Hématologie (crée en 1927 par Jean Bernard)

A/Hématopoïèse : ensemble des mécanismes physiologiques impliqués ds la production de diverses

cellules sanguines à partir de la cell souche hématopoïétique CSH de façon continue et régulée

Elle est qttativement importante :

○ 2.106 (Méga) GR/s , 200 milliards (Géga)/J
○ Ds l'organisme : 25 1012 (Terra) au total
Si l'organisme produit + de GR que 2 Méga/s → cancer
Ainsi, Hématopoièse d'un nouveau né est considéré cancéreuse chez les adultes

Les cell sanguines matures st :

• Hématies ou GR dont le principal déchet est la bilirubine (couleur jaune en relation avec l'ictère)
• Leucocytes ou GB Les GR et Plaquettes sont anucléés
• Plaquettes ou Thrombocytes

I Hématies (RBC : Red Blood Cell)

• Coloration : à pH = 7.4, l'éosine (acide) + GR (basique) = coloration rouge
○ Orthochromatique : Eosine colorant qui donne sa propre couleur à l'élément
○ Métachromatique : Azur de méthylène, de couleur bleu mais colore en rouge
○ Panoptique : colorant qui permet de voir un produit invisible

II Leucocytes (WBC : White Blood Cell)

Les cell nuclées du sang peuvent etre classées par 2 modes : En se basant sur :
1. Aspect du Noyau : + ancien (Aspect morpho-métrique)
• Polynucléaire : cell diploide (46 chmes → sexe du bébé, grâce au caryotype : examen
chromosomique) mais le noyau dessine plsrs lobes liées par des appendices nucléaires
• Mononucléaire : Lymphocytes & monocytes
2. Aspect du Cytoplasme : classement des cell sanguines en 2 entités
• Granulocytes : Polynucléaires (PN, PE, PB) & monocytes
• Agranulocytes/Cell non granulaires : Lymphocytes
→ÊParmis les lymphocytes, existent des cell granulées (15 granules par cytoplasme), mais on ne la
considère PAS une cell granuleuse

Cell Durée de vie Production (milliards/J)

Hématies 120 J (4mois) 200
Plaquettes 7-10 J 100
PN 24h-3J 50
Monocytes Mois
Lymphocytes Mois - Années

RQ : P Neutrophile est responsable des Abcès à odeur javélisée

 III Schéma Classique de l'Hématopoïèse
• Les SCH sont acquises dès la naissance avec une qtté fixe (dizaine jusqu'à centaine de milliers) qui
diminue au cours de la vie
• Chaque jour, production à partir de 150 CSH (Stem Cells) de 340 à 400 milliards de cell sanguines
→ schéma classique de l'hématopoïèse en pyramide

• Les CSH empreintent 2 voies :

1. Proliférative conservative : CSH
se divise pour donner une cell fille
qui lui ressemble
2. Proliférative d'engagement : CSH
donne une cell dite Progéniteur qui
prolifèrent de la mm façon (les 2
voies). Ils se différencient en
Précurseurs qui donnent les Cell
sanguines terminales

• Les CSH et les progéniteurs existent ds le sang et la moelle osseuse. Cela dit, le comportement
tinctorial des colorations panoptiques classiques ne permet PAS de les reconnaitre. Seules les Cell
matures sont observables. (D'où le recours au phénotypage par cytométrie de flux)
De mm, La distinction des Lymphocytes LB LT NK (Natural Killer) est impossible par la coloration
panoptique classique (comportement tinctorial)
RQ : • LB, B n'est pas relié à Bone (coïncidence) mais à Bourse de Fabricius
• Les LT sont majoritaires ds le sang & moelle osseuse (site de transit) à l'état physiologique
(bonne santé) mais en pathologie maligne, les Pathologies lymphoides B dominent
• Hématies, polynucléaires et plaquettes sont incapable de se diviser. Qt aux monocytes, ils ne se
divisent PAS mais se différencient en macrophage aux niveaux des différents tissus. Les Lymphocytes
sont donc les seules dotées de multiplication + différenciation assurant les 2 types d'immunité
adaptatives
→ÊTtes les cellules nuclées du sang se divise ? NON

IV Ontogénie de l'hématopoïèse
1. Hématopoièse primitive mésodermique intra-utérine
• DébuteÊJ21 deÊvieÊembryonnaireÊetÊdériveÊduÊmésodermeÊduÊsacÊvitellinÊauÊniveauÊdesÊilotsÊ
deÊWolfÊPanderÊ,ÊelleÊestÊessentiellementÊérythroïde (donneÊérythroblastesÊ:ÊprécurseursÊ
nucléésÊdesÊGR).ÊAuÊniveauÊdesÊilots,ÊcellÊcentralesÊ→Êérythroblastes
cellÊpériphériquesÊ→ÊcellÊendothélialesÊ
2. Hématopoièse hépatosplénique (stade fœtal)
• RateÊetÊfoieÊassurentÊl'hématopoïèseÊdurantÊleÊstadeÊfœtalÊmaisÊperdentÊceÊroleÊàÊlaÊnaissance
3. Hématopoiese médullaire (stade fœtal)
• AuÊ4e mois deÊgrossesse,ÊérythropoïèseÊauÊniveauÊdeÊlaÊmoelleÊcommenceÊauxÊcotésÊdeÊ
l'hépatospléniqueÊ
• AÊla naissance,ÊparmisÊlesÊ4Êsites,ÊseuleÊlaÊmoelle osseuse resteÊhématopoiétique.ÊElleÊseraÊ
aidéeÊparÊleÊthymus (différenciationÊdeÊLT,ÊNK)Ê

