Chromatographie en phase gaz

MariePauleBassez http://chemphys.ustrasbg.fr/mpb

1. Introduction
LeconceptdeChromatographieenphasegazatintroduitparArcherMartin etRichardSynge(anglais)en1941 (NobelChimie1952"fortheirinventionofpartitionchromatography"oule dveloppementdelachromatographiedepartageliquideliquide). 2types: Chromatographiegazsolide:chromatographied'adsorption. peuutiliseenraisondestranesdanslespicsd'lutionprovoquesparlanon linaritduprocessusd'adsorption.CGS Chromatographiegazliquide,basesurlepartagedesconstituants sparer,lessoluts,entreunephasegazeusemobileinerteappelegazvecteur etunephaseliquidefixesurlasurfaced'unsupportporeuxinactif.CGL

2. Chromatographie gaz-liquide
2.1 Principe Volumedertention
Laphasegazeusemobileestcompressible.Lagrandeur"volumedertention" estutiliseavecunfacteurdecorrectionpluttquelagrandeur"tempsde rtention".
VR=tR.D VR=volumed'lutionoudertentiond'unsolutretenuparlaphasestationnairePS tR=tempsdertentiondecesolut D=dbitdelaphasemobile(flowrate)encm3.s1oumL.s1 VM=tM.DouV0=t0.D VM=V0=volumedelaPM,oud'unsolutnonretenuparlaPSdanslacolonne (=elutionvolumeofanunretainedspecies) tM=t0=tempsmort=tempsdertentiondecesolut

V'R=VRV0=t'R.D

V'R=volumedertentionrduit(adjustedretentionvolume)

Pourtenircomptedufaitquelegazvecteurestcompressibleetquelapressiondansla colonneaugmenteentrel'entreetlasortiedelacolonneetdoncqueledbitaugmente (cf.ref.EPFL),ArcherMartinetA.T.Jamesontintroduitunfacteurdecorrection:j. VN=j.V'R=j.t'R.D VN=volumedertentionrduitoucorriglimite(netvolume) j=estlefacteurdecorrectiondecompressionoucoefficientdepertedecharge j=3/2.[(p21)/(p31)] p=Pe(pressiond'entre)/Ps(pressiondesortie) inletpressure/outletpressure

Facteurdeslectivitoudesparation
=KB/KA=t'R(B)/t'R(A) SiBestchoisicommerfrence,alorsestunindiced'identificationdusolutA.Ilest indpendantdesparamtresdelacolonne,l'exceptiondelatemprature.

Indicedertention
Kovats,en1958,aproposl'indicedertentionIcommeparamtred'identification dessoluts.Lechromatogrammeenrgimeisothermed'unmlangedenalcanes montrequeleslog(t'R)croissentlinairementenfonctiondunombrend'atomesdeC.

Pardfinition:I(nalcane)=100xnbred'atomesdecarbone
indpendammentduremplissagedelacolonne,deTetdesautresconditionsdechromatogr.

I(solut)peuttreobtenupartird'unmlangedusolutetd'aumoins2alcanes normaux(hydrocarburesaliphatiqueslinairessatursCnH2n+2)quiencadrentI(solut).

Explication solutAdansphasemobilesolutAdansphasestationnairerG0 pourqu'ilyaitsparationchromatographique,ilfautrG0<0 K=[A]Stat/[A]Mob Kestdonclaconstanted'quilibreetlerapportdedistribution puisque rG0=RT.lnK(cf.chapitre"Equilibrechimique") etque K=.k'=.t'/tM(cf.chap.Notionsfond.Chromatographie) lnt'=lnK+ln(tM/);lnt'=rG0/RT+ln(tM/ )pourA Lacourbelnt'enfonctiondendesnalcanesA,B,C,...variecomme(rG0)Tct. Ilenestdemmepourlogt'

rgimeisotherme:7=60C phasestationnaire:squalane:C30H62

Fig.DroitedeKovats des6nalcanesdeC4C9: log(t'R(n))=f(n)=a.n+b Lapentedeladroitedpendde lacolonneetdurglagedu chromatographe. L'indicedertentionnedpend quedelaphasestationnaire. Indicedertentiondutolune= 749
nombred'atomesdecarbonesn
Refdudessin:D.Skoog2003,livreetsite

3. Instrumentation
Appareil de chromatographie en phase gaz

Legazporteurdoittre chimiquementinerte,tels: He,N2,O2,CO2. Sonchoixdpenddu dtecteurutilis.

