles nombreuses :
1. Hémolysine ou staphylolysine : produit l’hémolyse des hématies. Il
existe 4 types. Les plus importants sont :

 l’hémolysine α synthétisée par 80 à 90% des souches provoque


l’hémolyse des hématies de lapin à 37°C.

 L’hémolysine ß provoque l’hémolyse accrus des hématies en


présence des souches de Streptocoque du groupe B. Elle est
fabriquée par 54% des souches humaines et par 94% des souches
animales.

2. Leucocidines : elles ont un effet toxique pour les polynucléaires


neutrophiles et les macrophages de l’homme

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3. Entérotoxines : elles sont produites par 30 à 60% des souches de S.
aureus. On distingue 7 types (A, B, C, C1, C2, C3 et E) et sont
responsables d’intoxications alimentaires.

Les enzymes ayant un intérêt pathogénique ou diagnostique important


sont :
4. Coagulase libre : est une substance thermosatble qui est capable de
coaguler en quelques heures le plasma humain ou de lapin oxalaté,
citraté, ou hépariné. Elle protège le Staphylocoque contre la
phagocytose.

5. Coagulase liée ou « clumping factor » c’est une protéine fixée à la


surface du Staphylocoque et qui diffuse dans le milieu extérieur après
autolyse. Elle réagit avec le fibrinogène. En présence du plasma de
lapin, le « clumping factor » provoque l’agglutination instantanée du
staphylocoque. Toutes les souches d’origine humaine produisent la
coagulase liée.

6. Protéine A : Elle est élaborée par 90% des souches d’origine


humaine les souches d’origines animales sont moins souvent
productrices et est absente chez les staphylocoques coagulase négatifs.
En plus de son aptitude à réagir avec les IgG, elle interfère avec le
système immunitaire ; elle active le Complément par la voie classique
et déclenche la réaction immunitaire. Sa liaison avec les IgG favorise la
phagocytose.

IV. Diagnostic bactériologique des infections à Staphylocoque :

L’isolement et la caractérisation de la souche responsable constituent


la base du diagnostic biologique. Les conditions dans lesquelles les
prélèvements sont effectués ont une grande importance pour
l’interprétation des résultats.

Les prélèvements peuvent être :


- du sang pour hémoculture,
- des urines,
- du LCR ou du pus. Ils doivent être effectués avec la plus grande
asepsie.

La mise en culture est effectuée sur les milieux ordinaires, sur les
milieux enrichis au sang et pour les produits pathologiques pluri-
microbiens un milieu sélectif (milieu de Chapman ou autre milieu)

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L’identification est fondée sur :
 La morphologie en microscopie optique après la coloration de
Gram
 L’aspect des colonies
 La présence de la catalase
 La mise en évidence de la Coagulase libre
 La mise en évidence de la Protéine A par des particules
sensibilisées par des immunoglobulines

Antibiogramme :
Il est indispensable d’effectuer l’antibiogramme sur les souches
responsables de l’infection car la sensibilité du staphylocoque est
imprévisible. La recherche de la production d’une Pénicillinase et de
la résistance hétérogène à la Méticilline est indispensable.

L’antibiogramme sera effectué sur la Gélose Mueller Hinton .


L’inoculum sera préparé dans l’eau physiologique à 0,9% et
standardiser à 0,5 Echelle MacFarland.
L’incubation sera fait à 36,5°C pendant 18 heures. Les antibiotiques à
choisir sont : Pénicilline, Amoxicilline + ac clavulanique, Oxacilline,
Gentamicine, Amikacine, Kanamicine, Erythromycine, Clindamycine,
Pristinamycine, Cotrimoxazole.

Résistance par la production de la pénicillinase, qui inactive les


pénicillines A( ampicilline) et G, les carboxy
pénicillines(carbénicilline), et les uréidopénicillines(pipéracilline,
azlocilline, etc). Mais les pénicillines M et les Céphalosporines ne sont
pas inactivées.

Autres espèces de staphylocoques

Ce sont des staphylocoques coagulase négatif longtemps considérés


comme dépourvus de pouvoir pathogène et comme contaminants de
prélèvements défectueux. Aujourd’hui il est clair qu’au moins deux
espèces, S. saprophyticus et S. epidermidis sont des bactéries
opportunistes potentiellement pathogènes.

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S. saprophyticus :
Cette espèce cause des infections urinaires avec une grande fréquence
chez la femme jeune.
Le diagnostic de ces infections est difficile. La signification de son
isolement dans le produit pathologique dépend de la qualité du
prélèvement qui doit être fait selon les meilleures conditions
d’asepsie.
La présence de signes cytologiques d’infection, la répétition
d’isolements de la même souche sont des arguments en faveur du rôle
pathogène.

S. epidermidis :
Il peut être responsable d’infections de prothèses vasculaires ou
articulaires, valvule cardiaques, de valves de dérivation du LCR et
d’infections diverses chez les immunodéprimés.

Caractères biochimiques des principales espèces de Staphylococcus


isolées chez l’homme :

S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus


Coagulase + - -
Fermentation du + + - ou +
Glucose
Fermentation du + - +
mannitoL
Fermentation du - - +
Xylitol
Phosphatase + + -
DNAse + - -
Novobiocine 5µg S S R

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