RQ /ÊChezÊleÊrat,ÊlaÊrateÊestÊhématopoiétiqueÊmmÊàÊl'âgeÊadulteÊ
 V Topographie de la moelle osseuse en fonction de l'âge
EnÊgénéral,Êmoelle osseuse = moelle hématopoïétique + moelle graisseuse
• Naissance → 5 ans : presque ttes les cavités osseuses sont remplies de moelle hématopoiétique
(active)
• A partir de 5 ans : involution médullaire = régression progressive de moelle hématopoiétique
(rouge) au profit de moelle graisseuse (jaune)
• A 40 ans : 50% moelle rouge & 50% moelle jaune. La moelle osseuse occupe essentiellement les
cavités osseuses des os courts et plats (crâne, maxillaires, sternum, cotes, vertèbres, crêtes iliaques)
→ Les os longs abritent la moelle jaune (avant 18-24 : Fémur et tibia contiennent moelle rouge)
Aplasie médullaire = moelle osseuse occupée essentiellement par la moelle graisseuse

VI Compartiments cellulaires de l'hématopoièse

1. CSH
• Auto-renouvellement : multiplication autonome sans différenciation. Son intensité diminue au fil
de la différenciation
• Présence ds sang et moelle mais Non reconnues par coloration classique
• Quiescentes pour la plupart, situées au niveau de G0 du cycle cellulaire, dotée d'une résistance
limitée par la durée et l'intensité de l'intoxication (radiation, médicaments)
• Multipotence : donne ttes les cell du sang
• Par engagement →Êles progéniteurs (1000 rad = l'hématopoièse)

2 Méthode d'Etude des CSH :

• Techniques Till et Mc Culloch
→ÊCulture In Vivo
(sans rajout d'artifices)

Après 8 jours de traitement, les colonies formées sur la rate st dénommées CFU-S (Colony Forming Unit
in Spleen)

• Immunophénotypage par cytométrie en flux

→ÊCulture In Vitro
Les CFU-s sont identifiées en tant que CSH du rat grâce à l'Immuphénotypage par cytométrie

2. Progéniteurs
• Proviennent de la différenciation irréversible de SCH au niveau de MO :

Progéniteurs multi lignés Progéniteurs restreints

Myéloïdes (CFU-GEMM) À 2 lignées
Lymphoides : se différencie en 2 Progéniteurs Lymphoides À 1 lignée : CFU-G CFU-M
(PLB reste ds MO et PLT/NK voyage vers le thymus)
• Cell myéloïdes = GR, Plaquettes, Polynucléaires et monocytes
• Cell Lymphoides = LB LT et NK
• Cellules provenant d'un mm géniteur bipotent (bi-ligné):
○ Plaquette & GR (Anémie ferriprive → augmentation des plaquettes)
○ Monocyte & PN
• Etude des progéniteurs :
○ Culture des progéniteurs sur milieu semi-solide : Gélose (PAS gélatine), agar-agar spécifique de
culture. La partie liquide du milieu de culture est représentée essentiellement par le sérum du veau
(éviter l'assèchement de MO). La culture des progéniteurs sur milieu semi-solide est restreinte aux
facteurs de croissance hématopoïétiques dédiés C'est une culture In Vitro
→ÊExple : Erythropoïétine Facteur de Croissance spécifique de la lignée érythrocytaire sans lequel elle
ne peut pas pousser
La culture dure jusqu'à 3 semaines et les 2 constats de la poussée de culture se font à J14-J21 ''dates
à titre indicatif''
○ CFU-E (Colony Forming Unite) poussent entre J7-J14, ce sont des progéniteurs tardifs
○ BFU-E (Burst Forming Unite) poches désorganisées poussent à J21, ce st des progéniteurs
primitifs
→ÊLes progéniteurs tardifs ont besoin de moins de tps de pousse
○ Immunophénotypage par cytométrie de flux

3. Précurseurs
• La majorité des précurseurs médullaires sont reconnus par leur comportement tinctorial grâce à l'étude
de la MO (Myélogramme) par coloration panoptique classique à savoir coloration MGG (May
Grunwald-Giemsa)
3 exceptions : • Réticulocytes (précurseur anucléé du GR médullaire et sanguin)
• Plaquette Réticulée
• Pro mégacaryoblaste (précurseur des plaquettes)
• La majorité des précurseurs subissent des cycles mitotiques (réplication) et de synthèse
(transcription)
2 précurseurs ne se divisent pas : Réticulocyte (car anucléé) et son précurseur : Erythroblaste acidophile
• 3 moyens d'étude : 2 laboratoires et 1 radiologique
• Myélogramme : examen cytologique de MO après ponction aspiration (sternum pour l'adulte,
cretes iliaques pour adulte et enfant. Pas au sternum pour l'enfant car encore friable)
Cytoponction médullaire : pas d'anesthésie au niveau du sternum mais au niveau des cretes
iliaques, préparation du patient (passage au bloc opératoire avec anesthésie générale pour
l'enfant, locale pour l'adulte), perforer l'os par trocart sur le site opportun (un trait du nez vers
le sommet du sternum, au niveau du 2 EIC. On visse puis on procède à un Arrachement = un
seul geste d'aspiration. Le patient se soulève vers le haut donc geste réussi Ou ne le fait pas =
acte raté ou patient à un stade avancé de la maladie
• Biopsie ostéo-médullaire BOM : examen histologique de la MO (architecture de la MO)
Prélèvement de Carotte de 1cm= 10 logettes : trocart dédié sans aspiration. On retire une pièce
en vissant pour prélever l'architecture de la MO (MO et ce qui l'entoure)
BOM renseigne sur le Rapport entre M. Hématopoiétique & M. graisseuse et permet donc de
diagnostiquer l'aplasie médullaire
A l'état normal, prolifération endostale et péri-endothéliale des CSH et progéniteurs. Au
centre a lieu la maturation
En pathologie maligne, la prolifération est plutôt centrale. Donc BOM permet de prévoir le
développement d'un cancer
→ÊRéticulocyte étudié ds le sang (pas de Myélogramme)
• PET Scan ou Scintigraphie = examen global d'extension

