Test IMVIC

i. IMVIC :

Le test IMVIC comporte le test de recherche d’indole ; le test de rouge de méthyle (RM) et test
Voges-Proskauer (VP) et le citrate de Simmons.

Au départ on prélève une souche d’un milieu EMB ou on a fait l’isolement des coliformes et on la met
dans un tube avec l’eau physiologique a partir de ce tube on ensemence les tubes de EPI (eau
peptonné exempte d’indole) , de bouillon clark et lubs et de citrate de simmons.

a) Test d’indole :
1. Ensemencement :

Dans le milieu d’eau peptonné exempte d’indole on ajoute quelques gouttes a partir du tube qu’on a
préparé qui contient la bactérie à étudier.

2. Lecture des résultats :

Après incubation a 37°C pendant 24h on ajoute quelques gouttes de réactifs de KOVACS on agite et
on laisse reposer pour lire les résultats si on remarque la formation d’un anneau rose ou rouge sur la
surface cela indique la présence d’indole.(Indole+)

3. Résultats

Indole positive.

b) TEST RM et réaction de voges-proskauer :

Ce test est fait sur le milieu bouillon clark et lubs il permet la recherche des voies fermentaires des
entérobactéries si elle suit la voie d’acide mixte ou voie butylène glycolique par production de
l’acétoine.

1. Ensemencement :

On prélève à l’aide d’une anse ou pipette pasteur la souche qui se trouve dans le tube qu’on a
préparé au début et l’ensemencer dans le milieu clark et lubs.

2. Lecture des résultats :

Après incubation à 37°C pendant 24h repartir le milieu en 2 parties sur l’un on effectue le test de
rouge de méthyle sur l’autre le test VP ou le test de recherche d’acétoine.

 Le test de rouge de méthylène : on ajoute quelques gouttes du rouge de méthylène qu’on

ajoute dans l’un des tubes de bouillon clark et lubs l’apparition d’une couleur rouge indique
une réaction positive (pH<4.5) si la couleur reste jaune réaction négative.
 Le test VP : on ajoute quelques gouttes de l’alpha naphtol (VP1) et de soude caustique (VP2)
agiter puis laisser reposer 10min la présence se manifeste par l’apparition d’une teinte rouge
ou rose limitée en surface ou généralisée si on a l’absence de cette teinte on a VP-

3. Résultats

La bactérie suit la voie de fermentation d’acide mixte RM+ VP-

c) citrate de simmons :
ce milieu contient que le citrate de sodium le citrate c’est la seule source de carbone et d’énergie
permet de savoir si la bactérie peut fermenter le citrate ou non.

Ensemencement :

On prélève une goutte du tube qui contient la bactérie à étudier à l’aide d’une pipette de pasteur
effectué une strie centrale.

Lecture des résultats :

Le milieu contient un indicateur de ph après incubation à 37°C pendant 1 à 10j dans le cas ou il
ya utilisation du citrate ce qui provoque une alcalinisation du milieu qui fait virer l’indicateur du
ph (bleu de bromothymol) au bleu (citrate+) si le citrate n’est pas utilisé le milieu reste vert
(citrate-)

Résultats :

Citrate + notre bactérie peut utiliser le citrate comme source de carbone.