Fig.shmad'unappareildechromatographiegaz
http://www.rocler.qc.ca/pdubreui/chromatographie/CG/chroma2.html

Le flux de gaz est divis quand une proprit du gaz vecteur dpend du solut enceinte thermostate qui permet de chauffer la colonne T~400C rgle le dbit

cylindre gaz

Fig.shmad'unappareildechromatographiegazRef:D.Skoog2003,livreetsite
0,5<Padmission <3,5 atm ; dbit=25-150mL.min-1 (col. remplies) et 1-25mL (col. capillaires)

Fig.Courbesdevan Deemterpourune collonecapillaireetles gazvecteurN2,HeetH2

Ref.E.Prichardetsite vitesse moy. de dplacement des molcules de la PM

Le minimum de la courbe de N2, se produit sur une chelle des vitesses ou des dbits (D=u.S,S=sectiondelacolonne)trstroite,contrairementauminimumdescourbespourHeet H2 qui sont plus larges et qui se produisent pour des dbits plus levs. Un dbit plus lev signifieuneanalyseplusrapide(D=V/t,mL/s).HeetH2sontdoncprfrsettantdonnles prcautionsdescuritconcernantH2,He(noninflammable)estsouventutilis. Dans le cas des colonnes remplies, l'allure des courbes est semblable et le choix du gaz vecteurdpenddesadisponibilit,desacompatibilitaveclesdtecteurs...

Injecteur

La temprature de la chambre de vaporisation peut tre programme de ~20 300C: Injecteur PTV: ProgrammedTemperature Vaporizer

chambre de vaporisation ~50C au dessus de Teb du constituant le moins volatil introduction de la seringue

colonne Septum ou diaphragme travers par une microseringue qui contient le compos liquide ou gazeux. Injection pour les colonnes remplies: ~1 L-20L Pour les colonnes capillaires, l'injection peut tre de ~0,1L; un diviseur injecte une fraction de l'chantillon, le reste est jet: injecteur split/splitless

gaz vecteur

Fig.Injecteurvaporisationdirecte

Fig.Injecteuravecdiviseur
Ref.http://teaching.shu.ac.uk/hwb/chemistry/tutorials/chrom/gaschrm.htm

En modesplit,unepartiedel'chantillonest limineavantd'entrerdanslacolonnecapillaire. Inconvnient: Evaporation slective des composs les plus volatils avec modification de la compositionrelledel'chantilloninject.

Colonne

tube en mtal (acier, Cu, Al) ou en verre ou en tflon plac dans un four T cte: 20 400 C. Si T n'est pas ct, les rapports de distribution K ne sont pas cts.

support poreux et inerte constitu de grains de ~0,2 mm greffs ou imprgns de la phase stationnaire

diam. ext.=1/8 inch=3,18mm ou 1/4 inch=6,35mm

(1inch=2,54cm)

longueur: ~1 6 m

revtement de polyimide, polymre thermiquement stable: Tmax= 370C silice fondue obtenue par combustion du ttrachlorosilane SiCl4 dans atm d'O2 diam. int.= ~0,1-0,75mm long.=25-100m

Fig.colonneremplie (garnissage)
Les colonnes remplies sont enroules: diam=10-30 cm. Elles supportent un dbit de gaz vecteur de ~10-40 mL.min-1

phase stationnaire: p. 0,05-5m dpose ou greffe

Fig.colonnecapillaire

Fig.Colonnesremplies a)cuivre,6feetx0,25inch=183cmx6,35mm=2mx6,4mmdiamext.; b)gauchedrte:aluminium4ftx0,25ind.e.;20ftx3/8in=~6mx1cmd.e.; acierinoxyd.10ftx1/8in=~3mx3,2mmd.e.;3ftx1/8in=~1mx3,2mmd.e.; c)verre2mx0,25ino.d.(d.e.)x4mmi.d.(d.int.)(1foot=30,48cm) Ref.:E.Barry2007livreetsite

b d

Fig.Colonnes capillaires

a)gauche:acierinoxydable,formedecrpe,25mx1/16in(1,6 mm)diam.ext.;centre:Aletsilicefondue30mx0,25mm diam.int.;droite:tubecapillaireenaciervide(uncoatedstainless steel)1/16indiam.ext.; b)silicefondue30mx0,25mmdiam.int.etsonsupport; c)borosilicate60mx0,75mmdiam.int.; d)photographied'unecolonnecapillaireet microphotographielectroniquebalayagedesonextrmit:on observelaphasestationnairedposesurlemtal.

