Faculté des Sciences Année académique

Département de Physiologie 2021 - 2022

Animale

Fascicule de Cours de BIO 331

(Physiologie des Régulations)
Partie : Endocrinologie

Auditoire : Etudiant de semestre 6 du Parcours Biologie et

Physiologie Animale

Chargés : METOWOGO Kossi, Professeur Titulaire

KANTATI Yendubé T., Assistant
 Objectifs
A l’issue de cet enseignement, l’étudiant sera capable de :

 Définir les termes suivants : glande, glande endocrine, glande exocrine, glande mixte,
hormone.

 Localiser et décrire les principales glandes endocrines, leurs mécanismes

physiologiques, les hormones qu’elles sécrètent et leurs actions spécifiques

 Expliquer les principaux mécanismes du système endocrinien, en décrire les

composants et leurs rapports anatomiques (hypophyse, hypothalamus, épiphyse,
thyroïde, parathyroïdes, thymus, pancréas, surrénales, gonades).

 Les techniques biologiques d’exploration des fonctions endocrines

INTRODUCTION A L’ENDOCRINOLOGIE

I- Généralités

Chez les organismes unicellulaires (les bactéries) toute cellule répond à une stimulation
extérieure par des signaux qui peuvent, grâce à la courte distance à parcourir, être transmis par
diffusion des composés chimiques. Par contre chez les organismes multicellulaires, les
différents groupes cellulaires spécialisés (organe) doivent être intégrés et coordonnés. Chez
l’homme c’est le système endocrinien qui, en corrélation avec le système nerveux constitue le
système de régulation majeure de l’organisme. Le système nerveux dirige les activités de
l’organisme au moyen de l’influx nerveux (activité électrique). Le système endocrinien
sécrète dans la circulation sanguine des molécules, de médiateurs appelés hormones qui
parviennent à presque toutes les cellules du corps de façon lente et continue. L’endocrinologie
est la partie de la physiologie qui étudie les hormones, leur distribution, leur régulation, leur
effet physiologique et pathologique.

II- Les hormones

1- Définition

Les hormones sont des messagers chimiques produits par les cellules glandulaires (par les
glandes) et déversés dans le milieu intérieur le plus souvent dans le sang où ils sont véhiculés
vers les organes cibles. Les glandes sont des organes spécialisés dans la sécrétion des
hormones. On distingue:
 les glandes endocrines déversent leur produit de sécrétion directement dans le sang.
Exemple de l’hypothalamus, l’hypophyse
 les glandes exocrines disposent d’un canal excréteur par lequel les substances
fabriquées sont déversées à l’extérieur: surface corporelle, tube digestif. Exemple de
glande sudoripare
 les glandes amphicrines sont à la fois endocrines et exocrines : Exemple de pancréas
dont la partie endocrine sécrète l’insuline (hormone hypoglycémiante) et le glucagon

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 (hormone hyperglycémiante). La partie exocrine sécrète le suc pancréatique qui est
déversé dans le tube digestif au niveau du duodénum.

2- Les récepteurs hormonaux

Les hormones sont déversées dans le sang et sont véhiculées vers différents organes mais ne
produisent leur effet que sur les cellules cibles particulières. Les hormones influent sur leurs
cibles en se liant à des récepteurs spécifiques qui sont des protéines ou glycoprotéines
insérées à la surface des membranes cellulaires ou sur des organites intracellulaires. Seules les
cellules cibles d’une hormone possèdent les récepteurs qui peuvent le reconnaître et s’y lier.
En général une cellule cible possède 2000 à 100.000 récepteurs pour une hormone dont elle
est cible.
On distingue deux types de récepteurs en fonction de leur localisation:

 Récepteurs membranaires localisés dans la membrane plasmique, ils sont classés en :

- Récepteurs à activité de canal ionique : ce sont des récepteurs polymériques dont les
sous-unités subissent un changement conformationnel lors de la fixation de l’agoniste, ce
qui permet le passage d’ions. Ex : le récepteur nicotinique à l’acétylcholine.
- Récepteurs monomériques à 7 domaines transmembranaires : ils sont couplés aux
protéines G. Leur stimulation induit une interaction du récepteur avec une protéine G, ce
qui induit ensuite une production de second messagers (AMPc, GMPc, PLC, Ca++…). Le
premier récepteur de cette famille qui a été décrit est celui de la rhodopsine. Les nombreux
récepteurs (récepteurs adrénergqiues, dopaminergiques…) qui appartiennent à cette famille
semblent dériver d’un récepteur ancestral commun.

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- Récepteur-enzymes : ils associent sur une même protéine de la membrane plasmique une
fonction réceptrice (liaison du médiateur) et une fonction enzymatique. La fixation du
médiateur sur le récepteur module l’activité enzymatique. Récepteur-enzymes à activité
guanylyl cyclase produisant du GMPc, Ex : récepteur à l’ANP (atrial natriurétique peptide)
Récepteur à activité tyrosine kinase, ex : récepteur de l’insuline.

