Département Génie Civil

Option GUE

Exercices de Microbiologie

Exercice 1

ETUDE DE LA CROISANCE DE Staphylococcus aureus

Une souche de Staphylococcus aureus est ensemencée sur 3 milieux:
 Milieu 1: milieu complexe contenant de l'eau, sels minéraux, extraits de viande;
 Milieu 2: milieu synthétique contenant eau, sels minéraux, glucose, thiamine;
 Milieu 3: milieu synthétique contenant eau, sels minéraux, glucose.
Question 1: Après incubation à 37°C, les milieux 1 et 2 deviennent troubles alors que
le milieu 3 reste limpide. Interprétez ces résultats. Quels sont les rôles du glucose, de
la thiamine, des extraits de viande ?
Question 2: L'évolution de la population bactérienne en fonction du temps dans les
milieux 1 et 2 est suivie en mesurant l'absorbance A des cultures à 620 nm. Les
résultats sont rassemblés dans le tableau suivant:

Ln A Ln A
t en
milieu milieu
heures
1 2
0 11,50 11,50
1 11,50 11,50
2 12,50 11,50
3 13,80 12,10
4 15,05 13
5 16,25 13,85
6 17,50 14,75
7 18,75 15,65
8 19,55 16,45
9 19,55 17,45
10 19,55 18,30
11 19,55 19,10
12 19,55 19,45
 2.1Tracer sur papier millimétré les courbes Ln A = f(t). Prendre comme échelle d'abscisse
1 cm = 30 mn et comme échelle d'ordonnée 1 cm = 0,5 U Ln
2.2. Indiquer, pour la culture sur milieu 1, les noms, les dures et les significations
physiologiques des différentes phases de la croissance.
2.3. Définir les paramètres caractéristiques de la croissance. Déterminer graphiquement
pour chaque cas le temps de génération (donnée Ln 2 = 0,7).
2.4. Que peut-on conclure de la comparaison des 2 courbes ?

Exercice 2

Etude de la croissance de Salmonella Typhimurium en fonction du

tryptophane

On détermine le taux de croissance d'une souche de Salmonella typhimurium dans un

milieu de culture additionné de solutions de tryptophane (Trp) de concentrations
croissantes

Les résultats expérimentaux après 18 heures d'incubation à 37° sont présentés dans le
tableau suivant:

Tube de culture [Trp] en mg/mL µx expo en h-1

1 0 0
2 6 0,01
3 9 0,22
4 12 0,70
5 15 1,20
6 18 1,60
7 21 2,05
8 24 2,50
9 27 2,80
10 30 2,80

1- Tracer la courbe µx expo en fonction de la concentration en Trp du milieu (Echelle:

1cm = 2 mg/L et 1cm = 0,2 h-1).
Commenter et interpréter cette courbe.
2- Que représente le tryptophane pour Salmonella typhimurium ? Citer d'autres
substances jouant un rôle analogue à celui du Trp vis à vis d'autres bactéries.

3- On reproduit l'expérience dans les mêmes conditions en remplaçant la solution de

Trp (1 cm3 par tube) par 1 cm3 d'un hydrolysat protéique (complexe proteique)

En phase exponentielle de croissance on dénombre:

- au temps 6h: 6,31.106 bactéries par cm3.
- au temps 8h: 8,47.107 bactéries par cm3.

Calculer le taux de croissance et le temps de génération de la souche après avoir défini

ces paramètres (on prendra Ln 2 = 0,7).