Ref.:E.Barry2007livreetsiteetC.Szopa2001thse

Colonnes remplies
La phase stationnaire liquidedoit avoir uneaire de contact laplus levepossible avecla phasemobile.Elleestdoncdposesurdesgrainssphriquesdediamtre6080mesh=0,25 0,18mm ou 80100 mesh= 0,180,15 mm, ayant une surface spcifique ~28 m2/ g. A temprature leve, ce support solide doit rester inerte et uniformment mouill par la phase liquide. Lesupportleplusutilisestunmatriaunaturel,ladiatomiteou"terre diatomes"quiest unerochesdimentaireconstitueparl'accumulationoulasdimentationdecoquillesporeuses dediatomesdansleslacsetlesmers.Lesdiatomessontdesmicroorganismesunicellulaires, 1015m, ayant une coque fortement siliceuse forme de 2 valves et dont les gologues ont identifis~12000espces.Lastructureporeuseleurconfreunesurfacespcifiquede~20m2/g. LeurssurfacessontcouvertesavecdesgroupementssilanolSiOHetsiloxaneSiOSi. La diatomite rose a une grande surface de contact et son pH est lgrement acide: 67. La diatomiteblancheestlgrementbasique810.
(Ref.diatomite:R.Nakkad2005communication69;F.Champreux,unerocheauvergnate etE.Barry2007livreetsite).

Fig.microphotographielectroniqued'unediatome obtenueavecunmicroscopelectronique:
grossissement5000,tensiond'acclration:10,0kV
Ref:D.Skoog2003,livrep554etsite

Colonnes capillaires ou colonnes tubulaires ouvertes

Elles permettent des sparations sur des quantits trs faibles d'chantillon: <1g . Elles sont constitues d'un tube sur la paroi interne duquel est dpose la phase stationnaire.

ColonnesWCOT:wallcoatedopentubularcolumn,colonnecapillairefilmmince: Tube,enacierinoxydable,Al,Cuouenverre. Phasestationnaireliquidedpose. Depuis1979:FSOT,FusedSilicaOpenTubular: Ensilicefondueettrsflexibles:Lesparoissontplusmincesmaisrenforcesparunegaine enpolyimideappliquelorsdel'tirageducapillaire.Phasestationnairegreffechimiquemnt. ColonnesPLOT:PorousLayerOpenTubularcolumn: Phasestationnairesolide(adsorbant)dpose. ColonnesSCOT:SupportCoatedOpenTubularcolumn: Phasestationnaireliquideimprgnesurunsupportsolidetelquelaterredediatomes. Moinsutilises,tantdonnl'amliorationdestechniquesdedptetdegreffagedesphases stationnairesdirectementsurlaparoi(vaporation,rticulationinsituparliaisonCC..) Colonnessemicapillairesoumegaboreouwideboreoumacrobore DiamInt:0,53mm(=530m,"colonne530",L=550m)(col.capill.:0,15mm<D.I.<0,53mm). Injectiondummevolumequedanscolonnesremplies. Ellessontensilicegreffe,avecmoinsdeproblmesde"lessivage","bleeding"delaphase stationnaireparpertedecelleci,entraneparlegazvecteur. ColonnescapillairesnarrowboreoumicroboreGC:D.I.<0,18mm(mme0,10mm)pour chromato.rapide;L+petit:~10m.

fig.Comparaisondescolonnescapillairesetremplies
Ref.http://lepa.epfl.ch/ICP3_lecture_notes/Separation_Methods/Cours%202009/chromatoGC09

Fig. Comparaison des chromatogrammes obtenus avec 3 colonnes diffrentes 1974

Ref.:E.Barry 2007livreetsite

colonnesFastGC,2009

Fig.Sparationd'hydrocarburesdeC8C40enCPGavec a)unecolonnecapillaireconventionnelleL=30mxDI=0,25mmxdf=0,25met b)unecolonnecapillairedetype"narrowbore"10mx0,10mmx0,10mpour"FastGC"ou chromatographierapide;phasestationnaire(TR5MSnomcommercial),type:5%phnyl polysilphnylnesiloxane:DI,efficacitdelacolonne(N)

capillaire

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shortCapC.

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Tableau:Conditionsopratoiresdeschromatogrammesprcdents

Phase stationnaire
Propritsdelaphasestationnaire: faibletensiondevapeur;saT =~100CaudessusT eb col.max stablethermiquement;sansractionavecunsolut; propritsdesolvanttellesquelefacteurdertentionk'etlefacteurdeslectivit sesituentdansledomaineoptimalpourlessolutssparer.

Structuredesphasesstationnairesliquides Polysiloxanes

Danslastructure,serpteunmotifdebaseavec2chanescarbonesparatomedeSi: Polydimthylsiloxane:R=CH3liquidenonpolaire.