 Récepteurs intracellulaires (cytosoliques ou nucléaires), localisés dans le noyau

cellulaire ou migrent du cytosol vers le noyau de la cellule :
Ce sont des récepteurs nucléaires : ex : récepteurs des hormones thyroïdiennes, des hormones
stéroïdiennes. Ils se fixent après activation par leur ligand sur l’ADN et induisent des
modifications de la transcription de certains facteurs, par exemple la stimulation de la
synthèse de protéines.
NB: A l’exception des récepteurs d’hormones thyroïdiennes la plupart des récepteurs font le
trajet cytosol, noyau.

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En fonction de leur structure et de leur mode d’action les récepteurs sont classés en :
 Récepteur canal ou ionotrope
 Récepteur couplé au protéine G ou métabotrope
 Récepteur enzymatique
 Récepteur nucléaire

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 3- Hormones circulantes et hormone locale
Les hormones qui passent dans le sang et exercent leurs effets sur les cellules cibles éloignées
sont appelées hormones circulantes ou hormones endocrines. Celles qui accomplissent leurs
effets à proximité sont appelées hormones locales dont on distingue deux types :
 les hormones paracrines influent sur les cellules voisines
 les hormones autocrines ont pour cible les cellules mêmes qui les sécrètent.
Les hormones finissent par être désactivées dans le foie et excrétées dans les urines. Le réseau
hormonal est une amplification car le signal hormonal est toujours en quantité faible (10-8 à
10-12 mol/l) et la réponse peut être très importante

Fig : Hormones circulantes

Fig : Hormones locales

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 4- La classification des hormones

On classe les hormones en trois catégories en fonction de leur constitution chimique et en

deux catégories en fonction du contrôle de leur production

a- La classification en fonction de leur constitution chimique

En fonction de leur constitution chimique, les hormones sont classées en trois catégories.
 Les hormones aminées qui dérivent toutes de l’acide aminé appelé tyrosine (acide
aminé est le nutriment essentiel indispensable à l’organisme, issu de l’hydrolyse des
protéines). C’est l’exemple des hormones thyroïdiennes, l’adrénaline sécrétée par la
médullosurrénale, la noradrénaline libérée par les terminaisons sympathiques.
 Les hormones protéiques concernent la majorité des hormones. Elles sont constituées
d’un nombre plus important d’acides aminés et bien souvent synthétisées initialement
sous forme de protéines inactives. Elles nécessitent l’intervention d’une enzyme pour
devenir actives. C’est l’exemple de l’insuline.
 Les hormones stéroïdes ont une structure cyclique et leur précurseur le plus courant est
le cholestérol (lipide de la classe des stéroïdes). On trouve dans cette catégorie les
hormones produites par le cortex surrénalien (partie périphérique de la glande
surrénale) à savoir le cortisol, l’aldostérone et les hormones produites par les testicules
et les ovaires : testostérone, progestérone.

b- La classification en fonction du contrôle de leur production

On classe les hormones en deux groupes en fonction du contrôle de leur production : celles
contrôlées par le système nerveux et celles contrôlées par le système périphérique.
 Les hormones contrôlées par le système nerveux correspondent à une série
d’hormones produites par l’axe hypothalamus et l’hypophyse. Dans ce cas, leurs

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 composés périphériques correspondants ainsi que leurs effets métaboliques sont
associés aux fonctions cérébrales d’intégration somatique et de correspondance avec
l’extérieur. Toutefois il peut y avoir intervention des facteurs externes au système
neuro-hormonal. C’est l’exemple de l’aldostérone. La sécrétion des hormones suit des
rythmes de modalités différentes et d’une manière générale, le système fonctionne en
grande partie automatiquement selon des règles établies au cours du développement et
intégrées au niveau du système nerveux.
 Les hormones du système périphérique sont particulièrement impliquées dans la
régulation des grands métabolismes. Pour exemple, la production d’insuline par le
taux de glucose sanguin (glycémie) est un mécanisme automatique direct sans
intervention nerveuse.

5- Biosynthèse des hormones

La biosynthèse des hormones dépendent de leur nature chimique.

 Synthèse des hormones peptiques

Les hormones peptidiques sont synthétisées à partir d'acides aminés via un ARN messager,
lui-même issu d'une matrice d'ADN au sein du noyau cellulaire. Les précurseurs des
hormones peptidiques (pré-prohormones) sont alors traités en diverses étapes, typiquement
dans le réticulum endoplasmique, y compris l'élimination de la séquence de signaux N-
terminale et parfois la glycosylation, résultant en prohormones.
Les étapes de ce processus de synthèse comprennent :
– la transcription du gène en acide ribonucléique (ARN) prémessager ;
– la transformation de celui-ci en ARN messager (ARNm) mature ;
– la traduction de l’ARNm en polypeptide ;
– la maturation de ce polypeptide pendant son cheminement dans les organites de la cellule
endocrine ;
– l’exocytose permettant la sécrétion de l’hormone.

