Chapitre 6

Chapitre 06
Les immunothérapies

Master II Biotechnologie et pathologie moléculaire

Immunotechnologie

Dr. L. YSMAIL-DAHLOUK

Année universitaire: 2022/2023

 Plan
Introduction

1- Le principe de l’immunothérapie

2- Les deux grands types des immunothérapies

2-1- Immunothérapie Passive
2- 1-1 : L’utilisation des anticorps monoclonaux thérapeutiques
2- 1-2 : Le transfert de lymphocytes T; Les cellules CAR T
a- CAR T Cells: Principe.
b- CAR T Cells: Mécanisme immunologique.
c-CAR T Cells: Structure.
d- CAR T Cells: Processus de fabrication.
e- CAR T Cells: Utilisations cliniques.
f- Thérapie CAR T cells: effets secondaires
 Introduction

« Cancer » = maladies se caractérisant par la

multiplication et la propagation anarchiques de cellules
anormales.

Chaque patient représente un cas particulier par le type de

cancer, le caractère invasif de la tumeur, son âge, son état de
santé général et a donc besoin de recevoir un traitement
approprié.

Différents traitements anticancéreux existe: La chirurgie, La

radiothérapie, La chimiothérapie, hormonothérapie..
Dont le type choisi dépend de chaque individu, du type de cancer,
de son évolution et de l’état général de l’individu.
Néanmoins, le traitement du cancer a connu plusieurs
étapes importantes suivant les découvertes
scientifiques et le progrès médical.

Des avancées scientifiques menèrent à la découverte

dans les années 2000 des nouveaux médicaments dont
l’action est dirigée spécifiquement contre les
cellules tumorales= médecine de précision, l’objectif
étant de proposer au patient un traitement adapté aux
anomalies de sa tumeur, elle repose principalement
sur l’immunothérapie.

L’une des voies de recherche pour lutter contre le cancer

est d’associer les connaissances sur la
physiopathologie du cancer avec des techniques de
biologie.
 Le Concept d'immunosurveillance immunitaire ou
la règle des 3 E:

Le concept d’immunosurveillance
correspond à l’action de notre
système immunitaire qui
surveille en continu les
différentes cellules de notre
organisme à la recherche de
cellules cancéreuses.

La réponse immunitaire se fait

selon le cycle de l’immunité
anticancéreuse (Figure 1).

Immunité anti-tumorale:
Principalement implication
des : lymphocytes T CD8,
cellules NK, l’interféron
gamma et de molécules
cytotoxiques comme la
perforine ou le granzyme, dans
le contrôle de cette croissance Figure1. Le cycle de l’immunité anticancéreuse (d’après Chen DS, Mellman I.
tumorale. Oncology
Meets immunology: the cancer-immunity cycle. Immunity 2013;39[1]:1-10).
 En 2004, Dunn et al., (Immunity journal) ont
suggéré que l’immunosurveillance est composée
de trois phases:
Première phase = Elimination, dont le système immunitaire est
capable de reconnaître les cellules cancéreuses et les éliminer:
implication des les cellules NK et les lymphocytes T CD4+ et CD8+
permettant l’éradication de certaines tumeurs avant même qu’elles
deviennent détectables,

Deuxième phase = Equilibre, du fait de mutations génétiques ou

d’un dysfonctionnement du système immunitaire certaines cellules
tumorales vont persister. Néanmoins le système immunitaire
parvient à réguler la population de cellules tumorales durant cette
phase = phase d’immuno-editing,
Troisième phase = phénomène d’échappement, survient
lorsque, suite à plusieurs mutations successives, les cellules
tumorales échappent à la réponse immunitaire, cela
principalement en influençant certains points de contrôle
immunitaires désactivant ainsi les lymphocytes T. Pendant cette
phase les cellules tumorales ont acquis la capacité de détourner la
reconnaissance et/ou la destruction par le système et peuvent se
développer et former des tumeurs qui s’achève par le
développement d’une tumeur cliniquement détectable.
Figure : Désactivation des cellules immunitaires par
les cellules tumorales
 Cela signifie qu’en stimulant le système immunitaire il est possible
de contrecarrer le développement de ces cellules. C’est le principe de
l’immunothérapie anti-cancéreuse ou immuno-oncologie.
 1-Principe de L’immunothérapie

L’immunothérapie est un domaine de recherche clinique en plein

essor.