4. Cellules Matures
Les cell matures existent ds MO & Sang reconnues pour la majorité grâce à coloration MGG, sauf LT,
LB et NK
VII Coloration MGG
Coloration combinée Panoptique (colorant invisible) de May-Grunwald-Giemsa comprenant 4 produits
• May-Grunwald MG : solution méthanolique (toxique) contenant éosine et bleu de méthylène à
l'état moléculaire, donc éosine n'est pas considéré acide (absence d'eau)
• Giemsa : dilué au 10ième par de l'eau tamponnée (1 V de Giemsa et 9 V du diluant). C'est donc
une solution aqueuse contenant à l'état ionique 1 anion (Eosinate, acide orthochromatique) et 2
cations (Bleu de méthylène base orthochromatique & Azur de Méthylène base métachromatique)
• Eau tamponnée à pH 7 - 7,2
• Eau de robinet

ETAPES :
1. Réaction du frotti sanguin avec MG (pulvérisation, bain)
Double fixation : fixer les cells sur le verre et fixer des colorants éosine et Bleu de Méthylène à
l'état moléculaire à la superficie cellulaire
2. Ajout d'eau tamponnée à pH 7,2 : rôle de panoptique, initie la coloration en créant un gradient de
polarité rendant les colorants ionisés (éosine devient acide et bleu de méthylène base)
3. Ajout du Giemsa dilué au 10ième, ce qui permet de renforcer la coloration par éosine et bleu de
Méthylène et faire réagir l'Azur de Méthylène avec des grains azurophiles (composantes acides
cellulaires)
Donc L'Azur de Méthylène ne réagit qu'à la 3ième étape
la couleur rouge peut être donnée à d'un acidophile (avec Eosine) ou d'un basophile (avec AM)
4. Ajout délicat de l'eau de robinet pour éliminer l'excès de colorant

RQ :
• La cell se fait reconnaitre grâce à son comportement tinctorial
• Une cell granulaire maligne peut paraître agranulaire (Moyen de camouflage de la cell)
• Polychromatophile / Neutrophile = basophile et acidophile en mm tps
• Coloration varie selon stade cellulaire : Histone acide apparent durant la réplication (bleu)
 B/Erythropoïèse : Ensemble de mécanismes concourant à la formation des GR et le maintien du taux
de Hb circulante ds limites physiologiques

I MORPHOLOGIE
• GR circulaire (d=7 µm) disque biconcave (2 dépressions) dotée d'une plasticité (élasticité) lui permettant
d'arborer plusieurs formes afin de circuler au niveau des capillaires (4 µm)
• Hb occupe 1/3 de GR Ainsi Max de remplissage hémoglobinique d'un GR ne dépasse jamais 38%
Le centre clair 2/3 correspond au noyau des précurseurs. Centre clair est responsable de la couleur rose
du GR sous l'effet de l'éosine

• Anomalies :
○ Sphérocyte = GR où absence de centre claire par manque de constituants
○ Drépanocyte : GR en forme de faucille due à la présence d'une HbS anormale
En l'absence de traitement, majorité des drépanocytaires homozygotes perdent la rate (asplénie) à
l'âge de 5 ans par nécrose anatomique

• Au cours de la vie, présence de plsrs type d'Hb (selon

l'activation d'un gène ou l'autre)
Mais chaque Hb humaine = 4 hèmes + tétramère de
globine (identiques 2 à 2)
→ÊPar exple Hb A (Adulte) : 2α & 2β
Globine = prot de base de l'Hb qui fixe O2
• Génome de Globine : situé sur
○ Chme 11 : gènes 𝜀 et 𝛾
○ Chme 16 : gènes 𝛼 et 𝜁 (zéta)
A l'état physiologique, présence de 4 gènes 𝜶 sur le chme
16, se subdivisant en 2 types : Gènes α1 et α2 en tandem

II ONTOGENIE
1. Intra utérine : stade
• Embryonnaire : PAS d'Hb A, A2 et F (mais présence de Hb Gower I II et Portland)
→ α Thalacémie majeure : manque des 4 gènes α donc PAS de Gower II mais Gower I et Portland
sont possibles (donc embryon peut vivre mais avortement spontané au stade fœtal, ainsi aucun
humain ne peut survivre avec une absence totale de gène α)
→ÊMaladie de Cooley = β ThalacémieÊmajeureÊ:Êabsence des gènes β

• Fœtale : Hb F (Fœtale), Hb A (Adulte) et Hb A2 (si naissance à terme car apparition vers S40
d'aménorrhée )
○ Hépatosplénique
○ Médullaire : c'est la Moelle Osseuse qui déclenche Hb A
A partir de l'Age fœtale ttes les Hb humaines physiologiques contiennent des globines α (qui st
en excès par rapport aux autres)

