REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

FACULTÉ DE MÉDECINE
DÉPARTEMENT DE MÉDECINE

Thérapie Cellulaire
Focus sur la greffe de cellules souches
hématopoïétiques
Pr Ag. N. YAFOUR
Service d’Hématologie et Thérapie Cellulaire .
EHU « 1er Novembre 1954 » d’Oran
Faculté de Médecine d’Oran
2023-2024
Cours adressé aux externes en médecine

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 1

 Plan du cours

I. Définition de la thérapie cellulaire

II. Définition des cellules souches
III. Les différente types de cellules souches
IV. Caractéristiques des Cellules souches
V. Différenciation/régénération cellulaire
VI. Greffe de cellules souches hématopoïétiques
A. Autogreffe de cellules souches hématopoïétiques
B. Allogreffe de cellules souches hématopoïétiques
VII. CONCLUSION

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I. Définition de la thérapie cellulaire

La thérapie cellulaire est la transplantation de cellules humaines

pour:
1. Remplacer ou réparer des tissus et/ou des cellules endommagés
afin traiter une variété de maladies et d'affections ; leucémie,
parkinson, diabète etc…

2. Faciliter les greffes ou la restauration d'organe.

• Si les paramètres des cellules ont été modifiés génétiquement ex

vivo , on parle de thérapie génique .

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II. Définition des cellules souches

• Totipotentes : 3 feuiller embryonnaire ( ectoderme, mésoderme,

endoderme) + cellules germinale

• Pluripotentes: 3 feuiller embryonnaire

• Multipotentes : plusieurs lignées cellulaires; ex: cellules souches

hématopoïétiques

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 III. Les différentes types de cellules

• Cellules souches hématopoïétiques

• Cellules souches du muscle
squelettique
• Cellules souches
mésenchymateuses
• Lymphocytes
• Cellules dendritiques
• Cellules des îlots pancréatiques.

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IV. Caractéristiques des Cellules souches

•Auto nouvellement
•Devison asymétrique vers :
1. Des cellules capables de se différencier et de se multiplier.
2. Une autres cellules souches capables de se auto renouveler.

•Tous les tissus disposent de cellules souches, avec un rythme

d’auto renouvèlement différents :
1. Rapide et continu: moelle osseuse, intestins, peau.
2. Lents : pancréas, poumon, foie, épithélium rénal.
3. Minimal : cerveau.

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V. Différenciation/régénération cellulaire

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V. Différenciation/régénération cellulaire:
Exemple de l’Hématopoïèse

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VI. Greffe de cellules souches hématopoïétiques

• Procédures dans lesquelles le patient est traité avec une

chimiothérapie, une radiothérapie et ou les deux (appelé «
régime préparatoire / conditionnement »)

• Suivi de la perfusion de cellules souches hématopoïétiques /

progéniteurs à partir de:

✔ moelle osseuse
✔ sang périphérique
✔ sang ombilical

• Pour reconstituer la moelle osseuse

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1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
A. Définition

•L’autogreffe de CSH est la transfusion cellules

souches/progéniteurs hématopoïétiques dérivés du sang
périphérique dérivé du même patient (même individu)

• La réinfusion de progéniteurs hématopoïétiques du patient

permet la reconstitution hématopoïétique après une
pancytopénie profonde.

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1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Indications

Principales indications (recommandées):

•Myélome multiple
•Lymphomes de mauvais pronostic

•Autres indications peut fréquentes, ou en cours d’évaluations :

•Leucémies aigues
▪Maladies auto-immunes et auto-inflammatoires
▪Sclérose en plaques
▪Polyneuropathies inflammatoire démyélinisante
▪Sclérodermie systémique
▪Maladies de crohn

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1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

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1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

1ere étape : Mobilisation de cellules souches périphérique:

✔Injection en sous cutanée de facteurs de croissances

hématopoïétiques (G-CSF) pendant 4 à 6 jours : filgrastim,
lenograstim

✔Afin de mobiliser les CSH de la moelle osseuse vers la circulation

sanguine.

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 1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

2eme étape :
- Cytaphérese : recueil de cellules souches périphérique à l’aide d’un
séparateur de cellules
- Comptage des CSH par Cytométrie en flux à la fin de la procédure

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 1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

3eme étape : préservation de CSH

3 méthodes : soit
-Congélation à l’azote liquide à -196°c (20 ans ou plus)
-Congélation électrique à - 80°c (durée 6 mois )
-Préservation à +4 °c : pendant 4 à 6 jours

•4eme étape : intensification thérapeutique : conditionnement

•Consiste à l’administration au patient de la chimiothérapie

intensive (à haute dose) associée ou non à la radiothérapie.