Des traitements d’immunothérapie ont fait leurs preuves chez de

nombreuses personnes atteintes de certains types de cancer.

= L’une des voies de recherche les plus prometteuses en oncologie, est

envisagée comme arme additionnelle de lutte contre le cancer.

= Consiste à mobiliser des composants du système immunitaire du

patient afin de lutter contre son propre cancer.

= Consiste à manipuler, par différents traitements, le système

immunitaire afin de lutter contre différentes pathologies.

= Consiste à modifier, améliorer, « booster» les défenses immunitaires du

patients et ce, via plusieurs différentes stratégies= améliore la capacité
de l’organisme à détecter et à attaquer les cellules cancéreuses.
Des avancées dans le domaine de l’immunologie (étude de
tous les aspects du système immunitaire) ont permis de
mieux comprendre comment on peut mettre à profit les
propres mécanismes de défense de l’organisme pour
traiter les cancers du sang.

Les efforts de recherche en oncologie portent aujourd’hui

sur la manière dont le système immunitaire peut aider à
détruire les cellules cancéreuses.

Ces dernières années = une meilleure compréhension des

mécanismes subtils employés par le système
immunitaire pour nous défendre ou pour provoquer des
maladies du système immunitaire, étape déterminante, a
conduit au design rationnel de nouveaux
médicaments extrêmement efficaces pour le traitement
de maladies fréquentes du système immunitaire.

COMPREHENSSION…recherche académique…société de
biotech.
 2015:
2011: Atezolizumab (iPDL1)
Ipilimumab (iCTLA-4)
approuvé dans
le mélanome
1990:
BCG Approuvé
dans le cancer de la 2014:
vessie Nivolumab (iPD1)
2000: approuvés dans le mélanome
IL-2 approuvé dans
le cancer du rein et mélanome

1980:
- Infiltrats immunitaires anti-tumoraux,
-Stimulation de l’immunité de l’hote et
régression tumorale suite a une injection de
produits bactériens.
 2- Immunothérapie,
les deux grands types

L’immunothérapies consiste à utiliser le système immunitaire comme

cible ou médicament.
2-1- L’immunothérapie passive

= la majorité de ce qu’on appelle les thérapies ciblées.

=Repose sur l’utilisation d’agents immunologiques qui

vont cibler directement les cellules tumorales.

= Basée soit sur:

- L’administration de d’anticorps monoclonaux dirigés

contre les antigènes tumoraux,
- le transfert de lymphocytes T dirigés directement contre
les cellules tumorales.
2-1-1 L’utilisation des anticorps
monoclonaux thérapeutiques
= En agissent via plusieurs modes d’action (Revoir cours Anticorps monoclonaux),
= Globalement utilisés pour le traitement cancer du sein, des lymphomes, des
tumeurs ORL…

tels :

• Le Trastuzumab ciblant la protéine HER2 (Human Epidermal growth Factor

Receptor 2) indiqué dans le traitement des cancers du sein surexprimant HER2 ;
• l’Imatinib ciblant le BCR-ABL (Breakpoint Cluster Region ABeLson tyrosine kinase)
prescrit dans le traitements des leucémies myéloïdes chroniques ,
• Cetuximab ciblant l’EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) utilisé dans le
traitement des cancers colorectaux et ORL (Oto-Rhino Laryngologie) et le
• Bevacizumab ciblant le VEGF donné dans le traitement de différents cancers dont
le cancer du sein.

Question: Des Inconvénients ???!

2-1-2 Le transfert de
lymphocytes T

= Reprogrammer en ex vivo le système immunitaire du

patient en restaurant la capacité des lymphocytes T à
reconnaitre et à cibler les cellules cancéreuses.

