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Traveaux Dirigés De'histologie
Traveaux Dirigés De'histologie
D'EMBRYOLOGIE
Prpar par Mme L.CHADLI
Responsable de TD de la 1re anne
mdecine &chirurgie dentaire.
Service dHistologie & Embryologie
Facult de Mdecine
Universit dOran
TD N1
Techniques Histologiques
La technique dite *standard* consiste en la prparation dun fragment dorgane pour examen
au microscope. Elle requiert plusieurs temps successifs, savoir :
1. Prlvement
2. Fixation
3. Dshydratation
4. Imprgnation
5. Inclusion
6. Mise en bloc
7. Confection des coupes histologiques
8. Dparaffinage
9. Rhydratation
10. Coloration
11. Montage & Observation microscopique
1.
Prlvement :
Le prlvement, effectu sur un organe, doit se faire aussi dlicatement que possible afin
de ne pas meurtrir les tissus. Une fois obtenu, ce prlvement doit immdiatement tre
immerg dans un grand volume de liquide fixateur.
2.
Fixation :
La fixation a pour but la conservation des structures (dans un t at aussi proche que
possible de leur tat vivant) ainsi que le durcissement des pices. Les liquides fixateurs
les plus utilises en pratique courante sont le formol ou le liquide de Bouin (mlange de
formol et dacide picrique)
La dure de fixation varie s elon le volume des prlvements.
3.
Dshydratation :
Le but de cette technique est dliminer leau contenue dans les organes, par passage du
prlvement dans des bains dalcool de concentrations croissantes (de lalcool 50
jusqu lalcool absolu 100). Cette tape prpare linclusion, vu que la paraffine est
hydrophobe.
4.
Imprgnation :
Cette tape signifie le passage du prlvement dans un liquide intermdiaire afin den
liminer les traces dalcool. On utilise dans cette tape dimprgnation le xylne ou le
tolune.
5.
Inclusion :
Elle a pour but de permettre la ralisation de coupes fines et rgulires. Le milieu
dinclusion utilise est la paraffine.
Le prlvement baigne dans de la paraffine fondue (chauffe 56C) donc devenue
liquide et qui infiltre alors toute la pice.
6.
Mise en bloc :
Aprs 4 heures dinclusion, la paraffine liquide est coule dans un petit moule en
mtal*Barres de Leuckart*. Aprs refroidissement (dans un conglateur pendant toute
une nuit), on se trouve alors en prsence dun bloc de paraffine, dur, lintrieur duquel
la pice prleve est incluse.
7.
8.
Dparaffinage :
Le dparaffinage consiste, comme son nom lindique, liminer la paraffine, cest --dire
le milieu dinclusion. Les lames sont places sur une plaque chauffante ( 45-60C)
pendant 15 min. afin dobtenir la liqufaction et donc llimination de la paraffine..
9.
Rhydratation :
En immergeant les lames dans des bains dalcool de degr dcroissant (de lalcool 100
jusqu lalcool 50), puis dans de leau distille
10.
Coloration :
Le but de la coloration est daccentuer les contrastes afin de diffrencier les diffrents
constituent tissulaires. Les colorations les plus frquemment utilises associent deux ou
trois colorants diffrents :
Coloration lhmatoxyline-osine(HE) : o lhmatoxyline (substance
basique) colore les noyaux en violet et losine (substance acide) colore le
cytoplasme en rose. En pratique, cette coloration se fait de la manire suivante :
Hmatoxyline : un bain de 15 min ;
Rinage leau ;
Eosine : un bain dune minute ;
Xylne : deux bains successifs dune minute chacun.
Coloration lhmatoxyline-osine-safran(HES) : par ajout de safran colorant
en jaune les fibres de collagne.
Coloration au Trichrome de Masson cest--dire lhmatoxyline-osine(HE) +
un bleu ou un vert colorant les fibres de collagne.
11.
Ainsi dispose-t-on dune *prparation microscopique*(ou par abus de langage, dune lame) prte tre observe
au microscope.
TD N02
Epithliums de revtement
On dsigne le nom dpithliums des tissus forms de cellules juxtaposes
assurant une fonction de revtement ou de scrtion.