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  Synthèse des hormones stéroïdes

Toutes les hormones stéroïdiennes proviennent du cholestérol. Le cholestérol provient

essentiellement de l'apport sanguin - exogène par l’alimentation ou endogène par synthèse, à
partir de l'acétyl coenzyme A (CoA) - et est transporté par les lipoprotéines de basse densité
(LDL).
Il peut être également synthétisé dans les cellules qui produisent les hormones stéroïdiennes et
être utilisé lors de déstockage des gouttelettes d'esters de cholestérol par l’acyl cholestérol
acyl transférase (ACAT).
Le cholestérol (C27) est transporté vers les mitochondries par un mécanisme dépendant de la
LH régulé par une protéine de transfert dite protéine activatrice de la stéroïdogénèse (StAR ou
steroidogenesis activator protein). Ce transfert intra-mitochondrial du cholestérol constitue
l’étape limitante de la stéroïdogénèse.
Dans la mitochondrie, le début de la cascade de la stéroïdogénèse est marqué par le clivage du
cholestérol (C27) en prégnénolone (C21) par le cytochrome P450scc (side-chain clivage). La
prégnénolone, biologiquement inactive, est éjectée dans le réticulum endoplasmique où elle
est métabolisée sous l’action d’enzymes oxydatifs du groupe des cytochromes P450. La
prégnénolone est alors convertie en une variété de stéroïdes C19.

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Fig : Biosynthèse des hormones stéroïdes

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  Synthèse des hormones aminés

Les catécholamines dérivent de la tyrosine par hydoxylation et décarboxylation.

Les hormones thyroïdiennes se forment par iodation de résidus tyrosyl au sein d’une grosse
protéine, la thyroglobuline. La condensation de deux résidus iodotyrosyl dans la
thyroglobuline donne naissance à des iodothyronines qui sont finalement libérée par
protéolyse de la thyroglobuline.

Fig : Synthèse de cathécolamine

Fig : Synthèse des hormones thyroïdienne

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 6- Mécanisme d’action des hormones

Les hormones circulent à peu près au même moment dans le sang et par conséquent
l’hormone et sa cellule cible doivent se reconnaître mutuellement. Cette reconnaissance est
rendue possible grâce à la présence de récepteurs au niveau des cellules cibles : les récepteurs
étant des sites de liaison spécifiques entre le messager (hormone) et la cellule cible
(effecteur). Selon l’hormone le récepteur est situé différemment dans la cellule cible.

 Mécanisme d’action des hormones lipophiles et récepteurs cytosoliques

Les des hormones stéroïdes liposolubles sont situés à l’intérieur de la cellule cible : dans le
cytoplasme ou dans le noyau. C’est l’exemple d’hormone thyroïdienne : thyroxine (T4 ou T3
active ou inactive). Dans ces conditions les hormones traversent relativement facilement la
membrane cellulaire grâce à la liposolubilité

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Les hormones lipophiles sont des messagers à effet direct (hormones stéroïdes, testostérone,
estradiol, progestérone, cortisone, aldostérone, l'hormone thyroïdienne, la vitamine D, qui est
en réalité une hormone, et les rétinoïdes.) Après pénétration dans la cellule, ils se lient à une
protéine intracellulaire, appelée récepteur, dont ils modifient la conformation pour qu'elle
puisse interagir, au niveau nucléaire, avec le DNA.
Le messager, en raison de son caractère lipophile, traverse la membrane plasmique et interagit
soit avec le récepteur présent dans le cytoplasme et c'est le complexe messager-récepteur qui
pénètre dans le noyau et se lie au DNA, soit avec le récepteur présent dans le noyau et c'est le
complexe formé qui interagit avec le DNA. En réalité, le complexe messager-récepteur se
dimérise avant d'interagir avec le DNA.
La partie du récepteur qui, après activation par l'hormone, se lie au DNA, a une structure dite
en doigts de zinc car les atomes de zinc par leurs liaisons avec des résidus histidine et
cystéine lui donnent une forme de doigts.
La partie du DNA où le complexe hormone-récepteur se fixe est désignée par HRE (hormone
response element).
La conséquence de l'interaction entre le complexe récepteur-messager et la partie régulatrice
du gène est soit une activation soit une inhibition de la transcription du DNA en mRNA qui
commande la biosynthèse des protéines correspondantes mais aussi en RNA de transfert ou
tRNA et en RNA ribosomique ou rRNA.