REMARQUES

• Hb F a une + gde affinité avec O2 que Hb A (ne le lâche pas au tissu créant une sorte d'hypoxie
⇒ augmentation de production d'Hb). Ainsi à la naissance, le taux basal d'Hb est le + élevé
qu'une personne peut avoir
® A J3, (sub)ictère par destruction des GR ayant Hb F
® Disparition de l'ictère 1 mois après la naissance
 ® L'âge adulte de point de vue Hémoglobinique est atteint vers 6 mois (Hb A +++ Hb A2 + Hb F
qlq traces provenant de l'érythropoïèse F)

• Patients n'ayant pas Hb A : β0 Thalacémie et drépanocytose homozygote (hémolyse ⇒ stock de fer)

Ds ce dernier cas (drépanocytose), protocole thérapeutique comprend l'administration de
l'HydroxyUrea HU pour augmenter Hb F aux dépend de Hb S (anormale). Le patient présente entre
autre un excès de Globine α ⇒ précipitation au niveau des reins

• Synthèse de globines : nécessite AA, Fer et Ac nucléique

Fer (Aspect cytoplasmique)
○ Doit voyager par macrophage vers MO pour être inoculé aux Erythroblastes
○ Anémie ferriprive : déficit en ferritinémie (= réserve labile du fer, change selon les besoins) ⇒
nbre de réticulocyte ↘ = moelle arégénérative
○ Carence en fer ⇒
 Au début : anémie & microcytose (Volume de cell diminue) & hypochromie (qtté Hb
diminue) & anisocytose (hétérogénéité des GR) AU DEBUT
 Si la maladie perdure : anémie profonde & microcytose profonde & isocytose
(population homogène car tte la population déficitaire : homogénéité n'est pas preuve de
normalité)
Explication : manque de fer ⇒ rupture entre évolution du cytoplasme et noyau par arrêt de
synthèse d'Hb et de division cell. Pour y pallier, diminution du volume de la population
érythrocytaire, par augmentation du nbre de cycles mitotiques
○ En cas d'inflammation ou maladie chronique, Ferritine ↗ (car concentration du fer au niveau
des foyers de l'inflammation) et Hepcidine ↗ (inhibiteur de l'absorption digestive du fer), ce st
donc des marqueurs de l'inflammation
→ÊTraitement de la carence en fer doit être associé à une supplémentation en folate
○ Fer de l'érythropoïèse représente 60 % environ du fer de l'organisme

Ac Nucléiques
○ Substrat : Folate (vit B1C/B9) d'origine : végétale exclusivement + flore saprophyte, réserve de
1 à 4 Mois
→ÊBébé issu de césarienne ont moins de bactéries saprophytes (donc moins de folate)
○ Cofacteur enzymatique : B12 ( = accélérateur d'ordre 105), origine exclusivement animale +
flore saprophyte, réserve entre 1 et 4 ans (1mg)
→ÊEn cas de carence en folate ou B12 : anémie macrocytaire normochrome (qtté élevé d'Hb mais
concentration normale)

• A l'état physiologique, la pop érythrocytaire est normocytaire càd VGM (Volume Globulaire Moyen)
normal et normochrome (Concentration moyenne en Hb normale) et isocytaire (homogène : coeff de
courbe gaussienne inf à 15%)

• JAMAIS d'anomalie hyperchrome car 38% d'Hb est le summum qu'on peut atteindre

• Si présence de CO (monoxyde de Carbone, toxique), compétition avec O2 vis-à-vis des sites de l'Hb. Comme
il a + d'affinité avec Hb, il l'emporte à pression égale. Donc il faut penser à augmenter la PO2 lors de ce
type d'intoxication (Mais Attention, O2 HyperBar est également toxique)
III ETAPES

Erythropoïèse située ds moelle osseuse + sang, explorée par Hémogramme étude qttativ eet qualitative
de sang

Compartiments des précurseurs

• Nucléés : ErythroBlaste EB (…) reconnus et nommé par MGG
• Anucléés : Réticulocyte, non reconnu par MGG

Cinétique de l'érythropoïèse : Harmonie entre cytoplasme & noyau

• Proérythroblaste : cell médullaire à cytoplasme basophile (ARNm), subit 2 cycles mitotiques avec
maturation nucléo-cytoplasmique pour donner 4 érythroblastes basophiles
• EB basophile : unique division aboutissant à 8 érythroblastes polychromatophiles (basophilie
(ARNm) + acidophilie (Hb))
• EB polychromatophile : division + maturation nucléo-cytoplasmique produisant 16 érythroblastes
acidophiles (que de l'Hb)
• EB acidophile : ne se divise pas car noyau pycnotique (très dense) qui finit expulsé. Ainsi nait le
réticulocyte ds MO
• Réticulocyte médullaire
○ durée depuis proEB à réticulocyte : 5 à 7 jours (délai raccourci en cas d'urgence)
○ 16 réticulocytes qui restent ds MO de 2 à 5 J (48 à 120h) puis la quitte par diapédèse pour
rejoindre le sang où il séjourne de 24 à 48, pour se transformer enfin en GR
• GR : natif du sang, mais irrigue la MO (donc on peut l'y retrouver)

→ÊEn physiologie on note une apoptose des cell érythroblastiques et érythrocytaires = érythropoïèse
physiologique inefficace (10 à 15 %) avortement programmé (à ne pas confondre avec l'hémolyse)
DONC Rendement érythropoiétique = 85 à 90%