On en distingue ainsi deux groupes :
TD N2
Epithlium de revtement
1) coupe histologique dun pithlium tubaire
Ex : trompes de Fallope
Coloration : Trichrome de Masson
Interprtation :
Lpithlium de la trompe de Fallope est un pithlium prismatique simple cili, contient une
seule assise de cellules prismatiques reposant sur une membrane basale. Montrant au pole
apical des cils vibratiles ; ces derniers sont des expansions cytoplasmiques doues de
mouvements ondulants et transportant dans cette exemple lovocyte II.
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TD N3
Derme : il se compose dune couche de tissu conjonctif dense ; dans la quelle se situe
les diverses glandes de la peau et les follicules pileux.
Lpiderme :
Cest un pithlium pavimenteux stratifi (malpighien) kratinis , qui repose sur le
derme par une assise basale, dont les cellules se multiplient par mitose et se subissent
une volution caractrise par la production de la kratine.
Ces cellules assurent donc le renouvellement permanent qui dure en moyenne
27jours.
Lpiderme possde 5 couches :
1/ Couche corne (stratum cornum) : cest la couche superficielle de lpiderme
qui reprsente environ de son paisseur. Elle est compose de cellules kratinises
dpourvues de noyaux ; dont les couches superficielles se dtachent de la surface par
petites lamelles ou squames. Cest la Desquamation.
2/ Couche claire (stratum lucidum) : elle est forme par plusieurs ranges de
cellules aplaties sans noyaux, apparait homogne et correspond une zone de
transition.
3/ Couche granuleuse (stratum granulosum) : elle est reprsente par 2 5 couches
de cellules dont le cytoplasme est rempli de granulations denses.ces dernires sont
composes de kratohyaline, substance prcurseur de la kratine, qui va saccumuler
peu a peu dans les cellules du stratum granulosum pour occuper dans le stratum
cornum, la totalit de la cellule qui est alors transforme en une masse de kratine.
Cest la kratinisation.
4/ Couche pineuse (stratum spinosum) : il sagit de 5 6 couches de cellules
polydriques ; saplatissent au fur et mesure de leurs ascension. La surface de ces
cellules montre des prolongements protoplasmiques qui renferment des prolongeme nts
similaires issus des cellules adjacentes pour former des ponts intercellulaires. En
microscopie lectronique ; ces prolongements renferment des tonofibrilles.
5/ Couche basale (stratum germinativum) : la couche germinative est compose
dune seule assise de cellules prismatiques, rgulirement interrompues de cellules
pigmentaires : les mlanocytes.
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Le derme :
Constitue un tissu conjonctif fibro-lastique, richement vascularis, renferment de
nombreuses terminaisons nerveuses. On y trouve des glandes avec leurs canaux
excrteurs :
Glandes sbaces : toujours annexes aux poils ; elles secrtent une substance
huileuse : le sbum.
Glandes sudoripares : ce sont des glandes tubuleuses pelotonnes qui
secrtent la surface de la peau un fluide aqueux : la sueur.
Lhypoderme :
Cest un tissu conjonctif lche ; constitu de tissu adipeux, jouant un rle de coussin
protecteur contre les chocs. Les glandes sudoripares peuvent siger au niveau de
lhypoderme ; elles participent aux mcanismes de thermorgulation.
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TD N4
Epithlium glandulaire
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Interprtation : cest une glande endocrine ; vsiculaire contient plusieurs vsicules spars
entre eux par un tissu conjonctif richement vascularis. Chaque vsicule possde :
1 . Deux types de cellules :
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TD N5
Tissu conjonctif
Le terme de tissu conjonctif est un terme trs gnral sous le quel on
englobe une srie de tissus trs diffrents sur le plans morphologique et
fonctionnel ; mais possdant une unit embryologique.
Le tissu conjonctif est constitu par lassemblage de divers lments :
des cellules conjonctives ; des formations fibrillaires conjonctives ;
une substance fondamentale conjonctive ; des capillaires sanguins et
lymphatiques.
Parmi les diffrentes varits de tissus conjonctifs on a :
Tissu pauvre en fibres : tissu jeunes.
Ex : msenchyme (tissu embryonnaire).
Tissu prdominance de substance fondamentale
(Tissu comportant a autant de fibres ; que de cellules ; que de
substance fondamentale) :
tissu conjonctif lche :
Ex : msentre.
tissu lamelleux :
Ex : capsules dorganes sensoriels.