 Mécanismes d’action d’hormones non liposoluble et récepteurs membranaires

Les récepteurs des hormones hydrosolubles qui de nature protéique (insuline) et de la

médullosurrénale (catécholamines : adrénaline, noradrénaline) sont placés sur la surface

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externe de la membrane plasmique de la cible. Dans ce cas, lorsque l’hormone est fixée au
récepteur, un signal est déclenché et va activer un messager secondaire à l’intérieur de la
cellule. Le second messager ainsi formé enclenche les mécanismes qui permettent
l’expression de l’activité hormonale.

7- Etude de la liaison ligand-recepteur.

Elle permet de définir l’affinité et la sélectivité d’un ligand, mais ne permet pas de définir sa
nature agoniste ou antagoniste.
L’affinité d’un ligand pour un récepteur est la puissance de l’interaction physico-chimique
entre le ligand et son récepteur

a) Les techniques d’étude de ces liaisons nécessitent :

 Un traceur radio-marqué sélectif du récepteur avec une radioactivité élevée (Il y a
compétition entre le ligand radioactif et le ligand froid)

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  Des préparations enrichies en récepteurs :
- Récepteur purifié (artificiel)
- Membranes cellulaires ou cellules isolées hyper-exprimant le récepteur et naturellement
purifiées.

b) Les critères définissant un site de liaison spécifique (récepteur) sont :

 Affinité : l’affinité élevée augmente la probabilité que le site étudié soit un récepteur
d’intérêt. La reconnaissance d’un ligand par un récepteur est toujours < 10-6 mol.l-1 ( Il
faut noter qu’une hormone a besoin d’un récepteur de haute affinité et qu’un
neuromédiateur a besoin d’un récepteur de faible affinité.)
 Saturabilité : le nombre de sites spécifiques est forcément limité.
 Réversibilité des liaisons: les médiateurs physiologiques ainsi qu’une partie des
médicaments sont réversibles.
 Stéréospécificité : un seul des isomères optiques du ligand est actif sur le récepteur

Les trois premiers critères définissent la liaison ligand-récepteur.Pour considérer un site de

liaison spécifique comme étant un récepteur, il faut trouver la fonction biologique et la
distribution tissulaire des sites de liaison observés.

c) l’effet de la liaison ligand-recepteur

 Quantification des effets :
La réponse graduelle : c’est la réponse biologique en fonction de la dose ou de la
concentration de l’agoniste. L’étude se fait grâce à une courbe dose/réponse (que l’on peut
transformer en une sigmoïde semi-log)
DE50 ou CE50 : dose ou concentration induisant 50% de l’effet max.
CI50 : concentration inhibant 50% d’un effet. Le taux plasmatique de l’animal (CE50) doit être
environ 1000 fois inférieur à la DL50.

 Agoniste, antagoniste.
o Agoniste : substance qui possède une affinité pour un récepteur et qui exerce une activité
intrinsèque à ce niveau. C’est une substance qui stimule et qui possède les critères de
spécificité. On caractérise son effet par l’activité intrinsèque α comprise entre [0 ;1]
-Un agoniste est complet si l’effet observé est proportionnel au nombre de récepteurs stimulés
: donc, au maximum des concentrations, il donne un effet maximum biologique: α = 1
-Un agoniste est partiel s’il n’induit pas une activité totale : 0 < α < 1.
o Antagoniste : substance qui possède une affinité pour le récepteur mais qui est dépourvue
d’activité intrinsèque à son niveau. Il empêche l’agoniste physiologique de produire son
effet.
Un antagoniste peut avoir aussi une activité intrinsèque α’, mais α (de l’agoniste) = 0
-Un antagoniste est compétitif s’il se fixe sur le même site de liaison que l’agoniste
physiologique. Il y a donc une compétition entre les antagonistes et les agonistes qui suit la loi
d’action de masse.
-Un antagoniste est non-compétitif s’il ne se fixe pas seulement sur le site de liaison de
l’agoniste.
Les interactions antagoniste/agoniste n’obéissent pas à la loi de l’action de masse. Il y a une
diminution de l’effet maximum. Le déplacement de la courbe concentration/effet n’est donc
pas parallèle.

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 III- Méthodes de dosage hormonal et de biologie moléculaire en endocrinologie

Dosage en endocrinologie
L’endocrinologie est une spécialité où la clinique et la biologie sont indissociables : le
diagnostic clinique est confirmé par le dosage d’hormones ou de leurs actions sur des
effecteurs. Les premiers dosages hormonaux ont été réalisés en mesurant l’effet chez l’animal
de l’administration d’un échantillon à tester (dosage biologique) : on peut citer l’injection
d’urine humaine chez la lapine, permettant le dosage de l’human chorionic gonadotrophin
(hCG) urinaire en comptant les points d’ovulation au niveau des ovaires (technique de
Friedman). Ces techniques ont laissé la place à des techniques fondées essentiellement sur
l’immunologie et la biochimie.