• EN PHYSIOLOGIE, l'hémolyse physiologique est à

○ 90% intra tissulaire réparti sur 2 sites :
 90 % ds MO (site principal)
 10 % ds RATE & FOIE
→ÊMarqueur hyper-hémolyse : augmentation de la bilirubine non conjuguée
○ 10% intravasculaire
• EN PATHOLOGIE : hyper-hémolyse dépendant du mécanisme déclencheur
○ Intravasculaire : causé par
 Médoc / Fève : débris générés bloquent filtration glomérulaires (rein) = donc anurie par
CIVD (Coagulation IntraVasculaire Disséminé)
 Déficit constitutionnel
 Négligence lors d'un don de sang
 Crise hémolytique
○ Intra tissulaire : localisé principalement ds la rate (MO dépassée), s'accompagne de (sub)ictère
(jusqu'à ictère nucléaire), anémie et hyper spléno mégalie = triade hémolytique

Macrophage : 3 rôles
○ Approvisionnement en fer
○ Apoptose
○ Hémolyse intra médullaire (essentiellement médullaire et tissulaire)
 IV : REGULATEURS
• Facteurs de croissance (Erythropoïétine Epo) : 90% rénale, stimulée par hypoxie, synthétisé par cell
juxta glomérulaire
○ Insuffisance rénale implique diminution de l'Epo d'où anémie d'origine cplxe
• Hormones : Androgène et hormones thyroïdiennes (hypothyroïdie → anémie)
• Facteurs de transcription : famille GATA
• Inhibiteurs : cancers …

V ANEMIE
L'Anémie est définie par la baisse du taux d'hémoglobine (selon l'âge et le sexe)
• Homme / Femme ménopausée : Hb < 13 g/dl (VN : 13-16,5 g/dl)
• Femme menstruée : Hb < 12 g/dl (VN : 12-16 g/dl)
• Femme enceinte : Hb < 11 g/dl (VN : 11-15 g/dl, a baissé car hémodilution & hypertension arterielle)
→ Une variation significative du taux d'Hb est pathologique (hémorragie occulte par exple)
→ Un taux élevé d'Hb est un facteur de risque d'infarctus de myocarde par augmentation de la viscosité

Tableau clinique comprend des symptômes secondaires à l’hypoxémie (car rôle d'Hb = transport de O2
et CO2) : Pâleur cutanéo-muqueuse, Dyspnée, Tachycardie, Asthénie, Vertiges,…

Mécanismes physiopathologiques
○ Défaut de production d’hémoglobine
○ Perte importante de GR par hémorragies
○ Hyperhémolyse non compensée
○ Inflammation

Etude du frottis permettra de distinguer

• Anomalie de Morphologie :
○ Poïkilocytose : existence d’hématies de forme anormale (sphérocytes, ovalocytes ou elliptocytes,
cellules cibles, drépanocytes, schizocytes,…)
○ Anisocytose : présence d’hématies de taille différente
• Anomalies de Coloration : correspondant à l’hypochromie ou à la présence de GR contenant des
granulations basophiles, GR à corps de Jolly (reste nucléaire présent si carence B12 et Folate)

Numération des réticulocytes

• Permet d’apprécier la qualité de l’érythropoïèse et d’orienter le diagnostic étiologique d’une anémie :
• Les valeurs de références des réticulocytes sont de de 20-80 Giga/L
• En général :
○ Si taux de rétic < 80 Giga/L : anémie arégénérative
○ Si taux de rétic > 120-150 Giga/L : anémie régénérative

Exemples : Anémie ferriprive est hypochrome , microcytaire arégénérative

 C/ Lignée granulocytaire neutrophile

• Ensemble de mécanismes qui concourent à la formation des polynucléaires neutrophiles (PNN)

• S’effectue à partir de la naissance dans la MO (origine de ttes les cell)
• Les cell reconnaissables par MGG
○ Précurseurs : Myéloblaste, promyélocyte, myélocyte et métamyélocyte
○ Cell matures : PNN
• Lignée granulocytaire neutrophile : majorité des cell nucléées médullaires

I MYELOBLASTE
• se divise pour donner 2 promyélocytes
• Granulations azurophiles (acide se liant à Bleu de Méthylène) dites granulations primaires, non
spécifique de la lignée (mm ds les monocytes, ttes les cell granuleuses) renferme lysozyme et
myélopéroxydase MPO (enzyme clé à activité bactéricide)
RQ : déficit en MPO est soit constitutionnel (svt asymptomatique) ou acquis (Sd myélodysplasique)

II PROMYELOCYTE

• + petite que myéloblaste

• Se divise 1x pour donner 2 myélocytes
• Granulations Azurophiles (nbreuses)
RQ / Leucémie Aigue Promyélocytaire : la + grave des leucémies, peut être traité en 24h , mais peut
causer la mort par CIVD si absence de traitement (Médicament peu disponible car maladie très rare)

III MYELOCYTE NEUTROPHILE

• Se divise 2 à 3 x
• À partir de ce stade, les granulations spécifiques de la lignée sont visibles (granulations secondaires /
neutrophiles), elles ne contiennent pas la myélopéroxydase. Ainsi cell contient granulations
azurophiles et neutrophiles
• Cytoplasme acidophile

IV METAMYELOCYTE NEUTROPHILE
• Ne se divise PAS
• 1 myéloblaste donne théoriquement 16 à 32 métamyélocytes par processus mitotiques (4 à 5 divisions)
• De myéloblaste jusqu'à métamyélocyte : prolifération + maturation nucléo-cytoplasmique en 5 à 7 J (ds
MO)
• Métamyélocyte reste ds la MO pdt 4 à 5 J avant de
• Puis donne par maturation (nucléo-cytoplasmique) PN (Pas de mitose)
• Granulations primaires peu nombreuses non visibles et granulations neutrophiles abondantes