Tissu a prdominance cellulaire :
Ex : tissu adipeux.
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TD N6
Tissu musculaire
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TD N1
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II.
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TD N2
Le sperme
I. Gnralits :
On donne le nom de sperme au liquide libr lors de lejaculation.il est compos par les spermatozodes,
cellules sexuelles fabriques par les cellules germinales des tubes sminifres du testicule ; et par le liquide
sminal, qui correspond un mlange de secrtions provenant des glandes annexes du tractus gnital male
(prostate ; vsicules sminales ; glandes de Mery-cowper).
Lexamen cytologique et ltude des proprits physico-chimiques du sperme apportent des
renseignements souvent prcieux sur son pouvoir fcondant. Le spermogramme et le spermocytogr amme
constituent les examens cls de lexploration de la fertilit masculine. Ils font partie du bilan dinfertilit et
de strilit du couple.
II. Caractres gnraux du sperme :
Le sperme est un liquide de couleur blanchtre lgrement jauntre, de consi stance visqueuse, dune
odeur caractristique (rsulte de loxydation de la spermine et la spermidine), le pH du sperme est
variable entre 7.2 et 7.8.
La majeur partie du sperme provient des secrtions des glandes accessoires du tractus gnital ; aux
quelles sajoutent les spermatozodes produits par les testicules (ils ne prsentent que 5 10 seulement
du volume de ljaculat).
Le volume dun jaculat varie dun homme un autre.il est compris entre
2 6 ml ; il diminue avec la rptition des rapports s exuels et augmente en cas dabstinence prolonge.
La frquence des jaculations varie en fonction de lge. Le dlai minimum entre deux jaculations est
denviron 15 min chez un sujet jeune en bonne sant, et de 24H chez un homme g de 60 ans.
30 min 1 heure aprs ljaculation, le sperme subit une liqufaction grce a des enzymes dorigine
prostatique : phosphatases acides.
III. Lvaluation du spermogramme et du spermocytogramme :
Le spermogramme est lexamen biologique des diffrents paramtres constituants le sperme ; il permet
dvaluer :
La numration des spermatozodes par ml.
La mobilit des spermatozodes (en pourcentage) une et quatre heures aprs ljaculation.
La vitalit des spermatozodes(en pourcentage).
Le volume de ljaculat (en cm).
La viscosit du sperme.
Le PH du sperme.
La numration des globules blancs dans ljaculat.
Le spermocytogramme correspond lanalyse cytologique et morphologique des spermatozodes au
microscope, il permet dvaluer :
La morphologie des spermatozodes.
Le pourcentage des formes atypiques (formes anormales).
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B) Numration :
Lexamen du sperme liqufi, permet deffectuer des numrations de spermatozodes laide dun
hmatimtre.
Le sperme normal contient entre 20 millions 200 millions de spermatozodes par cm.les chiffres
inferieurs correspondent une anomalie.
Oligospermie : le nombre de spermatozodes est inferieur de 20 millions spermatozodes/cm.
Azoospermie : absence des spermatozodes mais prsence de cellules rondes.
Aspermie : absence totale du sperme.
C) Mobilit :
90 des spermatozodes sont normalement mobiles lmission ; on parle de :
Asthnospermie : si la mobilit est inferieur de 60 .
Akintospermie : si les spermatozodes sont vivants mais immobiles.
Ncrospermie : si on trouve que des spermatozodes mort.
V. Le liquide sminal :
Le liquides sminal, rsulte des diffrentes secrtions des glandes annexes (les vsicules sminales ; la
prostate ; les glandes bulbo-urtrales).
1/ Les vsicules sminales : elles laborent un liquide clair et visqueux, parfois appel plasma sminal.
Cest une scrtion alcaline riche en lipides, protides, elle renferme aussi lacide ascorbique et du fructose.
2/ La prostate : la scrtion prostatique un PH moyen de 6 ,5 ; elle est riche en oligo-lments (sodium,
potassium, calcium, zinc) ; des enzymes (protolytiques et phosphatases acides) ; des composs azots :
spermine et spermidine (leurs oxydation libre lodeur caractristique du sperme) et de lacide citrique.
3/ Les glandes de Mery-cowper : ces glandes secrte un liquide riche en acides amines libres et en lipides.
Cette scrtion alcaline neutralise lacidit de lurtre.