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 1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

5 eme étape : Greffe : Perfusion de cellules souches au patient

Un à trois jours après la fin de la chimiothérapie intensive, les
cellules souches sont décongelées (si elles sont congelées ) puis
transfusées au lit du patient par voie veineuse périphérique ou
centrale.

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Homing des cellules souches hématopoïétiques

Après quelques jours

Les CSH se greffent à l'intérieur des cavités de la moelle osseuse

par un mécanisme de homing Caocci et al. Mediterr J Hematol Infect Dis 2017

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 2. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

•6 eme étape : gestion de la période d’aplasie

❖ Le temps de récupération
hématologique est d’environ de 2 à 3
semaines avec un greffon de cellules Reproduction de
souches périphériques. l’ hématopoïèse
normale

Période d’aplasie de la greffe

❖ Précautions générales à l’unité

d’allogreffe (isolement , prévention
des infections, mesures d’hygiène…)
❖ Support hématopoïétique
❖ Support nutritionnel et métabolique
❖ Support psychologique
❖ Prise en charge de la neutropénie
fébrile

Caocci et al. Mediterr J Hematol Infect Dis 2017

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2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
A. Définition

•L’allogreffe de CSH est la transfusion cellules

souches/progéniteurs hématopoïétiques dérivés de la moelle
osseuse, du sang périphérique ou du cordon ombilical d'un
individu à un autre, qui peut être :

- apparenté (frère , sœur…)

- non apparenté (donneur volontaire ou sang de cordon
ombilical).

▪Traitement immunologique curatif :

✔Dans les hémopathies malignes : éradiquer une maladie clonale
✔Dans les hémopathies non malignes : remplacer une moelle
osseuse malade par une moelle fonctionnelle

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2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
B. Historique

En 1957, le Pr Edward Donnall Thomas du département de greffe à

Seattle (USA), rapporte pour la première fois le cas des deux allogreffes
syngéniques (receveur et donneur jumeaux/jumelles) .

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06

20
Mars 2022
 DÉVELOPPEMENT DE LA GREFFE DE CSH

En 1959 le cancérologue et l’immunologue français Georges Mathé a

publié le cas de plusieurs allogreffes de CSH réalisées à l’hôpital saint louis
(Paris), chez des patients qui avaient subi une exposition accidentelle à
l'irradiation à la suite d'un accident nucléaire survenu en Yougoslavie .

Physiopathologie de la GVHD

J Dausset J van Rood

R Billingham JLM ferrera BR Blazar

Eliane Gluckman

16 Octobre 1988, Eliane

Gluckman à l’hôpital saint
louis à Paris a réalisé la 1ere
DAUSSET. J. Acta Haematol .1958 allogreffe à partir du sang de
van Rood, J.J. Semin Hematol. 1968 Goldman et al. Blood 1981 Robert Zeiser cordon ombilical chez un
enfant atteints d’une anémie
de Fanconi 21
Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022
Chronologie montrant le nombre et les avancées sur
le terrain de transplantation de CSH
1957-2006
1990–2016

17,641

Passweg et al. .BMT.2018

Appelbaum . N Engl J Med 2007

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022

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1. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
C. Indications

LAM = 6281 pts

444 centres d’allogreffes

Passweg et al. BMT. 2017

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2. ALLOREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
D. Les différentes étapes de l’allogreffe de CSH

- La procédure de l’allogreffe de CSH peut être résumée en 5 étapes :

Étape 1 : Identification d’un donneur ( typage HLA )

Bilan prégreffe (receveur et donneur)
Étape 2 : Conditionnement : chimiothérapie et/ou radiothérapie admirées au receveur
Étape 3 : Transfusion des CSH
Étape 4 : Gestion des complications aigues
Étape 5 : Gestion des complications chroniques

Immunosuppresseurs

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 1. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
E. SÉLECTION DU DONNEUR POUR L’ALLOGREFFE DE CSH

• Un typage HLA est réalisé pour déterminer la compatibilité

entre le receveur et le donneur.

• Le choix du donneur est selon l’ordre suivant :

1. Allogreffe de CSH à partir d’un donneur apparenté identique

(génoidentique) (frères , sœurs).

2. Allogreffe de CSH à partir d’un donneur non apparenté (phénoidentique,

ou avec mismatch).

3. Allogreffe de CSH haplo identique (semi-identique qui peuvent être les

frères , sœurs ,père, mère, les enfants , les cousins...

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 2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
F. LES DIFFERENTES SOURCES DES CSH

• Prélèvement de moelle osseuse : la moelle osseuse est

généralement aspirée à partir des crêtes iliaques postérieures
sous anesthésie générale.

• Prélèvement de CSP : injection en sous cutanée de facteurs de

croissances hématopoïétiques (G-CSF) pendant 4 à 6 jours :
filgrastim, lenograstim.

• Sang de cordon ombilical : les cellules de sang de cordon

ombilical non manipulées collectés à partir du placenta
directement après l'accouchement puis cryoconservées.