Qualité du dosage et du prélèvement

Qualité du dosage
Les principaux critères systématiquement évalués sont :
– la sensibilité ou limite de détection ;
– la spécificité ;
– la variabilité : évaluation des variations lors de la répétition des dosages dans des conditions
identiques, d’un jour à l’autre, d’un manipulateur à l’autre, d’un échantillon à l’autre, etc. ;
– l’exactitude : évaluation de la concordance de dosages réalisés sur différentes dilutions d’un
échantillon ; de plus, pour les immunodosages, évaluation de l’effet du sérum (ou du plasma)
du patient sur le dosage (mesure de la « récupération » de l’hormone par le sérum/plasma,
mesure d’une interaction avec des composés du sérum/plasma) ;
– la corrélation à une technique de référence (lorsqu’elle existe), l’utilisation d’un standard de
référence pour étalonner chaque dosage, etc.

Malgré ces précautions, des variations importantes peuvent être observées lors du dosage
d’un même échantillon d’un laboratoire à l’autre ou d’une technique à l’autre. Afin de guider
le praticien, le laboratoire est tenu d’associer à chaque résultat les limites normales du test.

Qualité du prélèvement
La qualité d’un dosage dépend également de la qualité de l’échantillon qui parvient au
laboratoire. Un acheminement et un conditionnement rapides du prélèvement sont essentiels
et sont souvent à l’origine d’erreurs dans les centres où certaines explorations hormonales
délicates ne sont pas réalisées régulièrement. Il existe par ailleurs des contraintes particulières
pour certains dosages : certaines hormones peptidiques comme l’adrenocorticotrophic
hormone (ACTH) (adrénocorticotropine) sont très fragiles, nécessitant un transport dans la
glace au laboratoire et une centrifugation immédiate pour congélation. La glycémie veineuse,
indispensable pour affirmer le diagnostic d’hypoglycémie, doit également être acheminée
rapidement car les hématies présentes dans l’échantillon consomment le glucose. Il existe
enfin des types de tubes de prélèvement à respecter en fonction du dosage demandé (à
préciser avec le laboratoire : prélèvement sur éthylènediamine-tétra-acétique [EDTA],
héparine, tube sec, etc.).
La connaissance des techniques de dosage permet de mieux comprendre l’origine des
variations et les limites d’un dosage.

Techniques immunologiques de dosage

Ces techniques sont les plus répandues : elles consistent à utiliser des anticorps spécifiques
des hormones. Les techniques classiques de dosage sont le radio immunoassay (RIA),

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l’immuno radiologic measurement assay (IRMA) ou l’enzyme linked immunosorbent
assay (ELISA). Aujourd’hui apparaissent, notamment avec l’avènement des automates, des
techniques nouvelles dérivées de ces techniques fondamentales. Trois critères principaux
permettent de décrire les principes d’un immunodosage :
– le type de dosage : direct ou par compétition ;
– le système traceur ;
– les supports utilisés pour les réactions.

Dosage par compétition et dosage direct

Dans un dosage par compétition, l’hormone à doser est mélangée avec de l’hormone marquée,
puis incubée avec des anticorps spécifiques. On utilise une faible quantité d’anticorps pour
avoir un large excès d’hormone. Dès lors, l’hormone à doser et l’hormone marquée entrent en
compétition pour la liaison aux anticorps. Après isolement des complexes
anticorps/hormones, on mesure la quantité d’hormone marquée. La quantité d’hormone à
doser est inversement proportionnelle à ce résultat. La technique de référence est le RIA (Fig.
1A) : le traceur est radioactif (Iode 125 ou tritium) ; les anticorps peuvent être en solution ou
fixés à un support solide.

Dans un dosage direct ou immunométrique, l’hormone à doser est incubée en présence d’un
excès d’anticorps. La technique la plus courante est la technique « sandwich » : l’hormone à
doser est reconnue par deux anticorps spécifiques d’épitopes différents. Le premier anticorps
fixe la totalité de l’hormone. Le second, couplé à un traceur, marque les molécules
hormonales fixées au premier anticorps. La quantité d’hormone est proportionnelle à la
quantité de traceur mesurée. La technique de référence est l’IRMA: le premier anticorps est
fixé aux parois du tube de réaction ; le traceur du deuxième anticorps est un isotope radioactif.

La technique Elisa dérive directement de l’IRMA : le traceur radioactif est remplacé par une
enzyme qui catalyse une réaction colorée.

Les techniques par compétition sont en général moins sensibles et moins spécifiques que les
dosages directs, et sont surtout utilisées lorsque l’hormone ne possède qu’un seul épitope,
c’est-à-dire que l’on ne dispose que d’un seul anticorps spécifique. Citons l’exemple du
cortisol, encore souvent dosé par RIA.