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TD N3
Ovognse et ovulation
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II/ OVULATION :
3) Coupe histologique montrant la rupture Folliculaire (Ovulation)
Coloration : Hmatine - Eosine
Interprtation :
Au moment de lovulation, il y a coulement du liquide folliculaire qui entraine avec lui
lovocyte II et ses enveloppes : la zone pellucide entour par les cellules folliculeuses de la
coronna radiata et le cumulus oophorus.
Lovocyte II est libr avec le premier globule polaire, chaque cellule possde n chromosome
et 2q ADN.
Dans lovaire ; il reste un follicule vid de son liquide et de son ovocyte cest le follicule
dhiscent.
Ce dernier va se transformer en corps jaune progestative, sa dure de vie est de 10 jours, il
secrte les strognes et essentiellement la progestrone ; qui ont pour rle la prparation de
lendomtre une nidation.
Si la fcondation a lieu ; le corps jaune reste 3 mois ; il prend le nom de en corps jaune
gestative, le temps de formation du Placenta.
Si non, ce corps jaune rgresse en corps blanc.
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TD N3
Fcondation
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TD N 5
La grossesse gmellaire
I. Dfinition :
La grossesse gmellaire est une grossesse caractrise par le dveloppement de deux ftus dans une
seule cavit utrine en mme temps. Elle est appele aussi :
o
o
o
Gmellit
Grossesse multiple
Grossesse pluri ftale
Les faux jumeaux sont gntiquement diffrents, donc ils sont semblables des frres et
surs ns diffrentes poques ; Les deux nouveaux -ns issus de cette grossesse peuvent tre
deux garons, deux filles ou une fille et un garon.
Ils ne prsentent pas de tolrance aux greffes croises parce quils ont des caractres sanguins
diffrents.
Les deux bbs partagent pendant 9 mois la cavit utrine de leur mre, mais se dveloppement
sparment ; Ils sont toujours bichoriaux biamniotiques. (Il existe deux cavits amniotiques et
chaque ftus se dveloppe dans une cavit amniotique propre lui;On trouve deux placentas spars )
La procration mdicalement assiste (PMA) est parfois responsable de
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Chaque jumeau se dveloppe dans une cavit amniotique propre lui, la membrane qui les
spare (la cloison inter-ovulaire) est compose de deux couches qui sont les deux amnios .
Elle reprsente entre 65 70 % des grossesses gmellaires monozygotes.
Jumeaux monozygotes monoamnotiques monochoriaux :
La division de l'embryon survient au stade de disque embryonnaire (la cavit amniotique est
dj forme avec embryon deux feuillets).
Les deux jumeaux se dveloppent ensemble dans une cavit amniotique unique.
Donc il existe une seule masse placentaire, un seul amnios et un seul chorion.
Elle reprsente 1 2 % des grossesses gmellaires monozygotes. Il existe un cas spcial dans
ce type de gmellit appel :
Grossesse gmellaire monozygote mono-amniotique mono choriale avec monstre double
(jumeaux conjoints ou siamois) : la survenue des jumeaux conjoints se fait par la fusion
secondaire et partielle de deux disques embryonnaires monozygotes dj spars. Les deux
disques embryonnaires peuvent fusionner en diffrents points et sous angles varis, et le
rsultat, une grande varit de types de fusion entre les jumeaux conjoints.
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TD N 6
La contraception
I.
Dfinition :
Cest un ensemble des moyens qui permettent dviter temporairement une
grossesse ; il sagit en effet dune mthode rversible ; les autres mthodes, dites
de strilisation sont irrversibles (cest la ligature des trompes chez la femme ;
ligature des dfrents chez lhomme).
Les mthodes contraceptives reposent sur trois principes :
Empcher la production des gamtes (blocage de lovulation chez la
femme la pilule pour femme et par le blocage de la spermatognse chez
lhomme la pilule pour homme) ;
Empcher la rencontre entre les gamtes (abstention priodique, cot
interrompu, prservatif masculin, diaphragme) ;
Empcher la nidation de luf fcond en modifiant ltat de la
muqueuse utrine (strilet, pilule du lendemain).
Lefficacit dune mthode contraceptive est mesure par lindice de
Pearl : nombre de grossesse (dchec) survenant sur une anne, chez 100
femmes pratiquant une mthode contraceptive.
II.
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III.
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