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2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
G. L’allogreffe CSH

Perfusion simple du greffon au lit du patient

par voie veineuse périphérique ou centrale

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022

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2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH
A: maladie du greffon contre l’hôte

Graft versus host disease

vs Graft
Host
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CLASSIFICATION DE LA GVHD AIGUE ET CHRONIQUE

Filipovich AH et al .BBMT.2005

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 29

 GVHD AIGUE PEAU

• Atteinte cutanée représente 80% des cas de GVHD

• Sous forme de rash cutané pouvant évoluer vers des
bulles dans les formes sévères.

Aspect de nécrose kératinocytaires associée à

une infiltration lymphocytaire

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 Przepiorka D. BMT.1995 30

 GVHD AIGUE DIGESTIVE
• 50% des cas de la GVHD
• Nausées, vomissement, anorexie.
• Diarrhées, crampes et douleurs abdominales

• Endoscopies haute et rectosigmoïdoscopie, vidéocapsule : ulcérations, fragilité de la

muqueuse du tube digestif

Corps de nécrose apoptotique dans le fond des

cryptes glandulaires de la muqueuse colique,
diminution du nombre de cellules de paneth,
infiltration de PNN, de éosinophile, macrophage

Przepiorka D. BMT.1995 31
Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022
 GVHD AIGUE HÉPATIQUE

• 50% des cas de la GVHD

• Choléstase , hyperbilirubinémie
• Dg différentiel difficile avec : toxicité hépatique, MVO, infections virales, sepsis,
hémochromatose.
• Histolologie: destruction des canaux intra-hépatiques de petit calibre et (inflammation du
tissu hépatique).

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 Przepiorka D. BMT.1995 32

 GRADE DE LA GVHD

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 Przepiorka D. BMT.1995 33

 TRAITEMENT INITIAL DE LA GVHD AIGUE
▪ GVHD aigue grade I
⇢ CRT locaux

▪ GVHD > grade II

⇢ CRT : 2 mg/Kg
(Martin et al. BBMT 2012)
⇢ + stéroïdes non absorbables si GVH digestive
(beclomethasone dipropionate , 8mg/j), augemente le taux de réponse jusqu’à 71 %
(Hockenbery DM et al . Blood. 2007)

⇢ +/- supplementation entérale

⇢ +/- Octréotide : hormone inhibe de la somatostatine

(Ippoliti C et al. J Clin Oncol 1997).

▪ Réponse globale 40 -50 %

(MacMillan ML et al. BBMT 2002)

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 34

 GVH Chronique

35
Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars
 36
Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022
 TRAITEMENT
TRAITEMENT DE 1ERE LIGNE

• cGVHD légère : traitement local

• cGVHD modéré et sévère: prednisone 1mg/kg/J
• Si Echec : autres traitements immunosuppresseurs

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 37

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH
B. MALADIE VEINO-OCCLUSIVE HEPATIQUE

• La plus fréquente, occlusion non thrombotique des veines

centrolobulaires par atteinte des cellules endothéliales hépatiques.
• Facteurs de risques : chimiothérapies antérieurs, infections hépatiques,
drogues hépatotoxiques…
• Clinique = ICTERE+ POIDS + HEPATOMEGALIE ou hépatalgie
thrombopénie réfractaire + ascite.

syndrome hépatorénal dans les formes sévères

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 38

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH
C. COMPLICATIONS INFECTEIUSES

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Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 M Tomblyn.BBMT 2009
 2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH
D. COMPLICATIONS IMMUNO-HEMATOLOGIQES

1/ Transfusion du greffon (ABO compatibles ?)

2/ Changement des groupes du receveur

1. Passage des groupes du receveur aux groupes du donneur avec

problèmes de groupage pour le laboratoire et les infirmières !
2. Disparition progressive de l’alloimmunisation du patient (
remplacement par celle du donneur).

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 40

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH
E. COMPLICATIONS A LONG TERME

Inamoto. Haematologica . 2017

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 41
2. RÉSULTATS DE L’ALLOGREFFE GENOIDENTQIUE :
Exemple : leucémie aigue myéloïde

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 42

 CONCLUSION : L’activité de greffe nécessite une
infrastructure optimale avec collaboration de plusieurs
services
Comité de greffe Pneumologie
Bactério-viro CTS
Service Hématologie
Hôpital de jour
Pré greffe Hôpital de
JACIE
jour
Post greffe
Médecine Urologie
interne/endori
cloogie

Dermatologie
Unité de
Neurologie laboratoire
Prélèvement prélèvement CSP
moelle bloc de Thérapie cellulaire
Néphrologie
Gastrologie

Fichiers Donneurs
Volentaires Laboratoire Réanimation Pharmacologie
HLA

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022 43