Différents systèmes traceurs

Les isotopes radioactifs ont été les premiers traceurs à avoir été couplés aux hormones et aux
anticorps (RIA et IRMA). Des isotopes de demi-vie relativement brève sont généralement
utilisés (iode 125), ce qui rend les trousses de dosage rapidement périssables. Ces produits
exposent aux risques des radiations ionisantes lors de leur manipulation. Pour ces différentes
raisons, d’autres systèmes ont été développés et les dosages par compétition sont parmi les
seuls qui utilisent encore la radioactivité.
La colorimétrie est aujourd’hui très utilisée, notamment dans les automates : une enzyme qui
catalyse une réaction colorée est couplée à un anticorps. L’intensité de la couleur du produit
est mesurée. Les enzymes les plus courantes sont la phosphatase alcaline, qui transforme le 4
nitrophénylphosphate (incolore) en 4-nitrophénol (jaune) et la peroxydase (substrat :
orthophénylène diamine associé à l’eau oxygénée). Ces enzymes peuvent également catalyser
la formation de composés luminescents (c’est-à-dire produisant de la lumière spontanément) :

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 on parle alors de chimioluminescence. On peut citer l’action de la peroxydase sur le luminol.
L’Elisa est l’exemple type d’utilisation d’un traceur enzymatique.

Ces techniques présentent des limites spécifiques à connaître : certains composés inhibent les
enzymes, comme l’EDTA (inhibiteur de la phosphatase alcaline). Par ailleurs les techniques
optiques de lecture peuvent être faussées par la présence en abondance dans l’échantillon de
certains composés chromogènes comme la bilirubine (ictère sévère) ou l’hémoglobine
(prélèvement hémolysé).
Il existe d’autres traceurs comme la fluorescence ou les microparticules (or, argent) plus
rarement utilisés. Citons enfin des techniques en développement consistant à caractériser la
formation du complexe immun des dosages sandwich par mesure du transfert d’énergie entre
deux particules, chacune étant couplée à un anticorps (exemple : technologie Tracet).

Le couplage du traceur à l’anticorps monoclonal peut être direct, covalent ou non. Parfois ce
couplage est réalisé par le biais d’un autre anticorps. Par exemple : anticorps monoclonal de
souris couplé à un anticorps antisouris marqué (plus facile à produire).

Différents supports
Les réactions en phase liquide consistent à incuber en solution les anticorps et les hormones à
doser. La séparation des complexes anticorps/hormone fait ensuite appel à différentes
techniques biochimiques de précipitation, d’adsorption (par exemple, anticorps biotinylés
adsorbés sur de la streptavidine). Parfois, ce sont les hormones libres qui sont éliminées (par
exemple, adsorption sur charbons actifs).
Les anticorps sont le plus souvent liés à un support solide comme le tube de réaction : il s’agit
de réactions en phase solide. Les tubes peuvent être associés en plaques.
Les anticorps peuvent aussi être fixés à des microbilles magnétiques, et récupérés par
l’application d’un champ magnétique. Parfois enfin, les anticorps sont fixés sur des
membranes.

Classification des méthodes de dosage immunologiques

Traceur Dosage avec compétition Dosage sans compétition

(anticorps limitant) (anticorps en excès)

Radiomarqué Radioimmunoassay (RIA) Immunoradiometric assay (IRMA)

Enzyme Enzymoimmunoassay (EIA) Enzyme-labeled immunosorbent assay (ELISA)
Fluorescent Fluoroimmunoassay (FIA) Immunofluorometric assay (IFMA)
Luminescent Luminoimmunoassay (LIA) Immunoluminometric assay (IFLA)

IV- La régulation de la sécrétion hormonale

On peut avoir une rétroaction à effet négatif ou positif

1- La rétroaction à effet négatif

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C’est un principe qui est généralement auto-limitant. Les hormones exercent des effets
biologiques qui directement ou indirectement inhibent une sécrétion supplémentaire
d’hormone.
Exemple : L’insuline est sécrétée par les cellules bêta du pancréas quand le glucose augmente
dans le sang. L’insuline va augmenter l’utilisation du glucose par les cellules d’où sa
concentration diminue et par conséquent la sécrétion de l’insuline chute.