LapolaritetledomainedestabilitsontmodulsenremplaantdesCH3par: phnyleC6H5,cyanopropyle(CH2)3CN,trifluoropropyle(CH2)2CF3.

5%Phnylpolydimthylsiloxane:C6H5estli5%desatomesdeSidupolymre 70%Trifluoropropylpolydimthylsiloxane

Fig.Laphasestationnaire trifluoropropylepourcolonne capillairehauteperformance, Varian,(phaseVF200ms).

PolythylneglycolsPEG HOCH2CH2(OCH2CH2)nOHpolythylneglycol;liquidepolaire Carbowax20M(nomcommercial) HOCH2CH2(OCH2CH2)nOSilice greffagesurlesparoisensilicedelacolonneparuneliaisonCOSi

Epaisseurdufilmdephasestationnaire 0,1~5m;lesfilmspaissontutilisspourlessolutstrsvolatils,quisont ainsiretenuspendantuntempspluslong.Lasparationestamliore.

Fig.Chromatogrammeobtenuaveclaphase
70%Trifluoropropylpolydimthylsiloxane

Tableau:Quelquesphasesstationnairesenchromatographiegazliquide pourcolonnesrempliesetcapillaires
Phasestationnaire Polydimthylsiloxane TmaxC 350 Utilisations hydracarbures,aromatiques, strodes

5%Phnylpolydimthylsiloxane 50%Phnylpolydimthylsiloxane

350 estersmthyliquesd'acidesgras, alcalodes,composshalogns 250strodes,pesticides,glycols

70%Trifluoropropylpolydimthylsiloxane350 aldhydes,ctones,composs chlorsetnitrs Polythylneglycol 250 acides,alcools,thers, huilesessentielles,glycols 50%Cyanopropylpolydimthylsiloxane 240 acidesgraspolyinsaturs, acides,alcools polarit

Programmation de la temprature de la colonne

a 130C

Temperature Programmed Gas Chromatography TPGC a) La Tfour linairement en TPGC. b) Sparation isotherme des hydrocarbures de C6 C21 . 69C <Teb <360C La grande chelle des pressions de vapeur rend difficile le choix d'une T unique de sparation. Les hydrocarbures lgers sont lus ensemble (T trop lve). Les hydrocarbures lourds ont des pics larges enfouis dans la ligne de base. c) Sparation avec Prog Temp. Tous les pics sont bien rsolus et galement spars. Ils sont tous lus en 1/3 du temps d'lution isotherme.

b
50 250C par pas de 8C/min

Ref.http://scholar.lib.vt.edu/theses/available/etd-12092002-170253/unrestricted/kuthesis.pdf K.Urias 12/2002

Fig.Programmationdela tempraturedelacolonne

Ref. http://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/ chromatographiegazeuse

Couplage de technique
Uncouplagechromatographiegazeuse/spectromtriedemassepeuttre ralis. cf.http://atechimie.univlille1.fr/index.htmCPGSM

BIBLIOGRAPHIE
CyrilSZOPA,Analyseinsitud'unnoyaucomtaire:dveloppementet valuationdesperformancesd'unsystmedechromatographieenphasegazeuse pourlamissionRosetta,thse,Univ.ParisXII,19/12/2001. GwenolaBURGOTetJeanLouisBURGOT,MthodesInstrumentalesd'Analyse Chimique,TecetDoc2002. ColinF.POOLE,TheEssenceofChromatography,Elsevier2003. DouglasA.SKOOG,F.JamesHOLLER,TimothyA.NIEMAN,Principes d'AnalyseInstrumentale,DeBoeck2003. ElisabethPRICHARD,PracticalLaboratorySkills,GasChromatography,LGC, RoyalSocietyofChemistry,Cambridge,2003. FrancisROUESSACetAnnickROUESSAC,Analysechimique,Dunod2004. EugeneF.BARRYetRobertL.GROB,ColumnsforGasChromatography, Wiley,2007.

Complments: http://atechimie.univlille1.fr/pages/Chromato/Phase_gazeuse.htm http://nteserveur.univlyon1.fr/afsep/fichier/175_30_4_2004.pdf http://lepa.epfl.ch/ICP3_lecture_notes/Separation_Methods/Cours%202009/ chromatoGC09;EcolePolytechniquedeLausanne http://www.ucergy.fr/rech/labo/equipes/lppi/IMG/1CPGM1et3CPGM1

http://www.ipl.be/download/formation_continue/la_chromatographie_gazeuse.ppt