V PN
• 16 à 32 théoriquement à partir d'un myéloblaste
• Cell dotée de la durée de vie la + courte parmis les cell sanguine
• Ne se divise pas, ne se différencie pas
• Fct : Immunité non spé (action suicidaire engendre du pus) + cicatrisation + bactéricidie (peut être à
l'origine de détresse resp et glomérulo-néphrite)
• 1/3 granulations primaires & 2/3 spécifiques
• Courbe d'Arneth indique que : • Déviation à droite de la courbe d’Arneth :
○ 30 % : 2 lobes Carence vitaminique B9 ou B12 ⇒ neutropénie,
○ 50 % : 3 lobes gygantisme cellulaire, hyperlobulation
○ 17 % : 4 lobes • Déviation à gauche :
○ 3 % : 5 lobe Pseudo pelger = PN non lobulé (noyau ovalaire
arrondi) retrouvé ds Leucémie aigue et Sd
myélodysplasiques

REMARQUES
• Granulopoïèse physiologiques inefficace = 10 à 15 % des cell de la lignée (Apoptose)
Donc rendement = 85 à 90 %
• Cytoplasme de tous les Polynucléaires matures est acidophile (que ce soit PN, PB ou PE)
• Noyau :
○ Lobes liés par ponts chromatiniens/appendices
○ Chmes distribués ds les lobes
• Myéloblaste malin ⇒ granulations azurophiles cryptés, leur mise en évidence se fait par recherche de la
MPO : recherche cytochimique (H2O2 + substrat) ou recherche immun phénotypique par cytométrie en
flux

VI CINETIQUE DE GRANULOPOIESE
• Compartiment médullaire
○ Compartiment de x et maturation : myéloblaste → métamyélocyte
○ Compartiment de réserve médullaire : métamyélocyte séjourne ds MO 4 à 5 J, réserve mobilisable
par Corticoïde & Endotoxine (LPS des BGN ⇒ pyrogènes & choc septique) vers le sang
• Compartiment vasculaire
○ Demi vie des PNN vasculaire : 7 à 8 h
○ 2 pools de PN à proportions égales :
○ Marginé (50%) : adhère à l'endothélium vasculaire, mobilisé par adrénaline
○ Circulant (50%) : accessible à l'hémogramme
→ÊDs qlq cas, le pool marginé est excédentaire (> 50%). Le pool circulant est déficitaire induisant
une fausse neutropénie. Ainsi avant de conclure une vraie neutropénie, il faut éliminer une fausse
neutropénie de margination
○ Les PN st attirés vers le foyer infctieux par chimiotactisme, ce qui peut être inhibés par des chimio-
inhibiteurs : cortisol - héparine - chloroquine - corticoïdes (les 3 derniers peuvent être libérés par
des cell cancéreuses)
• Compartiment tissulaire

VII EXPLORATION
• Hémogramme
○ Taux sanguin variables en fct de l'âge : l'interprétation se base sur les chiffres absolus (en aucun cas
sur les %)
→ÊAdulte : 1,8 - 7,7 giga/l ou 1800 - 7700 µl
○ Morphologie à la coloration panoptique MGG :
○ Corpuscule de Barr : individualisation d'un Chme X, petit appendice nucléaire sur un PNN
normal (cas physiologique)
○ Polynucléaire à noyau non segmenté ou band cell (non lobulé), pathologique ou nn dépend
du taux (5% à 10% tolérable, sinon influence courbe d'Arneth)
• Myélogramme et biopsie ostéomédullaire
○ Lignée granuleuse neutrophile : 50 - 70% la + représentée ds la MO
○ Les granuleux st dispersés sauf formes immatures disposés à la périphérie (près de l'endoste) mais
en situation maline, rejoignent le centre
• Cytochimie
○ RctÊmyélopéroxydaseÊ:ÊBenzyline → détection de MPO (apparaît noirâtre)
○ Cell en miroir à main agranulaire MPO + : leucémie aigue Promyélocytaire (urgence vitale)
→ mort par CIVD aigue (hémorragie interne)
• Test de mobilisation
○ Pool marginal (démargination) injection d'adrénaline

VIII VARIATIONS PATHOLOGIQUES

• Neutropénie cyclique : neutropénie sévère périodique rare à tropisme féminin, Sd viral (herpès) aigu
avec agranulocytose chaque 2 mois qui se résout en 3J (acquise ou constitutionnelle)
DONC ds la pratique, des variations abruptes de taux de PN st possibles
• Fausse neutropénie
• Neutropénie : sévère = agranulocytose < 300 PN ds le sang (0.3 - 0.5 giga/l) expose à un choc septique
mortel
• Hypersegmentation

D/ Lignée mégacaryocytaire
mécanisme concourant à la formation et mise en circulation des PLT
• pas de mitoses des précurseurs
• Phénomène d'endomitose (1 cell, 1 cytoplasme, 1 noyau polyploïde)