2- La rétroaction à effet positif

Une hormone exerce des actions biologiques qui, directement ou indirectement provoquent
une sécrétion supplémentaire de l’hormone.
Exemple : La poussée de l’hormone lutéinisante (LH) juste avant l’ovulation résulte d’une
action en retour à l’effet positif des oestrogènes sur l’hypophyse antérieure. La LH agit sur les
ovaires pour leur faire produire encore plus d’oestrogènes. (La LH stimule l’ovulation, la
formation du corps jaune, la synthèse des oestrogènes et de progestérone)

V- Etude de quelques glandes endocrines

1- L’axe hypothalomo-hypophysaire

Les deux principaux systèmes de régulation d’un organisme sont le système nerveux et le
système endocrinien. L’interface et la coordination de ces deux systèmes sont assurées en
grande partie par l’hypothalamus.

a- L’hypothalamus
L’hypothalamus est situé dans le diencéphale et forme le plancher du troisième ventricule. Il
coordonne l’activité de la glande hypophyse par la sécrétion de peptides et d’amines.
L’hypothalamus produit des peptides et des amines qui induisent la production par l’
hypophyse d’hormones trophiques qui, nous le verrons plus tard, influencent à leur tour la
production d’autres hormones, ou d’hormones qui auront une action biologique directe sur les
tissus (prolactine).
La vasopressine et l’ocytocine sont produites dans l’hypothalamus par des neurones
dont les extrémités distales se trouvent dans la neurohypophyse. La sécrétion de ces
neurohormones se fait donc au niveau de la neurohypophyse. Il contrôle ainsi le SNA, le SE
et certains comportements.
-Fontion Neuro-Végétative
-Fonction Neuro-Endocrinienne
-Fonction de régulations des comportements
L’hypothalamus intervient pour intégrer les réponses motrices viscérales et somatiques, en
fonction des besoins du cerveau, constitue une véritable horloge interne.
L’Hypothalamus est constitué de cellules neurosectrétoires associées pour former des
noyaux regroupés en deux systèmes :
 Système magnocellulaire: Noyaux supraotique et paraventriculaire sécrettant
l’ocytocine et l’ADH.
 Système Parvocellulaire: Plusieurs noyaux, N.Arqué, les noyaux de l’aire préoptique
Ces neurones envoient des projections aux contacts des capillaires du plexus porte primaire et
secrètent les neurohormones et envoient aussi des projections au centres du système nerveux
autonome, aux centres de la réticulée et le tronc cérébral.

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Ainsi dans ce système parvocellulaire, les neurones hypothalamiques élaborent des substances
chimiques ayant pour cible les cellules glandulaires du lobe antérieur de l'hypophyse : des
releasing factors (RF) ou
libérines stimulant l'activité et des inhibiting factors (IF) ou statines inhibant l'activité des
cellules antéhypophysaires.
Ces facteurs sont synthétisés dans l'aire hypophysiotrope de l'hypothalamus (principalement le
noyau arqué). Ces afférences sont les supports anatomiques du contrôle nerveux des fonctions
hypothalamiques. Bref c’est l’hypothalamus qui permet à l’hypophyse de sécréter des
hormones, on parle de système hypotalamo-hypophysaire

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 b- Épiphyse (ou glande pinéale)
L’épiphyse sécrète une neuro-hormone appelée mélatonine pendant la période
nocturne. L’épiphyse reçoit des afférences de neurones reliés aux photorécepteurs de la rétine
de l’œil qui lui permet de réagir à la présence ou à l’absence de lumière
(« un troisième œil »). La mélatonine intervient dans les cycles annuels de plusieurs espèces
animales (Cervidés, ovins…). La baisse d’ensoleillement conduit à l’augmentation de
mélatonine qui déclencherait la période de reproduction. Chez l’homme, le rôle de cette
hormone n’est pas clair. Elle interviendrait (avec l’hypothalamus) dans la régulation du cycle
veille-sommeil et dans la régulation des humeurs. Problème de décalage horaire

c- Hypophyse
Située dans la selle turcique, elle est formée de deux parties : l’adénohypophyse ou
antéhypophyse d’origine ectoblastique et la neurohypophyse ou posthypophyse, d’origine
neurectoblastique. Il existe une organisation fonctionnelle entre l’hypothalamus et
l’hypophyse. L’hypothalamus est relié à l’hypophyse par l’infundibulum (tige de connexion
ou tige pituitaire)

 Antéhypophyse
L’antéhypophyse ou l’adénohypophyse est une glande endocrine de type trabéculaire avec
cellules endocrines en cordons entourés d'un riche réseau capillaire. Elle synthétise et excrète
nombreuses hormones dont la synthèse dépend de facteurs synthétisés par l'hypothalamus.
Les hormones secrétées sont :

- la thyréostimuline ou hormone thyréotrope ou thyrotrophine (TSH) stimule la

sécrétion et la croissance de la thyroïde

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 - l’hormone corticotrope ou corticotropine (ACTH) stimule la sécrétion et la croissance
du cortex surrénalien
- l’hormone de croissance (GH) ou somatotrophine accélère la croissance corporelle
- l’hormone folliculostimulante (folliculostimuline FSH) stimule la croissance des
follicules ovariens chez la femme et la spermatogenèse chez l’homme
- la prolactine stimule la sécrétion lactée
- l’hormone lutéinisante (LH) stimule l’ovulation, la formation du corps jaune et la
synthèse des oestrogènes (testostérone) et de la progestérone.
- L’hypophyse intermédiaire est rudimentaire chez l’homme. Il sécrète la mélanotropine
(MSH) qui stimule la synthèse de la mélanine chez l’homme ?