= Basée sur l’utilisation des fonctions cytotoxiques des

cellules effectrices de l’immunité du patient.

= Ce concept de reprogrammation génique des lymphocytes

T donne naissance aux lymphocytes T exprimant un
récepteur d’antigène chimérique (CAR) spécifiques des
cellules tumorales (chimeric antigen receptor).

Ce concept se situe à la croisée des concepts

d’immunothérapie précédents mais aussi dans le champ de
la thérapie génique et cellulaire et plus largement de la
médecine régénérative.

Figure : Principe des cellules CAR-T
Les cellules CAR-T autologues= modification
des lymphocytes T du patient afin qu’ils
expriment des CAR reconnaissant des
antigènes spécifiques des cellules tumorales.
Les récepteurs antigéniques chimériques =
Molécules artificielles, issues de
modifications génétiques, permettant
aux lymphocytes T un mécanisme de
ciblage spécifique qui améliore leur
faculté de recherche, d’identification et
de destruction des cellules tumorales
porteuses d’un antigène particulier.
Les cellules CAR-T
A- principe:
= le fruit de la recherche et des travaux
d’équipes académiques.
L’équipe du Pr. Gross, en 1989, est la première à
rapporter l’utilisation d’un CAR dans un
lymphocyte T.
Thérapie par lymphocytes T à
récepteur antigénique chimérique (CAR-T,
d’après son acronyme anglais) est une
immunothérapie qui utilise les lymphocytes T
d’un patient pour reconnaître et attaquer les
cellules cancéreuses.
Sont des lymphocytes T
génétiquement reprogrammées ex
vivo afin de cibler spécifiquement les
cellules tumorales du patient : il s’agit
par conséquent de thérapies
cellulaires et géniques produites
selon un processus complexe.
b-Mécanisme immunologique:
Se sont les lymphocytes T cytotoxiques qui servent de base à la
production des cellules CAR-T, présentant le TCR et le CD3 et
certainement un CD8.

NB:
1- L’activation des lymphocytes T-CD8
nécessite deux signaux:

- Le premier signal (signal d’activation):

Interaction CMH1-Peptide
antigénique-TCR
- Le deuxième signal (signal de co-
stimulation) délivré par l’interaction
entre le CD28 présent à la surface du
lymphocyte T-CD8 et le récepteur B7
(CD86).

Figure : Activation du lymphocyte T

Nature Reviews Immunology 1, 220-228 (2001)
 NB: 2-La reconnaissance des antigènes par les lymphocytes T
cytotoxiques effecteurs entraine l’activation de voies de transduction qui
conduisent à l’exocytose de protéines déclenchant l’apoptose de la cellule visée
(granzymes et perforines).

Figure : Rôle des Lymphocytes T cytotoxiques

bases de l’immunologie fondamentale et clinique. Abul K. Abbas, Andrew H. Lichtman
• Un domaine extracellulaire=La fraction de
liaison à la cible du CAR = provient d’un anticorps,
C-Structure du CAR:
• Un domaine intracellulaire = chargé de
transmettre un signal d'activation dès la
reconnaissance de l'antigène, provoquant une lyse
la cellule tumorale porteuse de l’antigène cible par
le lymphocyte T modifié.
Peut comprendre, outre le domaine entraînant
l'activation cellulaire et la réponse cytotoxique, un
ou plusieurs domaines provenant de protéines
réceptrices de costimulation pouvant améliorer la
capacité de prolifération et la survie des cellules
CAR-T.
 Figure : Structure du CAR
APC, antigen-presenting cell; CAR, chimeric antigen receptor; mAb, monoclonal antibody; MHC, major
histocompatibility complex; scFv, single-chain variable fragment; TCR, T-cell receptor.
Chimeric Antigen Receptor T-Cell Therapy for the Community Oncologist; Maus M, The Oncologist 2016
 NB: Un des intérêts majeurs de ce
système transgénique est de permettre
l’activation du lymphocyte T après
reconnaissance de l’antigène tumoral cible
et ce sans nécessiter la présentation du
peptide antigénique par une cellule
présentatrice d’antigène, au niveau d’une
molécule du CMH.
 D-Processus de fabrication des cellules CAR-T
autologues :
Etape 1: Le patient subit en premier lieu une leucaphérèse => le produit, les PBMC, va subir un
lavage puis une sélection et activation des lymphocytes T en lymphocyte T cytotoxique (CD8+)
via des billes magnétiques.