PRECURSEUR :
• Pro mégacaryoblaste : nucléé polyploïde, non reconnu par MGG
• Mégacaryoblaste : reconnu par MGG sur myélogramme , 4 stades de maturation nucléocytoplasmique
sans division (endomitose)
○ Mégacaryoblaste
○ Mégacaryocyte basophile : apogée de ploïdie d'une affiliation, les 2/3 st à 16 N et le 1/4 32 N
○ Mégacaryocyte granuleux : provient du mégacaryocyte basophile sans endomitose (sans gain
supplémentaire en ploïdie = conserve la mm ploïdie) individualisation des granulations
○ Mégacaryocyte plaquettogène : précurseur final
• 10 J (8 à 12) nécessaire du mégacaryoblaste au mégacaryocyte plaquettogène
• Lors de filiation mégacaryocytaire, mégacaryopoièse physiologique inefficace représentant 10 - 15 %

PLAQUETTE : + petite cell sanguine, anucléée, non granuleuse

• 2 types de granulations
○ Alpha :
○ Delta : dense (contient Ca2+)

• Fonction :
○ Responsable des métastases cancéreuses (pour les éviter, ttt antiplaquettaire)
○ Activation des complexes immuns
○ Rôle ds l'inflammation
○ Intervient ds l'hémostase

• Se forme ds 3 sites (fragmentation cytoplasmique du mégacaryocyte plaquettogène)

○ Projection de pseudopodes mégacaryocytaires au travers de la monocouche endothéliale du sinus
 médullaire et libération de (pro)plaquettes sous l'action de forces ce cisaillement du courant
circulatoire (85-90%) →ÊMO
→ÊPro plaquette plus gde que plaquette, passe ds la rate pour devenir PLT
○ Fragmentation au niveau des capillaires pulmonaires 10-15 % sous l'action du courant circulatoire
de petite circulation et pourrait représenter 30-50 % (tabagisme) →ÊPoumon
○ Rupture médullaire des MK pltogène (< 1%) →ÊMO
Échappement aux travers des cell endothéliales et retenues ds capillaires pulmo
PLT fragmenté ds courant circulatoire de petite circulation par décapitation

• Cinétique :
○ 1 mégacaryocyte produit 2 à 3 milles PLT
○ Durée de vie de plaquette : 8 - 10 J
○ Rate : réserve des PLT (30% du pool plaquettaire)
→ Drépanocytaire homozygote ayant asplénie : taux basal sup de 30 % d'où risque + élevé de
thrombose
→ÊSplénomégalie donne thrombopénie
RQ : hypersplénie : augmentation d'hémodilution - de volume plasmatique
Pool splénique des GR & granuleux : 2% - pool lymphoide : 20 %

Exploration :
• Taux pltaire = 150 - 400 Giga/L (cst durant tte la vie)
• Fausse Thrombopénie :
○ femme menstruée (diminution pouvant aller jusqu'à 50%)
○ Fausse thrombopénie EDTA dépendant :
- Par Amas : EDTA provoque formation d'amas pltaire chez presque une personne sur mille
sous action d'Ac anti-EDTA (agrégation de 3 plt considérées comme 1 seul) ce qui entraine
une sous estimation du taux sanguin pltaire lors d'hémogramme → en aucun cas EDTA ne
doit être utilisé ds les produits alimentaires …
- Par Satellitisme (satellitose) : plt adhèrent à des cell sanguines (PNN/ lymphocytes) on
compte les PNN mais pas les plt donc sous estimation → fausse thrombopénie par satellitisme
EDTA dépendant

AINSI Avant de conclure pour une vraie thrombopénie, faut exclure les fausses thrombopénies

• Facteur de croissance hématopoiètique spécifique de la lignée pltaire : thrombopoïétine (TPO)

synthétisée à 90 % ds le foie (principal organe producteur)
• Donc atteinte hépatique (hépatite, insuffisance hépato-cellulaire, cirrhose …) engendre thrombopénie
(De mm qu'atteinte rénale engendre anémie)
• Prise d'héparine (titre curatif) : si taux basal de plt baisse de + de 40% , arrêter immédiatement le ttt mm
si thrombopénie nn déclarée. Sinon Thrombose Induite par Héparine TIH (une complication
redoutable de l'héparinothérapie curatif)

Lignées Lymphoides Lymphopoïèse : production et mise en circulation des lymphocytes sanguins

I. 3 COMPARTIMENTS
1. Organes lymphoides primaires (centraux) :
- MO pour LB
- Thymus pour LT & NK
Différenciation lymphoide indépendante de l'Ag : production de lymphocytes naïfs qui passent ds
circulation
A ce niveau, les lymphocytes naifs (quiescents) acquièrent des critères de compétence (maturité) qui
seront à la base de la sélection + ou -
- Positif :
 LT : acquisition du récépteur TCR = Hétérodimère + CD3 membranaire (transducteur
de l'info reçue par TCR) au niveau du thymus
 LB : IgM (membranaire, de surface) et accessoirement IgD (Delta), CD79b au niveau
médullaire (C79 a exprimé chez les progéniteurs et précurseurs et version b chez cell
mature)
→ÊIgM membranaire + CD79b (transducteur des voies de signalisation) = BCR
- Négatif : apoptose pour cell n'ayant pas acquis les critères de compétences de façon appropriée
RQ : Comme cette phase centrale de lymphopoïèse se fait indépendamment des stimulations
antigéniques, les IgM n'ont pas de role d'Ac mais simplement de reconnaissance (récépteur)