 Posthypophyse
L’hypophyse postérieur ou neurohypophyse dérive d’un tissu nerveux dont les corps
cellulaires sont situés dans les noyaux hypothalamiques. Les hormones du lobe postérieur sont
synthétisées dans l’hypothalamus, rassemblées dans les granules de sécrétion puis
emmagasinées dans le lobe postérieur avant leur libération. On en distingue essentiellement
deux hormones:
- la vasopressine ou hormone antidiurétique (retient l’eau au niveau des reins)
- l’ocytocine stimule l’éjection du lait et la contraction de l’utérus

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 L’hormone de croissance
• La STH est une hormone polypeptidique de 191 acides
aminés
• Sécrétion est sous la dépendance d’un GRF
hypothalamique
• Elle est augmentée en cas d’hypoglycémie et pendant le
sommeil et est mise au repos pendant l’hperglycémie
• En pathologie l’augmentation donne l’acromégalie

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 Actions de la GH

• Métabolisme glucidique:
– GH = hormone hyperglycémiante
– résistance à l’insuline

• Métabolisme lipidique:
– GH = action lipolytique
– dégradation des triglycérides
– augmentation des acides gras libres
–
• La GH permet la synthèse et l’action de facteurs de croissances les
somatomédines appelés IGF1(insuline like growth factor)

• L’IGF1 est l’hormone produite sous l’effet de l’hormone de croissance

essentiellement par le foie c’est cette hormone qui permet a l’hormone de
croissance d’avoir certains effets

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 Actions de la GH
• Métabolisme protéique:
– GH = hormone anabolisante
– facilite l’incorporation tissulaire des acides aminés
– Anabolisme musculaire
• Croissance osseuse
La GH stimule la:
– production et activité des ostéoblastes (ostéogénèse)
– formation cartilagineuse (chondrogénèse)
– croissance épiphysaire de l’os, jusqu’à la soudure des
cartilages de conjugaison

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 Régulation de l’axe somatotrope

• L’hormone de croissance est sécrétée selon un rythme pulsé

influencé par le nycthémère. Pulse de sécrétion toutes les 3 ou 4
heures avec des pics plus importants la nuit

• Contrôle de la sécrétion par 2 facteurs hypothalamiques

• Un facteur activateur GHRH: growth hormone releasing

hormone (somatolibérine)

• Un facteur inhibiteur ou GHIF : growth hormone inhibiting

factor ( somatostatine)

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27
Régulation de la GH
SST

GH-RH
SST : somatostatine

GH : Growth Hormone

GH-RH : Growth Hormone

Releasing Hormone

IGF-1 : Insuline like

Growth Factor 1

Régulation de la GH
GH IGF1

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 La prolactine

• Hormone polypeptidique de 199 acides aminés

• Le nombre de cellules à prolactine est variable elles se multiplient
pendant la grossesse
• La sécrétion de prolactine augmente pendant la grossesse
• La dopamine issu de l’hypothalamus freine la prolactine
• La TRH stimule la prolactine
• La prolactine provoque au niveau de la glande mammaire la
fabrication de lait
• En pathologie le dosage permet de faire le diagnostic d’adénome à
prolactine

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 Les stimulines hypophysaires

• ACTH sécrétée de façon continue par hypophyse mais à taux variable selon les
heures maximum le matin à 8 heures minimum le soir 24 heures. La sécrétion est
réglée par le cortisol qui agit sur le CRH hypothalamique qui commande la
sécrétion d’ACTH. L’ACTH stimule la surrénale et stimule la production de
l’ensemble des hormones surrénaliennes

• FSH sécrétion rythmée par le cycle menstruel sur l’ovaire intervient dans le
recrutement des ovocytes sur le testicule favorise la spermatogenèse

• LH chez la femme sécrétée à partir de la puberté toutes les 90 mn et

déclenche l’ovulation chez l’homme elle est sécrétée de façon cyclique et entraine la
production de testostérone

• TSH sécrétée de façon permanente mais son taux est variable dans la journée.
Elle provoque la sécrétion de T3 et de T4 sécrétion sous la dépendance de la
TRH hypothalamique

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Hormones hypothalamiques : TRH, CRH, LH-RH, DA, GHRH, somatostatine
Système porte HH

posthypophyse
ADH , OCY
antéhypophyse

TSH
PRL

ACTH GH

LH FSH

testicules ovaires

T3, T4 Testo cortisol

Spermato genèse
stérone E2 Folliculogenèse
Pg
31
 Hormones de la post-hypophyse: neurohormones

Ocytocine

ADH (Hormone anti-

diurétique)
ou vasopressine

32