Etape 2: Transduction (ou transfection) ex vivo: Les lymphocytes T isolés seront génétiquement
modifiés de manière à exprimer un récepteur artificiel en surface. pour ce faire, ces lymphocytes
seront transduits via un vecteur viral (lentivirus ou rétrovirus) avec du matériel génétique codant pour un
CAR spécifique de l’antigène tumoral.

Etape 3: Expansion ex vivo: une phase d’expansion/culture cellulaire dans un bioréacteur en

présence de IL-2, IL-7,IL-15. Puis les cellules sont lavées à nouveau puis conditionnées pour le
transport avant injection au patient (cryoconservation).

Etape 4: avant l’injection des cellules CAR-T, Le patient va subir une Lymphodéplétion (par une
courte chimiothérapie comprenant un ou plusieurs agents à visée lymphodéplétive) afin d’améliorer
l’efficacité et la persistance des cellules injectées.. Il en résulte une aplasie, le patient doit donc être
placé en milieu stérile.

Etape 5: l’injection des cellules CAR-T peut avoir lieu (par voie intraveineuse), les lymphocytes T modifiés
(une « armée » qui patrouillera à la recherche de cellules exprimant l’antigène cible ) vont alors s multiplier et
exercer leurs fonctions cytotoxiques contre les cellules tumorales ciblées.

Posologie :
La dose unique cible injectée au patient se situe entre 2,0.106 et 2,5.108 cellules CAR-T par kg.
Généralement, la production de cellules CAR-T prêtes à être administrées au patient dure environ 3 à 4
semaines.
Récap: Mode d’action
E-Utilisation clinique des CAR-T Tableau. Antigènes cibles des CAR pour les
cancers hématologiques et tissus sains pouvant
exprimer la cible (D’apres Thérapie par lymphocytes T à récepteur antigénique
chimérique, leukemia and lymphoma society. 2017)

CAR-T approuvés ou
faisant l’objet d’études
cliniques dans les
cancers hématologiques.

IgK : chaîne légère d’immunoglobuline

kappa;
LAL : leucémie aiguë lymphoblastique;
LH : lymphome de Hodgkin;
LLC : leucémie lymphoïde chronique;
LMA : leucémie myéloïde aiguë;
LNH :lymphome non hodgkinien; ROR 1 :
récepteur tyrosine kinase orphelin de
type 1.
 Exemple de cible pour les CAR T
= CD19, une cible dans les
hémopathies malignes à cellules:

= C’est l’antigène le plus souvent ciblé dans

l’immunothérapie CAR-T pour la leucémie et le
lymphome.
= exprimé uniquement à la surface de presque
tous les lymphocytes B sains et cancéreux,
notamment ceux du lymphome et de la
leucémie.

= KYMRIAH (tisagenlecleucel), CAR T anti-

CD19 approuvé pour le traitement de leucémie
aiguë lymphoblastique (LAL) à lymphocytes B.
F-La thérapie CAR-T, Effets Secondaires ?!
1- Le Syndrome de relargage de cytokines:
La multiplication des cellules CAR-T dans l’organisme et la destruction des cellules cancéreuses favorisent la
production de cytokines.

Les cellules CAR-T rejoignent leurs cibles et sont rapidement activées => libération massive de cytokines
inflammatoires: IL-6, TNFα et IFNγ = une « tempête » de cytokines produites et libérées mettant la vie du patient
en danger.

2- Déficit en lymphocytes B :
Suite a une destruction des lymphocytes B cancéreux, mais surtout les lymphocytes B sains= une conséquence
prévisible d’un traitement efficace par cellules CAR-T ciblant le CD19.
= Réduction des capacité Anti-infectieuse.