2. Organes lymphoides secondaires (Périphériques)

= Ganglions lymphatiques, Rate, Appendice, Tissus lymphoïdes annexés aux muqueuses (MALT) :
plaques de Peyer, végétations et amygdales
Réarrangement génique + Différenciation des lymphocytes dépendant de l'Ag ⇒ production de L
matures effecteurs de la réponse immune
Prolifération pour former un clone de cell spé de l'Ag identiques par leur récepteur
3 entités résultent de ce processus :
- LB mémoire : se rappelant du stimulus en cause par intégration de son génome au sein de la
cell immunitaire →Êgénome hybride
- LB : CPA permet la reconnaissance grâce aux IgM membranaire (spécifique)
- Plasmocytes : sécréteur d'Ac (Immunoglobuline)
RQ : En plus des LB effecteurs (non naifs), il existe une autre cell CPA : macrophage

La rencontre des lymphocytes avec les Ag se fait au niveau des follicules lymphoides : exemple du
follicule lymphoide des gg lymphatiques
○ Avant stimulation antigénique, le follicule est primaire, d'aspect homogène, peuplé par
lymphocytes naifs LB ou LT
○ Après stimulation antigénique, follicule devient secondaire avec centre germinatif, d'aspect
hétérogène polymorphe (traduisant la présence de cell naives et effectrices)
- Centre germinatif clair : zone de rencontre du Lcyte avec l'Ag présenté par CPA. Il comprend
tous les stades cellulaires (Lymphocyte, centroblaste, centrocyte, immunoblaste →
plasmocytes différenciés selon leur PM …)
- Zone périphérique colorée : Manteau (Lcyte mémoire + Lcyte naifs)+ Zone marginale
(plasmocytes + Lcyte mémoire)
RQ : L'absence de ce polymorphisme est un signal d'alarme évoquant un cancer. En effet,
développement monotypique (un seul type cell écrase tous les autres) → processus malin
 3. Compartiment tissulaire
• Représenté par les territoires colonisés par les lymphocytes effecteurs : peau, muqueuse, parenchymes
• Les cellules lymphoïdes sont regroupées dans des structures fonctionnelles induites par la présence
d’antigène : réponses immunes
• Morphologie des cell lymphoides : MGG incapable de différencier LT LB NK mais peut distinguer :

Petit lymphocyte • Noyau volumineux arrondi avec parfois une encoche

• Cytoplasme Très réduit
• Rapport N/C 0.9 (très élevé)
• Forme proche du GR
• Cell mature mais rôle fonctionnelle indéterminée
Grand lymphocyte • Rapport Nucléo-cytoplasmique plus faible (0.6 - 0.8)
• Cytoplasme + abondant

Grand lymphocyte • < 15% des Ly

granuleux • Granulations azurophiles mais PAS cell granuleuse
• Si taux élevé, peut camoufler une LGG (Leucémie à Gd ly
Granuleux

Lymphocyte • Liseré cytoplasmique hyperbasophile renforcé

hyperbasophile • Ly actif bénin, présent en cas de Sd mononucléosique post-viral

Plasmocyte • Cell médullaire sécrétrice d'AC diff selon l'Ag (large spectre)
• Taux normalement < 3% ds MO, si sup : myélome multiple
(leucémies les + graves)
• Chromatine en écaille de tortue
• Cytoplasme abondant basophile avec archoplasme juxta
nucléaire (AG)
• Normalement absente ds le sang (exceptionnellement elle peut
transiter pour aller des organes lymphoide 2nd vers MO

• L'affiliation des cell lymphoides aux gpes B, T et NK se fait par immunophénotypage par cytométrie en
flux

II. FONCTIONS DES LYMPHOCYTES

1. LB
- Reconnaissance de l'AG indépendamment du système HLA (équivalent humain de CMH) par cell
naives
- Présentation des peptides associés au CMH II aux L helper CD4 par LB fonctionnelle = CPA
- Synthèse et sécrétion d’anticorps par différentiation en plasmocytes
- Fonctions de mémoire

2. LT
- Reconnaissance restrictive au système HLA
○ LT4 (CD4) : reconnait Ag associé au CMH II
 ○ LT8 (CD8) : reconnaît ag associé au CMH I
- Coopération de la réponse immune par LT4
- Fct mémoire et effectrice des LT8
- Fonction cytotoxique des LT8 : dble toxicité
○ Directe : naturelle contre cell infectée ou tumorale
○ Dépendant des Ac opsonique : non destructeur (neutralisant), juste sensibilisant

III.EXPLORATION
1.Hémogramme
•Taux sanguin des lymphocytes : 1- 4 Mille/mL soit 1-4 Giga/L (20 - 40 % des leucocytes sanguins)
•Coloration panoptique MGG permet :
○ D'apprécier morphologie lymphocytaire
○ Contrôler fausses lymphocytoses
2. Immunophénotypage des L sanguins et médullaires
LT majoritaire ds sang et MO 70-80% (surtt LT4 : 2/3)

IV. PATHOLOGIE
V. Lymphopénie : taux sanguin < 1giga/L (Inauguration d'un Sd malin) ⇒ ID, VIH
VI. Hyperlymphocytose : > 4 giga/L, notons que durant l'enfance, Physiologiquement, le taux peut aller
jusqu'à 15 milles/mL
○ Aigue :
- Infct virale (Zona Varicelle, rougeole, primo infct VIH) ou bactérienne
- Sd Mononucléosique : Toxoplasmose …
○ Chronique : maligne ou nn

ENFIN …
‫ ﻟﺼﺎﻟﺤﺎ‬Ê‫ﺗﺘﻢ‬Ê‫ﺑﻨﻌﻤﺘﻪ‬Ê ‫ ﻟﺬ‬Ê Ê‫ﻟﺤﻤﺪ‬
AS